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单纯型大疱性表皮松解症患儿的角蛋白5基因突变研究
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作者 刘芙蓉 王兴 +5 位作者 郝胜菊 张庆华 马盼盼 周秉博 张钏 王石凡 《临床皮肤科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期15-18,共4页
目的:对1例单纯型大疱性表皮松解症(EBS)患儿及其家系进行基因突变检测和致病性分析。方法:应用高通量二代测序技术捕获目标序列,对患儿进行全外显子组测序。发现致病位点后,应用Sanger测序法进行家系验证,查阅人类基因突变数据库(HGMD)... 目的:对1例单纯型大疱性表皮松解症(EBS)患儿及其家系进行基因突变检测和致病性分析。方法:应用高通量二代测序技术捕获目标序列,对患儿进行全外显子组测序。发现致病位点后,应用Sanger测序法进行家系验证,查阅人类基因突变数据库(HGMD),运用生物信息学蛋白功能预测软件,分析变异位点的致病性。结果:患儿角蛋白5(KRT5)基因的第一外显子检出杂合变异c.536T>C(p.F179S),该变异造成KRT5蛋白的第179位氨基酸改变,患儿父母均未检测到相同突变。结论:患儿KRT5基因的杂合变异c.536T>C(p.F179S)为新发致病性变异,导致患儿KRT5缺陷,进而引发疱疹样型EBS(DM-EBS)。该变异位点在国内未见报道,扩大了我国人群KRT5的基因突变谱,为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。 展开更多
关键词 表皮松解症 大疱性 单纯型 角蛋白5 基因变异
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P504s、CK-h、p63、CK5/6在前列腺癌患者中的表达及意义
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作者 陈嗣双 黄志芳 +1 位作者 侯斐 胡嘉瑜 《中国现代医生》 2023年第12期37-41,共5页
目的研究前列腺癌患者超声引导前列腺穿刺活检组织中α甲酰基辅酶A消旋酶(α-methylacyl-CoA racemase,P504s)、高分子量角蛋白(high molecular weight keratin,CK-h)、p63、细胞角蛋白5/6(CK5/6)表达及意义。方法选取金华市人民医院201... 目的研究前列腺癌患者超声引导前列腺穿刺活检组织中α甲酰基辅酶A消旋酶(α-methylacyl-CoA racemase,P504s)、高分子量角蛋白(high molecular weight keratin,CK-h)、p63、细胞角蛋白5/6(CK5/6)表达及意义。方法选取金华市人民医院2018年6月至2022年1月171例前列腺癌患者超声引导前列腺穿刺活检组织作为研究对象并进行回顾性分析,免疫组化法进行检测癌组织及癌旁组织标本中P504s、CK-h、p63、CK5/6阳性表达率,分析P504s、CK-h、p63、CK5/6与临床特征的相关性。结果癌组织中P504s阳性率高于癌旁组织,CK-h、p63、CK5/6阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。P504s、CK-h、p63、CK5/6表达与病理分级、分化程度、Gleason评分具有一定相关性(P<0.05)。结论P504s在前列腺癌组织中表达升高,CK-h、p63、CK5/6在前列腺癌组织中表达降低,且P504s表达水平随着病理分级、分化程度、Gleason评分逐渐增强,表明P504s、CK-h、p63、CK5/6联合检测在前列腺癌的诊断中具有较高价值。 展开更多
关键词 α甲酰基辅酶A消旋酶 高分子量角蛋白 P63 细胞角蛋白5/6 前列腺癌
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单纯型大疱性表皮松解症Weber-Cockayne亚型一家系角蛋白5基因突变的检测 被引量:8
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作者 徐哲 杨勇 +3 位作者 董慧婷 孙秀坤 卜定方 朱学骏 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期210-212,共3页
鉴定单纯型大疱性表皮松解症Weber-Cockayne亚型一家系中的基因突变位点。方法:应用聚合酶链反应(PCR)及DNA直接测序的方法,检测患者角蛋白5(KRT5)及角蛋白14(KRT14)基因的全部编码序列;针对所发现的突变,以限制性内切酶片段长度多态性(... 鉴定单纯型大疱性表皮松解症Weber-Cockayne亚型一家系中的基因突变位点。方法:应用聚合酶链反应(PCR)及DNA直接测序的方法,检测患者角蛋白5(KRT5)及角蛋白14(KRT14)基因的全部编码序列;针对所发现的突变,以限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)分析加以验证。结果:该家系患者存在KRT5基因突变:第2外显子第596位碱基由腺嘌呤突变为胞嘧啶,导致第199位氨基酸由赖氨酸变为苏氨酸(K199T),而正常对照无此替代。结论:KRT5K199T为导致此家系中患者临床表现的特异突变,此突变位点为国内外首次报道。 展开更多
关键词 单纯型大疱性表皮松解症 Weber-Cockayne亚型 家系 角蛋白5 基因突变 检测
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三阴性乳腺癌组织CK5/6表达与血行微小转移关系的研究 被引量:7
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作者 刘中正 韩涛 +3 位作者 李恒宇 杨晓丹 刘兆喆 谢晓冬 《解放军医药杂志》 CAS 2017年第4期5-8,共4页
目的探讨三阴性乳腺癌组织细胞角蛋白5/6(CK5/6)表达与血行微小转移的关系。方法选择2014年12月—2016年8月收治的40例女性三阴性乳腺癌术后切除组织及相关临床病理资料,进行免疫组化染色及结果判定,应用Can Patrol技术对循环肿瘤细胞(C... 目的探讨三阴性乳腺癌组织细胞角蛋白5/6(CK5/6)表达与血行微小转移的关系。方法选择2014年12月—2016年8月收治的40例女性三阴性乳腺癌术后切除组织及相关临床病理资料,进行免疫组化染色及结果判定,应用Can Patrol技术对循环肿瘤细胞(CTCs)进行分型检测。观察CK5/6的表达情况、CTCs分型计数及其与临床病理特征的关系。结果三阴性乳腺癌CK5/6阳性表达率为62.5%。CK5/6的表达和CTC分型计数与临床病理特征无相关性(P>0.05)。CK5/6阴性表达患者术后混合型和间质型CTC计数高于阳性表达患者(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌CK5/6阴性表达者更易发生早期血行微小转移。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 角蛋白5/6 肿瘤细胞 循环 肿瘤微转移
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角蛋白5基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育周期中的表达模式分析 被引量:2
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作者 高丽霞 刘志红 李金泉 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期27-30,共4页
为揭示角蛋白5(Keratin 5)基因与内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育周期的关联作用,实验采用RT-q PCR和West-blotting方法,从m RNA水平和蛋白质水平探索周岁母羊体侧部皮肤组织一年12个月毛囊发育周期中Keratin 5表达量的变化。结果表明:Kerati... 为揭示角蛋白5(Keratin 5)基因与内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育周期的关联作用,实验采用RT-q PCR和West-blotting方法,从m RNA水平和蛋白质水平探索周岁母羊体侧部皮肤组织一年12个月毛囊发育周期中Keratin 5表达量的变化。结果表明:Keratin 5在皮肤毛囊发育周期中的表达量在m RNA水平和蛋白质水平上均有明显差异,在10月皮肤毛囊发育兴盛期表达量显著增高(P<0.05),在3月毛囊发育休止期表达量显著降低(P<0.05)。结果显示,Keratin 5与绒山羊皮肤毛囊发育周期有关联作用。 展开更多
关键词 绒山羊 毛囊 发育周期 KERATIN 5 表达
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内蒙古阿尔巴斯绒山羊角蛋白5在毛囊生长周期中的表达 被引量:2
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作者 奈日乐 高丽霞 +6 位作者 刘志红 张燕军 于梦然 王乐 赵濛 木其尔 李金泉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期16-20,共5页
为探明角蛋白5(keratin 5,K5)在毛囊生长周期中的作用机制,采用免疫组化方法检测角蛋白5(K5)在内蒙古绒山羊毛囊生长周期中的表达情况。结果表明,在毛囊生长初期(6月),K5低表达于毛囊内根鞘和外根鞘;在毛囊生长旺盛期(10月),K5在内外根... 为探明角蛋白5(keratin 5,K5)在毛囊生长周期中的作用机制,采用免疫组化方法检测角蛋白5(K5)在内蒙古绒山羊毛囊生长周期中的表达情况。结果表明,在毛囊生长初期(6月),K5低表达于毛囊内根鞘和外根鞘;在毛囊生长旺盛期(10月),K5在内外根鞘同时表达,并在外根鞘表达量较高;在退行期(1月),K5在外根鞘低表达;在休止期(3月),K5基本不表达。由于K5的表达与绒毛生长周期发育规律一致,推测K5对绒毛的周期性生长可能是通过对内根鞘和外根鞘发挥作用的。 展开更多
关键词 绒山羊 角蛋白5 毛囊 表达
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细胞角蛋白5/6、P63蛋白、甲状腺转录因子-1、细胞角蛋白7在肺癌组织中的表达及意义 被引量:11
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作者 何萌萌 孙伟 +1 位作者 陈静 郑世良 《安徽医药》 CAS 2019年第5期903-906,I0003,共5页
目的探讨细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor,TTF-1)、细胞角蛋白7(cytokeratin7,CK7)在肺癌中的表达情况及临床意义。方法收集潍坊医学院附属医院2016年1月至2017年4月经... 目的探讨细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor,TTF-1)、细胞角蛋白7(cytokeratin7,CK7)在肺癌中的表达情况及临床意义。方法收集潍坊医学院附属医院2016年1月至2017年4月经皮肺穿刺活检及经纤维支气管镜活检、刷检确诊肺癌病人标本110例,其中鳞癌48例,腺癌60例,腺鳞癌2例,通过免疫组化方法检测CK5/6、P63、TTF-1、CK7在不同病理类型中的表达情况。结果 CK5/6和P63在鳞癌中的阳性率分别是93.75%93.75%,而在腺癌中的阳性率分别是5.00%和18.33%;TTF-1和CK7在腺癌中的阳性率分别是90.00%和93.33%,而在鳞癌中的阳性率是8.33%和91.67%、75.00%。结论CK5/6,P63,TTF-1和CK7对肺癌活检标本中腺癌和鳞状细胞癌的鉴别具有诊断意义,可指导临床治疗。 展开更多
关键词 肺肿瘤 角蛋白5 角蛋白6 角蛋白7 基因 肿瘤抑制 免疫组织化学 甲状腺转录因子-1
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Keratin 5-IRES-eGFP敲入的人胚胎干细胞系的构建
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作者 郑雯 钟亚丹 +3 位作者 王炫 刘慧婷 杨斌 刘军 《皮肤性病诊疗学杂志》 2022年第4期299-304,共6页
目的利用CRISPR/Cas9技术构建一种keratin 5-IRES-eGFP敲入的人胚胎干细胞(hESCs)系,为研究表皮基底角质形成细胞异常的皮肤病提供一种细胞模型。方法构建针对目的基因keratin 5的sgRNA质粒及打靶Donor质粒,利用CRISPR/Cas9技术完成对ke... 目的利用CRISPR/Cas9技术构建一种keratin 5-IRES-eGFP敲入的人胚胎干细胞(hESCs)系,为研究表皮基底角质形成细胞异常的皮肤病提供一种细胞模型。方法构建针对目的基因keratin 5的sgRNA质粒及打靶Donor质粒,利用CRISPR/Cas9技术完成对keratin 5的定向切割,将IRES-eGFP敲入至keratin 5终止密码子上游,诱导hESCs分化为表达绿色荧光蛋白(GFP)的基底层角质形成细胞。结果PCR及Sanger测序结果表明IRES-eGFP成功整合至hESCs细胞系的keratin 5终止密码子上游,分化培养后观察细胞形态与角质形成细胞系HaCat形态一致。免疫荧光染色验证hESCs分化获得的ES-KC细胞系稳定表达GFP与keratin 5。结论成功制备了keratin 5-IRES-eGFP敲入的hESCs细胞系,并诱导hESCs成功分化出带有绿色荧光蛋白标记的基底层角质形成细胞。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 CRISPR/Cas9技术 角蛋白5 基底层角质形成细胞
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羽毛角蛋白粘胶共混长丝的制备与性能测试 被引量:4
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作者 张勇 孙文金 +1 位作者 周燕 吴忠东 《棉纺织技术》 CAS 北大核心 2017年第10期25-28,共4页
为了消除羽毛角蛋白在使用中易产生的臭味,提高粘胶纤维的服用性能和附加值,利用碱水解法从羽毛中提取角蛋白,经乙醇抽提,将角蛋白与粘胶原液共混,通过湿法纺丝制备角蛋白粘胶共混长丝,表征了共混长丝的强伸性能和结晶性能,并观察了纤... 为了消除羽毛角蛋白在使用中易产生的臭味,提高粘胶纤维的服用性能和附加值,利用碱水解法从羽毛中提取角蛋白,经乙醇抽提,将角蛋白与粘胶原液共混,通过湿法纺丝制备角蛋白粘胶共混长丝,表征了共混长丝的强伸性能和结晶性能,并观察了纤维形貌。结果表明:羽毛角蛋白粘胶共混长丝表面能观察到明显的鳞片状角蛋白,共混长丝结晶度降低,干断裂强度下降5%~8%,干断裂伸长率下降4%~10%;角蛋白在85℃用乙醇抽提后,难闻的气味消失了,其共混长丝的结晶度和强伸性能也高于未抽提的角蛋白共混长丝。 展开更多
关键词 羽毛角蛋白 粘胶 共混长丝 强伸性能 红外光谱 表面形态 结晶度
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子宫腺瘤样瘤67例临床病理分析
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作者 陈勇 冯艺 +6 位作者 赵彩霞 汪勤 唐曼 张卫琴 刘婷珽 娄蓉 张和平 《安徽医药》 CAS 2020年第10期1992-1995,I0002,共5页
目的探讨子宫腺瘤样瘤(Adenomatoid Tumors,ATs)临床病理特征、免疫表型、鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析安徽医科大学附属妇幼保健院病理科2012年1月至2018年1月67例子宫ATs的临床特点、病理形态学及免疫表型特征,并复习相关文... 目的探讨子宫腺瘤样瘤(Adenomatoid Tumors,ATs)临床病理特征、免疫表型、鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析安徽医科大学附属妇幼保健院病理科2012年1月至2018年1月67例子宫ATs的临床特点、病理形态学及免疫表型特征,并复习相关文献。结果病人均为女性,年龄范围24~64岁,中位年龄39岁。肿瘤位于子宫浆膜下或肌壁间,其中66例呈结节状(直径1.0~8.0 cm),平均直径2.7 cm,1例呈巨大囊实性(直径12.0 cm)。肿块切面灰白,质韧,类似平滑肌瘤,与周围组织界限不清。肿瘤由大小不等的管腔或乳头状结构构成,被覆扁平或立方上皮细胞,呈单个或巢状分布于平滑肌组织之间。所有病例肿瘤细胞均无明显异型性,核分裂象罕见。免疫组织化学结果显示肿瘤细胞角蛋白广谱抗体(CKAE1/AE3)、钙网膜蛋白(Calretinin)、跨膜唾液酸糖蛋白(D2-40)、细胞角蛋白(CK5/6)的阳性率分别为100.0%(67/67)、100.0%(67/67)、100.0%(67/67)、19.4%(13/67),肿瘤增殖抗原(Ki-67)增殖指数低,约1%~5%之间,高度糖基化的i型跨膜糖蛋白(CD34)不表达。结论子宫ATs是一种少见的间叶来源的良性肿瘤,但组织学特征多样,尤其出现腺腔样结构难与腺癌相鉴别,结合镜下形态特点及免疫组化有助于提高诊断准确率,治疗以手术切除为主。 展开更多
关键词 腺瘤样瘤 子宫肿瘤 临床病理特征 上皮 角蛋白5 角蛋白6 唾液糖蛋白类 免疫组织化学
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Weber-Cockayne亚型单纯型大疱性表皮松解症一家系报告
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作者 徐哲 丁保玲 +1 位作者 卜定方 杨勇 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期691-693,共3页
目的:研究Weber-Cockayne亚型单纯型大疱性表皮松解症(EBS-WC)一家系的基因突变,并进行产前诊断。方法:应用PCR及DNA直接测序方法明确突变位点,针对所发现的突变以限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)分析加以验证,在此基础上于妊娠24周... 目的:研究Weber-Cockayne亚型单纯型大疱性表皮松解症(EBS-WC)一家系的基因突变,并进行产前诊断。方法:应用PCR及DNA直接测序方法明确突变位点,针对所发现的突变以限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)分析加以验证,在此基础上于妊娠24周时对从胎儿羊水所提取的DNA进行测序及酶切验证。结果:该家系患者存在角蛋白(keratin,KRT)5基因突变:第7外显子第1388位碱基由胸腺嘌呤突变为胞嘧啶,导致第463位氨基酸由亮氨酸变为脯氨酸(L463P)。50名健康对照者不存在此突变。羊水细胞DNA不存在此突变的胎儿,出生后未患大疱性表皮松解症。结论:KRT5第7外显子的突变是引起该家系临床症状的特异性突变。 展开更多
关键词 表皮松解症 大疱性 单纯型 角蛋白5 突变 基因
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小鼠角蛋白10(K10)基因启动子的克隆及活性分析
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作者 张俊珍 刘彧 +4 位作者 姬凯元 杨姗姗 胡帅鹏 刘学贤 范瑞文 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1810-1817,共8页
【目的】角蛋白10(K10)是黑色素细胞中黑素体向周围角化细胞迁移的分子标记之一,在研究基因在黑色素细胞与角化细胞相互作用的功能时,可以作为特异的启动子。本研究欲筛选K10较强的启动子片段,为研究K10以及相关基因的功能提供理论依据... 【目的】角蛋白10(K10)是黑色素细胞中黑素体向周围角化细胞迁移的分子标记之一,在研究基因在黑色素细胞与角化细胞相互作用的功能时,可以作为特异的启动子。本研究欲筛选K10较强的启动子片段,为研究K10以及相关基因的功能提供理论依据和奠定理论基础。【方法】从小鼠尾巴提取基因组DNA,经质量鉴定后,采用PCR法扩增K10的6个不同片段(F1—F6),并将其分别亚克隆到p MD18-T载体,经测序验证是否正确;将K10的6个亚克隆片段再克隆到p GL0载体中,产生p GL0-F1—F6构建,用脂质体法转染293T细胞,转染结束后将细胞裂解,并通过双荧光素酶报告基因检测6个片段转染细胞后引起的荧光素酶活性变化,以筛选启动效果最好的启动子片段;用筛选到的K10启动子片段作为特异启动子,替换p GL0载体上的CMV强启动子,并与周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)基因进行重组,形成p GL0-F-CDK5构建,用脂质体法转染小鼠皮肤角化细胞,待转染结束后,分别进行细胞爬片、细胞裂解和细胞总RNA的提取,之后用免疫荧光化学、双荧光素酶报告基因检测法和实时荧光定量PCR法检测CDK5的表达定位、表达水平及荧光素酶活性,以检测其在角化细胞中的启动效果;用生物信息法Promoter Scan分析所得到的活性最强的K10启动子片段,发现其可能的转录因子结合位点。【结果】PCR扩增、克隆得到K10启动子的6个片段(F1—F6),片段大小分别为1 201、908、664、787、790、656 bp;质粒p GL0-F1—F6分别转染293T细胞后,通过双荧光报告检测发现长度为787bp的F4启动子活性最强;但F1—F6启动子的活性均弱于p GL0-basic中CMV的启动活性;F4序列中含有基本启动子保守区域的共同序列即TATAAAA,经Promoter Scan分析发现F4序列中含有C/EBPβ、GATA、HSF、CAP等多个转录因子的结合位点,这些位点利于K10在角化细胞中表达;p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后,通过荧光蛋白的表达检测载体上GFP报告基因的表达,发现p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起GFP的表达量明显强于p GL0-basic-CDK5转染组;同时用荧光素酶活性检测p GL0-F4-CDK5在角化细胞中的启动效果,结果发现p GL0-F4-CDK5转染组的荧光比值明显高于对照组,差异显著(P<0.01);经实时荧光定量PCR检测CDK5的表达变化,结果发现p GL0-F4-CDK5转染角化细胞后引起CDK5 m RNA表达量明显高于对照组,差异呈极显著(P<0.01)。上述结果说明F4具有较强的启动子活性,是K10启动子的核心区。【结论】成功筛选了K10的核心启动子区域F4,在角化细胞里具有启动目标基因CDK5表达的功能,因此,F4可作为黑色素细胞与角化细胞相互作用过程中基因功能研究的特异性启动子,为研究K10基因功能提供理论依据。 展开更多
关键词 角蛋白10 启动子 特异启动子 转录因子 CDK5 小鼠
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伴移行性环形红斑的单纯性大疱性表皮松解症一家系报道及基因检测
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作者 杨蓓蓓 武卫民 肖华 《中国麻风皮肤病杂志》 2022年第9期604-606,共3页
目的:单纯性大疱性表皮松解症伴有移行性环状红斑(EBS-Migr)是EBS的一种罕见亚型,是一种常染色体显性遗传病,本文报道一家系,并进行基因检测。方法:收集临床资料,提取患儿及其父母外周血DNA,对患儿及其父母进行全基因组外显子测序,经生... 目的:单纯性大疱性表皮松解症伴有移行性环状红斑(EBS-Migr)是EBS的一种罕见亚型,是一种常染色体显性遗传病,本文报道一家系,并进行基因检测。方法:收集临床资料,提取患儿及其父母外周血DNA,对患儿及其父母进行全基因组外显子测序,经生物学分析,获得致病变异;再采用Sanger测序法进行验证。结果:患儿及其父亲KRT5外显子9存在杂合突变(移码缺失c.1653_1654delCT),其母亲未发现该突变。结论:该患儿诊断为伴移行性环状红斑的单纯性大疱性表皮松解症,致病机制为KRT5外显子9发生杂合突变(移码缺失c.1653_1654delCT),既往未见报道。 展开更多
关键词 单纯性大疱性表皮松解症 移行性环状红斑 KRT5
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雌孕激素联合对实验性大鼠口腔溃疡的治疗作用
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作者 胡佳敏 宋兆侠 +3 位作者 陈铭悦 陈永吉 纪悦 杨如会 《丽水学院学报》 2022年第2期67-73,共7页
口腔溃疡是常见的口腔黏膜疾病之一,内分泌因素被认为是诱发口腔溃疡的病因之一,本研究探讨雌激素联合孕激素对大鼠口腔溃疡的治疗作用。以Na OH刺激方法制备口腔溃疡大鼠模型,用雌二醇和黄体酮单独或联合局部干预10 d(2次/d),每天观察... 口腔溃疡是常见的口腔黏膜疾病之一,内分泌因素被认为是诱发口腔溃疡的病因之一,本研究探讨雌激素联合孕激素对大鼠口腔溃疡的治疗作用。以Na OH刺激方法制备口腔溃疡大鼠模型,用雌二醇和黄体酮单独或联合局部干预10 d(2次/d),每天观察溃疡改变,绘制溃疡愈合曲线。10 d后取溃疡组织做HE和Masson染色检测病理和胶原成分变化。运用免疫组化和Real-Time PCR方法检测溃疡组织TGF-β1、Keratin 5的蛋白以及mRNA改变。结果显示:相较于模型组和单独给药干预组,雌激素联合孕激素可以促进口腔溃疡的愈合,增加溃疡组织胶原含量,增加TGF-β1、Keratin 5的mRNA和蛋白表达。本研究初步证实了雌激素联合孕激素局部处理可以促进大鼠口腔溃疡的愈合,该作用与增加溃疡组织胶原合成、促进上皮细胞增殖和角化有关,并提示内分泌改变可能是口腔溃疡的一个重要因素。 展开更多
关键词 口腔溃疡 雌激素 孕激素 TGF-Β1 Keratin 5
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硝苯地平对大鼠牙龈退缩的治疗研究
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作者 姜春慧 陈永吉 +3 位作者 李孝迪 纪悦 胡佳敏 杨如会 《丽水学院学报》 2021年第5期66-73,共8页
牙龈增生是硝苯地平临床常见的副作用,本研究探讨该药物对牙龈退缩大鼠模型的治疗作用。通过手术加脂多糖刺激方法复制大鼠牙龈退缩模型,分别用1 mg/mL和2 mg/mL浓度的硝苯地平凝胶局部干预18 d(2次/d)。用游标卡尺测量牙龈退缩变化,用M... 牙龈增生是硝苯地平临床常见的副作用,本研究探讨该药物对牙龈退缩大鼠模型的治疗作用。通过手术加脂多糖刺激方法复制大鼠牙龈退缩模型,分别用1 mg/mL和2 mg/mL浓度的硝苯地平凝胶局部干预18 d(2次/d)。用游标卡尺测量牙龈退缩变化,用Mirco-CT检测大鼠牙龈组织改变,运用病理HE和Masson染色检测组织改变,采用免疫组化和Real-Time PCR方法检测牙龈TGF-β1、Keratin 5的蛋白和基因改变。结果显示,两种浓度的硝苯地平凝胶可以恢复退缩的牙龈、增加牙龈组织含量、恢复牙龈组织正常形态,增加TGF-β1、Keratin 5的mRNA和蛋白表达。本研究初步证实硝苯地平局部处理可以改善大鼠牙龈退缩,该作用与恢复退缩牙龈上皮细胞的增殖能力和成熟有关。 展开更多
关键词 牙龈退缩 硝苯地平 TGF-Β1 Keratin 5
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细胞角蛋白7、甲状腺转录因子1、新天冬氨酸蛋白酶A、细胞角蛋白5/6、p40、p63在肺腺癌及鳞状细胞癌鉴别诊断中的价值 被引量:10
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作者 赵丹 尹春岭 +3 位作者 王重利 张晨 张丽丽 张海青 《中国综合临床》 2015年第7期593-596,共4页
目的探讨肺腺癌及鳞状细胞癌鉴别诊断中有价值的免疫组化指标。方法选择非小细胞肺癌(NSCLC)病例标本共329例,分析其临床病理特征及免疫组化细胞角蛋白7(CK7)、甲状腺转录因子1(TTF-1)、新天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、细胞角蛋... 目的探讨肺腺癌及鳞状细胞癌鉴别诊断中有价值的免疫组化指标。方法选择非小细胞肺癌(NSCLC)病例标本共329例,分析其临床病理特征及免疫组化细胞角蛋白7(CK7)、甲状腺转录因子1(TTF-1)、新天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、细胞角蛋白5/6(CK5/6)、p40、p63表达情况。结果(1)329例NSCLC标本含肿物切除标本129例,活检标本195例,胸水标本5例。(2)含肺腺癌187例,肺鳞状细胞癌142例。(3)在肺腺癌及鳞状细胞癌鉴别诊断中,CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6、p40、p63在肺腺癌中的阳性率分别为97.9%、87.2%、81.3%、6.4%、3.7%、18.7%,在肺鳞状细胞癌中的阳性率分别为25.4%、11.3%、0、92.3%、95.1%、98.6%。对比两组指标,差异有统计学意义(χ^2值分别为190.665、187.432、214.542、242.003、274.407、206.818,P均〈0.001)。(4)在3个肺腺癌指标中,CK7敏感性最高,NapsinA特异性最高;在3个肺鳞状细胞癌指标中,p63敏感性最高,p40特异性最高。结论CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6、p40、p63可以做为NSCLC鉴别诊断的一组指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 细胞角蛋白7 甲状腺转录因子1 新天冬氨酸蛋白酶A 细胞角蛋白5/6 P40 P63 免疫组化
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伴有色素沉着的单纯型大疱性表皮松解症K5和K14基因突变分析 被引量:4
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作者 刘霞 夏莉 +4 位作者 汪京峡 郝雁杰 杨晶 柳凤琴 郭睿 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期612-615,共4页
目的检测宁夏地区一伴有色素沉着的单纯型大疱性表皮松解症家系的角蛋白5(keratin5,K5)和角蛋白14(keratin14,K14)基因突变。方法提取患者及对照组的外周血DNA,采用聚合酶链反应对K5和K14基因的全部外显子进行扩增,并进行DNA测... 目的检测宁夏地区一伴有色素沉着的单纯型大疱性表皮松解症家系的角蛋白5(keratin5,K5)和角蛋白14(keratin14,K14)基因突变。方法提取患者及对照组的外周血DNA,采用聚合酶链反应对K5和K14基因的全部外显子进行扩增,并进行DNA测序。结果在测序的11例患者中,发现K5的1个错义突变(237C〉T),而在家系正常人及100名正常对照中均未发现该突变。结论K5基因的错义突变可能与该家系患者的发病有关。 展开更多
关键词 伴有色素沉着的单纯型大疱性表皮松解症 角蛋白5基因 角蛋白14基因 基因突变
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CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞对共培养人黑素细胞的影响研究
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作者 贾苇雪 王建波 +6 位作者 罗玲玲 张媛媛 王雪 郭右铭 孔令卓 姜祎群 李诚让 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期659-664,共6页
目的探究敲减角质形成细胞KRT5基因对共培养黑素细胞黑素含量的影响,以解释屈侧网状色素沉着症(DDD)的色素增加性皮损形成的机制。方法通过成簇的规律间隔的短回文重复序列-相关蛋白9(CRISPR-Cas9)技术获得KRT5基因杂合突变的HaCaT细胞... 目的探究敲减角质形成细胞KRT5基因对共培养黑素细胞黑素含量的影响,以解释屈侧网状色素沉着症(DDD)的色素增加性皮损形成的机制。方法通过成簇的规律间隔的短回文重复序列-相关蛋白9(CRISPR-Cas9)技术获得KRT5基因杂合突变的HaCaT细胞,将转染非靶向单向导RNA:Cas9蛋白复合物的HaCaT细胞设为对照组,分别与人原代黑素细胞HEMn体外共培养。免疫荧光观察共培养细胞中细胞角蛋白及黑素小体表达;差异胰酶消化获得不同共培养组中黑素细胞,检测细胞内黑素含量。免疫组化检测1例KRT5突变DDD患者皮损和正常对照皮肤中黑素细胞特异性前黑素小体蛋白17(Pmel17)的表达改变。结果Sanger测序显示,实验组HaCaT细胞KRT5基因第1外显子起始密码子发生杂合突变(c.1delA),对照组HaCaT细胞KRT5基因未发生突变。Western印迹显示,实验组HaCaT细胞KRT5蛋白表达水平(0.60±0.05)显著低于对照组(1.00±0.00,t=32.38,P=0.001)。HEMn细胞与实验组HaCaT细胞共培养体系中Pmel17标记的黑素小体较与对照组共培养体系增多,且细胞内黑素含量增加52.5%,差异具有统计学意义(t=-3.48,P=0.025)。KRT5突变DDD患者皮损组织中Pmel17表达量较正常对照皮肤增加。结论本研究通过CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞,与黑素细胞在体外建立共培养细胞模型,验证了其对共培养黑素细胞的影响,为进一步研究角质形成细胞与黑素细胞相互作用机制以及皮肤色素异常的发病机制提供了初级研究模型。 展开更多
关键词 黑素细胞 角蛋白细胞 共同培养技术 角蛋白5 生物 基因修饰 色素沉着过多 屈侧网状色素沉着症 CRISPR-Cas9
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KRT5基因新生突变致重度型单纯型大疱性表皮松解症一家系 被引量:1
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作者 王小坡 陈志明 +1 位作者 杨勇 孙建方 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期229-231,共3页
目的报道1例重度型单纯型大疱性表皮松解症,并检测其基因突变。方法收集患者及其父母资料和外周血,提取基因组DNA,全外显子组测序筛查患儿致病基因,随后采用Sanger测序对家系成员进行验证。结果患者KRT5基因第7号外显子第1429位碱基发生... 目的报道1例重度型单纯型大疱性表皮松解症,并检测其基因突变。方法收集患者及其父母资料和外周血,提取基因组DNA,全外显子组测序筛查患儿致病基因,随后采用Sanger测序对家系成员进行验证。结果患者KRT5基因第7号外显子第1429位碱基发生G→A(c.1429G>A)杂合突变,导致KRT5基因所编码的蛋白第477位谷氨酸转换成赖氨酸(p.Glu477Lys),其父母未发现该突变。结论该例重度型单纯型大疱性表皮松解症患者存在KRT5基因c.1429G>A(p.Glu477Lys)致病突变,属新生突变。 展开更多
关键词 单纯性大疱性表皮松解 DNA突变分析 角蛋白5 KRT5基因
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Value of T cell receptor gamma alternate reading frame protein and keratin 5 in endometrial carcinoma
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作者 ZHAO Li-jun LI Xiao-ping QI Wen-juan WANG Jian-liu WEI Li-hui 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2013年第22期4260-4264,共5页
Background Tumors with different gene expression develop and progress in different ways. To deepen our understanding of the progression in endometrial cancer, and provide a useful tool for accurate diagnosis and progn... Background Tumors with different gene expression develop and progress in different ways. To deepen our understanding of the progression in endometrial cancer, and provide a useful tool for accurate diagnosis and prognosis assessment, we identified the new molecular prognostic markers in endometrial carcinoma and analyzed the relationship of them with clinical and pathological features of endometrial carcinoma. Methods Ninety-four cases of endometrial endometrioid adenocarcinoma with complete data from the Peking University People's Hospital from 2000 to 2008 and 40 cases of normal endometrium were enrolled. Among these, 30 endometrial endometrioid adenocarcinoma samples of different International Federation of Gynecology and Obstetrics (FIGO) stage were selected for further Agilent genome-wide microarray analysis. Significance analysis of microarrays (SAM) was used to identify genes that are significantly associated with tumor progress. Immunohistochemistry was utilized to identify the genes of interest in endometrial carcinoma and normal endometrium. The relationship between the genes and the age, clinical stage, histological grade, myometrium invaded depth, lymph node metastasis status, and the expression of ER, PR, P53, and PTEN were analyzed by X2 test. Results Analysis between FIGO 1988 stage I and stage III identified a 362-gene "progress signature"; 171 downregulated and 191 up-regulated genes. Among the alterative genes, TARP (T cell receptor gamma alternate reading frame protein) and KRT5 (keratin 5) decreased 3.57 fold and 5.8 fold in FIGO stage III patients. The expression of TARP in endometrial carcinoma increased compared to normal endometrium, while that of KRT5 decreased (P〈0.05). The expression of TARP and KRT5 decreased when stage, histological grading, myometrium invaded depth increased (P〈0.05). In the cases with lymph node metastasis, the expression of TARP decreased, while the expression of KRT5 did not differ (both P〈0.05) both. The expression of P53 had a negative relationship with the expression of KRT5 (P〈0.05), but not with the expression of TARP (P〉0.05). There was no correlation between the expression of TARP and KRT5 and the expression of ER, PR, PTEN (all P〉0.05). There was no significant difference in TARP and KRT5 expression in patients aged 50 or younger and patients older than 50 (P〉0.05). Conclusion The expression of TARP and KRT5 was correlated with the progress of endometrial cancer and their role needs further study. 展开更多
关键词 endometrial cancer T cell receptor gamma alternate reading frame protein keratin 5
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