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Activation of adult endogenous neurogenesis by a hyaluronic acid collagen gel containing basic fibroblast growth factor promotes remodeling and functional recovery of the injured cerebral cortex
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作者 Yan Li Peng Hao +6 位作者 Hongmei Duan Fei Hao Wen Zhao Yudan Gao Zhaoyang Yang Kwok-Fai So Xiaoguang Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第10期2923-2937,共15页
The presence of endogenous neural stem/progenitor cells in the adult mammalian brain suggests that the central nervous system can be repaired and regenerated after injury.However,whether it is possible to stimulate ne... The presence of endogenous neural stem/progenitor cells in the adult mammalian brain suggests that the central nervous system can be repaired and regenerated after injury.However,whether it is possible to stimulate neurogenesis and reconstruct cortical layers II to VI in non-neurogenic regions,such as the cortex,remains unknown.In this study,we implanted a hyaluronic acid collagen gel loaded with basic fibroblast growth factor into the motor cortex immediately following traumatic injury.Our findings reveal that this gel effectively stimulated the proliferation and migration of endogenous neural stem/progenitor cells,as well as their differentiation into mature and functionally integrated neurons.Importantly,these new neurons reconstructed the architecture of cortical layers II to VI,integrated into the existing neural circuitry,and ultimately led to improved brain function.These findings offer novel insight into potential clinical treatments for traumatic cerebral cortex injuries. 展开更多
关键词 adult endogenous neurogenesis basic fibroblast growth factor-hyaluronic acid collagen gel cortical remodeling functional recovery migration motor cortex injury neural circuits neural stem cells newborn neurons proliferation
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Effects of salvianolic acid-A on NIH/3T3 fibroblast proliferation,collagen synthesis and gene expression 被引量:25
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作者 Liu CH Hu YY +2 位作者 Wang XL Liu P Xu LM 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期361-364,共4页
AIM To investigate the mechanisms ofsalvianolic acid A(SA-A)against liver fibrosisin vitro.METHODS NIH/3T3 fibroblasts were culturedroutinely,and incubated with 10<sup>-4</sup>mol/L-10<sup>-7</s... AIM To investigate the mechanisms ofsalvianolic acid A(SA-A)against liver fibrosisin vitro.METHODS NIH/3T3 fibroblasts were culturedroutinely,and incubated with 10<sup>-4</sup>mol/L-10<sup>-7</sup>mol/L SA-A for 22 h.The cell viability wasassayed by[<sup>3</sup>H]proline incorporation,cellproliferation by[<sup>3</sup>H]TdR incorporation,cellcollagen synthetic rate was measured with[<sup>3</sup>H]proline impulse and collagenase digestionmethod.The total RNA was prepared from thecontrol cells and the drug treated cellsrespectively,and α(1)I pro-collagen mRNAexpression was semi-quantitatively analyzedwith RT-PCR.RESULTS 10<sup>-4</sup>mol/L SA-A decreased cellviability and exerted some cytotoxiciy,while10<sup>-5</sup>mol/L-10<sup>-7</sup>mol/L SA-A did not affect cellviability,but inhibited cell proliferationsignificantly,and 10<sup>-6</sup>mol/L SA-A had the besteffect on cell viability among theseconcentrations of drugs.10<sup>-5</sup>mol/L-10<sup>-6</sup>mol/LSA-A inhibited intracellular collagen syntheticrate,but no significant influence on extracellularcollagen secretion.Both 10<sup>-5</sup>mol/L and10<sup>-6</sup>mol/L SA-A could decrease α(1)I pro-collagen mRNA expression remarkably.CONCLUSION SA-A had potent action againstliver fibrosis.It inhibited NIH/3T3 fibroblastproliferation,intracellular collagen syntheticrate and type I pro-collagen gene expression,which may be one of the main mechanisms of thedrug. 展开更多
关键词 salvianolic acid-A NIH/3T3 FIBROBLAST cell VIABILITY cell proliferation collagen gene expression
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Skin care efficacy study of recombinant humanized collagen based on in vitro level
3
作者 Jian Wang Yuhui Fan +3 位作者 Danfeng Li Ningwen Cheng Ling Li Yufeng Yu 《日用化学工业(中英文)》 CAS 北大核心 2024年第9期1030-1038,共9页
Studying the skin care efficacy of recombinant humanized collagen based on in vitro level.The stability of the recombinant humanized collagen was first analyzed by treating at different temperatures,then its skincare ... Studying the skin care efficacy of recombinant humanized collagen based on in vitro level.The stability of the recombinant humanized collagen was first analyzed by treating at different temperatures,then its skincare efficacy based on in vitro level was evaluated by detecting the inhibition rate of elastase,the inhibition rate of collagenase,the protein content of type I collagen in human fibroblasts,the inhibition of reactive oxygen species(ROS)with human keratinocytes,and the effects of the recombinant humanized collagen on the expression of hyaluronic acid(HA),filaggrin(FLG)and transglutaminase 1(TGM1)in keratinocytes.The results showed that recombinant humanized collagen was able to maintain stability at temperatures below 70℃.With regard to its skincare efficacy,recombinant humanized collagen could inhibit elastase and collagenase activities and promote the increase of type I collagen content in human fibroblasts.It also showed good inhibition of ROS in keratinocytes in vitro and could increase the expression of HA,FLG,and TGM1 in keratinocytes.In short,the recombinant humanized collagen exhibited a favourable skin care effect in vitro level.This study proved that it has potential firming,anti-wrinkle,moisturizing,and repairing efficacy,and is a valuable cosmetic raw material. 展开更多
关键词 recombinant humanized collagen stability human fibroblast cell in vitro keratinocytes skin care efficacy
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川芎嗪对溶血磷脂酸诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:18
4
作者 蔡辉 修春英 +2 位作者 郭郡浩 沈思钰 赵智明 《医学研究生学报》 CAS 2008年第1期31-33,共3页
目的:观察溶血磷脂酸(LPA)对体外培养的心脏成纤维细胞(CF)增殖的影响,进一步研究中药川芎嗪单体对其的干预作用。方法:用消化法培养新生SD大鼠心脏成纤维细胞,用单四唑(MTT)比色法测定细胞增殖,羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成,分别观察... 目的:观察溶血磷脂酸(LPA)对体外培养的心脏成纤维细胞(CF)增殖的影响,进一步研究中药川芎嗪单体对其的干预作用。方法:用消化法培养新生SD大鼠心脏成纤维细胞,用单四唑(MTT)比色法测定细胞增殖,羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成,分别观察不同浓度LPA对CF增殖和胶原合成的影响及川芎嗪的干预作用。结果:随着LPA浓度的升高,MTT比色法A490值呈上升趋势。CF分泌的胶原随着LPA浓度和作用时间的增加呈递增趋势。20μg/m l的川芎嗪作用48 h即能明显抑制LPA(10-6μmol/L)诱导的细胞增殖作用(P<0.05)。结论:LPA具有促进SD新生大鼠CF增殖和胶原合成作用,而川芎嗪能对其产生明显的抑制作用,并呈浓度依赖性。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 川芎嗪 心脏成纤维细胞 细胞增殖 胶原合成
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间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞及瘢痕成纤维细胞转化生长因子β产生和信号通路的影响 被引量:4
5
作者 武艳 袁晓环 +4 位作者 杨岚 赵孝金 李厚忠 王莹 金红 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第29期4349-4354,共6页
背景:已有文献报道,间充质干细胞可通过分泌大量生物活性因子有效减轻损伤的心脏、肺脏、肾脏等器官纤维化的发生。目的:观察骨髓间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞和瘢痕成纤维细胞的影响及作用机制。方法:制备骨髓间充质干细胞... 背景:已有文献报道,间充质干细胞可通过分泌大量生物活性因子有效减轻损伤的心脏、肺脏、肾脏等器官纤维化的发生。目的:观察骨髓间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞和瘢痕成纤维细胞的影响及作用机制。方法:制备骨髓间充质干细胞条件培养液,将其作用于正常成纤维细胞和增生性瘢痕成纤维细胞,采用ELISA检测转化生长因子β的分泌水平,RT-PCR检测TGF-β/Smad信号通路相关基因Smad7的表达,比色法检测各组细胞上清液中羟脯氨酸的含量。结果与结论:(1)骨髓间充质干细胞条件培养液对增生性瘢痕成纤维细胞转化生长因子β的分泌、胶原的合成有显著抑制作用(P<0.01),并且明显增强Smad7基因的表达(P<0.01);(2)骨髓间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞的影响较小;(3)结果表明,骨髓间充质干细胞条件培养液对增生性瘢痕成纤维细胞具有显著抑制作用,为干细胞防治皮肤瘢痕提供基础理论支持。 展开更多
关键词 间质干细胞 瘢痕 成纤维细胞 胶原 细胞增殖 组织构建 组织工程 干细胞 羟脯氨酸
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当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响 被引量:14
6
作者 刘凯 张选奋 +2 位作者 张瑾 秦永红 钟琳 《中国美容医学》 CAS 2012年第9期1536-1538,共3页
目的:探讨当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法:体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞术分析细胞周期及凋亡,用放射免疫法测定胶原合成。结果:1mg/L、4mg/L和16mg/... 目的:探讨当归挥发油对增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法:体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞术分析细胞周期及凋亡,用放射免疫法测定胶原合成。结果:1mg/L、4mg/L和16mg/L当归挥发油组与对照组相比G0/G1期细胞、G2/M期减少,显著增加了S期细胞(P<0.05)。凋亡率随当归挥发油浓度增大逐渐增大(P<0.05)。当归挥发油呈剂量和时间依赖性抑制细胞合成胶原(P<0.05或0.01)。结论:当归挥发油抑制成纤维细胞的增殖和胶原合成。 展开更多
关键词 当归挥发油 成纤维细胞 增殖 凋亡 胶原合成
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补肾活血方对大鼠心脏成纤维细胞增殖及胶原表达的影响 被引量:5
7
作者 马新英 杨明会 +3 位作者 陈劲松 刘毅 潘从泽 樊金灼 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期122-124,127,共4页
探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据。方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液。提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3~ 4代CFs分为4组:A组为... 探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据。方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液。提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3~ 4代CFs分为4组:A组为10%含药血清培养液培养,B组为20%含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎牛血清培养液培养。培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting 检测胶原蛋白表达。 结果 与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低(P〈0.05); Ⅰ 型和 Ⅲ 型胶原mRNA在A、B两组表达较C、D两组明显下调(P〈0.05), Ⅰ 型、 Ⅲ 型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组(P〈 0.05)。 结论 补肾活血方可以抑制大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达。 展开更多
关键词 补肾活血方 成纤维细胞 细胞增殖 胶原 心肌纤维化
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红花对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响 被引量:7
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作者 韩剑宇 郝立君 +2 位作者 庞建华 王洁 宋淑民 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第4期337-339,F0004,共4页
目的探讨红花对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测红花对体外培养的HSFB增殖活性的影响;3H-脯氨酸掺入法测定红花对细胞胶原蛋白合成的影响;用光镜和电镜观察药物作用... 目的探讨红花对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测红花对体外培养的HSFB增殖活性的影响;3H-脯氨酸掺入法测定红花对细胞胶原蛋白合成的影响;用光镜和电镜观察药物作用后HSFB形态学和超微结构的改变。结果红花可明显抑制HSFB的增殖和胶原蛋白的合成,且在一定范围内具有时间一剂量依赖性,以8μg/ml浓度组第3天作用最为显著;HSFB的形态和超微结构呈抑制改变。结论红花具有抑制HSFB增殖和胶原合成的作用,为应用该药治疗瘢痕提供了实验依据。 展开更多
关键词 红花 瘢痕 成纤维细胞 细胞增殖 胶原
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胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料促进人牙髓细胞的增殖、迁移和分化 被引量:3
9
作者 潘福勤 刘建辉 +4 位作者 庞胤 邱严力 周静 李琦 蔡春意 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第14期2168-2173,共6页
背景:胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合材料具有良好的生物相容性、机械性能及可降解性,对细胞的黏附、增殖及血管生成极为有利。目的:观察胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料对人牙髓细胞的增殖、迁移和分化能力的影响。方法:分离... 背景:胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合材料具有良好的生物相容性、机械性能及可降解性,对细胞的黏附、增殖及血管生成极为有利。目的:观察胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料对人牙髓细胞的增殖、迁移和分化能力的影响。方法:分离培养人牙髓细胞,接种在胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上,接种前及接种后第1,3,7,14,24天,采用MTT法检测细胞增殖,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用ELISA法检测细胞上清液中的碱性磷酸酶活性。结果与结论:(1)与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞增殖能力明显增强(P<0.01);随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞增殖能力逐渐增强;(2)与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞迁移能力明显增强(P<0.01);随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞迁移能力逐渐增强;(3)与接种前比较,接种于胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞上清液中碱性磷酸酶水平明显增加(P<0.01);随着接种时间的延长,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯支架材料上的细胞上清液中碱性磷酸酶水平逐渐增强;(4)结果表明,胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料可促进人牙髓细胞的增殖、迁移和分化过程。 展开更多
关键词 成纤维细胞 胶原 细胞增殖 组织工程 生物材料 胶原-生物活性玻璃-聚己内酯复合支架材料 人牙髓细胞 增殖 迁移 分化
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黄连素抗心脏纤维化作用及其机制 被引量:5
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作者 蔡少艾 胡明 +2 位作者 汤晓燕 陈美婷 罗承锋 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第3期337-339,共3页
目的观察黄连素对心脏纤维化的影响,探讨其可能机制。方法体外使用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激心脏成纤维细胞,建立心脏纤维化细胞模型。采用不同浓度(10~90μmol/L)黄连素刺激,观察心脏成纤维细胞的活力、胶原Ⅲ和p38 MAPK蛋白表达... 目的观察黄连素对心脏纤维化的影响,探讨其可能机制。方法体外使用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激心脏成纤维细胞,建立心脏纤维化细胞模型。采用不同浓度(10~90μmol/L)黄连素刺激,观察心脏成纤维细胞的活力、胶原Ⅲ和p38 MAPK蛋白表达水平。结果低浓度的TGF-β1可增加心脏成纤维细胞的活力,促进胶原Ⅲ的合成。黄连素呈浓度依赖性地抑制心脏成纤维细胞的活力,降低胶原Ⅲ的合成,促进p38MAPK蛋白磷酸化。结论黄连素可抑制心脏成纤维细胞的增殖和胶原Ⅲ的合成,其机制可能是通过磷酸化p38MAPK蛋白起作用。 展开更多
关键词 黄连素 心脏成纤维细胞 细胞增殖 胶原Ⅲ P38 MAPK
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血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响 被引量:7
11
作者 齐峰 王先梅 +4 位作者 杨丽霞 郭传明 石燕昆 赵颖 王红 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2007年第5期361-364,共4页
目的探讨血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,四氮唑盐比色法检测细胞增殖,流式细胞分析技术测定细胞周期,逆转录—聚合酶链式反应测定心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型... 目的探讨血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,四氮唑盐比色法检测细胞增殖,流式细胞分析技术测定细胞周期,逆转录—聚合酶链式反应测定心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果①1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h,心脏成纤维细胞的四氮唑蓝比色分析法吸光度值(0.24±0.01)较无血清对照组(0.14±0.01)明显增加(P〈0.01);0.001-1.0μmol/L血管紧张素(1-7)和1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ共同干预后吸光度值逐渐降低,分别为0.20±0.01、0.19±0.01、0.13±0.01、0.16±0.03,均显著低于血管紧张素Ⅱ组(P〈0.01)。②血管紧张素Ⅱ组心脏成纤维细胞的S期百分率(14.0%±0.9%)和增殖指数(23.4±1.8)较对照组(5.4%±0.7%和10.8±2.4)明显增高(P〈0.01);0.1μmol/L血管紧张素(1-7)干预后S期百分率(8.5%±0.7%)和增殖指数(16.2±2.0)较血管紧张素Ⅱ组降低(P〈0.01)。③血管紧张素Ⅱ刺激后心脏成纤维细胞的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为较对照组明显增高(P〈0.01);给予0.001-1.0μmol/L血管紧张素(1-7)和1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ共同干预后,胶原表达水平浓度依赖性的下降,均显著低于血管紧张素Ⅱ组(P〈0.05)。结论血管紧张素(1-7)具有抑制血管紧张素Ⅱ浓度增加引起的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。 展开更多
关键词 内科学 血管紧张素(1-7) 血管紧张素Ⅱ 心脏成纤维细胞 胶原 逆转录—聚合酶链反应 细胞增殖
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不同培养基对皮肤来源的成纤维细胞增殖、衰老及胶原蛋白分泌的影响 被引量:6
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作者 喇文军 林孝发 +4 位作者 蒋伟 王妍 尹卫民 林嘉欢 林峰 《中国美容医学》 CAS 2017年第2期68-72,共5页
目的:探讨不同培养基组成对皮肤成纤维细胞的增殖、衰老及胶原蛋白分泌的影响。方法:采用两步酶消化法从健康人耳后皮肤中获得成纤维细胞,依据培养基种类不同分为A组(FM无血清培养基)、B组(DMEM+10%FBS)、C组(RPMI-1640+10%FBS)、D组(DM... 目的:探讨不同培养基组成对皮肤成纤维细胞的增殖、衰老及胶原蛋白分泌的影响。方法:采用两步酶消化法从健康人耳后皮肤中获得成纤维细胞,依据培养基种类不同分为A组(FM无血清培养基)、B组(DMEM+10%FBS)、C组(RPMI-1640+10%FBS)、D组(DMEM+F12(1∶1)+10%FBS),采用MTT法、细胞划痕实验、酶联免疫吸附实验、β-半乳糖苷酶试验、软琼脂克隆形成试验比较不同培养基对细胞增殖、迁移、胶原分泌、老化、变异的影响。结果:采用酶消化法在2d^4d内即可从组织块中获得大量成纤维细胞;其中B、D组较A、C组细胞增殖较快,且趋势与MTT细胞增殖相同;划痕实验显示B、D组较A、C组向缺损部位迁移更为明显;此外,D组胶原蛋白分泌量高于其余三组(P<0.05),且连续传代30次后,细胞无明显衰老及瘤变迹象。结论:两步酶消化法可快速高效的从人组织块中获得成纤维细胞,且采用DMEM+F12(1∶1)完全培养基有利于促进细胞增殖、分泌胶原蛋白及延缓细胞衰老。 展开更多
关键词 成纤维细胞 培养基 胶原蛋白 细胞增殖 原代培养
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压力下角质形成细胞与成纤维细胞共培养对细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:2
13
作者 刘阳 安美文 +2 位作者 芦莹 陈凌峰 茹孟洁 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期148-153,共6页
目的研究压力下人角质形成细胞(human keratinocytes,HKC)和人成纤维细胞(human fibroblasts,HFB)的三维共培养对细胞增殖及胶原蛋白合成的影响。方法将HKC与HFB分别接种于壳聚糖-明胶支架2 d后,将气-液界面诱导分化1 d后的HKC-壳聚糖-... 目的研究压力下人角质形成细胞(human keratinocytes,HKC)和人成纤维细胞(human fibroblasts,HFB)的三维共培养对细胞增殖及胶原蛋白合成的影响。方法将HKC与HFB分别接种于壳聚糖-明胶支架2 d后,将气-液界面诱导分化1 d后的HKC-壳聚糖-明胶复合物与HFB-壳聚糖-明胶复合物共培养12 h,3.4 k Pa气体压力加载24 h,并以压力单独培养、无压力单独培养或无压力共培养作为对照。HE染色观察细胞在支架中的分布及生长情况,MTT法测定细胞增殖情况,羟脯氨酸试剂盒测定上清液中的胶原含量。结果 HE染色发现,HKC与HFB均可以在壳聚糖-明胶支架上正常增殖成片;3.4 k Pa压力或共培养均可以促进HKC增殖和胶原合成,抑制HFB增殖及胶原合成。结论压力及共培养是影响HKC与HFB增殖及胶原蛋白合成的重要因素,研究结果为手术切除瘢痕后移植组织工程表皮结合压力法治疗增生性瘢痕的可能机制提供参考。 展开更多
关键词 角质形成细胞 成纤维细胞 细胞增殖 胶原蛋白 压力
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miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响 被引量:4
14
作者 宿利清 王立红 +1 位作者 贺岚 付秀华 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第1期139-143,共5页
目的:探讨miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响。方法:通过转染miR-155抑制剂构建miR-155低表达的HELF细胞株,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8法和流式细胞仪检测miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡的影响,West... 目的:探讨miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响。方法:通过转染miR-155抑制剂构建miR-155低表达的HELF细胞株,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8法和流式细胞仪检测miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡的影响,Western blot检测miR-155低表达对Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达的影响。采用TargetScan软件预测并通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-155和Smad5的靶向关系,qRT-PCR和Western blot检测miR-155和Smad5的调控关系。将si-Smad5和miR-155抑制剂共同转染HELF细胞后,观察Smad5沉默是否影响miR-155对HELF细胞增殖、凋亡和胶原蛋白合成的作用。结果:转染miR-155抑制剂成功下调了HELF细胞中miR-155的表达,miR-155低表达能够明显抑制HELF细胞增殖和Col-Ⅰ、Col-Ⅲ胶原蛋白的合成,并促进HELF细胞凋亡(P<0.05)。miR-155可与Smad53′UTR区域结合并负向调控Smad5表达(P<0.05)。Smad5沉默可逆转miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡和胶原蛋白合成的调控作用(P<0.05)。结论:miR-155低表达可通过靶向调控Smad5抑制HELF细胞增殖和胶原蛋白合成,并促进HELF细胞凋亡。 展开更多
关键词 MIR-155 肺成纤维细胞 细胞增殖 胶原蛋白合成 凋亡 SMAD5
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角质形成细胞条件培养液对成纤维细胞增殖与胶原分泌影响的研究 被引量:1
15
作者 厉孟 张琳西 +2 位作者 胡强 李丹 郭树忠 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期751-753,共3页
目的探讨正常的角质形成细胞对成纤维细胞生物学行为的影响。方法组织块法培养成纤维细胞,分别加入12.5%、25%与50%浓度的角质形成细胞条件培养液为实验组,加入不含血清DMEM为对照组,采用MTT、羟脯氨酸比色法测定成纤维细胞增殖、胶原合... 目的探讨正常的角质形成细胞对成纤维细胞生物学行为的影响。方法组织块法培养成纤维细胞,分别加入12.5%、25%与50%浓度的角质形成细胞条件培养液为实验组,加入不含血清DMEM为对照组,采用MTT、羟脯氨酸比色法测定成纤维细胞增殖、胶原合成;以流式细胞仪测定50%浓度角质形成细胞条件培养液组及对照组成纤维细胞生长周期。结果细胞增殖测定,各实验组吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随浓度增高,A值增加,25%及50%浓度组与12.5%浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01);25%及50%浓度组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。胶原合成测定中,各实验组A值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.01);各实验组组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。细胞周期测定见,50%浓度组可明显促进成纤维细胞通过G1/S及S/G2限制点,S期及G2/M期细胞与对照组相比明显增多,G0/G1期细胞与对照组相比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论正常角质形成细胞的上清液可促进成纤维细胞的增殖,但对其胶原分泌影响不明显。 展开更多
关键词 角质形成细胞 成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌
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甘草酸二铵对NIH/3T3成纤维细胞增殖及I型胶原分泌的影响 被引量:10
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作者 刘成海 刘平 +2 位作者 胡义扬 谭英姿 刘成 《肝脏》 1999年第4期212-214,共3页
目的 探讨18-α甘草酸二铵(甘利欣)的体外抗肝纤维化活性作用。方法 培养NIH/3T3成纤维细胞,分别以含5%~20%小牛血清的PRMI-1640培养液,或以无血清PRMI-1640培养液,或以含5%小牛血清PRM... 目的 探讨18-α甘草酸二铵(甘利欣)的体外抗肝纤维化活性作用。方法 培养NIH/3T3成纤维细胞,分别以含5%~20%小牛血清的PRMI-1640培养液,或以无血清PRMI-1640培养液,或以含5%小牛血清PRMI-1640培养液稀释的1~400μg/m1甘利欣药物温育液,温育细胞。MTT法检测药物对细胞的毒性作用与对小牛血清刺激的细胞增殖的影响, ELISA法测定细胞上清I型胶原含量,总蛋白测定(DC protein assay)试剂盒测定细胞层总蛋白含量,以校正细胞数。结果50~400μg/m1浓度甘利欣抑制细胞MTT转换,呈浓度依赖性增强,400μg/m1甘利欣呈现明显细胞毒作用。小牛血清一定浓度依赖性促进细胞增殖,而甘利欣对这种血清刺激细胞增殖作用明显呈浓度依赖性抑制。10-200μg/m1甘利欣对I型胶原的分泌,亦有明显抑制作用。结论 甘利欣对NIH/3T3成纤维细胞的增殖及I型胶原分泌有抑制作用,可能具有抗肝纤维化活性。 展开更多
关键词 成纤维细胞 I型胶原 肝纤维化 甘草酸二铵
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三氧化二砷对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响 被引量:2
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作者 韩剑宇 庞建华 +3 位作者 陈伟华 玉光哲 肖志波 郝立君 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第3期182-185,共4页
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测As2O3对体外培养的HSFB增殖活性的影响;3H-脯氨酸掺入法测定As2O3对细胞胶原蛋白合成的影响;用光镜和... 目的探讨三氧化二砷(As2O3)对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测As2O3对体外培养的HSFB增殖活性的影响;3H-脯氨酸掺入法测定As2O3对细胞胶原蛋白合成的影响;用光镜和电镜观察药物作用后HSFB形态学和超微结构的改变。结果 As2O3明显抑制了HSFB的增殖和胶原蛋白的合成,且在一定范围内具有时间-剂量依赖性,以8μg/L浓度组第3天作用最为显著;HSFB的形态和超微结构呈抑制改变。结论As2O3具有抑制HSFB增殖和胶原合成的作用,为应用该药治疗瘢痕提供了实验依据。 展开更多
关键词 三氧化二砷 瘢痕 成纤维细胞 细胞增殖 胶原
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釉基质蛋白对人皮肤成纤维细胞黏附、增殖及Ⅰ型胶原前mRNA合成影响的体外研究 被引量:2
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作者 肖博 郭树忠 +1 位作者 潘勇 刘丹 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1113-1116,共4页
目的观察釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对体外培养的人正常皮肤成纤维细胞黏附、增殖及Ⅰ型胶原前mRNA合成的影响。方法取自愿捐赠包皮环切术后包皮组织,采用组织块法培养人皮肤成纤维细胞,取第3~6代细胞进行实验。以终浓度... 目的观察釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对体外培养的人正常皮肤成纤维细胞黏附、增殖及Ⅰ型胶原前mRNA合成的影响。方法取自愿捐赠包皮环切术后包皮组织,采用组织块法培养人皮肤成纤维细胞,取第3~6代细胞进行实验。以终浓度为50、100、150、200μg/mL的EMPs工作液预铺培养板。①细胞黏附实验:取细胞以1×106个/mL置于预铺EMPs的96孔培养板,每孔0.2mL,作为实验组(A、B、C、D组)。培养1.5、3.0和4.5h后MTT比色法测定黏附细胞量。②细胞增殖实验:取细胞以5×104个/mL置于预铺EMPs的培养板,每孔0.2mL,作为实验组(A1、B1、C1、D1组)。于第2、4、6、8天以MTT比色法测定增殖细胞量。③细胞Ⅰ型胶原前mRNA合成实验:取细胞以1×106个/mL置于预铺EMPs培养板,每孔2mL,作为实验组(A2、B2、C2、D2组)。于培养第5天RT-PCR法测定Ⅰ型胶原前mRNA合成的量。以上实验均以相同浓度细胞悬液加入未预铺EMPs的板孔作为对照组,每组均3个复孔。结果①细胞黏附实验中,各时间点B、C、D组与A组及对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);A组与对照组间及B、C、D组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。②细胞增殖实验中,第2天各组间差异均无统计学意义(P>0.05);第4、6天,B1、C1、D1组吸光度(A)值分别为0.598±0.020、0.582±0.017、0.574±0.021及0.639±0.016、0.641±0.020、0.635±0.021,均高于对照组的0.548±0.021及0.605±0.019(P<0.05);A1组A值分别为0.545±0.023及0.603±0.016,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。第8天,B1、C1组A值分别为0.629±0.012、0.631±0.014,高于对照组的0.606±0.031(P<0.05),A1、D1组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。③细胞Ⅰ型胶原前mRNA合成实验中,B2、C2、D2组Ⅰ型胶原前mRNA合成量高于对照组。结论EMPs促进人正常皮肤成纤维细胞黏附、增殖及Ⅰ型胶原前mRNA合成,且EMPs在100μg/mL浓度时可发挥最大促进作用。 展开更多
关键词 釉基质蛋白 成纤维细胞 黏附 增殖 胶原合成
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碱性成纤维细胞生长因子及胰岛素样生长因子影响骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成 被引量:4
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作者 徐海龙 丁越 +2 位作者 谢洪 孙晓菊 谢慧心 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第6期891-897,共7页
背景:在皮肤修复及瘢痕形成过程中如何控制胶原蛋白的有序形成是值得关注的热点。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子与胰岛素样生长因子1对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成的影响。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,... 背景:在皮肤修复及瘢痕形成过程中如何控制胶原蛋白的有序形成是值得关注的热点。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子与胰岛素样生长因子1对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成的影响。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,进行成脂及成骨分化鉴定,在第3代细胞培养液中分别添加碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1以及两者联合干预,以加入正常培养基为对照组。培养12,24,48,72,96 h时采用MTT检测细胞增殖情况,培养10 d时采用RT-PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原m RNA表达,Western Blot检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果与结论:1与对照组比较,单独应用碱性成纤维细胞生长因子可显著促进骨髓间充质干细胞增殖,抑制Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达。2单独应用胰岛素样生长因子1可显著促进骨髓间充质干细胞增殖,促进Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达。3两种生长因子联用相比单独应用,促进增殖效果更为显著,同时使Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达趋于正常水平。4结果表明碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1联合应用在促进骨髓间充质干细胞增殖的同时能够对Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达有所限制,可能有助于控制瘢痕形成及促进创伤愈合。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 胰岛素样生长因子1 骨髓间充质干细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的实验研究 被引量:4
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作者 于瑞 崔琳 +5 位作者 王幼平 李彬 王新陆 谢世阳 高原 朱明军 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第11期2260-2266,共7页
目的:研究加参方对转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨。方法:出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分... 目的:研究加参方对转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨。方法:出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分离心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblasts,CFs)。采用10 ng·m L-1浓度的TGF-β1诱导CFs,0.25 mg·m L-1浓度的加参方药液作用于CFs 24 h。采用CCK-8计数法检测加参方对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光法检测加参方对CFsα-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)及Ⅰ型胶原的影响;羟脯氨酸测定法检测加参方对CFs胶原分泌的影响;实时荧光定量PCR(Real Time-PCR,RT-PCR)检测加参方对CFs Smad2、Smad3 m RNA表达的影响;蛋白印迹法(Western blot)检测加参方对CFs磷酸化Smad2、磷酸化Smad3(Phosphorylated-Smad2/3,P-Smad2/3)蛋白表达的影响。结果:与模型组相比,加参方可明显抑制CFs的细胞增殖(P<0.05),降低α-SMA及Ⅰ型胶原的表达量(P<0.05),减少CFs的胶原分泌(P<0.05)。同时,加参方组Smad2、Smad3 m RNA较模型组明显下调(P<0.05),P-Smad2、P-Smad3蛋白表达量也明显下降(P<0.05)。结论:加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及向肌成纤维细胞的分化具有抑制作用,这可能与加参方抑制TGF-β1/Smads信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 加参方 心肌成纤维细胞 TGF-Β1 细胞增殖 胶原含量 TGF-β1/Smads信号通路
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