扦插时间和ABT生根粉浓度对黄枝油杉扦插生根的影响

为了探讨扦插时间和ABT生根粉浓度对黄枝油杉(Keteleeria calcarea)扦插生根的影响,筛选出黄枝油杉扦插生根的最佳时间和ABT生根粉浓度。通过4个扦插时间和4个ABT生根粉浓度处理黄枝油杉插穗,扦插生根后对插穗的生根率、生根数、最长根长度、最长根粗度进行比较分析。结果表明,4月采用150 mg/L的ABT生根粉溶液处理的黄枝油杉插穗的生根率、生根数、最长根长度、最长根粗度均优于其他扦插时间、ABT生根粉浓度。因此,4月采用150 mg/L的ABT生根粉溶液浸泡黄枝油杉插穗利于黄枝油杉扦插生根。

黄枝油杉遗传多样性的ISSR分析

该研究采用ISSR分子标记,对黄枝油杉7个自然种群的遗传多样性进行了分析。结果表明:用12条ISSR引物对218个黄枝油杉个体进行扩增,共扩增出125个位点。在物种水平上,多态性位点百分数(PPL)为100.00%,Shannon信息多样性指数(I)为0.417 7,Nei’s基因多样性指数(H)为0.266 6;在种群水平上,多态性位点百分数(PPL)在71.20%~92.00%之间,平均值为80.69%,Shannon信息多样性指数(I)在0.327 3~0.388 6之间,平均值为0.354 8,Nei’s基因多样性指数(H)在0.213 9~0.247 8之间,平均值为0.229 1。这说明黄枝油杉在物种水平和种群水平上均显示出较高的遗传多样性。Nei’s遗传多样性分析(Gst=0.143 3)和AMOVA分析(Φst=17.91%)表明,黄枝油杉的遗传变异主要存在于种群内,种群间的遗传分化程度较低,种群间保持一定的基因交流(Nm=2.989 0>1)。Mantel分析显示,黄枝油杉种群间的遗传距离和地理距离之间不存在显著的相关关系(r=0.456 7,P=0.061 0>0.05)。

黄枝油杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

先运用正交设计进行初步筛选,再用单因素设计逐一优化对ISSR-PCR扩增效果有影响的Mg2＋、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物、模板DNA、循环次数及退火温度。建立了黄枝油杉的最佳反应体系和程序,即25μL体系中含2.0mmol/L的Mg2＋、1.5UTaq DNA聚合酶、0.10mmol/L的dNTP、1.0μmol/L的引物、30ng的模板DNA以及2.5μL10×PCR buffer,其余的用灭菌的ddH2O补够25μL。扩增程序：94℃预变性5min;94℃变性30s,48～56℃（不同的引物,其退火温度不同,根据具体引物而定）退火45s,72℃延伸90s,以上3个步骤循环50次;最后72℃延伸7min;扩增产物放在4℃冰箱中保存。该体系和程序稳定性良好,结果可靠,可用于黄枝油杉遗传多样性分析。

4种模型对黄枝油杉光合光响应曲线的拟合分析

【目的】为找出黄枝油杉(Keteleeria calcarea)光合光响应曲线的最佳模型,以得到较为准确的光合特征参数。【方法】采用Li-6400便携式光合系统对黄枝油杉的光合光响应曲线进行测定,并通过4种模型(直角双曲线模型、非直角双曲线模型、指数模型和直角双曲线修正模型)对其光响应曲线进行拟合。【结果】直角双曲线模型和非直角双曲线模型的最大净光合速率(Pnmax)拟合值高于实测值,而指数模型和直角双曲线修正模型的拟合值与实测值较为接近;在4种模型中,直角双曲线修正模型的Isat拟合值(850.45μmol·m-2·s-1)与实测值(800μmol·m-2·s-1)最为接近,其余3种模型求得的Isat远低于实测值。直角双曲线修正模型对黄枝油杉的光响应曲线拟合得到的Pnmax、光饱和点(Isat)、光补偿点(Ic)和暗呼吸速率(Rd)分别为5.06μmol·m-2·s-1、850.45μmol·m-2·s-1、7.86μmol·m-2·s-1和0.816μmol·m-2·s-1。【结论】直角双曲线修正模型的拟合效果最好,指数模型次之,非直角双曲线模型和直角双曲线模型的拟合效果最差。

黄枝油杉嫩枝中精油的化学成分研究

用水蒸气蒸馏法提取松科植物黄枝油杉嫩枝中的精油,得油率为0.1%,采用毛细管气相色谱-质谱联用方法进行化学成分分析,首次鉴定出21种化合物,占总离子流出峰面积的89.59%。黄枝油杉嫩枝中水蒸气蒸馏系列精油的主要成分为萜烯类物质,主要有(-)-β-榄香烯(2.91%)、β-石竹烯(46.21%)、葎草烯(8.59%)、石竹烯氧化物(14.53%)和大根香叶烯(4.09%)。

湖南濒危植物黄枝油杉的资源现状及人工栽培技术

通过查阅相关资料及实地调查,对黄枝油杉在湖南的分布及资源状况进行调查研究,揭示了黄枝油杉自然繁衍对生境的需求和过度砍伐利用是导致其濒危的因素。同时对其采种、育苗、栽培、造林及病虫害防治技术进行了较系统的研究。并对湖南黄枝油杉种质资源保护和开发利用所面对的问题提出相应的对策。

喀斯特地区珍贵树种黄枝油杉的种子萌发特性

黄枝油杉为中亚热带喀斯特地区珍贵树种,该物种分布范围狭窄,野生种群幼苗数量少,严重限制了其自然更新。为探求该物种濒危的原因,同时为其保护和利用提供参考,该文对黄枝油杉的种实性状进行了测定,并研究了温度、光照、土壤含水量、基质、贮藏温度和时间、不同地理种源等因素对种子萌发的影响。结果表明:(1)黄枝油杉球果平均结种率为7.45%±6.54%,种子有较长种翅[(2.27±0.32)cm],种子平均长度为(1.55±0.15)cm(不含种翅),平均宽度为(0.62±0.05)cm,平均厚度为(0.46±0.04)cm,平均千粒重为(214.81±14.76)g,风干种子平均含水量为15.28%±1.66%。(2)黄枝油杉种子萌发的适宜温度为25℃,在20℃和30℃下萌发率显著降低(P<0.05);种子萌发不需要光照,但周期性光照条件下的萌发率显著高于持续光照和持续黑暗条件(P<0.05);种子在土壤含水量为10%~30%条件下均能萌发,且能耐一定程度的干旱;适宜萌发基质为质地疏松、透气性好的泥炭土和珍珠岩;种子不耐贮藏,采集后应及时播种;3个不同地理种源中以桂林恭城县三江乡种群种子萌发率最高。黄枝油杉球果结种率较低,种子萌发对温度要求严格,且种子易失去活力,这可能与其濒危有很大关系。

不同处理对濒危植物黄枝油杉扦插育苗的影响

黄枝油杉属珍稀濒危植物,树形高大,采种困难,母树开花结实少,种子发芽率低,繁殖速度慢。采用扦插育苗,方法简便易行,繁殖速度快。为此,针对与黄枝油杉扦插育苗成活、生长密切相关的插穗粗度、ABT生根粉浓度和施肥种类三大因素,分别进行对比试验。结果表明:插穗茎粗0.70cm用150mg/LABT生根粉溶液处理的平均成活率达95.6%;扦插成活后施用粪肥+尿素(配比为100∶0.4)的混合肥苗木生长健壮,平均抽梢长达30.8cm。方差分析和多重比较分析结果表明,插穗粗度、ABT生根粉浓度和肥料种类对黄枝油杉扦插苗木的生长影响极大。

广西喀斯特地区黄枝油杉林的生境及种群结构特征

为调查珍贵树种黄枝油杉Keteleeria calcarea在广西的生境状况和种群结构特征,保护并可持续利用该物种,本研究采用样地调查法对黄枝油杉群落进行调查,分析其生境状况、土壤营养成分、伴生植物组成、种群结构特征等。调查结果显示,黄枝油杉在广西主要分布于喀斯特石山地区,从山顶至山底均有分布,亦可见于石山底部与土山相连的土石交错区,常见于阳坡或半阳坡,分布区土壤为黑色石灰土、棕色石灰土或黄土,呈酸性、中性或弱碱性,有机质和全氮含量较高,有效磷含量较低。黄枝油杉群落植被状况良好,可分为乔木层、灌木层和草本层,层间植物丰富,不同群落在物种组成上存在较大差异;黄枝油杉为乔木层的优势种,一般呈集群分布,偶见少数几株或单株分布于路边或房前屋后;少数种群因设有保护小区而种群状态较好,但是仍有部分种群人为干扰较为严重。不同种群个体的高度结构、冠幅结构和径级结构存在一定差异,恭城三江和富川麦岭种群以中老龄个体较多,融安泗顶种群以中龄个体居多,而临桂二塘种群以中小个体占优势,4个种群均存在幼苗缺乏、种群更新能力弱的情况,呈衰退趋势。生境的破坏、资源的过度采伐、结实植株数量少以及林下幼苗更新困难是黄枝油杉濒危的重要原因。因此,应加强对黄枝油杉资源和生境的保护,同时加强相关科研工作及黄枝油杉的推广应用。

基于转录组测序的黄枝油杉EST-SSR引物开发

黄枝油杉是中国特有的珍稀濒危树种,具有较高的生态、经济和科研价值。本研究基于转录组测序结果对黄枝油杉进行EST-SSR标记开发,使用MISA软件对黄枝油杉132 191条unigenes进行SSR搜索,共获得6 903个SSR位点,出现频率为5.22%,平均12.015 kb出现一个SSR位点。SSR重复类型以单核苷酸重复为主,二核苷酸重复和三核苷酸重复次之,所占比例分别55.15%、17.14%、17.07%。采用SSR分子标记筛选出225对扩增清晰且符合预期片段大小的引物,有效扩增率为69.23%,经复筛最终获得9对具有多态性SSR引物。对1个野生黄枝油杉种群25个样品进行多样性检测,所有位点均具有多态性。在9对多态性SSR位点中,等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Shannon's指数(I)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)分别为5.111、2.668、0.963、0.456、0.461、0.428。结果表明,9对SSR引物遗传多样性处于中等水平,基于黄枝油杉转录组序列的SSR标记开发是可行有效的,为开展黄枝油杉遗传多样性分析及辅助育种等研究提供参考。