一种新的PrP无细胞构象转化系统的建立

PrP细胞外构象转化系统已经被一些实验室用于朊病毒的研究,但在反应体系中往往需要使用放射性同位素。为了建立一种安全方便的PrP无细胞构象转化系统用于TSE发病机制的研究,通过PCR方法获得仓鼠PrP(HaPrP)全长基因,克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌中表达并纯化出分子量为27kDHaPrP蛋白,Westernblot证实可与PrP特异性单克隆抗体反应。将纯化蛋白在体外标记生物素(Biotin-7-NHS),与纯化的scrapie263K毒株仓鼠感染脑组织PrPSc蛋白共同孵育4天后,经蛋白酶K消化,Westernblot检测,证明存在一条抵抗蛋白酶K消化的、被亲和素特异性识别的条带,其分子量约为20kD。这表明HaPrPsen可以被转化为HaPrPres。实验表明,可以利用原核系统取代真核系统表达PrP,并用生物素标记取代35S标记纯化蛋白,建立一个更加安全方便的无细胞构象转化系统,用于朊病毒的研究。

基于HALCON的标签模切缺陷的检测

针对标签模切的凸起缺陷,采用模板对比检测方法中存在的误报和漏报的问题,文章提出了利用图像形态学处理的方法和通过提取轮廓的方法对现有的视觉检测算子改进以提升检测效果。使用HALCON软件实现模板比对、形态学和提取亚像素轮廓的三种检测的方法,并进行误报、漏报和算子处理速度进行比较。通过样本标签测试结果说明,针对样本中的凸起缺陷,改进后的方法误报和漏报为0,正确率较高。此方法对于规则物体边缘凸起缺陷的检测有较高的参考价值。