铁皮石斛氨基酸通透酶基因(DoAAP2)的克隆及表达分析

采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)和巢式PCR技术克隆出铁皮石斛氨基酸通透酶基因DoAAP2(Amino acid permease 2)序列。序列分析表明该基因长1772 bp,编码493个氨基酸残基,所编码的蛋白含有完整的Aa trans结构域。系统发育分析显示,DoAAP2与小兰屿蝴蝶兰亲缘关系最近,其次是深圳拟兰,这3种植物同为单子叶兰科植物。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果显示,DoAAP2在茎和叶中表达量较高,经过生物信息预测分析亚细胞定位于叶绿体类囊体膜,推测该蛋白可能参与植物的光合作用。在原球茎发育时期中,原分生组织形成(P3)、顶端分生组织形成(P4)、根端分生组织形成(P7)时期表达量较高,表明该基因对铁皮石斛根、茎的发育起重要作用。