卷羽麒麟鸡快、慢羽品系生长发育规律对比分析

【目的】了解快羽和慢羽麒麟鸡生长发育规律,评估其作为培育自别雌雄配套系遗传素材的价值,挖掘并利用该地方遗传资源。【方法】分别采用Bertalanffy、Gompertz和Logistic 3种模型拟合分析麒麟鸡快羽系和慢羽系1~19周龄生长发育规律,探究其合适的生长模型。【结果】对于公鸡,快羽和慢羽公鸡体重仅在第1周龄差异显著(0.01<P<0.05),其余时间点不显著。对于母鸡,在第3周龄慢羽母鸡体重极显著高于快羽组(P<0.01),在第7周龄快羽母鸡体重极显著高于慢羽组(P<0.01),其余时间点不显著。不同品系公母鸡龙骨长趋于一致,但胫长和胫围在不同生长时期有不同。本研究用3种模型对麒麟鸡的体重拟合度都很高(R^(2)≥0.985),其中以Bertalanffy模型最好。快羽系公、母鸡体重的拟合优度R^(2)分别为0.999和0.993,慢羽系公、母鸡体重的拟合优度R^(2)均为0.994。快、慢羽系鸡的龙骨长和胫围的最佳拟合模型均为Bertalanffy模型,快羽系鸡胫长的最优模型是Logistic,慢羽系鸡的胫长的最优生长模型是Gompertz。【结论】不同品系麒麟鸡生长发育存在差异。Bertalanffy模型是体重、龙骨长和胫围的最佳拟合模型,而Logistic和Gompertz分别是快羽系和慢羽系麒麟鸡胫长的最佳拟合模型。生产实践中应结合鸡的发育规律提供最优饲养条件和营养,满足麒麟鸡的生长发育需要。

麒麟鸡(卷羽鸡)体尺性状与屠宰性能的测定及相关性分析

为了研究抗热应激品种麒麟鸡(卷羽鸡)的肉用开发价值,试验对12周龄麒麟鸡体尺性状和屠宰性能进行测定及相关性分析,并构建简单回归方程。结果表明,12周龄麒麟公鸡龙骨长和胫长显著高于母鸡(P<0.05);12周龄麒麟公鸡活重、屠体重、半净膛重、全净膛重和腿肌重显著高于母鸡(P<0.05),腹脂重和皮脂厚显著低于母鸡(P<0.05),其余指标公、母差异不显著(P>0.05);麒麟鸡屠宰性能与体尺性状绝大多数存在显著或极显著相关性,并建立了主要屠宰性状的回归模型,为通过麒麟鸡活体的体尺测量结果预测屠宰性能指标提供一定理论依据,同时加速了麒麟鸡的遗传育种进程。

慢羽系麒麟公鸡纯合个体分子检测方法的建立

为建立一种快速准确鉴定麒麟公鸡慢羽纯合子的分子检测方法,以加快纯合慢羽系及其配套系的育种速度,利用鸡性连锁羽速基因K/k中慢羽基因K与禽白血病内源性病毒基因ev21的紧密连锁关系,选择241只(直观鉴定171只为表型慢羽,70只为表型快羽)140日龄麒麟公鸡,应用PCR扩增URa和URb基因以鉴定其快、慢羽型,再扩增ev21基因,并采用限制性内切酶HaeⅢ对慢羽鸡扩增产物进行消化,检测基因型为纯合子的慢羽公鸡。麒麟鸡羽速类型检测结果显示,慢羽公鸡(170只)2条带,快羽麒麟公鸡(71只)1条带。慢羽公鸡酶切基因分型结果显示,酶切后有2条带的为ev21缺失个体(72只),有3条带的是杂合个体(94只),有1条带的为纯合个体(5只)。综上,可以利用ev21插入位点鉴定麒麟鸡基因型是否为纯合的慢羽个体。

高温热应激对麒麟鸡生理生化指标的影响

为研究高温热应激对麒麟鸡生理生化指标的影响,选用56日龄麒麟鸡公母各204只,公母鸡均分为高温组(33±2℃)和常温组(26±2.0℃),每组6个重复,每个重复17只,试验期56 d,测定其112日龄的生理生化指标。结果表明:高温热应激对麒麟鸡部分生理生化指标产生影响,性别间存在差异,高温对公鸡的生理指标没有显著影响,但能显著降低胆碱酯酶(CHE)活性、乳酸脱氢酶(LDH-L)活性和α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)活性;高温热应激能显著加快母鸡的呼吸频率,显著降低母鸡血液血小板压积PCT和红细胞体积分布宽度(RDW),显著升高碱性磷酸酶(ALP)活性和总胆固醇(CHOL)含量。

不同温度环境下麒麟鸡屠宰性能与肉品质测定

为研究麒麟鸡的肉用开发价值．测定了在温度为33±1．0℃和27±1．0℃饲养12周龄的麒麟公鸡的屠宰性能及肉品质特性。结果表明：①屠宰性能：高温组各项屠宰性能指标都低于常温组，其中，活重、屠体重、屠宰率、半净膛重、半净膛率、全净膛重和全净膛率与常温公鸡差异显著（P〈0．05）；②肌间脂肪宽和皮脂厚差异极显著（P〈0．01）；其他性状差异不显著（P〉0．05）；③肉品质：高温组胸肌和腿肌的肉色、剪切力都比常温组差，差异显著（P〈0．05）；④而pH值差异都不显著（P〉0．05），都集中在6．0～7．0之间。麒麟鸡的耐热性较高、屠宰性能好及肉质鲜美等特点，有望成为一种适合热带高温地区饲养的优质肉鸡。

麒麟鸡Frizzled4基因的miRNA筛选及验证载体构建

研究利用生物信息学方法选出调控Fzd4基因的miRNAs,且利用q RT-PCR方法检测了卷羽麒麟鸡和片羽怀乡鸡中miRNAs和Fzd4基因表达水平,进一步构建了Fzd4基因双荧光素酶报告基因pmir Glo载体,为后期在细胞水平验证miRNA和Fzd4靶标关系提供条件。结果显示:Fzd4基因的CDS区存在miRNA-1458(mi R-1458)和miRNA-1623(mi R-1623)靶标结合位点,与经典的调控机制有所不同,其3′UTR存在miRNA-184-3p(mi R-184-3p)结合位点;相对于怀乡鸡,麒麟鸡皮肤中mi R-1458、mi R-1623和Fzd4基因表达水平极显著升高(P<0.01),而mi R-184-3p表达量极显著降低(P<0.01);构建了Fzd4基因双荧光素酶报告载体,为细胞水平研究其具体调控机制奠定基础。研究表明Fzd4基因的关键miRNA为mi R-184-3p以及Fzd4基因双荧光素酶报告载体的构建为进一步研究其在毛囊生长发育过程的作用奠定基础。

黄羽麒麟鸡(卷羽鸡)体重与体尺性状指标主成分分析

利用主成分分析法对12周龄黄羽麒麟鸡的7个体型性状进行统计分析,将众多的性状综合成几个主成分,旨在了解体尺性状和体质量之间的内在关联性,为黄羽麒麟鸡体型性状的选育提供参考依据。结果表明:黄羽麒麟公鸡的体重、体斜长、龙骨长、胸深和胫围均极显著高于母鸡,黄羽麒麟鸡的胫长和胫围这两个性状变异系数较大,选育潜力大;体重与体斜长、龙骨长、胸深、胫长和胫围呈极显著正相关,其他体尺性状间存在不同程度的相关性;黄羽麒麟鸡的7个体型性状可简化为3个主成分,累计贡献率占信息总量的91.37%,提取的3个主成分所占信息的侧重各不相同,对黄羽麒麟鸡体型特征的选育具有重要的参考价值。

麒麟鸡卷羽毛囊发育规律及卷羽特点研究

为了探究麒麟鸡卷羽毛囊发育规律及卷羽特点，研究通过采集7～18日胚龄麒麟鸡和怀乡鸡鸡胚背部皮肤，进行石蜡切片，HE染色，在显微镜下观察毛囊形态结构，比较分析麒麟鸡和怀乡鸡胚胎期毛囊发育过程，并于出壳后观察分析麒麟鸡卷羽生长状况。结果表明：卷羽毛囊发育过程在8～16日胚龄，其中12～15日胚龄卷羽毛囊呈弯曲状态，髓质面积大于片羽毛囊，羽辛支嵴小于片羽；卷羽羽轴向外弯曲、羽小枝之间不能相互钩连形成闭合羽片。

贵州麒麟鸡小肠肥大细胞的观察

为了解贵州麒麟鸡小肠黏膜的免疫状态,揭示其与生长速度缓慢的关系,剖取10只健康成年贵州麒麟鸡小肠,采用改良甲苯胺蓝染色对其肥大细胞的形态、分布及数量变化进行观察分析。结果表明:贵州麒麟鸡小肠各段均有肥大细胞分布,其主要分布于黏膜固有层和黏膜下层,少量分布于黏膜下结缔组织中,多为圆形、卵圆形或长梭形;十二指肠中肥大细胞为(11.63±2.67)个/mm2,空肠为(37.88±8.17)个/mm2,回肠为(8.75±1.98)个/mm2,十二指肠、回肠与空肠中肥大细胞数量差异均极显著(P<0.01),十二指肠与回肠间差异不显著(P>0.05)。贵州麒麟鸡的生长速度相对缓慢,可能与其十二指肠段的肥大细胞数量少有关。

高温应激致麒麟鸡(卷羽鸡)肝损伤试验动物模型的建立

本试验旨在建立急性应激致禽类肝损伤的试验动物模型。对麒麟鸡(卷羽鸡)进行持续高温应激后,检测血清中的肝损伤酶谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆碱脂酶(CHE)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变,观察肝脏病理组织学变化。结果显示,高温应激前期,麒麟鸡血清肝损伤酶AST和ALT活性极显著升高(P<0.01),高温应激后期,AST活性显著低于正常水平(P<0.05),而ALT活性极显著低于正常水平(P<0.01);持续高温应激期间,CHE的活性一直低于正常水平,高温应激后期,CHE活性极显著低于正常水平(P<0.01);在高温应激下LDH活性呈先下降后上升再下降的变化趋势,高温应激后期,LDH活性极显著高于正常水平(P<0.01)。高温应激引起麒麟鸡肝细胞出现水泡变性、肝细胞核浓缩现象。结果表明,采用急性热应激可诱导麒麟鸡肝损伤试验模型,试验模型具备肝脏水泡变性和核浓缩病理特征。

麒麟鸡miRNA-1623与靶基因Wnt4的靶标验证分析

麒麟鸡(frizzle chicken)是我国亚热带地区特有的一种具有卷羽特性的优质肉鸡品种。本课题组前期研究发现在麒麟鸡皮肤中高度表达miRNA-1623(miR-1623),因此推测其参与麒麟鸡毛囊发育及卷羽的形成过程。为研究其独特的毛囊发育及卷羽散热机制,本研究利用生物信息学手段根据其靶标结合位点寻找到其潜在靶标Wnt4基因,并利用qRT-PCR对卷羽麒麟鸡和片羽怀乡鸡中的miR-1623与Wnt4的表达水平进行了检测。进一步通过构建双荧光素酶报告基因pmirGlo载体在细胞水平对miR-1623与Wnt4的靶标关系进行了验证。结果表明:Wnt4 mRNA的3'UTR存在miR-1623靶标结合位点(TGCCTG);相对于怀乡鸡,麒麟鸡皮肤中miR-1623表达水平显著升高(p<0.01),Wnt4 mRNA表达水平显著降低(p<0.01);双荧光素酶检测分析发现miR-1623靶向负调控Wnt4-3'UTR。本实验可为进一步揭示miRNA-1623在禽类毛囊生长发育过程中的作用提供参考。