中枢性性早熟与KISS-1/G蛋白偶联受体54基因的研究进展

中枢性性早熟是一种常见的由下丘脑-垂体-性腺轴提前启动所引起的儿童内分泌疾病,近年来越来越受到人们关注。其确切的发病机制尚未明确,但多个研究均表明,KISS-1/G蛋白偶联受体54(GPR54)基因在儿童性早熟的发病及发展中扮演着重要的角色。现对KISS-1/GPR54基因在中枢性性早熟方面的研究进展进行综述。

胰岛素样生长因子-1 G蛋白偶联受体54及胃饥饿素在中枢性性早熟患儿中的水平及相关性分析

目的检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)及胃饥饿素在中枢性性早熟患儿中的水平,分析相关性。方法选取2019年5月—2020年10月台州市立医院收治的81例性早熟患儿为观察组,其中部分性性早熟患儿45例,中枢性性早熟患儿36例;另外选取同期30例正常发育儿童为对照组。应用生化分析仪检测卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))及黄体生成素(LH)水平,采用酶联免疫吸附法检测IGF-1和胃饥饿素水平,应用荧光定量PCR法检测GPR54水平。IGF-1、GPR54及胃饥饿素之间的相关性采用Pearson相关性分析。结果对照组FSH、E_(2)及LH水平分别为(2.85±0.32)IU/L、(8.71±1.26)pg/ml及(5.31±0.58)IU/L;观察组FSH、E_(2)及LH水平分别为(13.24±2.64)IU/L、(21.82±2.18)pg/ml及(16.74±1.73)IU/L。观察组FSH、E及LH水平均显著高于对照组(t=21.440,21.020,35.370,均P<0.05)。对照组IGF-1、GPR54及胃饥饿素水平分别为(50.32±5.26)nmol/L、(9.75±1.62)ng/ml及(2.51±0.28)ng/L;观察组IGF-1、GPR54及胃饥饿素水平分别为(113.68±10.81)nmol/L、(16.24±2.87)ng/ml及(2.75±0.36)ng/L。观察组IGF-1、GPR54及胃饥饿素水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(t=30.720,11.690,3.297,均P<0.05)。中枢性性早熟患儿IGF-1、GPR54及胃饥饿素水平均显著高于部分性性早熟患儿,差异均有统计学意义(均P<0.05)。IGF-1、GPR54及胃饥饿素联合检测预测中枢性性早熟的曲线下面积、灵敏度分别为0.935、94.80%,均显著高于单一检测。Pearson相关性分析发现:IGF-1与GPR54、胃饥饿素均呈正相关(r=0.599,P=0.001;r=0.750,P=0.001),GPR54与胃饥饿素呈正相关(r=0.631,P=0.001)。结论中枢性性早熟患儿血清IGF-1、GPR54及胃饥饿素水平异常上升,联合检测IGF-1、GPR54及胃饥饿素预测儿童中枢性性早熟的价值较高,IGF-1、GPR54及胃饥饿素可成为预测儿童中枢性性早熟的血清标志物。

膳食诱导肥胖小鼠下丘脑Kiss-1和GPR54 mRNA表达

目的探讨Kiss-1/G蛋白偶联受体54(GPR54)基因在肥胖导致雄性小鼠促性腺激素释放激素低下中作用。方法 6周龄C57bl/6雄性小鼠,共48只,动物随机分为2组:对照组12只,给予基础饲料,实验组36只,给予高脂饲料,饲养8周后,小鼠按体重分为肥胖倾向(DIO)和肥胖抵抗(DIO-R)2组,下腔静脉抽血后全部断头处死,称量生殖脏器、睾丸周和肾周脂肪含量,电镜检测睾丸间质细胞改变,迅速取出下丘脑组织,检测Kiss-1和GPR54 mRNA表达水平。结果与对照组比较,DIO组小鼠肾周脂肪、附睾脂肪[(0.59±0.10)、(1.16±0.26)g]及其系数[(0.018±0.002)、(0.036±0.007)]明显升高(P<0.05);DIO组小鼠睾丸系数(0.66±0.08)明显低于对照组(0.77±0.03)(P<0.05);DIO组小鼠下丘脑Kiss-1 mRNA表达水平(0.39±0.07)明显低于对照组(1.00±0.05)(P<0.05)。结论 Kiss-1 mRNA表达降低可能在雄性小鼠促性腺激素释放激素低下中起作用。

前列腺癌组织KISS-1、GPR54表达水平及其临床意义

目的分析前列腺癌组织中人吻素1(KISS-1)和G蛋白偶联受体54(GPR54)的表达水平,并探讨二者与前列腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法选取郑州大学附属郑州中心医院2016年4月至2018年5月收治的30例前列腺癌患者为前列腺癌组,另选取同期前列腺增生患者20例作为对照组。采用免疫组化法检测两组中KISS-1和GPR54蛋白表达情况;采用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组KISS-1和GPR54 m RNA的表达水平;分析KISS-1和GPR54表达与前列腺癌组织临床病理特征及患者预后的关系。结果免疫组化结果显示,前列腺癌组中KISS-1阳性表达率低于对照组(16.67%vs.80.00%)(P<0.05),GPR54阳性表达率与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。qRT-PCR结果显示,前列腺癌组中KISS-1 mRNA表达量低于对照组[(0.62±0.06)vs.(0.88±0.09)](P<0.05),GPR54 mRNA表达量与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。KISS-1和GPR54阳性表达与年龄、淋巴结是否转移无关,KISS-1和GPR54在不同TNM分期下的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),GPR54在不同Gleason评分下的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)。KISS-1阳性表达者1年生存率高于阴性表达者(100.00%vs.80.00%),GPR54阳性表达者1年生存率低于阴性表达者(80.77%vs.100.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论KISS-1和GPR54在前列腺组织中异常表达可能与前列腺癌的发生发展及患者预后有关,有望成为预测前列腺癌的潜在生物指标。

GPR-54/kisspeptins与性发育

G蛋白偶联受体-54(GPR-54)是新发现的视黄酸家族成员之一,kisspep-tins是其内源性配体,两者均是哺乳动物体内的肽类物质,主要分布于中枢神经系统的下丘脑、弓状核等多个区域,均与性发育密切相关。实验证明GPR-54突变的大鼠性发育低下,人类发生GPR-54突变者性腺功能低下,不能进入青春期。GPR-54/kisspeptins在调节促性腺激素LH和FSH的释放、促进生殖器官的发育及青春期启动中均具有重要的作用。

大补阴丸对真性性早熟模型大鼠的治疗作用

目的探讨大补阴丸对真性性早熟大鼠的治疗作用,评价大补阴丸对真性性早熟的疗效并探讨可能的作用机制。方法 5日龄SD雌性大鼠一次性sc给予达那唑30μg.g-1建立性早熟模型。15日龄时开始ig给予大补阴丸0.81,1.62和3.24 g·kg-1,每天1次,至模型组大鼠阴门开启数超过50%。21日龄起,密切观察各组大鼠阴门开启情况,并记录开启时的日龄。对阴门已开启的大鼠,于每日早晨进行阴道脱落细胞涂片,显微镜下观察性周期的变化。当模型组阴门开启大鼠数超过该组的50%时(33日龄),所有大鼠股动脉放血处死,取子宫和卵巢计算子宫和卵巢系数,并常规制作子宫和卵巢组织切片测定子宫壁厚度和卵巢黄体生成数;半定量逆转录(RT)-PCR法测定下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、G蛋白偶联受体54(GPR54)和Kiss-1 mRNA的表达水平。结果大补阴丸3.24 g·kg-1组子宫系数为115±12,较模型组154±14显著降低(P<0.05);大补阴丸3.24 g·kg-1组子宫壁厚度为(166±27)μm,较模型组(477±71)μm显著降低(P<0.05),并使卵巢黄体生成个数显著减少;大补阴丸能明显降低下丘脑GnRH,GPR54和Kiss-1mRNA的表达水平,卵巢系数则无明显变化。结论大补阴丸可能通过抑制下丘脑Kiss-1和GPR54基因表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,发挥治疗真性性早熟的作用。

复幼颗粒对SD雌鼠性早熟治疗作用及相关机制

目的:研究复幼颗粒对达那唑诱导大鼠性早熟模型的作用和有关机制。方法:将21窝SD雌鼠随机分为正常组,模型组,亮丙瑞林组(0.1 g·kg^(-1))和复幼合剂组(37.9 g·kg^(-1)),复幼颗粒高、中、低剂量组(17.0,8.5,4.3 g·kg^(-1))。于5日龄时注射达那唑300μg建立性早熟模型,造模10 d后,开始给药干预。20日龄时开始检查阴道开口情况,通过苏木素-伊红(HE)染色观察性腺发育情况;通过放射性免疫检测血清中黄体生成素(LH),卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E2)的含量;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH),Kiss-1,G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA表达。通过免疫组化检测下丘脑GnRH细胞表达情况。结果:与正常组比较,模型组阴道开口显著提前,子宫,卵巢系数明显增加(P<0.05),表明达那唑诱导性早熟模型成功建立,GnRH,Kiss-1,GPR54表达也均明显增加(P<0.05),表明达那唑模型可以提前启动下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴,从而诱发性早熟。与模型组比较,复幼颗粒中剂量组可显著延缓阴道开口时间(P<0.01),复幼颗粒高剂量可明显减轻子宫壁厚、子宫系数(P<0.05,P<0.01),中剂量可减轻卵巢系数和子宫壁厚(P<0.05),复幼颗粒高、中、低剂量均能明显下调血清激素E2,LH,FSH的含量(P<0.05,P<0.01),降低下丘脑GnRH,Kiss-1,GPR54 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),降低GnRH细胞的表达水平(P<0.05)。结论:复幼颗粒可通过调节Kiss-1/GPR54系统,下调GnRH的表达从而抑制HPG轴的启动达到治疗性早熟目的。

知柏地黄丸加减治疗特发性性早熟的疗效观察

目的:评价知柏地黄丸加减治疗特发性性早熟(ICPP)女性患儿的临床疗效及探讨其可能的作用机制。方法:收集河南省儿童医院自2019年7月至2020年7月收治的ICPP女性患儿共78例,按随机信封法分为观察组和对照组,各39例。观察组给予知柏地黄丸加减治疗(1剂/d,分2次口服),对照组给予知柏地黄汤治疗(1剂/d,分2次口服),治疗周期3月。观察两组治疗前后乳核长径、最大卵泡直径、子宫、卵巢容积的变化情况及检测两组血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、催乳素(PRL)、雌激素(E_(2))水平;在细胞水平上,检测知柏地黄丸加减与传统知柏地黄汤2种不同方药处理后下丘脑GT1-7细胞促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌量及性早熟相关基因亲吻素-1(Kiss-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA的表达水平。结果:与本组治疗前比较,两组患儿治疗后血清性激素水平均显著下降(P<0.01);治疗后,与对照组比较,观察组患儿乳核长径、最大卵泡直径明显缩小(P<0.01);观察组临床有效率优于对照组(P<0.01);细胞水平上,与传统知柏地黄汤组比较,知柏地黄丸加减组GT1-7细胞GnRH、Kiss-1、GPR54 mRNA表达水平明显降低。结论:知柏地黄丸加减能有效抑制ICPP患儿血清性激素水平,延缓性早熟患儿乳核及卵巢发育,较传统知柏地黄汤效果更明显,值得临床推广;抑制Kiss-1和GPR54 mRNA的表达水平可能是其治疗性早熟的作用机制之一。