下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用

下丘脑Kiss1系统是下丘脑-垂体-性腺轴中的一个重要组成部分,其通过促进促性腺激素释放激素的分泌,来调节生殖功能。最近研究发现,产前应激对男性后代生殖功能具有影响。然而,产前应激诱导的男性后代生殖功能下降的机制仍未阐明。通过对下丘脑Kiss1系统的治疗可能改善产前应激,诱导男性后代的生殖功能,该综述将讨论下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用。

下丘脑能量信号通路通过调节Kiss1神经元对青春期发育的影响研究进展

青春期的启动主要受下丘脑能量信号通路的调控。下丘脑能量信号通路瘦素、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、G蛋白偶联受体54(GPR54)具有启动青春期发育和调控机体能量平衡的功能。Kiss1是刺激性成熟的主要内分泌因子,是调控下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元的重要作用元件和下丘脑—垂体—性腺(HPG)轴成熟的调节因子,Kiss1作为GPR54的天然配体,与GPR54结合后调节GnRH分泌,对青春期发育起关键作用;瘦素是一种能量代谢的负反馈调节激素,下丘脑Kiss1神经元表达瘦素受体,介导瘦素对生殖系统产生影响;AMPK是重要的下丘脑能量感受器,在能量缺乏的条件下,AMPK被激活,抑制Kiss1 mRNA表达,在调节能量平衡及生殖方面起关键作用。机体能量代谢与青春期启动信号通路之间关系密切,研究青春期启动过程中调节能量平衡的信号通路,可以为治疗青春期发育异常和能量代谢失衡提供新治疗靶点。

经皮穴位电刺激对痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量及KISS1R的影响

目的通过研究在体外受精(IVF)周期中经皮穴位电刺激对痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量及Kiss1的影响,探讨经皮穴位电刺激影响痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量的机理。方法将100例行IVF-ET的痰湿型多囊卵巢综合征患者随机分为两组,试验组(经皮穴位电刺激联合西药组)和对照组(伪针联合西药组),每组各50例。分别观察两组患者治疗前后证候积分及积分差值、促性腺激素(Gn)总量、取卵数、单卵雌激素水平、优卵率、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率,取卵日卵巢颗粒细胞Kisspeptin/Kiss1r系统中Kiss1r mRNA水平的表达差异。结果试验组与对照组相比,治疗前后证候积分、积分差值、单卵雌激素水平改善明显(P<0.05);Gn总量、取卵数、受精率、临床妊娠率比较,差异无统计学意义;优卵率、优胚率显著提高(P<0.05);试验组患者颗粒细胞Kiss1r的表达水平较对照组有明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论经皮穴位电刺激提高痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量的机理与调控卵巢颗粒细胞Kisspeptin/Kiss1r系统,下调通路中关键因子Kiss1r的表达,促进颗粒细胞增殖、改善卵巢微环境有关,其作用机制尚需进一步探讨。

KISS1基因SNP对柯乐猪繁殖性状的影响

研究旨在了解KISS1基因对猪繁殖力的影响,以78头初产柯乐猪为材料,采用聚合酶链式反应(PCR)产物直接测序与人工较对相结合鉴定KISS1基因单核苷酸多态性(SNP)位点,分析SNP位点对柯乐猪繁殖指标的影响。结果显示在KISS1基因第1外显子处发现g.64835073 A>G同义突变,在第1内含子处发现g.64835529 G>A突变,2个SNP位点均产生3种基因型,均为中度多态位点,且均符合Hardy-Weinberg平衡;g.64835073 A>G位点对5个繁殖指标的影响未能达到显著水平(P>0.05);其中g.64835529 G>A位点对总产仔数、初生个体重、断奶个体重的影响达显著水平,揭示g.64835529 G>A位点可能作为猪产仔数的一个分子标记。

下丘脑Kiss1神经元在能量代谢调节中的作用

代谢是机体生存和延续的基础,机体通过影响行为并诱发一系列的生理反应,调节代谢状态。能量代谢失衡可能导致机体消瘦或肥胖,甚至会造成生长发育和生殖功能的障碍等。因此,维持机体的能量平衡至关重要,而这一状态的维持受中枢神经系统的严格控制。中枢神经系统,特别是下丘脑,在调节机体生理功能和能量平衡中发挥着重要的作用。下丘脑Kisspeptin被认为在调节性腺轴、营养性发育和生殖中发挥重要作用。近些年来,关于其在能量代谢调控中的作用也引起广泛关注。本文将从能量摄入和能量消耗两个方面对下丘脑Kisspeptin在能量代谢调控中的作用进行综述,以期为防治因能量失衡诱发的代谢性疾病提供新的研究思路和依据。

KISS1基因与哺乳动物繁殖性能关系的研究进展

转移抑制基因(KISS1)被公认为是促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)的关键上游调节因子,在下丘脑-垂体-性腺轴系统中起到一个中枢节点的作用。近年来随着表达定位研究技术的发展,已在多个物种的多个组织中检测到了KISS1基因的表达。作为繁殖领域的关键候选基因,KISS1基因如何调控动物繁殖性能已有大量文献报道,文章就KISS1基因在不同繁殖相关组织表达以及在生产实践中的应用做一综述。

KISS1和S100A4在胃癌中的表达变化以及与转移的关系

目的：观察KISS1和S100A4在胃癌及相应淋巴结和器官转移组织中的表达,并探讨它们在肿瘤发生和转移中的作用。方法：采用组织芯片和免疫组化方法检测KISS1和S100A4在正常黏膜(n=71)、原发癌(n=71)、淋巴结转移癌(n=64)和远处转移癌(n=40)中的表达,比较它们在原发灶和正常组织、转移灶的表达差异。结果：KISS1的表达随肿瘤的发生和进展逐步下降,而S100A4正好相反,随肿瘤进展表达上调。KISS1在正常黏膜、原发癌、淋巴结转移和器官转移组织中的表达率分别为：95.8%、74.6%、60.9%和57.5%,S100A4在相应组织中的表达为43.6%、71.8%、70.3%和90.0%。正常黏膜组织中KISS1的表达率显著高于厚发癌中的表达(P＜0.001)。S100A4在正常组织中的表达率显著低于肿瘤中的表达(P＜0.001),脏器转移中的表达率又显著高于原发癌中的表达(P＜0.05)。结论：肿瘤转移是一个遗传改变逐步积累的结果,KISS1表达下调和S100A4表达上调在胃癌发展及转移中可能起重要作用。

Kiss1基因调控哺乳动物繁殖性能的研究进展

Kiss1基因是近年来繁殖生理学领域的研究热点。Kiss1基因编码的多肽类激素叫Kisspeptin。Kiss1基因主要表达于下丘脑弓状核和下丘脑前腹部室旁核区域。Kisspeptin可通过其受体GPR54的介导来发挥作用。Kiss1基因是促性腺激素释放激素的关键上游调节子,在性腺轴系统中起到中枢节点作用。Kiss1在动物初情期启动、季节性发情、生殖调控中起着关键作用。论文就Kiss1基因在哺乳动物繁殖方面的研究进展进行简单综述。

慢病毒转染KISS1基因对人结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨慢病毒转染KISS1基因过表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并阐明其作用机制。方法:选取KISS1基因低表达结直肠癌细胞株,构建慢病毒载体并转染KISS1基因,分为对照组(PBS处理)、空载体组(转染空载体)和过表达组(转染含KISS1载体)。荧光显微镜检查转染的荧光率(MOI),Real-time PCR和Western blotting法检测各组细胞中KISS1 mRNA和蛋白(metastin)的表达量,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞侵袭和迁移能力。结果:LoVo、SW620、SW480、HCT-116和HT29细胞中,HCT-116细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量相对最低,因此筛选其作为研究载体。包装有KISS1基因的慢病毒感染HCT-116细胞后,能够稳定表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因,MOI均>80%。与对照组和空载体组比较,过表达组细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量明显升高(P<0.05),细胞增殖活力明显降低(P<0.05),侵袭能力和迁移能力亦明显下降(P<0.05);与对照组比较,空载体组细胞增殖活力、侵袭能力和迁移能力差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒转染KISS1基因能够过表达KISS1蛋白及抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力,其机制可能与KISS1蛋白表达有关。

GnRHR、GDF9、KISS1基因多态性与黄淮山羊产羔性状相关性的研究

为了研究黄淮山羊促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因、生长分化因子9(GDF9)基因、转移抑制1(KISS1)基因遗传多态性及其与产羔数的相关性,试验采用PCR-SSCP技术检测Gn-RHR、GDF9、KISS1基因的多态性,同时用最小二乘法研究了其多态性与黄淮山羊产羔数的关系。结果表明:在黄淮山羊群体中,GnRHR、GDF9、KISS1基因扩增片段均存在多态性,但只有2种基因型,即纯合型AA和杂合型AB;在黄淮山羊中,GnRHR、GDF9、KISS1基因的产羔数最小二乘平均值在AA基因型和AB基因型之间均存在极显著差异(P<0.01)。说明GnRHR、GDF9、KISS1基因对黄淮山羊的产羔数均有显著影响,GnRHR、GDF9、KISS1基因可以作为黄淮山羊多胎性状的有效分子标记。

KISS1、KAI1和FHL1在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤转移的关系

目的研究转移抑制基因KISS1、KAI1和FHL1在淋巴结转移与否的乳腺癌组织中表达的差异及其与雌、孕激素受体的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测59例乳腺癌组织和31例非癌组织中的KISS1、KAI1和FHL1表达情况及其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果①乳腺癌中KISS1、KAI1和FHL1的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②KISS1、KAI1和FHL1表达与乳腺癌的腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与患者年龄、肿瘤大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。③KAI1表达与ER、PR呈负相关(P<0.05);FHL1表达与PR呈负相关(P<0.05);差异均有统计学意义。④分析KISS1、KAI1和FHL1之间的关系可以看出:两两之间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论有淋巴结转移的乳腺癌患者KISS1、KAI1和FHL1的表达明显低于无淋巴结转移的乳腺癌患者。

KISS1R基因突变所致的一个特发性低促性腺激素性性腺功能减退症家系分析

目的:本研究旨在收集一个特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(idiopathic hypogonadotropic hypogonadism,IHH)的家系成员资料,通过基因检测确定其突变位点,丰富疾病突变谱。方法:对家系成员进行病史采集、生化及影像学检查。应用高通量测序技术检测先证者突变位点,Sanger测序技术对先证者及家系成员进行基因型验证。结果:该家系为近亲结婚家系,先证者为25岁女性,表现为青春期发育延迟、原发性闭经、不孕、促性腺激素及性激素水平低下,先证者妹妹及弟弟也存在明显青春期发育延迟,父母为表兄妹关系且临床表型正常。基因检测结果示先证者KISS1R基因5号外显子上,第983号碱基胞嘧啶突变为腺嘌呤(c.C983A),使第328号氨基酸丝氨酸突变为终止密码子(p.S328X),蛋白质翻译提前终止。父母为该突变位点的杂合子,妹妹为纯合子。结论:通过基因检测,发现了KISS1R基因上的一个新的致病突变c.C983A(p.S328X)。

PKC信号通路在KISS1基因抑制人结直肠癌HCT116细胞侵袭迁移的作用

目的:探讨PKC信号通路在KISS1基因发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭迁移的作用。方法:构建p GC-LV-KISS1-EGFP慢病毒载体感染人结直肠癌细胞HCT116,分空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)、过表达组(OE组)。q RT-PCR和Western blot检测KISS1基因m RNA和Metastin、PKC信号通路的关键分子PKCα、PKCβII及下游E钙黏蛋白表达量的变化。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力的变化。结果:转染后能够稳定表达报告基因EGFP,荧光率均>80%,且OE组KISS1基因m RNA、Metastin表达量较CON组和NC组均明显升高(P<0.05)。转染后,PKCβⅡ的蛋白表达量(0.288 2±0.023 7)较CON组(0.530 9±0.013 3)和NC组(0.511 7±0.008 5)明显下降(P<0.05),而PKCα的表达水平无明显变化(P>0.05);下游效益蛋白E钙黏蛋白表达量(0.633 2±0.017 4)较CON组(0.232 2±0.019 6)和NC组(0.252 3±0.018 2)明显升高(P<0.05)。OE组细胞侵袭、迁移能力较CON组和NC组均明显下降(P<0.05)。结论:KISS1基因可能通过下调PKCβⅡ后上调下游蛋白E钙黏蛋白的表达而发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭、迁移作用,有望成为防治结直肠癌转移的新靶点。

Kisspeptin/Kiss1r系统在多囊卵巢综合症大鼠下丘脑弓状核的表达

目的:通过构建多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨其下丘脑弓状核Kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达变化及相互作用。方法:孕10dWistar大鼠雌性后代随机分为对照组和PCOS组。采用来曲唑构建大鼠PCOS模型。造模结束后,测定体重参数和内分泌激素的改变;观察卵巢组织的病理学改变;同时用免疫组织化学、免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测下丘脑弓状核Kisspeptin、Kiss1r和GnRH的蛋白和各自mRNA水平。结果:成功构建PCOS大鼠模型,体重增加(P<0.05),体脂肪含量增加(P<0.05),血清黄体生成激素(LH)和睾酮(T)水平增加显著(P<0.01),具有典型的PCOS内分泌和卵巢的改变;与对照组相比,PCOS组GnRH的蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),Kisspeptin蛋白和其mRNA表达下调(P<0.05),未见Kiss1r蛋白和其mRNA表达的显著改变(P>0.05)。结论:大鼠下丘脑弓状核Kisspeptin/Kiss1r系统表达下调,GnRH表达异常增加,与PCOS的神经内分泌有关,可能在PCOS疾病的发生发展中有着重要的作用。

KISS1及骨桥蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨KISS1(KiSS-1 metastasis-suppressor)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在上皮性卵巢癌(epithelial ovariancancer,EOC)组织中的表达及其临床意义。方法:选取2009年3月至2010年10月在河北医科大学第四医院妇科接受手术的上皮性卵巢肿瘤患者组织标本67例,免疫组化法检测KISS1和OPN在肿瘤组织中的表达,分析其相关性和临床意义。结果:KISS1蛋白在EOC组织中的表达明显低于其在卵巢良性肿瘤组织中的表达[39.5%(17/43)vs 75.0%(18/24);χ2=7.765,P=0.005];有淋巴结转移组中KISS1的表达低于无淋巴结转移组[25.0%(7/28)vs 66.7%(10/15);χ2=7.094,P=0.008];在不同临床分期组中,Ⅰ+Ⅱ期EOC中KISS1的表达高于Ⅲ+Ⅳ期[61.1%(11/18)vs 24.0%(6/25);χ2=6.029,P=0.014]。OPN蛋白在EOC组织中的表达率明显高于其在卵巢良性肿瘤组织中的表达[74.4%(32/43)vs 37.5%(11/24);χ2=5.475,P=0.019];在有淋巴结转移组中OPN的表达高于无淋巴结转移组[89.3%(25/28)vs 46.7%(7/15);χ2=7.251,P=0.007];在不同临床分期组中,Ⅰ+Ⅱ期EOC中OPN的表达低于Ⅲ+Ⅳ期[50.0%(9/18)vs 92.0%(23/25);χ2=7.616,P=0.006]。KISS1和OPN蛋白的表达与EOC的病理类型及患者年龄无关(P>0.05)。在EOC中,KISS1与OPN蛋白的表达呈负相关(r=-0.507,P=0.001)。结论:KISS1和OPN可能参与了EOC的发生、发展和转移,有可能成为EOC预后判断的生物学标志物。

SATB1、KISS1在胃腺癌组织芯片中的表达及其临床意义

目的 探讨特异性核基质结合区蛋白-1（SATB1）和亲水性蛋白-1（KISS1）在胃腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测76例胃腺癌组织及19例癌旁正常胃黏膜组织中SATB1、KISS1的表达情况，并分析其表达与临床病理特征和预后的关系。结果 SATB1、KISS1在胃腺癌组织中的阳性表达率分别为80.3％（61／76）和14.5％（11／76），与正常胃黏膜组织的10.5％（2／19）、89.5％（17／19）比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。SATB1和KISS1的表达与胃癌淋巴结转移、远处转移、TNM分期有关（P＜0.05），而与年龄、性别、肿瘤直径和组织分化程度无关（P＞0.05）；SATB1和KISS1的表达呈负相关（r=-0.736，P＜0。01）。SATB1阳性和阴性表达患者的中位总生存时间（OS）分别为16.8个月（95％CI：10.124～21.876个月）、42.2个月（95％CI：31.804～52.196个月），差异有统计学意义（P＜0.05）；KISS1阳性和阴性表达患者的中位OS分别为45.1个月（95％ CI：36.736～53.264个月）、13.6个月（95％ CI：9.971～16.029个月），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃腺癌组织中SATB1、KISS1的表达与胃腺癌发生、发展及侵袭性有关，二者均可作为评价胃腺癌生物学行为的指标。

KiSS1蛋白和MMP-2在宫颈癌组织中的表达及诊断价值

宫颈癌（ICC）是女性常见的生殖道恶性肿瘤,随着人们生活方式的改变及人口的高龄化,发病率明显上升,且日趋年轻化。早期ICC无明显症状,术后易复发和转移,早期诊断能够明显提高治愈率,降低死亡率。临床亟待寻找敏感性高、特异性强的检测方法,以早期诊断,提高治愈率,提高患者的生活质量。

Kisspeptin/kiss1 r系统在营养性肥胖雄性大鼠下丘脑弓状核的表达以及对下丘脑-垂体-睾丸轴的影响

目的:通过构建营养性肥胖雄性大鼠的模型,探讨下丘脑弓状核kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达和作用,以及对下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT)的影响。方法:孕14 d SD大鼠,其后代随机分为正常组和高能饲料组,构建营养性肥胖模型。将肥胖大鼠进一步分为对照组和实验组,实验组侧脑室注入kisspeptin。记录体重参数和内分泌激素的改变;免疫组化和Western印迹检测各组大鼠下丘脑弓状核中瘦素受体(LepR)、kisspeptin、kiss1r和GnRH的蛋白表达。qRT-PCR检测各组大鼠下丘脑弓状核GnRH mRNA的表达。结果:成功构建营养性肥胖大鼠,体重参数和内分泌激素改变明显。相比较正常组,对照组大鼠弓状核LepR、kisspeptin和GnRH表达减少,侧脑室注入kisspeptin后,实验组大鼠弓状核GnRH显著增加,血清LH和T水平显著升高,未见LepR和kiss1r的改变。结论:中枢注入kisspeptin可以显著改善由营养性肥胖引起的GnRH低表达,纠正HPT轴功能失调,进而改善生殖功能。

下丘脑弓状核Kisspeptin、Kiss1r和GnRH蛋白和mRNA在PCOS大鼠模型中的表达水平及相互作用的实验研究

目的探讨下丘脑弓状核促性腺激素释放激素(Gn RH)、Kisspeptin和Kiss1r蛋白和m RNA在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型中的表达水平。方法取24只雌性Wistar大鼠,随机分为对照组(正常大鼠)和实验组(应用来曲唑建立PCOS大鼠模型),两组各12只。对照组给予等量羧甲基纤维素溶液灌胃。实验组应用来曲唑1 mg/kg联合1%羧甲基纤维素溶液进行每日灌胃,连续3周。经苏木精-伊红染色观察两组大鼠卵巢组织病理学改变,检测内分泌激素水平,分别采用免疫印迹法与实时荧光定量PCR法对大鼠下丘脑弓状核Gn RH、Kisspeptin、Kiss1r蛋白和m RNA表达量进行检测。结果实验组血清卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)和黄体生成素(LH)的水平较对照组显著升高(P<0.01)。实验组Kisspeptin、Kiss1r蛋白和m RNA表达量较对照组显著降低(P<0.05),Gn RH蛋白和m RNA表达量较对照组显著升高(P<0.01)。结论PCOS大鼠Gn RH表达异常升高,Kisspeptin表达异常降低,提示大鼠下丘脑弓状核Kisspeptin/Kiss1r系统表达异常,与PCOS的神经内分泌密切相关,可能在PCOS的病理过程中起到重要作用。

KISS1与KAI1在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨KISS1与KAI1在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法:收集80例行结肠癌根治术患者的术后病理标本,采用免疫组织化学检测其中KISS1与KAI1蛋白表达,分析结肠癌组织中KISS1和KAI1蛋白表达与患者临床参数的关系,及两者表达的相互关系。结果:KISS1与KAI1在结肠癌组织中表达较癌旁组织明显下降(P<0.05);KISS1和KAI1表达与患者年龄、性别、肿瘤大小均无明显相关性(P>0.05),KISS1和KAI1表达与患者肿瘤分化程度、淋巴转移及侵犯浆膜均有明显相关性;结肠癌组织中KISS1表达和KAI1表达呈正相关(P<0.05);KISS1和KAI1阴性表达患者的5年生存率均明显低于阳性表达患者(P<0.05)。结论:KISS1和KAI1在结肠癌中低表达,与结肠癌恶性生物学行为有关,对评价结肠癌患者预后具有一定的提示意义。