下丘脑kisspeptin/神经激肽B/强啡肽神经元研究进展

Kisspeptin/神经激肽B/强啡肽(KNDy)神经元位于动物的下丘脑弓状核和人类的漏斗状核,因其共表达kisspeptin、神经激肽B和强啡肽而被命名为KNDy神经元。KNDy突变可以导致女性生殖内分泌紊乱、生殖障碍性疾病,因而受到国内外学者的广泛关注。KNDy神经元能够调控下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴,在青春期启动、促性腺激素释放激素(GnRH)释放和生殖内分泌疾病中发挥重要作用,且KNDy神经元与绝经期潮热有关,有望揭开潮热的源头机制。本文就KNDy神经元的发现及命名,KNDy神经元与HPG轴、GnRH、雌激素的关系,以及其在生殖内分泌疾病中的作用进行综述。

大鼠脑干孤束核中神经激肽B受体神经元在内脏痛信息传递与整合中的作用(英文)

背景:脑干孤束核是内脏痛信息向高位脑中枢传递的一个关键的中继站。形态学证据表明,大鼠孤束核中分布有大量的神经激肽B受体(neurokininBreceptors,NKR)。然而,孤束核中表达NKR的神经元是否参与内脏痛信息的传入与整合目前仍不清楚。目的:阐明孤束核中表达NKR的神经元在脑肠通路中传递内脏痛信息中的作用。设计:随机的对照实验性研究。地点和对象:12只SD大鼠购自第四军医大学实验动物中心。大鼠均为雄性,体质量220～250g,用随机数字表法分为实验组和对照组,每组各6只。干预:6只雄性大鼠吸入麻醉后,将2mL50g/L的乙酸经导管注入大鼠升结肠内,20s后再注入5mL生理盐水冲洗结肠。对照组大鼠则注射等体积的磷酸缓冲液(0.01mol/L)。24h后大鼠开胸经心脏灌流40g/L的甲醛。灌注毕后取出鼠脑修块,然后将含有孤束核的脑块在300g/L的蔗糖溶液中浸泡过夜,冰冻切片机切片。用抗FOS抗体和抗NKR抗体行免疫组化双重标记染色。免疫组化由第一作者完成,动物模型构建由第二作者完成,第三及第四作者负责免疫组化结果评估。主要观察指标:孤束核中NKR和FOS蛋白的共表达。结果:孤束核各个亚核中均有大量的NKR免疫阳性的神经元,但在内侧亚核和联合亚核中尤其浓密。阳性产物分布在细胞膜和树突上;胃肠道给予甲醛刺激后,表达FOS蛋?

外源性神经激肽B对大鼠初情期的影响

【目的】研究神经激肽B(NKB)中枢给药对大鼠初情期启动、下丘脑Kisspeptin和促性腺激素释放激素(GnRH)基因及蛋白质的表达水平,以及血清中性腺激素含量的影响,以了解NKB在调节初情期方面的作用。【方法】将初情期前SD雌性大鼠分为NKB组、NKB拮抗剂组和对照组,分别侧脑室注射60 pmol/μL NKB溶液、0.3 nmol/μL NKB拮抗剂和生理盐水,注射剂量为10μL/只,每日观察阴门开启情况,统计阴门开启时间。所有大鼠均在阴门开启时采集血样,分离血清,并采集下丘脑、卵巢、子宫,称卵巢、子宫质量。分别采用免疫荧光共定位和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,分析下丘脑中GnRH和Kisspeptin蛋白和基因的表达情况,并分别通过酶联免疫吸附法(ELISA)和放射性免疫法(RIA)检测血清中NKB和性腺激素(雌二醇、孕酮)水平。【结果】NKB使大鼠阴门开启时间显著提前(P<0.05),卵巢质量显著降低(P<0.05),对子宫质量无明显影响(P>0.05);NKB拮抗剂使阴门开启时间显著推迟(P<0.05),对卵巢和子宫质量无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,NKB组SD大鼠下丘脑Kiss1和GnRH mRNA的表达显著提高(P<0.05);GnRH+细胞数量在室旁核(PVN)和正中隆起(ME)显著增加(P<0.05),而在下丘脑弓状核(ARC)中显著减少(P<0.05),Kisspeptin+细胞数量在ARC和室周核(PeN)中显著增加(P<0.05),在PVN中无显著差异(P>0.05);血清中E 2和P 4水平均显著增加(P<0.05)。但在NKB拮抗剂组中,SD大鼠下丘脑Kiss1和GnRH mRNA的表达低于对照组,但无显著差异(P>0.05),GnRH+细胞数量在ARC中显著增加(P<0.05),在室旁核PVN和ME则显著降低(P<0.05),ARC和PeN中Kisspeptin+细胞的数量显著减少(P<0.05),且血清中E 2和P 4水平均显著降低(P<0.05)。【结论】NKB通过调节下丘脑Kisspeptin和GnRH的表达以及提高血清中E 2和P 4水平来促进大鼠初情期启动。

KNDy神经元在女性生殖内分泌中的研究与应用

Kisspeptin/神经激肽B/强啡肽(kisspeptin/neurokinin B/dynorphin,KNDy)神经元是Kisspeptin神经元的一个亚组,是性激素负反馈的靶细胞,它产生神经激肽B(Neurokinin B,NKB)和强啡肽(Dynorphin A,Dyn),NKB起刺激作用,Dyn起抑制作用,两者协同通过自分泌和旁分泌调节kisspeptin对促性腺激素释放激素(GnRH)脉冲频率的控制,进而维持和控制垂体卵泡刺激素(FSH)及黄体生成激素(LH)的分泌释放,参与了青春期的启动及性腺激素的调节、女性性征的发育及生育功能维持,并与多种内分泌异常疾病的病理过程密切相关,如下丘脑闭经、中枢性早熟和多囊卵巢综合征等。KNDy神经元的发现逐渐揭开了下丘脑GnRH的上游调控机制,使学者们对生殖内分泌轴有关的疾病发病机制和疾病诊断有了新的认识,而这些新认识促进了对生殖内分泌生理病理及其相关疾病发病机制的理解和思考。对KNDy神经元在女性生殖内分泌领域的研究与应用作一综述,以期为临床及科研人员提供参考。

KNDy神经元在绝经后期妇女血管舒缩症状病理机制中的作用

血管舒缩症状(VMS)困扰着近80%的绝经后期妇女,但是对VMS病因的了解十分有限。与生殖轴相关的神经内分泌回路在绝经后期发生显著变化。目前很多研究发现在绝经后期由于缺乏卵巢类固醇激素负反馈,女性下丘脑的KNDy神经元的形态及神经肽基因表达发生改变,因此推测KNDy神经元可能在VMS病理机制中发挥作用。在大鼠模型中,通过KNDy神经元的消融可以减少尾部皮肤血管舒张,部分阻断雌激素对温度调节的影响。此外,KNDy神经元可以通过中位视前核(MnPO)中的神经激肽B(NKB)信号影响大鼠尾部皮肤血管舒张。该文对调节KNDy神经元可能成为治疗VMS的新方法作一综述。

特发性中枢性性早熟女童血浆kisspeptin、神经激肽B及强啡肽浓度的变化研究

目的研究特发性中枢性性早熟(ICPP)女童血浆kisspeptin,神经激肽B(NKB)及强啡肽浓度的变化,探索其在ICPP发病中的作用。方法选取2016年1月-2017年1月在山东大学齐鲁医院确诊为ICPP并未经治疗的女童50例,观察并比较ICPP女童与正常健康女童以及ICPP女童治疗前后性发育状况和血浆kisspeptin、神经激肽B、强啡肽浓度的变化。结果未行治疗的ICPP女童的骨龄、骨龄/年龄、身高标准差单位(SDS)、黄体生成素基础值(B-LH)、卵泡刺激素基础值(B-FSH)、雌二醇(E2)、kisspeptin、NKB与健康对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),治疗6个月后,其B-LH、黄体生成素峰值(P-LH)、B-FSH、卵泡刺激素峰值(P-FSH)、P-LH/P-FSH、E2、kisspeptin、NKB较治疗之前均显著下降(P<0.01),治疗12个月后上述指标与治疗6个月时差异无统计学意义(P>0.05),强啡肽在各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。ICPP女童接受促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)治疗后,其性发育在3个月之内均得到明显控制,持续观察至12月,性发育均未再明显进展。Kisspeptin和NKB、P-LH、P-LH/P-FSH、E2均存在明显正相关关系(P<0.05),NKB和kisspeptin、P-LH、P-LH/P-FSH、E2也存在明显正相关关系(P<0.05)。结论 Kisspeptin和NKB在ICPP的发病过程中起重要作用,其有可能成为监测儿童性发育及评价ICPP治疗效果的有效指标。

KNDy神经元在多囊卵巢综合征中的研究与应用前景

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)作为最常见的妇科内分泌疾病,影响着全球范围内的女性,其群体患病率为6%~20%[1],患PCOS的女性易合并不孕症、肥胖、代谢综合征、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、肝脂肪变性和血脂异常,同时会增加子宫内膜癌、2型糖尿病和心血管疾病的患病风险[2-5],对女性健康危害极大,需及时诊断和干预治疗。

外源性神经激肽B对雌性大鼠生殖轴GnRH和Kisspeptin表达的影响

为研究外源性神经激肽B(NKB)对雌性大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA)GnRH和Kisspeptin表达的影响,将40只60d的Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为试验组和对照组,侧脑室分别注射NKB溶液和等体积生理盐水,20min后处死采集样品。采用免疫荧光技术分析各组织的GnRH和Kisspeptin蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析GnRH和Kiss1mRNA的表达量变化。结果显示,与对照组相比,试验组下丘脑GnRH mRNA显著增加(P<0.05),Kiss1 mRNA表达量显著降低(P<0.05);试验组下丘脑视前区(POA)中GnRH阳性细胞数量显著增加(P<0.05),弓状核(ARC)和正中隆起(ME)中GnRH阳性细胞数量增加(P>0.05),但下丘脑ARC,POA,室旁核(PVN)和前腹侧室旁核(AVPV)中Kisspeptin阳性细胞数显著减少(P<0.05);且NKB抑制腺垂体中Kisspeptin的表达(P<0.05),但不影响卵巢中Kisspeptin的表达。综上,NKB通过调节HPOA Kisspeptin和下丘脑GnRH的表达来调控雌性大鼠的生殖。

神经激肽B及其受体在生殖轴中的作用

目前的研究认为Kisspeptin信号系统在调控青春启动及生殖发育方面发挥关键作用。许多哺乳动物有神经激肽B（neurokinin B，NKB）、kisspeptin及雌激素α受体在下丘脑弓状核共表达，它们的作用是对雌激素的负反馈产生应答，调节促性腺激素释放激素的分泌。NKB或其受体基因的失活突变与不伴有嗅觉异常和其他生长发育缺陷的散发性低促性腺素性功能减退症有关，说明NKB及其受体在生殖轴的启动中起着重要作用。

脂肪因子、氨基酸和神经肽调控下丘脑kisspeptin分泌的研究进展

青春期的启动以及生殖功能的维持主要受下丘脑-垂体-性腺(hypothalamic-pituitary-gonadal,HPG)轴的调控。下丘脑促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,Gn RH)神经元脉冲式分泌Gn RH是青春期启动的标志。Kiss1基因编码的kisspeptin是Gn RH神经元重要的上游调控元件,是生殖轴成熟的重要调节因子。下丘脑中影响和调控kisspeptin的因子目前尚未完全清楚。本文将对脂肪因子(脂联素、瘦素)、氨基酸(谷氨酸、γ-氨基丁酸)和神经肽(神经激肽B、强啡肽)如何调控kisspeptin进而影响青春期启动以及生殖功能进行综述。