去整合素Kistrin对兔眼LECs增殖的抑制

目的探讨不同浓度的去整合素Kistrin对兔眼后发性白内障(Posterior capsular opacification,PCO)发生过程中晶状体上皮细胞(lensepithelial cells,LECs)增殖的抑制作用,以明确Kistrin的眼内有效浓度。方法制备兔眼PCO模型,行白内障摘除术,术毕3个实验组前房分别注入40μg/L、80μg/L、160μg/L的Kistrin,对照组前房注入林格氏液。术后在裂隙灯显微镜下观察PCO发生情况及形态,于术后14 d及3个月时取材,分别检测晶状体囊膜上LECs增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果术后第14天实验组LECs的PCNA表达均较对照组降低(P<0.05);第3个月时仅80μg/L组较对照组明显降低(P<0.05);两个时间点80μg/L组LECs的PCNA表达均较其余实验组明显降低(P<0.05),40μg/L组与160μg/L组间无显著性差异(P>0.05)。同一浓度术后第14天与3个月时LECs的PCNA表达比较,仅80μg/L组差异无显著性,余三组比较差异有显著性。结论 80μg/L Kistrin术后早期及3个月均可有效地抑制兔眼PCO的发生,可作为进一步研究去整合素抑制PCO形成研究的较适宜浓度。

去整合素抑制体外培养的人眼晶状体上皮细胞生长的研究

目的:研究去整合素Kistrin对体外培养的人眼晶状体上皮细胞(HLECs)生长的抑制作用。方法:MTT法检测不同浓度去整合素Kistrin(5、10、20、40、80μg/L)对HLECs的黏附抑制作用;划线法检测80μg/L的去整合素Kistrin对HLECs作用不同时间后(24、48、72h)对其移行的抑制作用;MTT法检测不同浓度去整合素Kistrin(20、40、80μg/L)对HLECs增殖的抑制作用。结果:不同浓度的去整合素Kistrin(20、40、80μg/L)对HLECs的黏附和增殖具有抑制作用。80μg/L的去整合素Kistrin可显著抑制HLECs的移行。结论:去整合素Kistrin对体外培养的HLECs的生长具有抑制作用。

去整合素抑制兔晶状体上皮细胞增殖的实验研究

目的探讨去整合素（Kistrin）对兔眼后发性白内障发生过程中晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）增殖的抑制作用。方法雄性新西兰大白兔36只,随机分为对照组：A组,实验组：B、C、D组,每组各9只兔9眼（右眼）。4组均行透明晶状体囊外摘出术,术毕A组兔眼前房注入林格液0.2mL,B、C、D组分别注入40μg.L-1、80μg.L-1和160μg.L-1Kistrin溶液0.2mL。术后第14天采用免疫组织化学法对4组兔后发性白内障发生过程中LEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclearantigen,PCNA）的表达进行检测,计算增殖指数（proliferative index,PI）值,PI=PCNA阳性细胞数/50×100%;通过HE染色及透射电镜观察角膜改变情况。结果（1）术后第14天PI值A组：0.320±0.020、B组：0.175±0.030、C组：0.065±0.020、D组：0.190±0.050,B、C、D组较A组PI值均明显降低（均为P〈0.01）;C组较B、D组PI值均明显降低（均为P〈0.01）,B组与D组PI值比较差异无统计学意义（P〉0.05）;（2）术后第14天赤道部PI值A组：0.390±0.060、B组：0.230±0.040、C组：0.110±0.030、D组：0.240±0.080;中央部PI值A组：0.250±0.050、B组：0.120±0.030、C组：0.060±0.020、D组：0.140±0.040,4组赤道部较中央部PCNA阳性表达均明显升高（均为P〈0.01）。（3）实验组C组与A组比较：角膜内皮细胞超微结构无明显改变。结论40~160μg.L-1的Kistrin灌注液可有效地抑制兔眼后发性白内障的发生;赤道部LEC增殖能力强于中央部;80μg.L-1可作为进一步研究Kistrin抑制后发性白内障形成的较适宜浓度。

去整合素抑制体外培养人晶状体上皮细胞增殖的研究

目的探讨去整合素 Kistrin(disintegrin kistrin)对体外培养的人眼晶状体上皮细胞(human lensepithelial cells,HLECs)增殖的抑制作用。方法对先天性白内障患者术中环行撕前囊膜,进行原代培养并传代,取第二代细胞用于实验。增殖抑制实验:将悬浮的活细胞接种于涂有鼠尾胶原的96孔培养板,16 h 后,去掉旧培养液,换用不同浓度的去整合素(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml)37℃、5%CO_2条件下共同孵育,7d后,MTT 法测定晶状体上皮细胞的数目。结果 20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml 的去整合素对体外培养的晶状体上皮细胞的增殖进行干预后,OD 值分别为0.254±0.008、0.224±0.009,0.202±0.010,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论去整合素可抑制体外培养的人眼晶状体上皮细胞的增殖。(中国眼耳鼻喉科杂志,2006,6:146～148)

整合素-β1在转化生长因子-β2诱导晶状体上皮细胞转化中的作用

目的探讨整合素-β1(integrinβ1)在转化生长因子-β2(TGF-β2)体外诱导晶状体上皮细胞(HLECs)向肌成纤维细胞转化中的作用。方法体外培养的HLECs,选择传3代的细胞进行实验,以TGF-β2作为诱导剂。免疫荧光方法检测HLECs integrinβ1、E-cadherin、α-SMA和F-actin的表达,RT-PCR方法检测E-cadherin和α-SMAmRNA的表达。其中部分细胞预先加入去整合素kistrin孵育1h,再加入TGF-β2刺激细胞48h。结果 TGF-β2处理晶状体上皮细胞后,integrinβ1、α-SMA和F-actin的表达明显增强,细胞E-cadherin表达明显减弱。加入去整合素kistrin后,细胞α-SMA和F-actin的表达明显减弱,细胞E-cadherin表达明显增强。结论 TGF-β2诱导了HLECs转分化,整合素-β1参与了TGF-β2诱导的HLECs向肌成纤维细胞的转化过程。