沿海滩涂甘紫菜Porphyra tenera Kjellm.挥发油成分的稳定性研究

研究了沿海滩涂甘紫菜Porphyra teneraKjellm.的干燥藻体挥发油成分的稳定性。结果表明,高温、极端pH值、金属离子Fe3+、Cu2+以及氧化剂对沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油的稳定性有不同程度的影响。在提取和使用沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油的过程中应避免高温、极端pH值,同时避免与金属离子Fe3+、Cu2+以及氧化剂接触。

沿海滩涂甘紫菜(Porphyra tenera Kjellm.)营养成分分析

[目的]为沿海滩涂甘紫菜的进一步研究与开发应用提供理论依据。[方法]以沿海滩涂甘紫菜为材料,将新鲜藻体晒干、粉碎,作为样品。测定样品中氨基酸、Vc和微量元素含量。[结果]样品中共检测出15种游离氨基酸和16种水解氨基酸,在游离氨基酸中,必需氨基酸占总量的24.35%,水解氨基酸中,必需氨基酸占总量的39.81%;维生素和微量元素种类多、含量高,样品中含Vc 17.2mg/100 g、VE4.08 mg/100 g;微量元素中Na的含量最高,样品中含356.7 mg/100 g,其次是Ca、Mg和K,Pb和Cu的含量远低于指标值。[结论]沿海滩涂甘紫菜中含有丰富的氨基酸、维生素和微量元素,值得进一步研究与开发利用。

沿海滩涂甘紫菜Porphyra tenera Kjellm.色素的抗氧化性研究

[目的]为沿海滩涂甘紫菜的进一步研究与开发应用提供科学依据。[方法]采用乙醇浸提法提取沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素,分别用Fenton反应法和DPPH法测定该色素对羟自由基、DPPH.的清除率,研究其抗氧化性。[结果]当沿海滩涂甘紫菜藻体色素、BHT的浓度为0.10 g/L时,其对羟自由基的清除率分别为57.2%和67.8%。沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素对DPPH.有较明显的清除作用,且其清除作用在0.05-0.80 g/L范围内随浓度的增加而增强。0.10 g/L的BHT对DPPH.的清除率为75.8%。当沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素、BHT的浓度均为0.10 g/L时,色素对羟自由基、DPPH.的清除率分别是BHT的84.4%和86.0%。[结论]沿海滩涂甘紫菜干燥藻体色素具有较强的抗氧化活性。

孔石莼多糖降血脂活性的初步研究

为开发我国的孔石莼资源,在研究了其多糖化学组成的基础上,进行了孔石莼多糖对高脂血症的活性研究。结果表明:3个剂量的多糖样品组均有显著的降甘油三酯作用;中、高剂量组可显著降低血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),升高高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)从而增加HDL-C/TC的比值;高剂量组的降脂活性与阳性对照药烟酸肌醇酯相近;血清中脂蛋白胆固醇的改善状况有明显的剂量依赖性。并对孔石莼多糖降血脂活性的机理进行了讨论。

气相色谱/质谱法分析孔石莼中的脂肪酸

建立了孔石莼脂肪酸的气相色谱/质谱(GC/MS)测定方法。使用Folch法提取了孔石莼中的总脂,经过2mol/LHCl-甲醇溶液的甲酯化处理后,采用GC/MS法对其脂肪酸组成进行了分离分析,同时结合有机质谱学规律,分别对饱和脂肪酸甲酯、单不饱和脂肪酸甲酯和多不饱和脂肪酸甲酯的裂解规律和质谱特征进行了分析归纳。通过质谱数据库检索和标准品对照,鉴定出孔石莼中的24种脂肪酸,其中9,12,15-十八碳三烯酸、4,7,10,13-十六碳四烯酸和6,9,2,15-十八碳四烯酸3种主要多不饱和脂肪酸占总脂肪酸含量的45.14%。通过对孔石莼中脂肪酸的分析,表明特征离子在脂肪酸甲酯尤其是多不饱和脂肪酸甲酯的定性方面具有很好的应用价值。

三种藻类硫酸多糖的提取及其清除自由基活性研究

目的通过对紫莱、海带、羊栖莱3种藻类硫酸多糖进行提取和体外活性检测,以期筛选出具有一定开发潜力的抗氧化剂。方法以稳定自由基(DPPH)等抗氧化检测方法对提取物进行抗氧化活性的测定。结果3种硫酸多糖均有不同程度的抗氧化活性。但它们之间的抗氧化活性大小差异较大,并且用不同溶剂提取的硫酸多糖抗氧化活性也有差异。结论水提的羊栖菜硫酸多糖(SPS)具有较强抗氧化活性。

孔石莼与2种海洋微藻的胞外滤液交叉培养研究

在实验室条件下,采用海洋大型海藻石莼(Ulva pertusaKjellm.)和海洋微藻青岛大扁藻(Platymonas helgolandicaKylin var.tsingtaoensis)、亚历山大藻(Alexandrium tamarense(Lebour)Balech)的滤液做了交叉培养研究,初步探索藻间的克生机制。试验结果表明,不同温度处理下,2种微藻滤液对石莼生长的影响均有显著的差异。不同温度处理的石莼滤液对青岛大扁藻生长的影响差异显著,而对亚历山大藻生长的影响差异不显著。可以推测:石莼对亚历山大藻的抑制作用很可能是通过细胞的直接接触来完成的;而石莼对青岛大扁藻的抑制作用和两种微藻对石莼的抑制作用主要是通过分泌胞外产物(Extracellular products,ECP)来实现的,至于其它的方式和途径有待于进一步研究。

孔石莼多糖的分离分析

研究孔石莼中多糖的提取分离方法,并对多糖进行了灰分、总糖、水解硫酸根含量、特性粘度等测定,以及元素分析、单糖气相色谱分析、氨基酸分析、红外光谱和核磁共振光谱等仪器分析。

孔石莼(Ulva pertusa)中一种抗TMV活性蛋白的纯化及其特性(英文)

采用硫酸铵盐析和阳离子交换柱层析(CM—Sepharose Fast Flow)，从孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)藻体中分离纯化得到1个蛋白，命名为UPCM40。经SDS—PAGE确定其分子量约为36kD，Native—PAGE可知其为单一组分；该蛋白不含糖；其全波长扫描结果显示，该蛋白在190～220nm和250～300nm处有特征吸收峰，在250～300nm范围中的最大吸收峰在270～275nm处。经测定发现该蛋白具较好的抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)的活性，当蛋白质浓度为50μg/mL时，对TMV的抑制效果为：在枯斑寄主心叶烟上的侵染抑制率达85．6％，在苋色藜上为90．2％。测定该蛋白对6种供试真菌的抑制效果发现，对镰刀菌(Fusarium oxysporum f．sp．cucumerinum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和香蕉炭疽菌(Gloeosporium musarum)均有一定程度的抑菌作用，但抑制活性很低。

孔石莼外植体再生及发育途径的研究

将孔石莼 (UlvapertusaKjellm)野生种和“不育株”突变体的叶状体切成1cm2 以下大小不同的片段培养 ,发现再生情况和外植体大小存在密切关系。在5mm×5mm以下的片段中 ,90%以上的细胞都出现了再生 ,表现为3种发育途径 :形成球形的原生质体 ,经丝状体而成叶状体 ;产生游动细胞 ,也经过丝状体而成叶状体 ;细胞原位分裂 ,形成球状体或管状体 ,呈现礁膜属和浒苔属的特征。5mm×5mm～10mm×10mm的片段 ,除边缘的1～2层中有极少量细胞形成游动细胞和球形原生质体外 ,其它细胞没有变化。将由片段再生形成的小叶状体采到紫菜苗网上 ,经过一年的海区养殖 。

孔石莼营养成份的研究

对辽宁沿海生长的绿藻——孔石莼的营养成份进行了研究。孔石莼干粉含蛋白质6.03％、粗脂肪3.12％、总糖38.88％、水分12.27％、灰分39.7％,根据气相色谱测得孔石莼多糖是由鼠李糖、葡萄糖、木糖、三碳糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖组成。同时还含有钙、镁、锌、硒等无机元素。实验结果表明:孔石莼可开发研制成有营养价值的功能食品。

UV-B辐射增强对海洋大型藻与微型藻种群生长关系的影响

选用孔石莼和青岛大扁藻为海洋大型藻和微型藻的代表,通过室内添加模拟试验研究了UV-B辐射增强对孔石莼(重量固定)与青岛大扁藻(密度不同)种群生长关系的影响。结果表明:(1)在单养情况下,4个UV-B辐射剂量都对孔石莼的生长产生抑制作用;对青岛大扁藻生长的影响却不同,低剂量(U-1)的UV-B辐射对青岛大扁藻的生长有促进作用,而高剂量的UV-B辐射则有显著的抑制作用;且因初始接种密度不同而各异。(2)在共养情况下,微藻对孔石莼的生长表现出一定的抑制作用,随着微藻初始接种密度的增加,其抑制作用亦增加;反之,在共培养的初始阶段(6 d内)孔石莼对微藻的生长也有抑制作用,但后期阶段(9 d后)表现出促进作用。(3)在共培养的同时附加UV-B辐射处理,随着初始接种密度的增加,青岛大扁藻对孔石莼生长的抑制作用更加明显;同时,与共养相比较,孔石莼对微藻生长的抑制作用亦趋于明显。

尿素包合法纯化孔石莼不饱和脂肪酸

用Folch法提取孔石莼总脂,经皂化后酸化制得脂肪酸,再对脂肪酸进行尿素包合,使其中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸分离,从而提高不饱和脂肪酸的含量。在脂肪酸:尿素:无水乙醇比为1:2:20,温度为4℃,包合12h的条件下进行尿素包合结晶,效果较好,不饱和脂肪酸含量由72·43%增加到96·91%,其中十六碳四烯酸由13·63%增加到22·92%,增加68·16%,十八碳四烯酸由20·99%增加到38·82%,增加84·95%。

孔石莼多糖及其磺化衍生物HU体外结合脂类和胆固醇的研究

目的研究孔石莼多糖及其磺化孔石莼多糖HU在体外结合脂类和胆固醇的能力,并进一步阐明其可能作用的机制。方法在体外模拟人体消化环境,测定孔石莼多糖U及磺化孔石莼多糖HU对脂肪、胆固醇和胆酸盐的结合能力。结果孔石莼多糖进行磺化后显著增强了它对胆固醇和胆盐的结合能力,但相对减弱了它对脂肪的结合能力。结论孔石莼多糖及其磺化衍生物在体外对脂类和胆固醇具有很强的结合能力,孔石莼多糖中硫酸基的含量是影响其吸收脂类和胆固醇的重要因素。

影响辐射小鼠肝脏SOD及MDA活性的孔石莼多糖研究

目的:了解不同相对分子量段孔石莼多糖对因辐射导致小鼠肝脏SOD及MDA活性含量改变的影响。方法:将通过膜分离纯化得到的三种不同相对分子量段的孔石莼多糖(≧100ku、30～100ku及≦30ku)分别给相应设置的三个实验组小鼠进行灌服,另设辐照对照组和空白对照组;辐照后制备各组动物的肝脏组织匀浆,对其SOD和MDA活性进行测定,并对其结果进行比较。结果:孔石莼多糖对辐射降低SOD活性及提高MDA活性均有一定的抑制作用,其中30～100ku和≦30ku两种相对分子量的孔石莼多糖的抑制作用最为显著,具有显著性差异(P<0.01)。结论:相对分子量低的孔石莼多糖对辐射引起小鼠肝脏组织氧化损伤具有一定的抑制作用,由此推断相对较低的分子量段孔石莼多糖具有一定的抗辐射抗氧化作用。

孔石莼多糖对糖尿病小鼠抗氧化能力的影响

目的:研究孔石莼多糖抗氧化活性。方法:采用传统的水提醇沉法提取孔石莼多糖,以四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠为模型,分为孔石莼多糖低、高剂量组、阳性对照组、模型组及正常组。分别以不同剂量孔石莼多糖(250mg/kg、1000mg/kg)、二甲双胍(1000mg/kg)和蒸馏水灌胃,28d后测定小鼠肝脏和肾脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量。结果:高剂量孔石莼多糖能显著提高糖尿病小鼠肝脏和肾脏组织中SOD、GSH-Px和CAT的活性,降低MDA含量。结论:孔石莼多糖具有显著的抗氧化作用。

赤潮异弯藻对孔石莼生长及其某些生理特性的影响

通过实验生态学和生物化学的方法,研究了赤潮异弯藻[Heterosigma akashiwo(Hada)Hada]对孔石莼(Ulva pertusa Kjellman)生长及其叶绿素a(Chl-a)含量、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化酶(GPX)活力的影响。结果表明:孔石莼的克生作用会明显抑制赤潮异弯藻的生长,同时赤潮异弯藻也会抑制孔石莼的生长,且孔石莼生理生化特性对其有明显的响应。赤潮异弯藻会使孔石莼CAT活力和MDA含量呈现升高的趋势;GPX活力呈现下降的趋势;T-AOC和T-SOD活力呈现先下降后升高趋势;Chl-a含量并无明显变化。推测赤潮异弯藻克生作用诱导孔石莼产生活性氧自由基,是藻体受损伤的主要原因。

紫菜中微量铁的分光光度直接测定

在表面活性剂存在下,pH5.00的HAC-NH4AC缓冲溶液中,铁与铁试剂(7 -碘-8 -羟基喹啉-5 -磺酸)产生灵敏的显色反应,络合物的最大吸收波长为610 nm且其他金属离子不干扰反应.据此建立了分光光度法直接测定紫菜中铁含量的方法,Fe3 +含量在0.02 ～3μg/mL范围内遵守Beer定律,测得福建晋江海域每克干紫菜中铁含量为641.13μg,相对标准偏差(RSD)1.41%,回收率97.5% ～104.5%.

沿海滩涂甘紫菜挥发油成分分析及抗菌活性研究

[目的]研究沿海滩涂甘紫菜的挥发油成分及抗菌活性。[方法]用水蒸气蒸馏法提取沿海滩涂甘紫菜干燥藻体的挥发性成分,用气相色谱-质谱联用仪对其进行分析,结合计算机检索技术,对化学成分进行分离鉴定,应用气相色谱峰面积归一化法测定各成分的相对含量。[结果]从沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油中分离出43种成分,鉴定出28种,鉴定率为65.12%。主要成分是对甲氧基肉桂酸乙酯,含量为40.96%;其次是肉桂酸乙酯,含量为23.68%。抗菌活性研究表明,沿海滩涂甘紫菜的干燥藻体挥发油对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用,对枯草杆菌和大肠杆菌无抑制作用。[结论]该研究为沿海滩涂甘紫菜的进一步研究与开发应用提供了科学依据。

IDENTIFICATION OF CYTOKININ IN A GREEN ALGAE EXTRACT

Jsopentenyladenosine (i6 Ado) was identified, and trans-zeatin (trans-Z) and trans -zeatin riboside (trans-ZR) were detected by high pressure liquid chromatography (HPLC) but not verified with chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis of cytokinin from the extracts of green algae (Ulva pertusa (Kjellm), Enteromopha compressa and Monostroma sp.). This indicated that the green algae mixture contained cytokinin - like substances.