维生素C和E对Klebsiella pneumoniae合成1,3-丙二醇的调控

通过外源添加还原剂的方式调控细胞内NADH/NAD再生系统的状态,研究了40～150 mg/LVC及20～100mg/LVE对Klebsiella penumoniae合成1,3-丙二醇的影响,发现外源添加150 mg/L VC或30 mg/L VE均可使1,3-PD合成浓度提高20%～30%;但同时也提高了某些副产物的合成浓度,对代谢流分布的调控作用不明显;1,3-丙二醇得率稍有提高但不显著.提高1,3-pD得率宜从代谢节点(丙酮酸)通量调节方面考虑.

高产乙醇肺炎克雷伯adhE缺失菌株构建及对其产乙醇能力的影响

目的探究基因adhE缺失对高产乙醇肺炎克雷伯菌株生长能力,乙醇脱氢酶活性及产乙醇能力的影响。方法以高产乙醇肺炎克雷伯菌株TH1为背景,利用温敏型质粒介导的同源重组技术构建基因adhE的缺失菌株。通过PCR扩增获取基因adhE片段并构建于pGEM-Teasy表达载体获得回补质粒,导入ΔadhE缺失菌株得到回补菌株,并将pGEM-Teasy空质粒导入高产乙醇肺炎克雷伯野生菌株及ΔadhE缺失菌株作为空载对照。在液体LB培养基中测定各菌株的生长曲线,使用试剂盒检测各菌株的乙醇脱氢酶活性并通过顶空法检测各菌株的乙醇产量。结果使用PCR技术明确ΔadhE缺失菌株与相关回补菌株构建成功。基因adhE缺失后,厌氧条件下高产乙醇肺炎克雷伯菌株的生长速度显著降低,而回补菌株的生长速度显著升高(P<0.05)。同时,相比于野生型菌株,ΔadhE缺失菌株的乙醇脱氢酶活性与乙醇产量显著降低,而回补菌株的乙醇脱氢酶活性与乙醇产量恢复到了野生型菌株的水平(P<0.05)。结论基因adhE的缺失减缓了高产乙醇肺炎克雷伯菌株厌氧条件下的生长速度,同时显著降低了高产乙醇肺炎克雷伯菌株的产乙醇能力。

治疗肾萎缩合并多部位耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染分析

目的分析肾萎缩合并多部位耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的治疗,为此类疾病的临床合理用药提供参考。方法临床药师结合实践经验,参考最新文献,参与1例肾萎缩合并多部位耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的治疗,提出调整美罗培南用法用量、联用多粘菌素E、及时降阶梯治疗等建议。结果医师采纳建议调整治疗方案后,患者的症状和感染指标恢复正常,感染得到有效控制。结论多粘菌素E甲磺酸钠与大剂量美罗培南协同治疗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌引起的尿路感染及血流感染具有较好的临床疗效。

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性的探讨

目的 探讨临床患者分离出来的肺炎克雷伯菌对 11种抗菌药物的耐药性。方法 按照美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)推荐的方法与规则 ,采用浓度梯度法 (E test)测定并比较亚胺培南等 11种抗菌药物对肺炎克雷伯菌的体外抗菌活性。结果 除亚胺培南对产ESBLs和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率均为零外 ,产ESBLs的肺炎克雷伯菌的耐药率显著高于非产ESBLs的肺炎克雷伯菌。结论 临床实验室应将ESBLs作为常规检测项目 ;在治疗包括肺炎克雷伯菌在内的革兰阴性菌严重感染中 ,最敏感的抗菌药物是碳青酶烯类 ,如亚胺培南 ,其次为头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶检测及药敏分析

目的统计分析肠杆菌科中的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱＇李云。－内酰胺酶（ESBLs）检出率和药敏情况，为临床提供合理使用抗生素用药依据。方法本文收集笔者所在医院2006年1月－2009年9月门诊和住院患者各种临床标本检出的大肠埃希菌200例，肺炎克雷伯菌99例，统计分析产ESBLs阳性率及药敏试验。结果产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的阳性检出率分别为69．5％和48．5％，其药敏：对阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦的敏感率分别为：84．9％和89．6％、84．O％和75．0％、66．2％和79．2％。结论产ESBLs菌的检测，对指导临床用药有重要的意义。

2006～2008年产超广谱β-内酰胺酶菌株的分离及药敏变化分析

目的了解2006～2008年临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的分离及药敏变化情况,供临床参考。方法采用Microscan WalkAway全自动细菌分析仪进行分析与药敏试验,用K-B纸片药敏法和ESBLs检测条做补充,得到结果进行统计分析。结果这三年大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌产ESBLs菌株的检出率分别平均是53.2%和45.5%三年内变化不明显(P>0.05),大肠埃希氏菌对阿米卡星敏感率由84.3%上升到89.6%,对特治星由83.2%上升到89.5%,对头孢他啶由74.2%上升至77.3%。阿莫西林/克拉维酸由84.9%降到69.8%,敏感率最低是氨苄西林和哌拉西林,敏感率15.6%以下,其次是环丙沙星和复方新诺明,敏感率32.2%以下,其他抗生素如头孢曲松、庆大霉素等11种这三年来变化不大(P>0.05)。肺炎克雷伯菌对阿莫西林/克拉维酸敏感率由80.1%降到69.5%,对阿林卡星由80.1%上升到85.5%,特治星由76.2%上升到84.8%,敏感率最低是氨苄西林3.6%以下,其他如头孢类,庆大霉素等14种抗生素敏感率不高,相对也较平稳(P>0.05),大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌对亚胺培南培已出现不敏感菌株。结论大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌产ESBLs菌株的检出率高,对各种抗生素呈多重耐药,应加强抗生素使用管理,合理用药。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药基因检测及其同源性分析

目的:研究六安市人民医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药基因及同源性。方法:收集2018年4-6月分离自临床标本的肺炎克雷伯菌40株,用法国梅里埃VITEK 2 COMPACT全自动细菌鉴定药敏仪进行鉴定和药敏。采用改良Hodge试验(MHT)和改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)对40株菌进行碳青霉烯酶表型的筛选,采用PCR方法检测其是否携带已知的主要碳青霉烯耐药基因KPC、OXA-48、NDM-1。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对其进行同源性分析。结果:40株CRKP多分离自ICU病房(占55%),以呼吸道来源标本为主(占80%),对常用抗生素头孢菌素类、氨基糖苷类以及大环内酯类的耐药率均在80.0%以上。MHT和mCIM试验中有33株菌二者均为阳性,2株菌均为阴性,剩下5株MHT试验阳性而mCIM试验结果为阴性。32株菌携带KPC基因,未检出OXA-48及NDM-1基因。同源性分析结果显示40株CRKP分为7个型别,其中A型34株(占85%),B、C、D、E、F及G型各1株(各占2.5%)。结论:分离的CRKP以携带KPC-2基因为主,共有7个型别,以A型为主,为有效治疗和预防CRKP感染提供了参考依据。

两种常见产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及临床应用

目的:筛选检测肺炎克雷伯氏菌及大肠杆菌的超广谱的β-内酰胺酶(ESBLs)的敏感方法,并探讨肺炎克雷伯氏菌及大肠杆菌产ESBLs的情况与耐药的关系,为临床合理使用抗生素提供实验依据。方法:临床分离的78份菌株分别用4种方法进行ESBLs及耐药性的检测,比较其检出率及差异性。结果:单纸片加克拉维酸扩散法敏感性最好。肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌产ESBLs的阳性率在我院明显高出许多文献报道。结论:在仪器自动鉴定时,若ESBLs阳性的标本,应采取纸片法重新检测。我院肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌产ESBLs的阳性率应引起医务人员的重视,临床应加强监测,依据药敏情况合理选用抗生素。

宁波地区临床分离CRKP中mcr基因分布及常用黏菌素敏感差异性分析

目的了解宁波地区医院临床分离CRKP中mcr基因分布,以及黏菌素耐药情况,为临床治疗和医院感染控制提供依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增和琼脂糖凝胶电泳的方法,对2019年7月—2022年6月宁波地区多中心医院临床分离CRKP分别进行mcr-1、mcr-2、mcr-3、mcr-4和mcr-5基因筛查;检测CRKP对临床常见抗菌药物的耐药率;采用微量肉汤稀释法进行黏菌素(硫酸多黏菌素B和硫酸多黏菌素E)的敏感性检测。结果150株CRKP中mcr-1阳性菌株共有1株,阳性率为0.68%,未检出mcr-2、mcr-3、mcr-4和mcr-5基因;CRKP对临床常见抗菌药物的耐药性较高,极少数具有敏感性;150株CRKP对硫酸多黏菌素B和硫酸多黏菌素E的敏感率分别为97.3%和96.7%,无明显差异,其中MIC_(50)分别为1μg/ml和0.5μg/ml,MIC_(90)均为1μg/ml;mcr-1阳性菌株对硫酸多黏菌素B和硫酸多黏菌素E均耐药。结论宁波地区CRKP对临床常规抗菌药物敏感性较低,对2种黏菌素敏感性均较高,其中mcr基因分布率较低,但携带mcr-1基因菌株表现为黏菌素耐药。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦敏感性及不同检测方法差异性研究

目的 了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对头孢他啶/阿维巴坦敏感性以及不同方法检测存在的差异,为实验室药敏检测和临床抗菌药物的使用提供依据。方法 选择2019年—2021年临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌150株,分别采用微量肉汤稀释法、E-test法和纸片(K-B)法检测头孢他啶/阿维巴坦体外的敏感性,分析3种药敏检测方法所存在的差异。结果 微量肉汤稀释法和E-test法检测CRKP对头孢他啶/阿维巴坦的敏感率分别为68.0%和67.3%;E-test法检测的MIC值高于标准方法,差异有统计学意义(P<0.01);E-test法和K-B法的方法学误差分析均在标准范围内;以微量肉汤稀释法为参考标准,K-B法测得头孢他啶/阿维巴坦抑菌圈为20 mm的MIC值为4.00μg/ml, CA值为0.0%,低于标准参考值;K-B法抑菌圈直径KB值与微量肉汤稀释法MIC值之间方差分析,KB值与MIC值存在线性关系,回归方程为y=-21x+496.62,r2=0.617,P<0.01。结论 本地区CRKP菌株对于头孢他啶/阿维巴坦具有较高的敏感性,E-test相对参考方法具有较高的一致性和准确性,适合在临床实验室推广。

3种肠杆菌科细菌的耐药性变迁

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌的耐药性变迁。方法对2007～2009年临床分离的大肠埃希菌(645株)、肺炎克雷伯菌(260株)和阴沟肠杆菌(150株),采用纸片扩散法进行体外药敏测定,并依据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)规定的标准,分析3种肠杆菌科细菌的耐药性变迁。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌对氨苄西林的耐药率均较高;对头孢他啶的耐药率低于头孢噻肟;与2007年比较,2008年和2009年对头孢吡肟的耐药率明显增长;未发现对亚胺培南耐药菌株的产生。结论细菌耐药性不断增强已成为临床治疗面临的重要难题,应从耐药监测、医院感染控制、合理使用抗生素等多方面努力,减少细菌耐药性的产生。