胆型螺旋杆菌(Helicobacter bilis)的分离、鉴定与序列分析

鉴定分离到的微需氧菌为螺旋杆菌 ,并对该菌进行分型。小鼠皮下或肌肉注射地塞米松使其免疫抑制 ,取小鼠肠内容物培养 ,对分离到的细菌 ,经油镜、电镜观察。然后提取细菌DNA ,用根据螺旋杆菌 (Helicobactersp .)rRNA保守区设计的引物P7 P8进行扩增 ,并对扩增产物分别用MboI、HhaI、XspI内切酶酶切 ,酶切产物用 1 0 %PAGE分析。再用根据螺旋杆菌胆型 (H .bilis)rRNA设计特异引物P7 Pb扩增 ,将扩增产物测序分析。最后 ,将该细菌在Scid小鼠上作动物感染。细菌在油镜下呈鸟翼状 ,电镜下观察到双极鞭毛 ,无周质纤毛。引物P7 P8扩增出 374bp的特异带 ,此片段能分别被MboI、HhaI、Xsp内切酶酶切。引物P7 Pb扩增出364bp的条带 ,测得的DNA序列中存在MboI、HhaI、XspI的内切位点 ,与文献中H .bilis序列比较 ,同源性为 97 5 %。动物感染试验符合Koch准则。

Koch氏准则的胆固醇新说

Koch提出了判断微生物致病的3条准则。动脉粥样硬化的病因也可根据类似的构想而确定胆固醇所引起的致病机制。