抗KOD聚合酶单克隆抗体的制备(英文)

单克隆抗体具有高度的均一性和专一性。抗KOD聚合酶单克隆抗体，可以特异性结合于KOD聚合酶，抑制PCR反应前常温状态下的多聚酶活性，显著提高PCR反应的特异性。为了提高KOD聚合酶PCR反应的特异性，以KOD聚合酶为抗原，制备了两株抗KOD聚合酶的单克隆抗体。以大肠杆菌表达的重组蛋白KOD聚合酶为抗原免疫BALB／c小鼠，然后将免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择培养、ELISA检测和有限稀释法克隆，建立了2株能稳定分泌抗KOD聚合酶单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1F5与3G6，对应的抗体亚型分别是IgGl和IgG2a。染色体计数结果分别是85～90和83～86。1F5与3G6的细胞上清和腹水的ELISA效价分别为1：2^8，1：2^9和1：2^11，1：2^11。间接免疫荧光证实制备的单克隆抗体的特异性良好。该结果为进一步建立高特异性的PCR方法奠定了良好的基础。

基于KOD能量特征的群体异常行为识别

在群体异常行为识别过程中,针对传统特征易受目标遮挡影响导致其对群体行为的弱描述性问题,提出一种基于KOD(kinetic orientation distance)能量特征的群体异常行为识别方法。该能量特征忽略群体中相互遮挡的个体的局部特征,从群体行为整体上分别根据群体的运动剧烈程度、群体运动方向一致性和群体中个体的相对位置定义并提取群体动能、方向势能和距离势能构成群体行为高层KOD能量特征,以此描述群体的运动状态变化,最后通过构建隐马尔可夫模型实现群体异常行为检测及类型识别。在PETS和UMN公共数据集上进行实验并与传统光流特征进行对比,实验结果表明,使用KOD能量特征能够有效地检测出群体异常行为并识别出其类型,且能够达到92%的准确率。

Kod DNA聚合酶的制备及纯化研究

Kod DNA聚合酶作为常见的高保真DNA聚合酶,具有较强的DNA延伸能力以及3'-5'外切核酸酶校正活性。本研究通过对重组Kod DNA聚合酶分离纯化条件的优化,以期提高其表达和纯化效率以及片段扩增能力。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)对pET-30a-Kod进行诱导表达后,利用酶溶法和超声波破碎法对细胞破碎并提取粗酶液,然后利用Ni-NTA柱洗脱纯化获得较纯Kod DNA酶,再经透析得到高纯度Kod DNA酶,利用PCR反应和Sanger测序手段来检测自提纯化的Kod DNA聚合酶活性及保真性。同时,本研究对IPTG浓度和洗脱液中咪唑浓度等重要参数进行优化。结果表明,在28℃条件下0.1 mmol/L IPTG诱导16-18 h后,Kod DNA聚合酶高效表达;当咪唑浓度为200 mmol/L时蛋白洗脱效果最佳。PCR反应体系中Mg^(2+)浓度为1.5 mmol/L,Kod DNA聚合酶浓度为0.06125μg/μL时,Kod DNA聚合酶效率较高,能有效地扩增3194 bp的目的条带;通过序列比对,PCR产物序列中未引入任何突变。经优化制备后的Kod DNA聚合酶在酶活性和扩增保真性上均能达到商用高保真DNA聚合酶水平。本研究为节省实验室PCR成本,进一步开发和利用Kod DNA聚合酶奠定一定的基础。

暴风雪下的卡利姆多城管 wNv.THOOO VS KoD.MiNiMum

对战双方:wNv.THOOO VS koD.MiNiMuM APM:Human(220) Orc(154)比赛时间:31分01秒比赛版本:1.22比赛地图:Melting Valley常客据官方权威统计,《电子竞技》杂志魔兽战报中曝光度最高选手已经不再是那个把开矿当饭吃的韩国暗夜。

Lifestyle

Keep On Dancing （KOD） is the largest world-wide hip-hop event in Asia, and regarded as one of the three biggest international hip-hop dance events around the world together with BOTY in Germany and UK-BBOY. One of the highlights of KOD was that all the referees invited were among the best hip-hop dancers and masters, including Link, the choreographer of Michael Jackson, and Pete, the choreographer of Black Eyed Peas, and the members from the renowned EB group.

苗药课币有水溶性黄酮的纯化

目的:优选聚酰胺树脂纯化课币有(kod bit vud)中水溶性黄酮的工艺条件。方法:采用紫外分光光度法,以芹菜素含量为考察指标,研究聚酰胺树脂在动态条件下,树脂吸附和洗脱水溶性黄酮的行为,并筛选出纯化课币有(kod bit vud)水溶性黄酮的最优工艺参数。结果:采用二次上样的方法,上样原液共9个柱体积,以60%乙醇溶液洗脱5个柱体积,课币有(kod bit vud)水溶性黄酮,纯度从0.54%提高到18.86%,纯度提高了34倍。结论:经过聚酰胺树脂纯化,课币有(kod bit vud)水溶性黄酮得到了明显提高,这为进一步开展其药理活性研究积累了一定基础。

Box-Behnken响应面法优化苗药课币有水溶性黄酮提取工艺

【目的】为苗药课币有的质量控制和药理作用研究提供参考。【方法】以黄酮提取量为指标,对苗药课币有水溶性黄酮提取溶剂(蒸馏水及浓度10%、20%、30%、40%、50%的乙醇)、固液比(g︰mL)(1︰8、1︰12、1︰16、1︰20、1︰24)、提取温度(10℃、30℃、50℃、70℃、90℃)、提取时间(10 min、30 min、50 min、70 min、90 min)进行考察,在此基础上结合Box-Behnken响应面法优化苗药课币有水溶性黄酮提取工艺。【结果】苗药课币有水溶性黄酮提取最佳工艺:以蒸馏水为提取溶剂,固液比(g︰mL)1︰20,提取时间90 min,提取2次,提取温度45℃。【结论】在最佳提取工艺下,课币有黄酮提取量平均为1.33 mg/g,与预测值(1.34 mg/g)接近。优化后的提取方法工艺稳定、可行,可为黄酮类成分进一步研究提供基础。

大神齐聚 燃爆金陵 体育舞蹈Breaking系列报道

6月20日至23日,万众瞩目的2019 WDSF世界街舞锦标赛、2019 CDSF街舞世界杯即将在南京·溧水拉开帷幕.Battle、Showcase、Party应有尽有.大神齐聚,燃爆金陵.上个月我们公开了WDSF世界街舞锦标赛Breaking裁判阵容:Bojin、Renegade、Ken Swift、Danny、Katsu One、Yan The Shrimp、Glacial、Kim、Movie One、Hurricane、Freeze、Skim。12位顶级舞者组成的国际专业裁判组让人直呼'太恐怖'.但听说还有人觉得不够炸?认为国内大神太少?一起来看看2019CDSF街舞世界杯裁判、MC、DJ名单。

杂货装点小日子

听同事多次说到街道口新世界百货旁的一家杂货店，他每天坐车回家经过，看到小店亮着的橘黄灯光，都很想进去一探究竟。