珠子参抗癌成分及其作用机制

珠子参为《中华人民共和国药典》新收载品种,含有多种抗癌的活性成分,具有很好的抗肿瘤作用,其抗癌成分主要有珠子参皂苷、珠子参多糖、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa、竹节参皂苷Ⅳa甲酯、齐墩果酸、人参皂苷RO、竹节参皂苷Ⅳa、人参皂苷Rf、金盏花苷E、太白楤木皂苷Ⅳ、太白楤木皂苷Ⅰ、panajaponol、齐墩果酸3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-6'-O-正丁基酯]等,抗癌谱主要为肝癌、胃癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、肺癌、脑胶质瘤、宫颈癌等恶性肿瘤,其抗肿瘤的作用机制包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、干扰肿瘤细胞周期、提高机体免疫功能、抑制肿瘤血管生成、抗肿瘤转移等。

珠子参历史沿革及民族习用考证

珠子参是西南地区民族常用药,亦是珍稀濒危药材。历代本草对珠子参的记载较为简略,且存在同名异物的现象,易造成市场混乱。通过对古代本草及现代书籍梳理,对珠子参名称、产地、基原、炮制加工及功效等进行考证。结果发现,珠子参别名多以形态及产地命名,现多分布于我国西南地区,珠子参有两个来源,且二者在《中华人民共和国药典》2020版等大部分药材标准中均作为竹节参的变种处理,产地加工及炮制方法在各地炮制规范中差异不明显,珠子参以补血活血、补气以及清热止痛的功效较为突出。

UPLC指纹图谱与一测多评法结合化学模式识别分析的扣子七质量控制研究

目的建立扣子七的超高效液相(ultra high performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱,同时建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)对8个化学成分进行含量测定,并结合化学模式识别分析对扣子七进行质量评价。方法采用Waters CORTECS UPLC T3色谱柱,以0.1%磷酸水-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,流速0.3 mL·min^(-1),建立扣子七UPLC指纹图谱,进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析,并以竹节参皂苷Ⅳa为内标,建立人参皂苷Rb1、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb3、竹节参皂苷Ⅳ、人参皂苷Rd、姜状三七皂苷R1和金盏花苷E的相对校正因子,计算8种成分的含量,并与外标法测定结果进行比较,以验证QAMS方法的准确性、重复性及可行性。结果14批指纹图谱共确定12个共有峰,指认人参皂苷Rb1、人参皂苷Ro、人参皂苷Rb3、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa、人参皂苷Rd、姜状三七皂苷R1和金盏花苷E 8种主要特征成分。14批样品图谱的相似度在0.793~0.993之间,聚类分析可将14批样品分为4类,主成分分析得到4个主成分,累计方差贡献率为83.20%,正交偏最小二乘法-判别分析筛选出5个差异质量标志物。QAMS法计算值与外标法实测值无统计学差异。结论该研究建立的扣子七UPLC指纹图谱结合一测多评法简便可行,结合化学模式识别可有效为扣子七药材整体质量控制提供参考。

Effects of Polysaccharides Extracted from Zhu Zi Shen(Rhizoma Panacis Majoris) on Oxidative Stress and Hemodynamics in Rats with Adriamycin-induced Chronic Heart Failure

Objective:To probe into the intervening action of polysaccharides of Zhu Zi Shen(Rhizoma Panacis Majoris)(PZZS) on oxidative stress and hemodynamics in rats with adriamycin-induced chronic congestive heart failure(CHF).Methods:After SD rats were successfully modeled with adriamycin,they were randomly divided into a normal control group,a model group,a PZZS group,and a captopril group,and were administrated respectively.At the end of experiment,the hemodynamic function,whole heart weight index,and the blood CK,SOD,MDA,NO,NOS were detected;and the myocardial morphological examinations were carried out.Results:Compared with the normal control group,the arterial systolic pressure(SBP),diastolic pressure(DBP),mean arterial pressure(MAP),heart rate(HR),left ventricular systolic peak(LVSP),and left ventricular pressure change rate(dp/dtmax) significantly decreased,and left ventricular end diastolic pressure(LVEDP),whole heart weight index,the blood CK,MDA,NO,NOS significantly increased in the model group.PZZS significantly improved the hemodynamic function,lowered the MDA and NO levels,and decreased the CK and NOS activities in the CHF rats.Conclusion:PZZS can improve the hemodynamic function,and alleviate the oxidative stress reaction in the CHF rat.

珠子参水提物抗炎镇痛作用的实验研究

目的观察珠子参水提物的抗炎、镇痛作用。方法将250只小鼠采用完全随机设计分组法分成5组:空白对照组,阿司匹林组及珠子参水提物低、中、高剂量组,每组50只。分别进行抗炎和镇痛系列实验共5种,每种实验各组取10只小鼠。其中珠子参水提物组分别给予珠子参水提物低(2.50g/kg)、中(5.00g/kg)、高剂量(10.00g/kg)灌胃,阿司匹林组给予阿司匹林(0.20g/kg)灌胃,空白对照组给予相同体积蒸馏水灌胃,均每天1次,连续给药7d。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、角叉菜胶致小鼠足跖肿胀法和小鼠棉球肉芽肿法观察珠子参水提物的抗炎作用,采用醋酸扭体法和热板法观察其镇痛作用。结果与空白对照组比较,珠子参水提物低、中、高剂量组均可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度,抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿;可延缓醋酸所致小鼠扭体的出现时间,减少扭体反应次数,提高热板所致小鼠痛阈值(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参水提物具有明显的抗炎镇痛作用。

土壤因子对珠子参药材质量的影响研究

目的:研究土壤因子对珠子参药材质量的影响,筛选影响珠子参药材质量的土壤主导因子。方法:测定不同产地珠子参皂苷类有效成分含量,以及相应生长地土壤养分和重金属元素含量,运用相关性分析和逐步回归分析等统计方法分析土壤因子对珠子参药材质量的影响。结果:不同采集地珠子参的人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa含量均存在差异,对应的土壤养分和重金属矿质元素含量也存在差异。珠子参人参皂苷Ro含量与其生长土壤p H值呈显著正相关(P<0.05)、与速效N呈极显著负相关(P<0.01);竹节参皂苷Ⅳa含量与其生长土壤p H值呈极显著正相关(P<0.01)、与速效N呈显著负相关(P<0.05)、与矿质重金属元素Cu呈显著正相关(P<0.05)。结论:土壤因子是影响珠子参药材质量的重要因素,土壤p H值和速效N含量可能是影响珠子参药材质量土壤主导因子。

珠子参水提物预处理对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的研究珠子参水提物预处理对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法雄性5周龄昆明小鼠170只,采用完全随机设计分组法分为6组:假手术组(n=20)、模型组(n=30)、尼莫地平组(2 mg/kg,n=30)和珠子参水提物低、中、高剂量组(2.5、5.0、10.0 g/kg,n=30)。除假手术组和模型组灌胃给予蒸馏水20 ml/kg外,其余各组灌胃给予相应剂量的药物。以上各组给药7 d后制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,假手术组切开缝合不进行动脉阻塞,在缺血2 h再灌注24 h后进行行为学检测,记录各组小鼠存活率。取大脑并用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色后测定梗死面积和脑含水量;制作脑匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XOD)酶活性和丙二醛(MDA)含量。结果珠子参水提物中、高剂量组的成活率分别为77.8%(21/27)和82.1%(23/28),与模型组[51.9%(14/27)]比较具有统计学差异(P<0.05);珠子参水提物高剂量组的神经症状评分(1.77±0.38)、斜板角度(63.6±5.5)°优于模型组[神经症状评分(2.21±0.43),斜板角度(55.1±7.5)°](P<0.05,P<0.01),与尼莫地平效果接近;与模型组比较,珠子参水提物中、高剂量组能显著降低脑梗死面积和脑含水量(P<0.05,P<0.01),并能明显增加SOD、GSH-PX、CAT酶活性(P<0.01),降低XOD酶活性和MDA含量(P<0.01);高剂量组在改善GSH-PX、SOD和CAT酶及XOD酶活性方面优于尼莫地平组。结论珠子参水提物预处理对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

珠子参总皂苷通过促进Nrf2转位拮抗新生大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制。方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200μg/ml)孵育24 h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响。结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500μmol/L),珠子参总皂苷(100、200μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参总皂苷抑制心肌细胞氧化应激损伤,与Nrf2抗氧化途径的激活和清除ROS有关。

竹节参与珠子参质量比较研究

目的研究建立珠子参和竹节参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定方法,并比较二者化学成分的差别。方法采用薄层色谱法进行珠子参和竹节参鉴别,高效液相色谱法测定二者竹节参皂苷Ⅳa的含量。结果二者在主要化学成分含量和种类上存在一定区别,珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量在2.42%~4.99%之间,而竹节参中竹节参皂苷Ⅳa含量3.09%。结论珠子参和竹节参化学成分存在一定差异。

珠子参水提物对小鼠耳廓微循环的影响

目的:观察珠子参水提物对耳廓微循环的影响。方法:采用耳廓微循环观察法检测珠子参水提物对正常和血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响。结果:珠子参水提物能明显增加耳廓微血管管径及毛细血管开放数目,能有效改善肾上腺素所致的耳廓微循环障碍。结论:珠子参水提物具有改善小鼠耳廓微循环作用。

高效液相色谱法同时测定珠子参中4种化学成分的含量

目的建立不同产地加工珠子参中人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 4种化学成分的含量测定方法。方法采用Kromasil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱;以0.2%的磷酸溶液和乙腈进行梯度洗脱;柱温25℃;流速1 mL·min-1;检测波长203 nm。结果在HPLC法中,人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa的线性范围分别是：0.81-16.20μg（r=0.999 9）、0.46-9.20μg（r=1.000 0）、0.38-7.60μg（r=0.999 9）、0.16-3.20μg（r=0.999 9）;平均回收率分别为100.3%、99.1%、100.1%、95.8%,RSD分别为2.6%、2.3%、2.5%、0.7%。结论该方法专属性强,重复性好,可用于不同加工方法珠子参的质量控制。

珠子参药材无机元素特征及与道地性的关系

目的:探讨不同产地珠子参药材中无机元素的特征及与药材道地性之间的关系。方法:用ICP-AES法测定不同产地珠子参药材中无机元素的含量,采用SAS统计方法对珠子参药材中无机元素进行相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果:珠子参药材质量与无机元素含量之间存在一定相关性;Fe、Cr、Al、Mg、Cd、Ca、Zn为珠子参药材的特征元素;珠子参药材无机元素含量存在地域性差异。结论:无机元素Ca、Fe、Zn(尤其是人体必须的微量元素Fe、Zn)含量可以作为珠子参药材品质的评价指标之一;陕西可能是珠子参药材的道地产区。

珠子参饮片质量标准研究

目的:建立珠子参饮片质量标准。方法:采用性状、显微、TLC进行定性鉴别,高效液相色谱法测定人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa的含量。同时测定了水分、灰分和酸不溶性灰分等。结果:对四川、云南、贵州等省区所产珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量进行测定,结果显示,各样品中人参皂苷Ro平均含量为7.19%,竹节参皂苷Ⅳa的平均含量为3.16%。结论:本法操作简便、稳定性好,可用于珠子参饮片中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的含量测定;制定的质量标准规范,结果准确。

珠子参皂苷与BMSCs联用治疗大鼠肝纤维化作用研究

观察珠子参皂苷与骨髓干细胞（bone marrow stem cells,BMSCs）联用对四氯化碳（CCl4）致大鼠肝纤维化损伤的治疗作用.实验大鼠腹腔注射50%CCl4（2和1mL/kg/周）,连续8周制备大鼠肝纤维化模型,注射2周后灌胃给予珠子参皂苷（200mg/kg）,正常组和模型组灌胃给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每天1次,共8周;在第5周,其中的珠子参皂苷组大鼠尾静脉注射5×10^6/0.5mL/只Dil标记BMSCs,7d后,用荧光显微镜检测BMSCs向大鼠肝组织募集情况;8周后取血清,检测谷丙转移酶（ALT）、谷草转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）水平;检测肝组织羟脯氨酸（Hyp）水平和病理学变化,计算纤维化分级、胶原纤维和网状纤维面积比.结果表明珠子参皂苷可显著促进BMSCs定向募集至肝脏受损部位,珠子参皂苷和其与BMSCs联用均可明显改善肝功能,降低血液中ALP、ALT、AST水平,增加TP、ALB水平和A/G,降低肝纤维化分级、胶原纤维和网状纤维面积比及Hyp水平,改善肝脏组织形态学（P〈0.05或P〈0.01）,尤以珠子参皂苷与BMSCs联用组效果最为显著.本研究为珠子参皂苷与BMSCs联合应用治疗肝纤维化损伤提供了实验依据.

珠子参皂苷类成分酸性条件下的热转化机制研究

目的探索珠子参炮制加工过程中皂苷类成分的热转化机制。方法采用HPLC法分析珠子参加热时皂苷成分热转化的变化,进行热转化机制研究。结果皂苷类成分随加热时间的延长,原生皂苷含量逐渐减少,次生皂苷含量逐渐增加,人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa热转化的主要产物分别为姜状三七皂苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa。结论研究表明,珠子参加工时热转化的机制为珠子参饮片炮制加工规范化和质量评价提供科学依据;阐明了皂苷类成分的热转化规律,为姜状三七皂苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa的制备提供方法。

土家族药竹节参及其近似品种的研究进展

竹节参及其近似品种珠子参、扣子七等为人参属植物,均为少常用中药,但由于几种药材植物性状和功效的相近,造成这几种药物长时间的混用。研究对不同产区的竹节参及其近似品种的化学成分及其含量的不同进行了比较,旨在为进一步理清该属植物的分类提供化学依据。

不同产地珠子参中多糖的含量测定

目的建立珠子参多糖的含量测定方法,并比较不同产地珠子参中多糖含量的差异。方法采用水提醇沉法对珠子参中多糖进行提取、纯化,采用蒽酮-硫酸比色法对不同产地珠子参中多糖进行含量测定,并对测定结果进行聚类分析。结果在0.0057 mg/mL^0.0190 mg/mL葡萄糖浓度C与吸光度A线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.55%,RSD 2.2%,不同产地的珠子参多糖含量在3.26%~9.36%,不同产地珠子参多糖存在差异。结论本试验建立的珠子参中多糖含量测定方法简便、稳定、可行,不同产地珠子参中多糖含量的差异较大,该结果为珠子参中多糖质量控制和相关产品的开发利用提供了理论依据。

不同产地珠子参中氨基酸成分分析

目的:建立珠子参氨基酸的测定方法,并比较不同产地的珠子参中氨基酸的含量差异。方法:采用氨基酸分析仪测定不同产地珠子参中氨基酸含量,并利用SAS软件进行聚类和主成分分析。结果:不同产地珠子参均含有17种氨基酸,其中必需氨基酸有7种占总氨基酸28.5%,药用氨基酸有8种占总氨基酸45.6%;聚类和主成分分析结果为陕西和四川产地分为一类,云南一类。结论:不同产地珠子参中氨基酸含量具有一定差异,该结果为珠子参的开发、利用及珠子参的质量品质评定提供科学依据。

不同产地珠子参生药鉴定研究

目的对珠子参西北主产区的陕西和西南产区的贵州所产的珠子参药材进行生药鉴定研究,为该药材及其同属药用植物的鉴别及进一步开发研究提供依据。方法运用性状和显微鉴别方法对珠子参药材进行鉴定研究。其中显微鉴别分别对根茎的节和节间横切面、粉末的显微特征进行了描述。结果对两个不同产区珠子参的性状和显微特征进行了详细描述,并附有相应的组织、粉末的显微彩色图谱。结论不同产区珠子参药材的性状及显微特征有一定差异。

正交实验法优选珠子参总皂苷的提取工艺

目的建立珠子参总皂苷的提取工艺。方法以人参皂苷Re为对照,以总皂苷含量为指标,设计L9(34)正交实验,确定合理的提取工艺。结果6倍量50%乙醇提取2次,每次2 h为优化提取方案。结论本工艺条件对珠子参总皂苷的提取收率高且稳定,为珠子参总皂苷的工业化生产和新药开发提供了依据。