急性缺血性脑卒中患者血清微小RNA-140-3p、Krüpple样因子5表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性

目的探索急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)、Krüpple样因子5(KLF5)表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性。方法选择2022年10月—2024年1月本院收治的285例AIS患者作为研究对象,依据超声结果将患者分为斑块易损组(196例)、斑块稳定组(53例)以及无斑块组(36例);将患者依据斑块狭窄程度分为狭窄重度组(42例)、狭窄中度组(57例)、狭窄轻度组(150例)以及无狭窄组(36例)。收集患者的一般资料,采用实时荧光定量PCR对血清miR-140-3p、KLF5表达水平进行检测;多因素Logistic回归分析AIS患者颈动脉斑块不稳定性的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-3p、KLF5水平检测对AIS患者颈动脉斑块不稳定的诊断价值;分析不同狭窄程度血清miR-140-3p、KLF5水平;Pearson法和Spearman法相关性分析血清miR-140-3p、KLF5水平的相关性及二者与AIS患者颈动脉斑块稳定及狭窄程度的相关性。结果斑块易损组患者高血压人数、糖尿病人数、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、膀抑素C(Cys-C)及KLF5水平高于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),血小板(PLT)及miR-140-3p水平低于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),斑块稳定组LDL-C、FIB、D-D、Cys-C及KLF5水平高于无斑块组(P<0.05),PLT及miR-140-3p水平低于无斑块组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示PLT、D-D、FIB、Cys-C、miR-140-3p、KLF5是AIS患者斑块不稳定性的影响因素(P<0.05);ROC分析显示,miR-140-3p、KLF5联合诊断AIS患者颈动脉斑块不稳定的ROC曲线下面积(AUC)显著大于miR-140-3p单独诊断的AUC(Z=4.617,P<0.001),KLF5单独诊断的AUC(Z=3.473,P=0.001);随着患者狭窄程度的增加,患者血清miR-140-3p水平降低(F=341.819,P<0.001),血清KLF5水平升高(F=152.186,P<0.001);Pearson法相关性分析显示,血清miR-140-3p水平与血清KLF5水平及斑块稳定性、狭窄程度呈负相关(r=-0.536,-0.529,-0.601,P<0.001),血清KLF5水平与斑块稳定性及狭窄程度呈正相关(r=0.511,0.634,P<0.001)。结论AIS患者血清miR-140-3p水平降低,血清KLF5水平升高,其水平变化与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度密切相关。

下调KLF5抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大机制研究

目的探讨Krüpple样因子5(KLF5)对心肌细胞体积、细胞内总蛋白、氧化损伤及Ca^(2+)水平的影响。方法体外分离培养乳鼠心肌细胞,心肌细胞分为以下几组,对照组:不做任何处理,正常培养。模型组:在细胞培养液中添加100 nm的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)。阴性组:心肌细胞中转染siRNA阴性对照。干扰组:心肌细胞中转染KLF5 siRNA。阴性+AngⅡ组:心肌细胞中转染siRNA阴性对照,并在细胞培养液中添加100 nm的AngⅡ。干扰+AngⅡ组:心肌细胞中转染KLF5 siRNA,并在细胞培养液中添加100 nm的AngⅡ。分别检测KLF5的基因和蛋白表达水平。在心肌细胞内转染KLF5 siRNA,同时用AngⅡ处理,测定心肌细胞的体积和心肌细胞内总蛋白的含量,同时检测细胞内肥大基因心房利钠肽(ANP)mRNA的水平,Western blot方法测定细胞内钙调神经磷酸酶(CaN)蛋白水平,激光共聚焦显微镜检测静息状态下Ca^(2+)水平,二硝基苯肼法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果模型组心肌细胞中KLF5基因和蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。干扰组心肌细胞中KLF5水平低于对照组(P<0.05)。阴性组和对照组心肌细胞中KLF5水平没有差异(P>0.05)。模型组心肌细胞的体积增加,细胞总蛋白含量也增加,细胞内肥大基因ANP mRNA的水平也升高,CaN蛋白表达和静息状态下Ca^(2+)水平上调,细胞内生成的MDA增加,SOD活性降低,细胞培养液中LDH水平升高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰+AngⅡ组心肌细胞体积和蛋白含量下降,细胞内肥大基因ANP mRNA的水平降低,CaN蛋白表达和静息状态下Ca^(2+)水平下降,细胞生成的MDA减少,SOD活性升高,细胞培养液中LDH水平降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。阴性+AngⅡ组细胞体积、蛋白含量、细胞内肥大基因ANP mRNA、CaN蛋白、静息状态下Ca^(2+)水平、细胞生成的MDA、SOD活性、细胞培养液中LDH水平与模型组比较没有明显差异(P>0.05)。结论 AngⅡ诱导心肌细胞表达KLF5,KLF5下调可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与心肌细胞氧化损伤和Ca^(2+)水平有关。

未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p、KLF5表达水平及临床意义

目的检测未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p、Krüpple样因子5(KLF5)表达并探讨其临床意义。方法2017年9月~2020年5月本院收治的未破裂颅内动脉瘤病人(观察组)143例,同期体检健康者150例(对照组)作为对照。检测血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平及血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;比较两组血清miR-448-3p、KLF5 mRNA水平;Pearson法分析未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p、KLF5 mRNA水平与血清IL-6、TNF-α水平,及血清miR-448-3p与血清KLF5 mRNA水平的相关性;ROC曲线分析血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平对未破裂颅内动脉瘤的诊断价值。结果与对照组相比,观察组未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA、IL-6、TNF-α水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与瘤数目=1个比较,瘤数目≥2个的未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与瘤直径<7 mm相比,瘤直径≥7 mm的未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平与血清KLF5 mRNA、IL-6、TNF-α水平均呈负相关(r=-0.429、-0.442、-0.471,P<0.05),血清KLF5 mRNA水平与血清IL-6、TNF-α水平均呈正相关(r=0.454、0.523,P<0.05);血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平诊断未破裂颅内动脉瘤的ROC曲线下面积分别为0.978、0.995,敏感度分别为93.7%、95.8%,特异性分别为90.7%、98.7%。结论未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平降低,KLF5水平升高,两者水平与病人瘤数目、瘤直径、炎症水平关系密切,可能共同参与动脉瘤进展。

Current knowledge of Krüppel-like factor 5 and vascular remodeling: providing insights for therapeutic strategies

Vascular remodeling is a pathological basis of various disorders. Therefore, it is necessary to understand the occurrence, prevention, and treatment of vascular remodeling. Krüppel-like factor 5 (KLF5) has been identified as a significant factor in cardiovascular diseases during the last two decades. This review provides a mechanism network of function and regulation of KLF5 in vascular remodeling based on newly published data and gives a summary of its potential therapeutic applications. KLF5 modulates numerous biological processes, which play essential parts in the development of vascular remodeling, such as cell proliferation, phenotype switch, extracellular matrix deposition, inflammation, and angiogenesis by altering downstream genes and signaling pathways. Considering its essential functions, KLF5 could be developed as a potent therapeutic target in vascular disorders.