应用亚硫酸钠快速制备低氧性肺血管收缩离体模型所需低氧性Krebs-Henseleit液的方法及评价

目的:探讨应用亚硫酸钠(sodium sulfite,Na2SO3)快速去氧制备低氧性肺血管收缩(hypoxia pul-monary vasoconstriction,HPV)离体模型所需低氧性Krebs-Henseleit(KH)溶液的可行性。方法:在暴露于空气的开放环境中将不同剂量Na2SO3加至0.5 L温度为37℃的KH溶液中,用i-STAT便携式临床分析仪检测加样1min后溶液pH值、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)和钠离子(Na+)浓度的变化;选择适合HPV模型条件的Na2SO3剂量溶入0.5 L KH液后,检测此低氧溶液在1、10、20、30、60和90 min时上述指标的变化。结果:大于0.2g(包括0.2 g)Na2SO3加至0.5 L KH液中可降低KH液的PO2(P<0.01),且随着剂量的增加,PO2降低。其中,1.5 g Na2SO3剂量可使0.5 L KH液达到HPV模型所需的低氧状态PO2(20～40 mmHg)并维持此低氧状态至少90min,溶液pH值、PCO2和Na+浓度均处于正常范围。结论:应用Na2SO3可制备HPV离体模型所需的低氧溶液,方法简单,快速可行,状态稳定,无需密闭。

KREBS混澄器的研制和使用

KREBS混澄器在结构和性能上比普通混澄器有显著的改进。由于采用了锥形输液泵,流槽和百叶窗式的布液器,澄清面积比常规减少50%～70%,这不仅降低了总的基建投资,而且能减少生产费用。

3-吗啉丙磺酸缓冲的生理盐溶液的配制及pH稳定性

目的配制以3-吗啉丙磺酸和Na2HPO4为缓冲对的生理盐溶液(MOPS液),并观察其pH稳定性及对大鼠离体血管张力的影响。方法配制MOPS液和Krebs液及其母液,分别给MOPS液或Krebs液通O2或950mL/L O2+50mL/L CO2,用pH计测定pH值,用张力描记仪记录大鼠离体血管的张力。结果 MOPS液和K+-MOPS液14d内的pH变化为(7.32±0.04)～(7.51±0.04),基本恒定;Krebs液和K+-Krebs液随时间延长,pH由7.40±0.01逐渐升至8.41±0.04。通气速度对MOPS液的pH影响小,变化范围为(7.24±0.04)～(7.39±0.00);Krebs液对通气速度敏感,在15～60个气泡/min,pH的变化范围在(6.81±0.07)～(8.33±0.02)之间,波动范围较大。在相同通气速度下MOPS液和Krebs液体积的变化对其pH影响小。大鼠离体的肠系膜动脉、脑基底动脉和冠状动脉在MOPS液中能产生良好的收缩。结论 MOPS液具有pH稳定、放置时间长、通气容易掌握,并且应用成本低的优点,可用于哺乳动物离体组织、器官如血管等实验。

不同保存液对兔门静脉收缩力的影响

将去除和保留内皮细胞的门静脉 ,分别置于 4℃的 UW( U niversity of Wisconsin)液和 Krebs液中保存 ,在 36℃ Krebs液和去甲肾上腺素作用条件下观察不同保存时间对门静脉收缩力的影响 .结果表明 :去除内皮细胞的门静脉 ,无论是在 Krebs液中还是在 UW液中保存 ,其收缩力均随保存时间的延长而下降 ,72 h后分别为 30 %和 6 5 % ;而保留内皮细胞的门静脉 ,其收缩力均随保存时间的延长而增大 ,Krebs液中保存优于 UW液 ,72 h后分别为 2 1 3%和 1 1 8% .无论有无内皮细胞 ,门静脉在 UW液和 Krebs液中保存 ,其收缩力以 UW液中保存的最接近刚离体时的水平 .

支气管肺发育不良患儿血浆及支气管肺泡灌洗液中TGF-β_1和KL-6水平变化的意义

目的观察支气管肺发育不良(BPD)患儿机械通气前血浆转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)水平,探讨其与BPD患儿肺发育不成熟度的关联,了解BPD患儿不同机械通气时段血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)TGF-β1、KL-6水平的动态变化在机械通气肺损伤中的意义。方法入选早产患儿90例,分为3组,每组30例,分别为早产非机械通气组(早产儿不予机械通气)、机械通气非BPD组(早产非BPD患儿予机械通气)、机械通气BPD组(早产BPD患儿予机械通气),另选足月健康新生儿30例作为正常对照组。ELISA法测定机械通气早产患儿通气前、非机械通气早产患儿、健康新生儿血浆及机械通气早产患儿通气1、24、48、72 h血浆及BALF中TGF-β1、KL-6水平。结果 (1)机械通气前,机械通气BPD组血浆TGF-β1水平明显高于机械通气非BPD组及早产非机械通气组、正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),通气前血浆TGF-β1水平与胎龄呈显著负相关(r=-0.274,P<0.05),4组患儿KL-6差异无统计学意义(P>0.05)。通气初始(通气1h),机械通气BPD组BALF中TGF-β1明显高于机械通气非BPD组,差异有统计学意义(P<0.01)。通气1 h BALF TGF-β1水平与胎龄呈显著负相关(r=-0.238,P<0.05)。(2)随着通气持续时间的延长,予机械通气的两组患儿血浆及BALF中TGF-β1、KL-6逐渐上升,机械通气BPD组至48 h后TGF-β1、KL-6水平与通气1 h时比较差异有统计学意义(P<0.01),机械通气非BPD组血浆TGF-β1水平至48 h、BALF TGF-β1至72 h后与通气1 h时比较差异有统计学意义(P<0.05),血浆KL-6水平至72 h后与通气1 h时比较差异有统计学意义(P<0.05),BALF KL-6各通气时段变化差异无统计学意义(P>0.05)。(3)不同通气时段机械通气BPD组血浆及BALF TGF-β1水平均高于同时段机械通气非BPD组,差异有统计学意义(P<0.05);KL-6水平,通气1、24 h与非BPD患儿差异无统计学意义(P>0.05),48、72 h均高于非BPD患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)血浆中与BALF中TGF-β1水平相关性回归方程为y=0.772 3x+10.664,呈显著正相关(r=0.853,P<0.01);血浆中与BALF中KL-6水平相关性回归方程为y=0.986 3x-16.195,呈显著正相关(r=0.937,P<0.01)。结论机械通气前血浆及机械通气初始BALF高水平的TGF-β1可能与BPD患儿肺发育不成熟度相关。而动态观测机械通气早产患儿血浆及BALF中TGF-β1及KL-6水平,有助于监测机械通气肺损伤的发生发展。血浆与BALF中TGF-β1、KL-6检测具有良好相关性,动态观测BALF中TGF-β1、KL-6水平,对BPD早期诊断、治疗监测具有更为广阔的临床应用前景。

HX液和CollinsⅡ液对大鼠肝窦内皮细胞及肝脏生化功能影响的对比研究

为对比观在ＨＸ液和ＣｏｌｌｉｎｓⅡ液对被保存鼠肝肝窦内皮细胞损伤程度和肝脏生化功能的影响，作者将７０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组（ｎ＝１０），Ｈ组（ＨＸ液保存，ｎ＝３０）和Ｃ组（ＣｏｌｌｉｎｓⅡ液保存，ｎ＝３０），制成大鼠肝脏离体灌注模型，而后测定其肝窦内皮细胞死亡率，Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ液内酮体比、肝脏糖释放量和分泌胆汁的肝脏数量。实验结果表明，ＨＸ液在防止肝窦内皮细胞损伤和维持肝脏正常生化功能方面的作用明显优于ＣＯｌｌｉｎｓⅡ液。

利多卡因对缺血再灌注离体大鼠心功能的影响

目的:探讨利多卡因对缺血再灌注离体大鼠心功能的影响及其可能机制。方法:40只健康成龄雌性Wistar大鼠,随机分为5组(n=8),建立Langendorff模型。缺血再灌注组(A):灌注Krebs-Henseleit(K-H)缓冲液;利多卡因1mg/L组(B):灌注含1mg/L利多卡因的K-H液;利多卡因2.5mg/L组(C):灌注含2.5mg/L利多卡因K-H液;利多卡因5mg/L组(D):灌注含5mg/L利多卡因的K-H液;利多卡因+格列苯脲组(E):灌注含2.5mg/L利多卡因和10μmol/L格列苯脲的K-H液。各组分别缺血前灌注相应灌流液20min,全心缺血30min,再灌注60min。记录缺血前5min及再灌注30min和60min的心率(HR)、左心室形成压(LVDP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)等心功能参数。结果:与A组比较,再灌注30min和60min时,C组的HR、LVDP、±dp/dtmax均升高(P<0.05),B、D两组上述参数变化无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,再灌注30min和60min时,E组各项参数均降低(P<0.05)。结论:含2.5mg/L利多卡因的K-H液可显著改善缺血再灌注离体大鼠心功能,部分机制可能与心肌细胞和线粒体ATP敏感性钾通道有关。

中枢神经系统Ca^(2+)-钙调素激活的蛋白激酶Ⅱ和cAMP激活的蛋白激酶的发育

1932年,Lipmann和Levene即观察到蛋白质分子中羟基侧链被磷酸化这一现象,但当时没有引起重视。50年代初,Sutherland和Krebs发现蛋白激酶(Protein kinase)后,蛋白质磷酸化反应才引起关注。