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微小RNA-22-3p调控Kruppel样因子6表达对骨髓间充质干细胞心肌样分化的影响
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作者 钟晓鸣 张蕾 +5 位作者 姚新亮 刘洪洋 张媛 万琪琳 李彦明 程冠昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-8,共8页
目的探究微小RNA-22-3p(miR-22-3p)调控Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)心肌样分化的影响。方法分离并培养大鼠BMSC,将第3代BMSC分为对照组、5-氮杂胞苷(5-AZA)组、模拟物阴性对照组、miR-22-3p模拟物组、miR-22-3p... 目的探究微小RNA-22-3p(miR-22-3p)调控Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)心肌样分化的影响。方法分离并培养大鼠BMSC,将第3代BMSC分为对照组、5-氮杂胞苷(5-AZA)组、模拟物阴性对照组、miR-22-3p模拟物组、miR-22-3p模拟物+空载质粒组、miR-22-3p模拟物+KLF6过表达质粒组;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-22-3p及KLF6表达;免疫荧光化学染色法检测细胞结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白T(cTnT)、间隙连接蛋白43(Cx43)表达;Western blot检测Desmin、cTnT、Cx43、KLF6蛋白表达;流式细胞术检测BMSC凋亡情况;采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-22-3p和KLF6的靶向关系。结果与对照组比较,5-AZA组BMSC中miR-22-3p(q=7.971,P<0.001)、Desmin(q=7.876,P<0.001)、cTnT(q=10.272,P<0.001)、Cx43表达(q=6.256,P<0.001)以及细胞凋亡率(q=12.708,P<0.001)显著增加,而KLF6 mRNA(q=20.850,P<0.001)及蛋白表达(q=11.080,P<0.001)显著降低;与5-AZA组和模拟物阴性对照组比较,miR-22-3p模拟物组BMSC中miR-22-3p(q=3.591,P<0.001;q=11.650,P<0.001)、Desmin(q=5.975,P<0.001;q=13.579,P<0.001)、cTnT(q=7.133,P<0.001;q=17.548,P<0.001)、Cx43表达(q=4.571,P=0.037;q=11.068,P<0.001)显著增加,而KLF6 mRNA(q=7.384,P<0.001;q=28.234,P<0.001)及蛋白表达(q=4.594,P=0.036;q=15.945,P<0.001)显著降低,miR-22-3p模拟物组细胞凋亡率显著低于5-AZA组(q=8.216,P<0.001);与miR-22-3p模拟物+空载质粒组比较,miR-22-3p模拟物+KLF6过表达质粒组KLF6 mRNA(q=23.891,P<0.001)及蛋白表达(q=13.378,P<0.001)显著增加,Desmin(q=9.505,P<0.001)、cTnT(q=10.985,P<0.001)、Cx43表达(q=8.301,P<0.001)显著降低,细胞凋亡率增加(q=4.713,P=0.029)。双荧光素酶报告基因实验发现KLF6是miR-22-3p的潜在靶基因。结论miR-22-3p通过抑制KLF6表达来促进BMSC心肌样分化。 展开更多
关键词 微小RNA-22-3p kruppel样因子6 骨髓间充质干细胞 心肌样分化
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Kruppel样因子4对内毒素所致IL-6基因表达的调控及机制研究 被引量:8
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作者 冯衍生 刘梅冬 +4 位作者 刘瑛 刘俊文 陈广文 张华莉 肖献忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1313-1318,共6页
探讨Kruppel样因子4(KLF4)对内毒素所致白介素(IL-6)的基因表达以及释放的影响,并对其调控机制做了初步研究.使用RT-PCR和Westernblot检测KLF4mRNA和蛋白质的表达.采用KLF4过表达的RAW264.7巨噬细胞株或反义寡核苷酸技术抑制内源性KLF4... 探讨Kruppel样因子4(KLF4)对内毒素所致白介素(IL-6)的基因表达以及释放的影响,并对其调控机制做了初步研究.使用RT-PCR和Westernblot检测KLF4mRNA和蛋白质的表达.采用KLF4过表达的RAW264.7巨噬细胞株或反义寡核苷酸技术抑制内源性KLF4的表达,用RT-PCR和ELISA检测内毒素(LPS)刺激后IL-6mRNA和蛋白质的表达.采用荧光素酶报告基因检测RAW264.7细胞中KLF4过表达对IL-6基因启动子报告基因转录活性的影响.使用EMSA法检测细胞中KLF4与IL-6基因启动子区KLF4元件的结合.结果表明:LPS可以诱导RAW264.7巨噬细胞KLF4的表达以及IL-6蛋白表达.KLF4过表达明显抑制IL-6的mRNA和蛋白质的表达,而KLF4缺失使这种作用消失.荧光素酶报告基因的结果显示,KLF4可以抑制LPS所致的IL-6基因启动子的转录活性.EMSA显示KLF4不能与IL-6启动子区的KLF4结合元件直接结合.结果表明,LPS可以促进RAW264.7小鼠巨噬细胞KLF4的表达和IL-6的释放.KLF4能抑制LPS诱导的IL-6表达和释放,其机制是抑制IL-6启动子的转录活性,但KLF4的抑制作用不是通过直接与IL-6基因的启动子区相结合而实现的. 展开更多
关键词 kruppel样因子4(KLF4) 内毒素(LPS) 白介素6(IL-6) 炎症
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胃癌组织中KLF6和PTTG1的表达与胃癌淋巴结转移及预后的关系
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作者 张锐 唐纪全 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第11期869-872,885,共5页
目的:探讨Kruppel样因子6(KLF6)、垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在胃癌组织中的表达,并分析两者与胃癌淋巴结转移及预后的关系。方法:选取2018年4月—2019年10月诊治的80例胃癌患者,收集患者术中切除的癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组织... 目的:探讨Kruppel样因子6(KLF6)、垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在胃癌组织中的表达,并分析两者与胃癌淋巴结转移及预后的关系。方法:选取2018年4月—2019年10月诊治的80例胃癌患者,收集患者术中切除的癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组织化学法对KLF6、PTTG1的表达进行检测;Spearman法分析胃癌组织中KLF6和PTTG1表达的相关性;Logistic回归分析影响淋巴结转移的因素;Kaplan-meier法分析胃癌组织中KLF6和PTTG1表达与患者预后的关系;Cox回归分析患者预后的影响因素。结果:与癌旁正常组织相比,胃癌组织中KLF6低表达率、PTTG1高表达率明显升高(P<0.05);胃癌组织中KLF6、PTTG1表达呈负相关(r=-0.502,P<0.05);胃癌淋巴结转移患者KLF6低表达、PTTG1高表达比例明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05);KLF6是淋巴结转移的保护因素(P<0.05),PTTG1是淋巴结转移的危险因素(P<0.05)。KLF6高表达组生存率显著高于低表达组(χ^(2)=8.557,P<0.05),PTTG1低表达组生存率显著高于高表达组(χ^(2)=5.637,P<0.05);KLF6是患者预后的保护因素(P<0.05),淋巴结转移、PTTG1是患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:胃癌组织中KLF6低表达、PTTG1高表达,均与胃癌淋巴结转移及预后有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 kruppel样因子6 垂体肿瘤转化基因1 淋巴结转移 预后
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宫颈癌患者Kruppel样因子6,p21蛋白表达水平与病理特征及化疗敏感性的相关性分析 被引量:7
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作者 徐晓锋 王纯 +4 位作者 卢国丰 孟亚萍 周勤芬 胡明珠 石琴 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第6期12-15,共4页
目的探讨宫颈癌患者Kruppel样因子6(KLF6),p21蛋白表达水平与病理特征及化疗敏感性的相关性。方法回顾性分析2016年1月~2018年12月接受化疗的40例宫颈癌患者,化疗结束后根据化疗效果将患者分为化疗敏感组(CR+PR)、化疗抵抗组(SD+PD)。... 目的探讨宫颈癌患者Kruppel样因子6(KLF6),p21蛋白表达水平与病理特征及化疗敏感性的相关性。方法回顾性分析2016年1月~2018年12月接受化疗的40例宫颈癌患者,化疗结束后根据化疗效果将患者分为化疗敏感组(CR+PR)、化疗抵抗组(SD+PD)。采用免疫组化检测宫颈癌组织KLF6,p21蛋白的表达,分析其与临床病理特征、化疗敏感性及总生存期(OS)的关系。结果宫颈癌中KLF6,p21蛋白阳性率与病理分期、肿瘤直径、分化类型及化疗敏感性相关(χ2=2.14~5.74,均P<0.05)。KLF6+/p21-者ORR为85.71%,显著高于非KLF6+/p21-者42.11%(χ2=8.33,P<0.05)。宫颈癌患者的中位OS为11.20个月(95%CI:9.73~12.71),其中KLF6阳性者中位OS为11.90个月(95%CI:10.81~12.99),显著高于阴性表达者9.20个月(95%CI:9.05~9.35);p21蛋白阳性者中位OS为9.14个月(95%CI:8.26~10.22),显著低于p21阴性表达者11.62个月(95%CI:9.63~13.58)(χ2=11.50,6.23,均P<0.05)。结论宫颈癌患者KLF6,p21表达水平与其临床病理特征相关。KLF6高表达、p21低表达者化疗敏感性高,且预后更好,可作为预后、个体化治疗方案选择的评价指标。 展开更多
关键词 宫颈癌 kruppel样因子6 P21蛋白 病理特征 化疗敏感性 相关性
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急性缺血性脑卒中患者血清Kruppel样转录因子2水平表达与脑梗死体积及预后的相关性研究
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作者 钟曌 郭继勃 +3 位作者 郭昊 韩晓婷 张丽萍 祝刚 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第6期1-5,12,共6页
目的 研究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清Kruppel样转录因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)水平表达与脑梗死体积及预后的关系,探讨KLF2对AIS脑梗死体积及预后不良的预测价值,并分析KLF2诱导AIS发生的可能机制。... 目的 研究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清Kruppel样转录因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)水平表达与脑梗死体积及预后的关系,探讨KLF2对AIS脑梗死体积及预后不良的预测价值,并分析KLF2诱导AIS发生的可能机制。方法 收集2021年4月~2022年11月在空军军医大学第二附属医院收治的141例AIS患者为研究对象,并收集同期行健康体检者50例作为对照。根据Pullicino公式计算AIS脑梗死体积,分为小梗死灶组、中梗死灶组和大梗死灶组;根据改良Rankin量表(modified rankin scale,mRS)评分分为预后良好组和预后不良组;采用Pearson相关性分析血清KLF2表达与AIS患者脑梗死体积、预后及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)和鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)表达的相关性;绘制ROC曲线评估血清KLF2对AIS预后不良的预测价值。结果 AIS组患者血清KLF2(194.37±32.37pg/ml)水平显著低于对照组(242.85±17.39pg/ml);IL-6(13.70±2.89pg/ml),S1P(432.58±101.37pg/ml)和SphK1(2.65±0.58pg/ml)水平显著高于对照组(9.92±2.45pg/ml,259.15±78.24pg/ml,1.48±0.36 pg/ml),差异具有统计学意义(t=10.076,-8.253,-10.986,-13.367,均P <0.05)。小梗死灶组、中梗死灶组和大梗死灶组血清KLF2水平分别为217.69±33.14pg/ml,196.48±29.53pg/ml和168.94±31.62pg/ml,差异有统计学意义(F=25.753,P<0.001)。AIS预后良好组血清KLF2水平为211.83±28.46pg/ml,明显高于预后不良组的170.12±25.34pg/ml,差异有统计学意义(t=8.982,P<0.001)。血清KLF2水平与AIS脑梗死体积、预后及IL-6,SphK1水平呈负相关性(r=-0.607,-0.586,-0.480,-0.522,均P<0.05),与S1P水平无明显相关性(r=0.172,P>0.05);血清SphK1与S1P水平呈明显正相关(r=0.480,P<0.05)。血清KLF2预测AIS脑梗死体积(中~大梗死灶)和预后不良的AUC值分别为0.871和0.889,当截断值分别取206.1 pg/ml和192.37 pg/ml时,诊断灵敏度和特异度较高。结论 AIS血清中KLF2表达降低与患者脑梗死体积及预后关系密切,可作为AIS病情评估及判断预后不良的有效生物指标。血清KLF2表达与IL-6,SphK1水平存在明显相关性,KLF2可能调控SphK1/S1P途径参与神经炎症反应,介导AIS发生、发展,为临床研究及治疗提供了新的靶标。 展开更多
关键词 急性缺血性卒中 kruppel样转录因子2 脑梗死体积 白细胞介素6 鞘氨醇激酶1/鞘氨醇-1-磷酸
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HMBA对人舌癌Tca8113细胞增殖和KLF6及相关蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 黄健 侯菊花 +4 位作者 王国华 胡春萍 陈高 王双杰 左晓娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期433-438,共6页
目的:研究六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HMBA)对人舌癌Tca8113细胞增殖和Kruppel样因子6(Kruppel-likefactor 6,KLF6)及相关蛋白表达的影响。方法:HMBA处理Tca8113细胞后,观察细胞生长和细胞形态;流式细胞术观察细胞周... 目的:研究六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HMBA)对人舌癌Tca8113细胞增殖和Kruppel样因子6(Kruppel-likefactor 6,KLF6)及相关蛋白表达的影响。方法:HMBA处理Tca8113细胞后,观察细胞生长和细胞形态;流式细胞术观察细胞周期;RT-PCR检测KLF6 mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测KLF6、p53、cyclin D1及c-Jun的蛋白表达。结果:HMBA处理后贴壁细胞的数量随浓度增加明显减少;MTT实验显示其生长抑制作用呈浓度/时间-效应关系;镜下观察显示处理后Tca81 13细胞出现向正常细胞形态逆转演变的特征。流式细胞术检测结果显示,对照组Tca8113细胞G_1期比例为(52.00±0.02)%,S期为(34.00±0.08)%,G期为(14.00±0.10)%;HMBA处理后,随作用时间增加,G_1期细胞显著增加,S期细胞显著减少,G_2期细胞也减少,细胞明显被阻滞于G_1期(P<0.05);出现凋亡峰。RT-PCR结果显示HMBA处理后KLF6 mRNA的表达上调(P<0.05);免疫组化检测显示HMBA处理后KLF6和p53蛋白表达上调(P<0.05),cyclin D1和c-Jun表达下调(P<0.05)。结论:HMBA对Tca8113细胞增殖具有抑制作用;其作用机制一方面可能通过p53上调p21的表达和活性,另一方面可能通过上调表达的KLF6解除c-Jun对p21的抑制作用,下调cyclin D1,抑制CDK4/6和cyclinD1复合物活性,将Tca8113细胞阻滞于G_0/G_1期,诱导Tca8113细胞向正常细胞分化,恢复正常细胞的表型和功能,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 TCA8113细胞 kruppel样因子6 六亚甲基二乙酰胺
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结直肠癌组织中KLF6蛋白的表达及其与血清癌胚抗原的相关性 被引量:3
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作者 王强 曹杰 +3 位作者 杨平 孙政 钟俊斌 李旺林 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1844-1846,共3页
目的探讨KLF6蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与血清癌胚抗原的相关性。方法应用免疫组化SP法检测KLF6蛋白在结直肠癌、结直肠腺瘤及正常结直肠组织中的表达,分析KLF6蛋白与结直肠癌各种临床病理参数的关系。用酶联免疫吸附试验(ELISA法... 目的探讨KLF6蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与血清癌胚抗原的相关性。方法应用免疫组化SP法检测KLF6蛋白在结直肠癌、结直肠腺瘤及正常结直肠组织中的表达,分析KLF6蛋白与结直肠癌各种临床病理参数的关系。用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测结直肠癌患者血清CEA水平。结果 KLF6蛋白从正常结直肠组织、结直肠腺瘤到结直肠癌组织中表达逐渐下调(85.7%、76.5%、43.6%),三者比较差异有统计学意义(2=25.20,P<0.01);KLF6蛋白表达水平与组织学类型无关(2=0.13,P>0.05),与分化程度(2=4.04)、淋巴结转移(2=6.79)、TNM分期(2=6.16)有关(均P<0.05)。KL6表达阴、阳性患者血清CEA水平差异无统计意义(P>0.05)。结论 KLF6表达下降,可能参与了结直肠癌的发生发展;KLF6基因可能是结直肠癌的一个重要抑癌基因并可能参与结直肠癌细胞凋亡的调节。KLF6可作为结直肠癌恶性程度的一个监测指标,长期的随访有助于评价手术疗效、是否转移和监测复发。 展开更多
关键词 KLF6 结直肠癌 癌胚抗原
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KLF6和WWOX蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 万晓娟 宋锐锋 +2 位作者 陈玉龙 徐珂 徐峰 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第6期602-607,共6页
目的:探讨KLF6和WWOX蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学法分别检测40例结直肠癌及40例正常结直肠黏膜组织中KLF6和WWOX蛋白的表达,并分析两者的表达水平与其临床病理因素的关系.结果:结直肠癌组织中的K... 目的:探讨KLF6和WWOX蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学法分别检测40例结直肠癌及40例正常结直肠黏膜组织中KLF6和WWOX蛋白的表达,并分析两者的表达水平与其临床病理因素的关系.结果:结直肠癌组织中的KLF6和WWOX蛋白的阳性表达率明显低于正常结直肠黏膜组织(45.0%vs82.5%;37.5%vs90.0%,均P<0.05),KLF6和WWOX蛋白在结直肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.320,P<0.05),并与肿瘤组织的分化程度、淋巴结转移及浸润深度均密切相关(均P<0.05).结论:KLF6和WWOX的低表达可能与结直肠癌的发生、发展及预后有关,联合检测两者对结直肠癌的诊断及预后判断具有重要意义. 展开更多
关键词 结直肠癌 kruppel样因子6 包含氧化还原酶的WW域 免疫组织化学
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核转录因子KLF6在非酒精性脂肪性肝纤维化形成中的作用 被引量:5
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作者 王晓敏 陈东风 《消化外科》 CSCD 2006年第5期355-360,共6页
目的研究大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中,肝脏核转录因子KLF6及相关基因表达变化及其作用。方法建立高脂饮食脂肪性肝纤维化模型,用RT-PCR与免疫组织化学法观察肝组织中KLF6、TGF-β1、α-SMA表达变化,放射免疫法检测血清肝纤维... 目的研究大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化形成过程中,肝脏核转录因子KLF6及相关基因表达变化及其作用。方法建立高脂饮食脂肪性肝纤维化模型,用RT-PCR与免疫组织化学法观察肝组织中KLF6、TGF-β1、α-SMA表达变化,放射免疫法检测血清肝纤维化指标HA、LN、CⅣ。结果模型组大鼠高脂喂养8周呈现单纯性脂肪变,肝脏KLF6、TGF-β1、α-SMA的mRNA表达与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。12周时随着脂肪变的加重,KLF6mRNA表达上调(0.62±0.10,P<0.01),于16周达高峰(1.01±0.07,P<0.01),24周略有回落(0.81±0.08,P<0.01);而TGF-β1和α-SMA的mRNA表达于16周时开始增高(0.62±0.19、0.77±0.12,P<0.01),24周达高峰(0.91±0.07、1.08±0.19,P<0.01)。相关分析发现,KLF6与TGF-β1、α-SMA表达以及肝纤维化分级评分之间呈显著正相关(r=0.848、0.859、0.706,P<0.01)。结论高脂饮食引起KLF6表达增强,最初可能是一种适应性反应,随着其表达进一步增强,可引起TGF-β1和α-SMA表达持续上调,从而促进脂肪性肝纤维化的发生、发展。 展开更多
关键词 KLF6 转化生长因子Β1 平滑肌肌动蛋白 非酒精性脂肪性肝病 肝纤维化
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转录因子KLF6对大鼠趋化因子CCL5基因启动子活性的影响及其可能的结合部位
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作者 刘玉 虞天一 +7 位作者 张婧 何风霞 卢燕来 周梦雅 王璐璐 赵聃 邱文 王迎伟 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2015年第6期461-465,共5页
目的:构建大鼠趋化因子CCL5基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,检测大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)中过表达Kruppel样转录因子6(Kruppel-like factor 6,KLF6)对CCL5基因启动子活性的影响。同时,筛选KLF6与CCL... 目的:构建大鼠趋化因子CCL5基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,检测大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)中过表达Kruppel样转录因子6(Kruppel-like factor 6,KLF6)对CCL5基因启动子活性的影响。同时,筛选KLF6与CCL5基因启动子区的结合位点。方法:采用PCR技术,将扩增出的大鼠CCL5基因启动子全长序列(-1744nt^-14nt)插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic中,获得CCL5基因启动子全长荧光素酶报告质粒(p GL3-CCL5-FL)。然后,将p GL3-CCL5-FL与大鼠野生型KLF6表达质粒(p IRES2/KLF6)共转染GMC,测定其荧光素酶活性。另用生物信息学软件预测CCL5基因启动子上KLF6潜在的结合位点,并据此构建出4个CCL5基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(即p GL3-CCL5-1~4)。将上述CCL5基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒分别与KLF6过表达质粒共转染GMC,再行荧光素酶活性的测定,初筛KLF6可能的结合部位。结果:菌液PCR以及核酸测序结果证实,上述所有启动子荧光素酶报告质粒均构建成功。p GL3-CCL5-FL和p IRES2/KLF6共转染GMC结果显示,CCL5基因启动子的活性显著增强。p GL3-CCL5-FL、p GL3-CCL5-1~4分别与p IRES2/KLF6共转染GMC后发现,p GL3-CCL5-4的启动活性显著降低。提示KLF6可能结合在CCL5基因启动子的-343nt^-191nt区域。结论:本实验成功构建了大鼠CCL5基因启动子全长及截短荧光素酶报告质粒,并初步筛查出KLF6在CCL5基因启动子上可能的结合部位在-343nt^-191nt区域。 展开更多
关键词 kruppel样转录因子6 CCL5 肾小球系膜细胞 荧光素酶报告质粒 启动子活性
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Krupple样因子6在结直肠癌中的表达及其与临床病理因素的关系
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作者 梁立源 曹杰 +3 位作者 王强 杨平 肖焕擎 刘振邦 《消化肿瘤杂志(电子版)》 2010年第1期39-41,共3页
目的检测结直肠癌中Krupple样因子6(Krupplelikefactor6,KLF6)蛋白的表达,分析其与临床病理因素的关系,探讨KLF6蛋白在结直肠癌中的临床意义。方法应用免疫组化检测52例结直肠癌组织及28例良性直肠黏膜组织中KLF6蛋白的表达。分析KLF6... 目的检测结直肠癌中Krupple样因子6(Krupplelikefactor6,KLF6)蛋白的表达,分析其与临床病理因素的关系,探讨KLF6蛋白在结直肠癌中的临床意义。方法应用免疫组化检测52例结直肠癌组织及28例良性直肠黏膜组织中KLF6蛋白的表达。分析KLF6蛋白的表达与结直肠癌临床病理因素的关系。结果 52例结直肠癌组织中KLF6的表达率为42.30%(22/52),明显低于28例良性直肠黏膜组织的89.29%(25/28)(P<0.05);KLF6蛋白表达水平与组织学类型无显著相关(P>0.05),与分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论 KLF6低表达可能参与结直肠癌的发生发展;KLF6基因可能为结直肠癌的一个重要抑癌基因,与结直肠癌浸润及转移有关。 展开更多
关键词 Krupple样因子6 结直肠癌 免疫组化
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KLF6基因在原发性肝癌中的表达 被引量:5
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作者 王少平 亢黎莉 +3 位作者 陈孝平 周鹤俊 周卫江 徐江 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期343-346,共4页
目的通过研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达,探讨KLF6基因作为肝癌抑制基因的可能性。方法分别用荧光定量PCR、半定量RT-PCR和Western blot方法检测肝细胞癌及癌旁组织中KLF6基因在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果实时荧光定量PCR... 目的通过研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达,探讨KLF6基因作为肝癌抑制基因的可能性。方法分别用荧光定量PCR、半定量RT-PCR和Western blot方法检测肝细胞癌及癌旁组织中KLF6基因在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果实时荧光定量PCR显示经过看家基因GAPDH标化的KLF6 cDNA起始浓度,在配对癌旁组织约为肝癌组织的3倍。26例肝癌组织的KLF6 mRNA表达水平与配对癌旁组织相比,差异具有显著性意义(P<0.01)。在肝癌细胞株HepG2及Hep3B,KLF6 mRNA的表达亦显著低于正常对照细胞L02(P<0.01)。实验还发现,在肝细胞癌中KLF6蛋白表达变化与mRNA表达变化一致,即KLF6蛋白在癌组织及肝癌细胞的表达明显低于癌旁组织及L02(P<0.01)。结论KLF6表达下调可能是肝细胞癌的遗传学改变之一,KLF6基因可能为新的肝癌相关抑癌基因。 展开更多
关键词 KLF6 肝细胞癌 基因表达
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卵巢浆液性腺癌组织中ELOVL6及KLF4的表达水平与预后的关系
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作者 李海鹏 《中国性科学》 2020年第10期39-43,共5页
目的探讨卵巢浆液性腺癌组织中超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6)及锌指转录调节蛋白4(KLF4)的表达水平及其与预后的关系。方法选取2012年5月至2014年5月青海红十字医院诊治的105例卵巢浆液性腺癌患者作为研究对象。其中高级别患者设为高级别... 目的探讨卵巢浆液性腺癌组织中超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6)及锌指转录调节蛋白4(KLF4)的表达水平及其与预后的关系。方法选取2012年5月至2014年5月青海红十字医院诊治的105例卵巢浆液性腺癌患者作为研究对象。其中高级别患者设为高级别组(n=75),低级别患者设为低级别组(n=30)。另选择因其他疾病行手术切除的正常卵巢组织和输卵管组织的患者设为对照组(n=25)。采用免疫组化法检测患者组织中ELOVL6及KLF4蛋白阳性表达,使用Spearman分析相关性,患者5年生存率采用Kaplan-Meier单因素分析,影响患者预后的独立危险因素采用Cox多因素分析。结果ELOVL6和KLF4蛋白在低级别组患者中的阳性表达率(53.33%、30.00%)显著低于对照组卵巢组织的阳性率(80.00%、64.00%),差异具有统计学意义(P<0.05),在高级别组患者中的阳性表达率(42.67%、16.00%)显著低于对照组输卵管组织的阳性率(88.00%、80.00%),差异具有统计学意义(P<0.05);高级别组患者Ⅲ期+Ⅳ期中ELOVL6和KLF4蛋白阳性表达率显著低于Ⅰ期+Ⅱ期,术后有残留灶患者的KLF4蛋白阳性表达率显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);高级别组患者ELOVL6和KLF4阳性表达率呈正相关,差异具有统计学意义(r=0.041,P=0.035);高级别组患者的ELOVL6蛋白阳性者5年生存率为40.6%,显著高于阴性者的21.8%,KLF4蛋白阳性者5年生存率为39.2%,显著高于阴性者的18.9%;Cox多因素分析显示KLF4低表达、FIGO分期均是影响高级别组患者预后的独立危险因素。结论卵巢浆液性腺癌患者组织中ELOVL6及KLF4蛋白低表达,FIGO分期和KLF4对患者预后有一定影响。 展开更多
关键词 卵巢浆液性腺癌 ELOVL6 KLF4 预后
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KLF6、p21表达与中晚期宫颈癌同步放化疗敏感性的关系 被引量:3
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作者 车亚 郭峰 +1 位作者 任英红 马红兵 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第8期1346-1350,共5页
目的:探讨Kruppel样因子6(KLF6)、p21蛋白表达与中晚期(Ⅱb-Ⅲb)宫颈癌同步放化疗敏感性的关系。方法:选取108例Ⅱb-Ⅲb期宫颈癌患者作为受试对象,均行同步放化疗,根据病变好转情况分为放化疗敏感组81例和放化疗不敏感组27例。用免疫组... 目的:探讨Kruppel样因子6(KLF6)、p21蛋白表达与中晚期(Ⅱb-Ⅲb)宫颈癌同步放化疗敏感性的关系。方法:选取108例Ⅱb-Ⅲb期宫颈癌患者作为受试对象,均行同步放化疗,根据病变好转情况分为放化疗敏感组81例和放化疗不敏感组27例。用免疫组织化学法检测所有受试者组织中KLF6、p21蛋白水平,分析二者表达与Ⅱb-Ⅲb期宫颈癌患者同步放化疗敏感性及3年总生存率(OS)的关系。结果:放化疗敏感组与不敏感组患者的肿瘤分化程度、肿瘤大小差异有统计学意义(P<0.05);两组患者年龄、FIGO分期、淋巴结转移及化疗方案差异均无统计学意义(P>0.05)。KLF6蛋白低表达患者同步放化疗总有效率明显低于高表达患者(P<0.05),p21蛋白低表达患者总有效率显著高于高表达患者(P<0.05)。KLF6、p21蛋白表达与Ⅱb-Ⅲb期宫颈癌患者FIGO分期、肿瘤分化程度、肿瘤大小及放化疗敏感性有关(P<0.05)。KLF6低表达患者OS明显低于高表达患者(P<0.05);p21高表达患者OS显著低于低表达患者(P<0.05)。多因素分析显示KLF6、p21表达是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:KLF6高表达、p21低表达的Ⅱb-Ⅲb期宫颈癌患者同步放化疗敏感性强,其放化疗总有效率及3年OS均较高,可作为预后判断的依据。 展开更多
关键词 kruppel样因子6 P21 宫颈癌 同步放化疗 敏感性
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miR-933调控KLF6基因影响非小细胞肺癌的作用研究 被引量:2
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作者 李海洲 张艳炜 +3 位作者 许英杰 杨门 张磊 韩京军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期581-588,共8页
背景与目的:miRNA被认为参与肿瘤的发生、发展过程,但miRNA与肺癌的关系仍不完全清楚,探讨miR-933调控Kruppel样锌指转录因子6(Kruppel-like zinc finger transcription factor 6,KLF6)对肺癌细胞系增殖、迁移侵袭和诱导凋亡的影响。方... 背景与目的:miRNA被认为参与肿瘤的发生、发展过程,但miRNA与肺癌的关系仍不完全清楚,探讨miR-933调控Kruppel样锌指转录因子6(Kruppel-like zinc finger transcription factor 6,KLF6)对肺癌细胞系增殖、迁移侵袭和诱导凋亡的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQPCR)检测正常支气管上皮细胞BEAS-2B细胞、肺癌细胞系A549、H460细胞中miR-933的表达。采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测KLF6 mRNA表达和蛋白水平。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和EdU法检测细胞增殖,采用transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,采用AnnexinⅤ-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色法检测细胞凋亡。结果:肺癌细胞系转染miR-933mimic组KLF6mRNA表达水平明显上调(P<0.05)。与阴性对照组相比,高表达miR-933能增加A549、H460细胞KLF6蛋白的相对表达水平(P<0.05)。过表达miR-933可抑制A549、H460细胞的增殖、迁移和侵袭能力,差异均有统计意义(P<0.05)。转染miR-933mimc后,A549和H460细胞的凋亡率均显著高于各阴性对照组(P<0.001)。结论:miR-933通过调控KLF6基因的表达,诱导肺癌细胞的凋亡,抑制肺癌细胞的增殖,降低肺癌细胞的迁移和侵袭能力,影响肺癌的发生、发展。 展开更多
关键词 MIRNA 非小细胞肺癌 细胞增殖 细胞凋亡 kruppel样锌指转录因子6
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Frequent Down-regulation and Deletion of KLF6 in Primary Hepatocellular Carcinoma 被引量:1
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作者 王少平 亢黎莉 +1 位作者 陈孝平 周鹤俊 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2010年第4期470-476,共7页
Kruppel-like factor 6 (KLF6) was reported as tumor suppressor in multiple cancers. However, loss of chromosomal locus spanning KLF6 is relatively infrequent in previous published studies. To explore the role of KLF6 i... Kruppel-like factor 6 (KLF6) was reported as tumor suppressor in multiple cancers. However, loss of chromosomal locus spanning KLF6 is relatively infrequent in previous published studies. To explore the role of KLF6 in hepatocellular carcinoma (HCC), we examined the gene for expression change, loss of heterozygosity (LOH) and mutation in 26 HCC samples. The expression levels of KLF6 were significantly down-regulated in HCCs, as detected by qRT-PCR. LOH occurred in 11 (52%) of 21 tumors, and all the samples with LOH showed KLF6 down-regulation. The mutational frequency was 24%, and sequence changes located in activation domain of KLF6. Furthermore, MTT assay showed a significant antiproliferative effect of the wt KLF6 transfected in HepG2 hepatoblastoma cells. Fluorescence-activated cell sorting analysis revealed that KLF6 could induce apoptosis. These findings indicate that deregulation of KLF6, together with genetic abnormalities of allelic imbalance and mutations, may play a role in HCC pathogenesis. 展开更多
关键词 tumor suppressor gene kruppel-like factor 6 gene expression cell proliferation hepatocellular carcinoma
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KLF6mRNA Expression in Primary Hepatocellular Carcinoma
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作者 王少平 陈孝平 +1 位作者 张万广 裘法祖 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2004年第6期585-587,共3页
Summary: To investigate the expression of KLF6mRNA in primary hepatocellular carcinoma (HCC), nomal liver tissues and the tissues adjacent to the cancers, reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was e... Summary: To investigate the expression of KLF6mRNA in primary hepatocellular carcinoma (HCC), nomal liver tissues and the tissues adjacent to the cancers, reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was employed to investigate the expression of the KLF6 gene in HCC, the corresponding adjacent non-cancerous tissues and normal liver tissue. Our results showed that an amplified fragment of 427 bp DNA was detected in 18 of 19 (94.7 %) adjacent non-cancerous tissues and normal liver tissue, and in 12 (85.7 %) of 14 HCC. There were no significant differences in the levels of KLF6 mRNA between normal liver and liver tumors (P>0.05). It is concluded that KLF6 mRNA is generally expressed in HCC. 展开更多
关键词 kruppel-like factor 6 (KLF6) hepatocellular carcinoma (HCC)reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)
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三氟拉嗪对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的抑制作用 被引量:2
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作者 郑静 孙笑 +2 位作者 王晶 王丽华 王玉东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期609-612,共4页
目的观察盐酸三氟拉嗪(TFP)在体外对人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和增殖的影响,探讨可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度TFP体外干预对Ishikawa细胞生长的抑制作用,计算药物的半抑制浓度(IC50)并选择最佳作用时间。流式细胞仪分... 目的观察盐酸三氟拉嗪(TFP)在体外对人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和增殖的影响,探讨可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度TFP体外干预对Ishikawa细胞生长的抑制作用,计算药物的半抑制浓度(IC50)并选择最佳作用时间。流式细胞仪分析TFP对Ishikawa细胞周期的影响;Real-Time PCR检测TFP对Ishikawa细胞内叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)和抑癌基因Kruppel样因子6(KLF6)表达的调控作用。结果不同浓度TFP对Ishikawa细胞的生长均有抑制作用,呈剂量和时间依赖性,IC50为16.56μmol/L;20μmol/L作用24 h的抑制效果最佳。20μmol/L TFP干预Ishikawa细胞24 h,S期细胞比例明显降低(P<0.01),KLF6 mRNA表达显著上调(P<0.05)。结论三氟拉嗪体外干预可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的生长和增殖,其作用机制可能与抑癌基因KLF6表达上调有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 三氟拉嗪 细胞生长 细胞增殖 kruppel样因子6
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抑癌基因kruppel样因子6及其剪接体蛋白对HepG2细胞增殖和分化的影响
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作者 潘修成 陈智 +3 位作者 季芳 郭忠胜 陈明 傅涓涓 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期683-687,共5页
目的研究抑癌基因Kruppel样冈子(KLF)6及其剪接体蛋白对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和分化的影响。方法RTPCR扩增肝细胞癌组织中KLF6剪接体cDNA并测定其序列;构建KLF6剪接体真核表达喷粒pcDNA3.1A(-)/KLF6V。转染HepG2细胞后,经G41... 目的研究抑癌基因Kruppel样冈子(KLF)6及其剪接体蛋白对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和分化的影响。方法RTPCR扩增肝细胞癌组织中KLF6剪接体cDNA并测定其序列;构建KLF6剪接体真核表达喷粒pcDNA3.1A(-)/KLF6V。转染HepG2细胞后,经G418筛选获得稳定表达KLF6全长和其剪接体蛋白的HepG2细胞,分别命名为HepG2/KLF6和HepG2/KLF6V。四甲基偶氮唑盐法测定该两种HepG2细胞的增殖活性;同时分别以放射免疫法或Westernblot技术测定白蛋白、甲胎蛋白或P21^WAFI、细胞周期素D1蛋白在HepG2/KLF6或HepG2/KLF6V细胞中的表达情况。结果从肝细胞癌组织中扩增出一种KLF6剪接体,序列分析提示该剪接体缺失127nt,引起KLF6蛋白近羧基端缺失42个氨基酸;KLF6VmRNA在肝癌及癌旁组织均有表达,但癌组织表达水平明艟增高。HepG2/KLF6细胞牛长速度较慢而HepG2/KLF6V细胞增殖较快,同时HepG2/KLF6细胞P21^WAFI蛋白表达及白蛋白分泌水平明显高于HepG2/KLF6V细胞,而细胞周期素D1表达及甲胎蛋白分泌水平在HepG2/KLF6V细胞高于HepG2/KLF6细胞。结论肝细胞癌组织中存在KLF6剪接体,该剪接体能对抗全长KLF6基因抑制细胞生长、促进细胞分化等的功能。 展开更多
关键词 肝细胞 剪接体 基因 抑制 细胞分化 kruppel样因子6
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姜黄素通过miR-181a调控KLF6表达抑制骨肉瘤细胞的生长 被引量:1
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作者 白洋 黄纬 +2 位作者 张菲斐 李向辉 金杰 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2023年第3期298-303,315,共7页
目的:探讨姜黄素通过微小RNA-181a(miR-181a)调控锌指蛋白Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨肉瘤细胞生长的影响。方法:体外培养骨肉瘤细胞系U2OS细胞,将U2OS细胞分为对照组(不作处理)、姜黄素组(终浓度分别为5, 10, 20μmol/L姜黄素)、miR-... 目的:探讨姜黄素通过微小RNA-181a(miR-181a)调控锌指蛋白Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨肉瘤细胞生长的影响。方法:体外培养骨肉瘤细胞系U2OS细胞,将U2OS细胞分为对照组(不作处理)、姜黄素组(终浓度分别为5, 10, 20μmol/L姜黄素)、miR-181a阴性对照(miR-NC)组、miR-181a模拟物(miR-181a mimics)组、姜黄素(20μmol/L)+NC组、姜黄素(20μmol/L)+miR-181a mimics组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法与平板克隆形成实验检测各组U2OS细胞增殖情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-181a与KLF6 mRNA表达情况;蛋白印迹分析法检测各组U2OS细胞KLF6、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、Cyclin D1表达变化;双荧光素酶报告实验验证miR-181a与KLF6的靶向关系。结果:与对照组相比,随着姜黄素浓度升高,U2OS细胞存活率、细胞平板克隆形成率、Cyclin D1、Cyclin B1蛋白、miR-181a表达水平逐渐降低,KLF6表达水平逐渐升高,并呈浓度依赖性(P<0.05);经targetscan数据库预测显示,miR-181a与KLF6 mRNA 3’UTR区有结合位点,与KLF6-3’UTR-WT+miR-181a NC组比较,KLF6-3’UTR-WT+miR-181a mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05);与对照组及miR-NC组相比,miR-181a mimics组U2OS细胞存活率、细胞平板克隆形成率、Cyclin D1、Cyclin B1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),KLF6蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达miR-181a显著降低姜黄素对U2OS细胞增殖抑制作用。结论:姜黄素可抑制骨肉瘤细胞的生长,其作用可能是通过抑制miR-181a表达而调控KLF6表达实现。 展开更多
关键词 姜黄素 微小RNA-181a 锌指蛋白kruppel样因子6 骨肉瘤细胞 增殖
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