Kruppel样因子14介导的JAK-STAT信号通路对非小细胞肺癌预后的影响

目的探讨Kruppel样因子14(KLF14)介导的Janus激酶-信号转导子与转录激活子(JAKSTAT)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)预后的影响。方法收集2018年1月至2019年9月本院手术切除的80例NSCLC组织和25例癌旁非肿瘤组织。患者随访至2023年4月结束。采用免疫组织化学检测组织中KLF14表达,根据KLF14表达的中值水平将患者分为高表达组和低表达组。通过在A549细胞中转染KLF14、JAK1过表达质粒和在HCC827细胞中转染KLF14、JAK1特异性短发夹RNA(shKLF14、shJAK1)来过表达或敲低KLF14、JAK1。采用细胞克隆形成试验分析细胞的增殖活力。Transwell分析细胞的迁移、侵袭情况。结果与癌旁正常组织相比,KLF14在NSCLC组织中表达降低(P<0.001)。KLF14的低表达与肿瘤直径>3 cm、淋巴结转移、临床分期Ⅲ期显著相关(P<0.05)。在高KLF14表达组和低KLF14表达组之间的总存活率有显著差异,低KLF14表达的患者预后不良(P<0.05)。KLF14过表达后,A549细胞的增殖能力、迁移和侵袭细胞数均显著降低(P<0.05),而KLF14敲低后,HCC827细胞的增殖能力、迁移和侵袭细胞数均显著增加(P<0.05)。与Vector+KLF14组相比,JAK1+KLF14组A549细胞的集落数、迁移和侵袭数显著增加(P<0.05);而与shNC+shKLF14组相比,shJAK1+shKLF14组HCC827细胞的集落数、迁移和侵袭数显著降低(P<0.05)。结论KLF14低表达与NSCLC患者较差的总生存期相关。KLF14上调显著抑制肺癌细胞在体外的增殖、转移能力,其作用机制可能与抑制JAK-STAT信号通路有关。

急性缺血性脑卒中患者血清Kruppel样转录因子2水平表达与脑梗死体积及预后的相关性研究

目的 研究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清Kruppel样转录因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)水平表达与脑梗死体积及预后的关系,探讨KLF2对AIS脑梗死体积及预后不良的预测价值,并分析KLF2诱导AIS发生的可能机制。方法 收集2021年4月~2022年11月在空军军医大学第二附属医院收治的141例AIS患者为研究对象,并收集同期行健康体检者50例作为对照。根据Pullicino公式计算AIS脑梗死体积,分为小梗死灶组、中梗死灶组和大梗死灶组;根据改良Rankin量表(modified rankin scale,mRS)评分分为预后良好组和预后不良组;采用Pearson相关性分析血清KLF2表达与AIS患者脑梗死体积、预后及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)和鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)表达的相关性;绘制ROC曲线评估血清KLF2对AIS预后不良的预测价值。结果 AIS组患者血清KLF2(194.37±32.37pg/ml)水平显著低于对照组(242.85±17.39pg/ml);IL-6(13.70±2.89pg/ml),S1P(432.58±101.37pg/ml)和SphK1(2.65±0.58pg/ml)水平显著高于对照组(9.92±2.45pg/ml,259.15±78.24pg/ml,1.48±0.36 pg/ml),差异具有统计学意义(t=10.076,-8.253,-10.986,-13.367,均P <0.05)。小梗死灶组、中梗死灶组和大梗死灶组血清KLF2水平分别为217.69±33.14pg/ml,196.48±29.53pg/ml和168.94±31.62pg/ml,差异有统计学意义(F=25.753,P<0.001)。AIS预后良好组血清KLF2水平为211.83±28.46pg/ml,明显高于预后不良组的170.12±25.34pg/ml,差异有统计学意义(t=8.982,P<0.001)。血清KLF2水平与AIS脑梗死体积、预后及IL-6,SphK1水平呈负相关性(r=-0.607,-0.586,-0.480,-0.522,均P<0.05),与S1P水平无明显相关性(r=0.172,P>0.05);血清SphK1与S1P水平呈明显正相关(r=0.480,P<0.05)。血清KLF2预测AIS脑梗死体积(中~大梗死灶)和预后不良的AUC值分别为0.871和0.889,当截断值分别取206.1 pg/ml和192.37 pg/ml时,诊断灵敏度和特异度较高。结论 AIS血清中KLF2表达降低与患者脑梗死体积及预后关系密切,可作为AIS病情评估及判断预后不良的有效生物指标。血清KLF2表达与IL-6,SphK1水平存在明显相关性,KLF2可能调控SphK1/S1P途径参与神经炎症反应,介导AIS发生、发展,为临床研究及治疗提供了新的靶标。

微小RNA-98-5p靶向Kruppel样转录因子9对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨微小RNA(miR)-98-5p靶向Kruppel样转录因子9(KLF9)对大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤的保护作用。方法50只大鼠随机分为假手术组、模型组、miR-98-5p agomir组、agomir-NC组及miR-98-5p agomir+pcDNA-3.1-KLF9组,每组10只。通过冠状动脉结扎法建立MI/R注模型。HE染色观察心肌组织病理情况;TUNEL检测心肌组织细胞凋亡情况;ELISA检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;Real-time PCR检测心肌组织miR-98-5p、KLF9 mRNA表达水平;Western blotting检测心肌组织KLF9、Bax和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-98-5p与KLF9的关系。结果与假手术组相比,模型组大鼠心肌细胞排列较乱,出现坏死;心肌组织细胞凋亡率、血清CK、CK-MB、LDH含量均升高,心肌组织miR-98-5p表达水平下降,KLF9 mRNA和蛋白及p-JAK2和p-STAT3蛋白表达均升高(P<0.05)。过表达miR-98-5p后,大鼠心肌细胞排列较为整齐,心肌细胞坏死减少;心肌组织细胞凋亡率、血清CK、CK-MB、LDH含量及心肌组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均下降(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果验证KLF9是miR-98-5p的靶基因。过表达KLF9逆转了miR-98-5p agomir对心肌损伤大鼠产生的作用。结论MiR-98-5p靶向KLF9改善MI/R大鼠心肌损伤,其机制可能与miR-98-5p调控JAK2/STAT3信号通路抑制心肌细胞凋亡相关。

Kruppel样转录因子8的结构和功能多样性

Kruppel样转录因子8(KLF8)是KLFs家族中的一员,其在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构及氨基端可变的转录调节结构域,转录调节结构域含PVALS/T基序,在氨基端和羧基端内存在核定位序。KLF8在细胞侵袭和上皮-间质转化、细胞周期循环、细胞致癌性转化及各种肿瘤(肝癌、口腔癌、卵巢癌、胃癌)发生发展中发挥重要作用。

miR-216a抑制Kruppel样转录因子9调控核因子-κB信号通路对肾小管上皮细胞急性肾损伤的影响

目的探讨miR-216a对Kruppel样转录因子9(KLF9)的调控作用,及其对缺氧-复氧(H/R)诱导的肾小管上皮细胞急性肾损伤的影响。方法将293T细胞(人肾上皮细胞系)分为KLF9野生型载体、miR-216a mimics(类似物)+KLF9野生型载体、miR-216a NC(阴性对照)+KLF9野生型载体,利用荧光素酶报告基因验证miR-216a与KLF9的结合关系。H/R诱导大鼠肾脏近端肾小管上皮细胞,并转染miR-216a mimics,将大鼠肾脏近端肾小管上皮细胞系RPTC分为对照组,H/R组,H/R+miR-216a NC组,H/R+miR-216a mimics组。检测miR-216a、KLF9、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管生长因子A(VEGF-A)、尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)mRNA表达。结果 miR-216a mimics+KLF9野生型共转染组的荧光素酶活性显著低于KLF9野生型组、miR-216a NC+KLF9野生型共转染组的荧光素酶活性(P<0.05)。与对照组比较,H/R组和H/R+miR-216a NC组miR-216a[(0.56±0.11)及(0.48±0.06)比(1.00±0.00)]表达量下调(P<0.05),KLF9[(2.77±0.19)及(2.79±0.10)比(1.00±0.00)]、NF-κB p65[(2.35±0.02)及(2.42±0.27)比(1.00±0.00)]、TNF-α[(2.40±0.21)及(2.44±0.11)比(1.00±0.00)]、VEGF-A[(4.17±0.07)及(4.19±0.11)比(1.00±0.00)]、uPA[(2.28±0.05)及(2.38±0.13)比(1.00±0.00)]mRNA表达量上调(P<0.05);与H/R组和H/R+miR-216a NC组比较,H/R+miR-216a mimics组中miR-216a[(31.75±2.40),F=45.87,P=0.000]表达量上调,KLF9[(1.96±0.04),F=13.98,P=0.005]、NF-κB p65[(2.15±0.15),F=14.89,P=0.001]、TNF-α[(1.79±0.10),F=18.90,P=0.000]、VEGF-A[(3.65±0.04),F=15.94,P=0.000]、uPA[(2.06±0.11),F=14.22,P=0.001]mRNA表达量下调(P<0.05)。结论 miR-216a过表达通过靶向下调KLF9表达进而抑制NF-κB信号通路,降低肾小管上皮细胞急性肾损伤。

Krüppel样因子5在心血管疾病中的研究进展

心血管疾病是导致全球非感染性疾病死亡的首要原因,心血管疾病的发生给家庭和社会带来了极大的负担。Krü-ppel样因子(KLF)5是与DNA结合的转录因子,参与调节细胞发育、代谢等其他细胞机制。近年来研究发现,KLF5在心血管疾病如动脉粥样硬化、缺血再灌注、心肌肥厚、心肌代谢、糖尿病心肌病中的调控上也发挥了重要作用。我们综述了KLF5在心血管疾病中的研究进展,为以KLF5为靶点的心血管疾病治疗提供了新的策略。

Kuippel样因子6经活化转录因子4通路对晶状体上皮细胞凋亡的调控作用

目的以活化转录因子4（ATF4）为靶点，探讨Krüppel样因子6（KLF6）调控紫外线B（UVB）诱导的晶状体上皮细胞（HLECs）凋亡的分子机制。方法HLECs系（HLE-B3）进行常规培养，采用脂质体转染法将构建的真核表达质粒pEGFP-C2-ATF4转染HLECs作为UVB＋ATF4转染组，并用能量密度为20 mJ/cm2的UVB照射细胞；未转染的ATF4细胞作为正常对照组。采用苏木精－伊红染色法和Hoechst染色法观察ATF4对HLECs细胞形态学的影响。将培养的细胞分为KLF6转染组及相应空质粒对照组，小干扰KLF6（siKLF6）组（转染pSilencer-KLF6质粒）及相应的空载体对照组（转染pSilencer空质粒），采用Western blot法检测细胞中ATF4蛋白的相对表达量。将培养的细胞分为4个组，联合空载体组HLECs联合转染pEGFP-C2空载体和pSilencer空载体；KLF6＋pSilencer空质粒组HLECs联合转染pEGFP-C2-KLF6和pSilencer空载体；小干扰ATF4（siATF4）＋pEGFP-C2组HLECs联合转染pEGFP-C2空载体和pSilencer-ATF4；KLF6＋siATF4组HLECs联合转染pEGFP-C2-KLF6和pSilencer-ATF4，各组细胞均暴露于UVB 200 s，采用ELISA法检测上述各组HLECs凋亡值。结果正常对照组培养的HLECs大小均匀，排列整齐，细胞核呈卵圆形，数量多且完整；UVB照射后部分细胞核固缩，细胞间隙增大，少数细胞出现核分裂；UCB＋ATF4转染组细胞数量减少，多数细胞出现核固缩和核分裂。UVB＋ATF4转染组细胞中ATF4蛋白表达条带灰度明显强于UVB＋空载体组，ATF4蛋白相对表达量分别为0.99±0.06和0.13±0.02，差异有统计学意义（t＝23.13，P〈0.01）。KLF6转染组细胞中KLF6和ATF4蛋白相对表达量均明显高于其空载体对照组，siKLF6组细胞中KLF6和ATF4蛋白相对表达量均明显低于其空载体对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ELISA检测显示ATF4转染组HLECs凋亡值为1.37±0.11，明显高于正常对照组的0.31±0.11，差异有统计学意义（t＝8.034，P＝0.001）；KLF6＋pSilencer空质粒组细胞凋亡值明显高于联合空载体组，siATF4＋pEGFP-C2组细胞凋亡值明显低于联合空载体组，差异均有统计学意义（P〈0.01，P＝0.02）；KLF6＋siATF4组细胞凋亡率明显低于KLF6＋pSilencer空质粒组，差异有统计学意义（P〈0.01）。 结论KLF6通过活化ATF4促进UVB诱导的HLECs凋亡，ATF4基因沉默可使细胞凋亡值明显降低，因此ATF4可作为KLF6调控HLECs凋亡的靶因子，也是KLF6调控LECs凋亡的主要生物机制之一。

胃肠富集Kruppel样因子的研究进展

胃肠富集Kruppel样因子(GKLF)是一种新发现的真核锌指蛋白转录因子.他通过调节其下游目标基因的转录表达而在细胞周期调控、细胞的增生分化中担任重要的角色,他可能与肿瘤发生、发展有着密切的联系.现就GKLF的结构、调节、功能及其与肿瘤的关系等方面的研究进展做一综述.

Kruppel样因子6基因对巨噬细胞中胆固醇蓄积的影响

背景:研究表明,Kruppel样因子6与巨噬细胞极化密切相关。但是,关于Kruppel样因子6在巨噬泡沫细胞形成中的作用尚不清楚。目的:观察Kruppel样因子6过表达对氧化低密度脂蛋白刺激下的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)胆固醇蓄积及对ATP结合盒转运蛋白A1表达的影响。方法:取Raw264.7巨噬细胞株分别转染慢病毒空载体和重组载体p CDH-KLF6,作为对照组和Kruppel样因子6组,另取稳定感染慢病毒空载体的Raw264.7巨噬细胞株和稳定感染重组载体p CDH-KLF6的Raw264.7巨噬细胞株均加入50 mg/L氧化低密度脂蛋白共孵育48 h后,得到氧化低密度脂蛋白组和Kruppel样因子6+氧化低密度脂蛋白组。结果与结论:与对照组相比,氧化低密度脂蛋白组巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯表达水平显著增加(P<0.05)。与氧化低密度脂蛋白组巨噬细胞相比,Kruppel样因子6+氧化低密度脂蛋白组细胞内总胆固醇和胆固醇酯表达水平明显下降,胆固醇酯/总胆固醇明显降低(P<0.05)。而未加入氧化低密度脂蛋白处理的2组细胞内脂质表达水平少,且对照组与Kruppel样因子6组相比,细胞内脂质表达水平差异无显著性意义。提示Kruppel样因子6可能通过促进ATP结合盒转运蛋白A1的表达,抑制氧化低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积。

Kruppel样因子4抑制巨噬细胞向破骨细胞分化介导平滑肌细胞钙化

目的探讨Kruppel样因子4(KLF4)在巨噬细胞向破骨细胞分化中的作用及相关机制。方法提取雄性C57BL/6J小鼠腹腔原代巨噬细胞并鉴定,将其分为对照组,NF-κB受体激动剂配体(RANKL)组,共刺激组(KLF4抗体和RANKL共刺激4 d),用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞分化情况,用鬼笔环肽染色检测破骨细胞成熟程度;通过骨吸收陷窝实验测破骨细胞骨吸收能力;通过qRT-PCR检测破骨细胞分化相关基因表达,用钙盐染色检测血管平滑肌细胞钙化情况。结果TRAP染色显示,TRAP阳性细胞直径约100μm,细胞核>3个。共刺激组破骨细胞数量较RANKL组明显增多(P<0.05)。与RANKL组比较,共刺激组破骨细胞成熟程度进一步升高、陷窝面积及数量升高(P<0.05)。RANKL组较对照组相关破骨基因表达明显升高(P<0.05);共刺激组较RANKL组相关破骨基因表达明显升高(P<0.05),而血管平滑肌细胞钙化明显降低(P<0.05)。结论KLF4抗体可促进巨噬细胞向破骨细胞转分化,进而抑制平滑肌细胞钙化。

KLF转录因子家族与脂肪细胞分化

Kruppel样转录因子(Kruppel-like factors,KLF)是一类具有锌指结构的转录因子,其典型结构特征是在其羧基端具有3个C2H2锌指结构.KLF广泛参与细胞增殖、凋亡、分化以及胚胎发育等多个生命活动的调控.近年来脂肪细胞分化研究的结果显示,KLF家族的多个成员参与脂肪细胞分化过程的调控,既有促进脂肪细胞分化的,也有抑制脂肪细胞分化的.其中KLF4通过与Krox20协同作用,激活C/EBPβ(CCAAT-enhancer-binding proteinβ)基因表达,促进脂肪细胞分化;KLF5和KLF15都通过直接结合到氧化物酶增殖体激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)基因的启动子,激活PPARγ基因表达,促进脂肪细胞分化;而KLF6则通过抑制前脂肪细胞因子(pre-adipocyte factor1,PREF1)基因表达,促进脂肪细胞分化.抑制脂肪细胞分化的KLF2通过结合于PPARγ的启动子,抑制PPARγ基因表达,从而抑制脂肪细胞的分化;KLF3通过募集辅助抑制因子C-末端结合蛋白(c-terminal binding protein,CtBP)形成KLF3-CtBP抑制复合体,结合于C/EBPα(CCAAT-enhancer-binding proteinα)基因的启动子,抑制C/EBPα表达,进而抑制脂肪细胞的分化;KLF7通过抑制葡萄糖转运蛋白2(glucosetransporter2,GLUT2)基因的表达抑制脂肪细胞的成熟.本文综述这些KLF转录因子在脂肪细胞分化过程的作用及其作用的机制.

转录因子KLF6对大鼠趋化因子CCL5基因启动子活性的影响及其可能的结合部位

目的:构建大鼠趋化因子CCL5基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,检测大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)中过表达Kruppel样转录因子6(Kruppel-like factor 6,KLF6)对CCL5基因启动子活性的影响。同时,筛选KLF6与CCL5基因启动子区的结合位点。方法:采用PCR技术,将扩增出的大鼠CCL5基因启动子全长序列(-1744nt^-14nt)插入荧光素酶报告基因载体p GL3-basic中,获得CCL5基因启动子全长荧光素酶报告质粒(p GL3-CCL5-FL)。然后,将p GL3-CCL5-FL与大鼠野生型KLF6表达质粒(p IRES2/KLF6)共转染GMC,测定其荧光素酶活性。另用生物信息学软件预测CCL5基因启动子上KLF6潜在的结合位点,并据此构建出4个CCL5基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(即p GL3-CCL5-1~4)。将上述CCL5基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒分别与KLF6过表达质粒共转染GMC,再行荧光素酶活性的测定,初筛KLF6可能的结合部位。结果:菌液PCR以及核酸测序结果证实,上述所有启动子荧光素酶报告质粒均构建成功。p GL3-CCL5-FL和p IRES2/KLF6共转染GMC结果显示,CCL5基因启动子的活性显著增强。p GL3-CCL5-FL、p GL3-CCL5-1~4分别与p IRES2/KLF6共转染GMC后发现,p GL3-CCL5-4的启动活性显著降低。提示KLF6可能结合在CCL5基因启动子的-343nt^-191nt区域。结论:本实验成功构建了大鼠CCL5基因启动子全长及截短荧光素酶报告质粒,并初步筛查出KLF6在CCL5基因启动子上可能的结合部位在-343nt^-191nt区域。

KLF5转录因子对预测乳癌肺转移的临床意义

目的探讨Kruppel样因子5(KLF5)及其下游基因在乳癌组织中的表达,分析其与乳癌病理特点的相关性及在预测乳癌肺转移中的临床意义。方法应用免疫组织化学方法,检测乳癌肺转移乳癌组织(35例)、乳癌无肺转移乳癌组织(35例)、乳腺良性肿瘤组织(20例)及乳癌肺转移原发灶癌旁正常组织(20例)KLF5、肿瘤坏死因子-α诱导蛋白2(TNFAIP2)和β-连环蛋白(β-catenin)表达,分析各因子表达与乳癌肺转移病人临床病理特征间的关系,Kaplan-Meier生存分析模型分析各因子表达与乳癌病人5年无远处转移生存率(DFS)及总生存率(OS)的相关性,单因素卡方检验和多因素二元Logistic回归模型分析KLF5、TNFAIP2和β-catenin对乳癌肺转移风险的预测价值。结果乳癌肺转移组KLF5(χ^(2)=25.881,P<0.01)、TNFAIP2(χ^(2)=23.669,P<0.01)和β-catenin(P=0.002)阳性表达明显高于其他3组,乳癌肺转移组KLF5、TNFAIP2、β-catenin表达与组织学分级、脉管内癌栓有关(P=0.001~0.048);与年龄、分子亚型、ER、PR、HER-2、Ki67及生存状态无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,乳癌病人KLF5、TNFAIP2和β-catenin表达与DFS(χ^(2)=5.371~7.084,P<0.05)、OS(χ^(2)=4.152~7.670,P<0.05)显著相关。单因素和多因素分析表明,KLF5表达是乳癌发生肺转移的独立危险因素(HR=3.246,95%CI=1.197~12.046,P=0.034)。结论 KLF5、TNFAIP2和β-catenin在乳癌肺转移乳癌组织中高表达且KLF5可能为预测乳癌肺转移风险的分子标志物。

肺癌组织中转录因子Klf8的表达及下调肺癌细胞株中Klf8表达的生物学效应

目的:研究肺癌组织中转录因子Klf8的表达及下调肺癌细胞株中Klf8表达的生物学效应。方法:收集癌组织和癌旁正常肺组织,检测Klf8的mRNA含量;培养肺癌A549细胞株,转染Klf8的siRNA后测定细胞周期、细胞侵袭以及上皮-间质转化。结果:肺癌组织中Klf8的mRNA含量高于癌旁正常肺组织;转染Klf8的siRNA后,Klf8mRNA的抑制率为74.31%;Klf8siRNA组细胞中G0/G1期比例高于阴性对照siRNA组,S期细胞和G2/M期细胞比例、Cyclin D1的mRNA含量、侵袭至transwell微孔膜外侧面的细胞数目低于阴性对照siRNA组;Klf8siRNA组细胞中CDH1、CK18以及Snail、Slug的mRNA含量高于阴性对照siRNA组,VIM、N-cadherin的mRNA含量低于阴性对照siRNA组。结论:肺癌组织中Klf8表达量异常升高;下调肺癌细胞株中Klf8表达能够抑制细胞的恶性生物学效应,表现为细胞周期停滞、细胞侵袭过程和上皮-间质转化过程抑制。

Krüppel样因子家族在女性生殖系统疾病中的研究进展

女性生殖系统疾病很大程度上与雌、孕激素及其受体介导信号通路失调所致细胞增殖、凋亡和分化异常有关。这些核受体的精细调控是复杂的,许多核因子参与其中。Krüppel样因子(Krüppel-like factors,KLFs)是一组与真核细胞转录调控密切相关的锌指蛋白,在女性生殖系统中普遍表达,作为类固醇激素反应的共同调控者和整合者。KLF4在子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜和子宫内膜肿瘤中表达减少。围着床期,KLF5在子宫内膜容受性的形成中起重要作用,与胚胎成功植入有关。KLF6参与胎盘发育和妊娠的维持。KLF9对孕激素受体起正向调节作用,而对雌激素受体起到负向调节作用。KLF11是一种转录抑制因子,具有潜在地抑制子宫肌瘤、EMs异位病灶生长的功能。深入探讨KLFs的生物功能,对认识女性生殖系统疾病的发病机制有重要意义。

Krüppel样因子4在肝细胞癌发生发展中的作用机制

肝细胞癌发生发展机制复杂,目前尚未完全阐明。KLF4又称为胃肠富集Krüppel样因子,具有抑癌和促癌的双重调节作用。KLF4在肝癌中发挥抑癌作用,介绍了KLF4在肝癌发展过程中的生物学功能及调控机制,研究KLF4在肝癌中作用机制有望为肝癌的靶向治疗和预后监测提供新思路。

Kruppel样转录因子4在子宫内膜癌中作用机制的研究进展

子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,2018年全球女性发病率和死亡率为8.4/100 000和1.8/100 000[1],有数据显示,近年我国EC患者的病死率增速超过发病率增速,且发病年龄逐渐年轻化,美国癌症协会预计2022年美国子宫内膜恶性肿瘤新发6.6万余例,死亡1.2万余例[2]。EC发生发展的调节机制仍旧不清。

小干扰RNA沉默Kruppel样转录因子8对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响

目的 观察小干扰RNA （siRNA）沉默Kruppel样转录因子8（KLF8）基因对胃癌细胞MKN-28增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对KLF8的小干扰RNA（si-KLF8）,应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Westem blot技术检测转染后胃癌细胞中KLF8 mRNA和蛋白的表达,应用噻唑蓝（MTT）比色法检测转染24、48、72 h的细胞增殖能力的变化,应用Transwell小室实验检测转染48 h后胃癌细胞侵袭能力的变化.结果 si-KLF8和阴性对照siRNA （si-CTRL）成功转染至胃癌细胞;si-KLF8组KLF8 mRNA和蛋白的表达量明显低于阴性对照组和正常对照组（P＜0.05）;si-KLF8组增殖能力下降,24、48、72 h的吸光度值分别为0.125±0.003、0.193±0.005、0.223±0.005、0.267 ±0.003、0.315±0.006,穿膜细胞数为（42.0±3.6）个,均明显低于阴性对照组和正常对照组（P＜0.05）;阴性对照组和正常对照组比较,上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 si-KLF8可抑制人胃癌细胞的增殖和侵袭能力,提示KLF8在胃癌的发生发展过程中发挥着重要的作用.

动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1表达及其与认知功能的相关性研究

目的探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清Kruppel样因子5(KLF5)微小RNA(mRNA)和长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(lncRNA NEAT1)表达与认知功能的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月在该院进行开颅夹闭术的110例动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者作为研究对象。术后根据认知功能的评分分为认知功能正常(≥26分,对照组)和认知功能障碍(<26分,研究组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平;采用简易精神状态量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分评定患者的认知功能水平;采用Pearson相关分析血清KLF5 mRNA与lncRNA NEAT1的相关性及二者与认知功能障碍的相关性;采用多因素Logistic回归分析动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平单独及二者联合对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的诊断价值。结果对照组纳入67例患者,研究组纳入43例患者。术后早期研究组血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平均显著高于对照组,且术后早期血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平均显著高于术前,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组MMSE和MoCA评分均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平呈正相关(P<0.05),且二者均与MMSE和MoCA评分均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,KLF5 mRNA、lncRNA NEAT1高表达均为动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,KLF5 mRNA诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的曲线下面积(AUC)为0.814,lncRNA NEAT1诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的AUC为0.872,二者联合诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的AUC为0.950,二者联合诊断优于KLF5和lncRNA NEAT1各自单独诊断(Z联合vs.KLF5mRNA=2.547、Z联合vs.lncRNA NEAT1=3.268,P<0.05)。结论动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1表达升高与认知功能障碍有关,二者联合检测可以更好地预测认知功能障碍的发生。

上调KLF11可改善结肠炎模型小鼠的肠道炎症:基于抑制JAK2/STAT3信号通路

目的分析Kruppel样转录因子11(KLF11)在克罗恩病(CD)肠黏膜组织中的表达情况,并探究其对CD样结肠炎的作用和机制。方法以本院收集的CD患者结肠标本为实验组(CD,n=12),CRC患者结肠标本为对照组(Control,n=12),分析KLF11在病变和正常结肠黏膜组织中的表达差异;构建TNBS诱导的小鼠模型,分析KLF11在小鼠结肠黏膜组织中的表达情况;利用腺相关病毒感染上调KLF11在小鼠中的表达,并观察其对小鼠CD样结肠炎的影响;通过慢病毒感染构建Caco-2细胞KLF11高表达稳定体系,并利用体内外免疫印迹实验探究KLF11对JAK2/STAT3信号通路蛋白的影响;采用信号通路激动剂处理KLF11表达上调的小鼠,验证肠道炎症反应的相关机制。结果免疫荧光染色分析显示,病变肠黏膜组织中KLF11表达水平较低(P<0.05),而TNBS小鼠结肠标本KLF11表达水平同样较低(P<0.05);通过腺相关病毒感染小鼠发现,上调KLF11能够改善TNBS小鼠肠炎症症状,并降低肠黏膜炎症因子的表达水平(P<0.05);利用慢病毒感染Caco-2细胞,通过免疫印迹筛选KLF11稳定高表达的细胞株(P<0.05);体内外免疫印迹实验均显示,上调KLF11抑制了小鼠肠黏膜组织及Caco-2细胞中p-JAK2和p-STAT3的表达水平;经JAK2/STAT3激活剂香豆霉素A1(COU)干预后显示,上调KLF11未能改善小鼠肠道炎症,同时肠黏膜炎症因子表达水平增加(P<0.05)。结论KLF11在CD肠黏膜中低表达,上调KLF11能改善肠炎症状、减少炎症因子分泌,其可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路拮抗肠道炎症反应。