利用RT-PCR检测库尔勒香梨苹果茎痘病毒的研究

以库尔勒香梨新鲜、冷藏、冷冻叶片和皮层为材料 ,对提取双链RNA (dsRNA)的 2种方法和提取总RNA的 3种方法进行了分析比较 ,并对总RNA的提取方法进行了改进 ,获得了纯度较高、完整性较好的dsRNA和总RNA ,在此基础上进行了反转录 (RT)和PCR扩增。在国内首次完成了对苹果茎痘病毒 (ASPV)的RT PCR检测 ,建立了ASPV有效RT PCR反应体系。用此体系扩增到ASPV一个长约 316bp的片段。实验表明以dsRNA和总RNA为模板均能成功进行RT PCR检测 ,且dsRNA优于总RNA。