粉防己碱联合顺铂抑制宫颈癌细胞生长的作用和机制研究

目的:研究电压门控钾离子通道Kv10.1在宫颈癌中的表达,探讨Kv10.1特异性抑制剂粉防己碱(tetrandrine,TET)单独或与顺铂(cisplatin,DDP)联合使用对宫颈癌细胞生长抑制的作用及可能的分子机制。方法:免疫组化检测宫颈癌及正常宫颈组织中Kv10.1蛋白的表达情况。不同浓度的TET、DDP单药或联合处理宫颈癌SiHa细胞24 h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖能力,采用流式细胞技术检测细胞周期,采用Western Blot法检测各组细胞中Eag1及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平。向TET组与对照组加入PI3K激动剂740Y-P,采用细胞克隆技术检测细胞生长情况,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用划痕实验检测细胞迁移能力,采用实时荧光定量PCR检测细胞Kv10.1表达水平,并进行统计学分析。结果:Kv10.1在宫颈癌组织中的表达明显高于正常宫颈组织,两者差异具有统计学意义(P<0.05),TET、DDP单药及双药联合组均能抑制SiHa细胞的增殖,促进细胞凋亡,其效应呈浓度依赖性,以联合用药组效果最为显著(P<0.05)。Western Blot显示TET单药可降低Kv10.1、p-PI3K和p-Akt蛋白表达,与DDP联合作用后效果更显著(P<0.05);与TET组相比,TET+740Y-P组克隆、侵袭、迁移细胞数量及Kv10.1表达水平均明显增高(P<0.05);与740Y-P组相比,TET+740Y-P组克隆、侵袭、迁移细胞数量及Kv10.1表达水平明显下降(P<0.05)。结论:Kv10.1在宫颈癌组织中的表达显著上调,提示其可能与宫颈癌的发生发展相关。Kv10.1特异性抑制剂TET可抑制PI3K/Akt信号通路,下调Kv10.1,从而提高宫颈癌细胞对顺铂治疗的敏感性,为宫颈癌治疗中DDP的减毒增效提供策略。