一氧化氮合酶抑制剂L-NNA对福尔马林大鼠脑nNOS、iNOS表达的影响

目的 探讨一氧化氮合酶抑制剂L NNA对福尔马林实验大鼠脑一氧化氮合酶表达的影响。方法 应用免疫组织化学ABC法研究了nNOS、iNOS在福尔马林大鼠脑内的表达。结果 在福尔马林实验大鼠不同脑区 ,nNOS和iNOS表达较强。一氧化氮合酶抑制剂L NNA可抑制福尔马林实验大鼠脑nNOS、iNOS的表达 ,NO生成减少。结论 一氧化氮合酶抑制剂L NNA可通过抑制一氧化氮合酶作用 ,参与伤害性痛觉调制。一氧化氮在脑的痛觉调制过程中起重要作用。

灵芝孢子和L-NNA对脊髓损伤后背核线粒体细胞色素氧化酶活性的影响

目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用对大鼠脊髓半横断后受损伤的背核线粒体细胞色素氧化酶活性的影响。方法将20只SD成年雌性大鼠(200-250g)行右侧T11脊髓半横断30d后,对受损伤脊髓做细胞色素氧化酶酶组化染色;用图像分析方法检测L1脊髓段背核线粒体细胞色素氧化酶活性的变化,用酶组化电镜技术观察L1脊髓段背核细胞色素氧化酶活性的分布位置。结果与对照组相比,L-NNA组和灵芝孢子组L1脊髓损伤侧背核线粒体细胞色素氧化酶活性有所提高,灵芝孢子+L-NNA组损伤侧背核线粒体细胞色素氧化酶活性最大。各组L1脊髓背核细胞色素氧化酶活性均出现在线粒体内,具有细胞色素氧化酶活性的线粒体存在所有神经元胞体及其树突和轴突内,也存在于神经胶质细胞胞体及其突起内。结论灵芝孢子和L-NNA均可提高大鼠脊髓半横断后受损伤的脊髓背核线粒体细胞色素氧化酶的活性,两者联合应用更能提高受损伤的背核线粒体细胞色素氧化酶的活性。

IFN-γ和L-NNA对感染旋毛虫沙鼠血清和小肠的影响

目的 探讨IFN -γ和L -NNA对感染旋毛虫沙鼠血清和小肠NO水平的影响及其对小肠组织病理变化的影响。方法 (1)给予不同浓度的IFN -γ或L -NNA作用于正常和感染旋毛虫后不同时期的沙鼠 ,测定血清和小肠NO生成量。 (2 )观察小肠组织病理变化。结果 (1)在各期沙鼠血清和小肠中 ,IFN -γ表现为促进NO合成。 (2 )L -NNA表现出不同的影响。它抑制感染鼠血清NO生成 ,却促进正常鼠血清NO合成。在沙鼠小肠 ,L -NNA降低正常鼠及感染后 4 0d组NO水平 ,却促进感染后 7d、2 5d组NO的合成。 (3)小肠病理变化 :在给予IFN -γ或L -NNA组 ,药物低剂量组与未用药组相比无明显改变。高剂量组 ,可见肠组织破坏更严重 ,两种药物之间病变程度无明显差别。结论 (1)IFN -γ能促进血清和小肠NO合成。 (2 )L -NNA对感染后不同时期沙鼠血清和小肠的NO合成有抑制或促进作用。 (3)过高的NO产量能使小肠组织的炎症病变加重。

L-NNA抑制福尔马林大鼠脑原癌基因表达产物c-FOS、c-JUN的表达

目的 探讨一氧化氮合酶抑制剂L NNA对福尔马林实验大鼠脑内原癌基因表达产物c FOS、c JUN表达的影响。方法 应用免疫组织化学ABC法研究了c FOS、c JUN在福尔马林大鼠脑内的表达。结果 在福尔马林实验大鼠不同脑区都存在c FOS、c JUN的阳性表达 ,一氧化氮合酶抑制剂L NNA可抑制福尔马林实验大鼠脑内原癌基因表达产物c FOS、c JUN的表达。结论 一氧化氮合酶抑制剂L NNA可抑制原癌基因的表达 。

IFN-γ、L-Arg及L-NNA对感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成和组织病理变化的影响

目的探讨IFN-γ、L-Arg和L-NNA对感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成和组织病理变化的影响。方法经腹腔给予感染旋毛虫后不同时期的沙鼠不同剂量的IFN-γ、L-Arg和L-NNA,检测沙鼠血清及腓肠肌NO的含量。观察腓肠肌的病理变化。结果IFN-γ和L-Arg组沙鼠血清及腓肠肌NO含量随药物浓度的增加而升高;L-NNA阴性对照组血清NO含量和感染25 d的L-NNA组腓肠肌NO含量升高,L-NNA实验组血清NO含量及阴性对照组、旋毛虫感染7 d组4、0 d组腓肠肌NO含量降低。实验组腓肠肌内囊包数较阳性对照组略有减少。结论IFN-γ和L-Arg能促进感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成,L-NNA则具有增强或抑制NO合成的双重作用。

L-NNA对大鼠血流动力学的影响

目的研究N硝基左旋精氨酸(L-NNA)对麻醉大鼠血流动力学的影响。方法将32只SD大鼠随机分为4组:L-NNA 0.5mg/kg组、L-NNA 1mg/kg组、L-NNA 2mg/kg组和生理盐水对照组。静脉方式给药,用股动脉插管、右颈总动脉心室插管和连续记录肢体Ⅱ导联心电图的方法观察给药前和后5、15、30和60分钟大鼠的心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉血压(AP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左心室平均压(LVAP)、左心室终末舒张压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt max)、左心室开始收缩至dp/dt max的间隔时间(t-dp/dt max)、左心室内压最大下降速率(-dp/dt max)和等容舒张时间室内压下降的时间常数(T)的变化。结果静脉注射L-NNA 0.5、1和2 mg/kg 5、10和30分钟均能使大鼠心率显著加快(P<0.05),SBP升高(P<0.05或P<0.01),LVSP显著升高(P<0.05或P<0.01),对LVDP、-dp/dt max、t-dp/dt max和T值无显著性影响(P>0.05);静脉注射L-NNA 1和2 mg/kg后5、15和30分钟均能使麻醉大鼠DBP、AP、LVAP和+dp/dt max明显升高(P<0.05或P<0.01),对LVDP、LVEDP、t-dp/dt max、-dp/dt max和t值无显著影响(P>0.05)。结论N硝基左旋精氨酸有加快麻醉大鼠心率,升高动脉血压、增强心肌收缩功能的作用。

体外培养中IFN-γ、L-Arg及L-NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用

目的 探讨体外培养中IFN γ、L Arg及L NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用。 方法 分离、纯化长爪沙鼠腹腔巨噬细胞 ,置RPMI16 4 0培养液中培养。设IFN γ组、L Arg组、L NNA组和对照组 ,每个实验组又分 5个不同的浓度组。分别向含有巨噬细胞的培养瓶中加入不同浓度的IFN γ、L Arg及L NNA进行体外培养。培养 2 4h后 ,用硝酸还原酶法分别测定培养液中的NO含量。将旋毛虫幼虫分别加入上述培养体系中进行体外培养 ,观察旋毛虫幼虫的活动及损伤。结果 ①体外培养中 ,激活的巨噬细胞能产生NO ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,L NNA则能抑制NO的合成 ,这种促进或抑制NO合成的作用均具有剂量依赖性 ,剂量越高作用越明显。②加入旋毛虫幼虫后 ,在IFN γ和L Arg培养体系中 ,随着NO浓度的升高及作用时间的延长 ,对虫体的抑制及杀伤作用越来越明显 ,导致其活动度减弱 ,虫体破裂 ,最终死亡 ;在L NNA培养体系中 ,L NNA浓度越高 ,对虫体的影响越小。结论 ①体外培养中 ,通过激活的巨噬细胞 ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,给予L NNA则能抑制NO的合成。

L-Arg及L-NNA对旋毛虫病沙鼠小肠及肝NO合成和组织病理变化的影响

目的探讨L-Arg和L-NNA对感染旋毛虫的沙鼠小肠及肝NO合成和组织病理变化的影响。方法在感染旋毛虫后的早、中、晚期经腹腔给予沙鼠不同剂量的L-Arg和L-NNA,检测沙鼠小肠及肝组织NO的含量;观察小肠组织的病理变化。结果L-Arg组沙鼠小肠及肝NO含量均明显升高,且随药物浓度的增加而升高。给予L-NNA后,小肠组织实验7d组、25d组NO量明显高于阳性对照组,且随L-NNA剂量的增加而升高,40d组及阴性对照组NO量则明显低于阳性对照组(P<0.05),且随药物浓度的增加而降低;肝组织实验组NO量普遍明显低于阳性对照组(P<0.01),且随L-NNA剂量的增加及感染时间的延长而降低。高剂量组小肠组织的病理损伤加重。结论L-Arg能促进感染旋毛虫的沙鼠小肠及肝NO的合成,L-NNA则表现出不同的增强或抑制NO合成的双重作用。

L-NNA治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究

目的 观测Ｌ－ＮＮＡ治疗大鼠急性脊髓损伤后的行为学、脊髓神经元一氧化氮合酶（ＮＯＳ）、Ｎｉｓｓｌ体及其超微结构变化。方法 用运动评分和倾斜板评分法；ＮＡＤＰＨｄ组织化学技术、Ｎｉｓｓｌ法和透射电镜方法。结果 １．行为学变化：Ｌ－ＮＮＡ治疗组九鼠的后肢运动能力及倾斜板评分均较生理盐水对照组增强（Ｐ＜０．０１）；２、脊髓ＮＯＳ阳性神经元染色较生理盐水对照组浅．两组光密度比较 Ｐ＜０．０５；３．脊髓神经元 Ｎｉｓｓｌ染色，生理盐水对照组显示 Ｎｉｓｓｌ体移位、减少，甚至消失等现象，这些改变在Ｌ－ＮＮＡ治疗组较轻；４．超微结构观察，生理盐水对照组脊髓神经元胞质呈空泡样变．线粒体等细胞器变性，髓鞘严重变形，少数髓鞘呈线团状改变，常伴有高电于密度的块状沉积物。但Ｌ－ＮＮＡ治疗组脊髓神经元及大部分神经纤维的髓鞘结构清晰。结论 大鼠急性脊髓损伤可诱导神经元ＮＯＳ表达，Ｌ－ＮＮＡ可对其损伤修复起促进作用。

L-NNA对内毒素诱导的葡萄膜炎抑制作用的实验研究

目的 为了深入研究前葡萄膜炎的病理生理学变化 ,寻找治疗葡萄膜炎新的有效治疗方法 ,探讨其疗效机制。方法 采用大肠杆菌内毒素诱导的葡萄膜炎的动物模型 (endotoxin induceduveitis ,EIU) ,用一氧化氮合成酶抑制剂———氮 -硝基左旋精氨酸 (N nitro L arginine ,L NNA)进行实验性治疗 ,以地塞米松 ,生理盐水注射液为对照组。结论 L NNA可以明显抑制EIU的葡萄膜炎症状 。

施万细胞和L-NNA对脊髓半横断后脑干红核神经元存活的影响

目的 探讨移植施万细胞 (SCs)和应用一氧化氮合酶抑制剂L 硝基精氨酸 (L NNA)能否促进脑干红核受损伤的神经元存活。 方法 2 0只成年SD雌性大鼠分为 :对照组、SCs组、L NNA组和SCs +L NNA组。在胸11脊髓段半横断后立即在损伤处植入SCs,术后腹腔注射L NNA。 结果 脊髓半横断后 30d ,对照组和L NNA组大鼠受损伤侧红核的神经元密度明显降低 ,但两组间无明显差异 ;两组受损伤侧红核神经元的NOS表达阴性。SCs组和SCs +L NNA组大鼠受损伤侧红核的神经元密度明显增加 ,两组间无显著差异 ;两组受损伤侧红核神经元NOS表达也呈阴性。 结论 移植的SCs能够促进受损伤的红核神经元存活。NOS可能不参与影响受损伤红核神经元的存活过程 ,因而L NNA对受损伤红核神经元的存活没有作用。

附子、美西律、依那普利合用对L-NNA所致高血压小鼠的影响

目的:探讨附子、美西律、依那普利合用对L-NNA所致高血压小鼠模型的影响。方法:将雄性ICR小鼠随机分为8组:正常对照组、L-NNA模型组、L-NNA+附子组、L-NNA+依那普利组、L-NNA+附子+依那普利组、L-NNA+附子+依那普利+美西律组、L-NNA+附子+美西律组、L-NNA+美西律组。采用持续10天灌胃给予L-NNA(700mg/kg·d-1)的方法造高血压小鼠模型。造模成功后,各组持续10天分别给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液、L-NNA、L-NNA+附子水煎液、L-NNA+依那普利、L-NNA+附子水煎液+依那普利、L-NNA+附子+依那普利+美西律、L-NNA+附子+美西律、L-NNA+美西律。给药10天后,测定各组小鼠的血压,血清中NO含量,心、肝、肾匀浆中NO和MDA的含量。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠血压明显升高,血清和心、肝、肾组织中的NO含量降低,MDA含量升高,单独给予附子和依那普利的治疗组小鼠血压及生化指标显著改善,但两种药合用后降压效果消失;而在合用附子和依那普利的基础上给予美西律,其降压和升高血清、心、肝、肾中NO的效果比附子和依那普利合用有所提高。结论:附子和依那普利合用有明显的拮抗作用,提示附子的作用机制与RAAS系统有关,美西律能减弱附子和依那普利的拮抗作用。

L-NNA对大鼠急性脊髓损伤的影响

实验采用雌性 Wistar大鼠 41只 ,分为正常对照组、生理盐水对照组和 L - NNA治疗组 ,后两组制成不完全性(2 18克厘米力 )急性脊髓 (第 10胸髓 )损伤模型 ,于术后每天一次腹腔注射 L - NNA (2 0 m g/ kg)或等量生理盐水 ,连续四周 ,然后处死动物 ,行脊髓 NOS染色和超微结构观察。结果显示 ,L - NNA治疗组脊髓 NOS阳性神经元染色较生理盐水对照组浅 ,两组光密度比较 P<0 .0 5 ;超微结构观察 ,生理盐水对照组脊髓神经元胞质呈空泡样变 ,线粒体等细胞器变性 ,髓鞘严重变形 ,少数髓鞘呈线团状改变 ,常伴有高电子密度的块状沉积物。但 L - NNA治疗组脊髓神经元及大部分神经纤维的髓鞘结构清晰。因此我们认为 ,大鼠急性脊髓损伤可诱导神经元 NOS表达 ,L - NNA对其损伤修复起促进作用。

林檎叶提取物对N_(ω)-硝基-L-精氨酸(L-NNA)诱导KM小鼠高血压的预防效果

该研究旨在探讨林檎叶在L-NNA诱导的小鼠高血压模型中的预防作用。林檎叶提取物可降低高血压小鼠收缩压(SBP)、平均血压(MBP)、舒张压(DBP)。林檎叶提取物作用高血压小鼠后,小鼠血清、心脏、肝脏、肾脏、胃中的一氧化氮(NO)含量均高于模型组,丙二醛(MDA)含量低于模型组。林檎叶提取物作用高血压小鼠后血清内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、E-selectin水平降低,但降钙素基因相关肽(CGRP)水平升高。林檎叶提取物作用高血压小鼠可使小鼠心脏和血管组织中的血红素加氧酶-1(HO-1)、神经元型一氧化氮合酶(n NOS)、内皮型一氧化氮合成酶(e NOS)、受体活性修饰蛋白2(RAMP2)mRNA表达上调,肾上腺髓质素(ADM)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)表达下调。分析结果显示,林檎叶提取物含有金丝桃苷、异槲皮苷、二氢槲皮素、槲皮苷、橙皮苷、杨梅素、异黄芩苷、新橙皮苷二氢查尔酮、槲皮素,含量分别为104.92、83.05、15.14、242.83、60.24、13.87、125.53、11.23、28.92 mg/g。同时高浓度林檎叶提取物具有更好的预防作用,与高血压药物卡托普利相近。这些结果表明,林檎叶对实验性高血压具有良好的预防作用。

The Acute Physiological Effects of the Vaso-Active Drug, L-NNA, a Nitric Oxide Synthase Inhibitor, on Renal and Tumour Perfusion in Human Subjects

Purpose: To assess the baseline variation in global renal and tumour blood flow, blood volume and extraction fraction, and changes in these parameters related to the acute physiological effects of a single dose of a non selective inhibitor of nitric oxide synthase, L-NNA. Materials & Methods: Ethical approval and informed consent were obtained for this Phase I clinical study. Patients with advanced solid tumours refractory to conventional therapy were recruited and given L-NNA intravenously at two different dose levels. Volumetric perfusion CT scans were carried out at 1, 24, 48 & 72 hours post L-NNA. Blood pressures were taken at regular interval for 6 hours after LNNA. Results: L-NNA was well tolerated by the four patients who received it. Blood flow (BF) and blood volume (BV) in both tumour and kidney were reduced post L-NNA administration (renal BF—20%;renal BV—19.7%;tumour BF—16.9%;tumour BV—18.6%), though the effect was more sustained in tumour vasculature. A negative correlation was found between the change in systemic blood pressure and vascular supply to the tumour within 1 hour following L-NNA (p 0.0001). Differences in response to L-NNA by separate target lesions in the same patient were observed. Conclusion: The differential effect of L-NNA on tumour and renal blood flow, and the absence of any significant toxicity in this small cohort of patients permit further dose escalation of L-NNA in future early phase trials. The predictive value of blood pressure change in relation to the acute effect of L-NNA on tumour vasculature deserves further evaluation.

红曲对L-硝基精氨酸高血压大鼠降压作用初探

在本实验室建立L-硝基-精氨酸(L-NNA)高血压大鼠模型,探讨红曲(monascus)对该类高血压模型大鼠的降压功效。并考察其血中内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量变化。雄性Wistar大鼠共20只正常对照组(C组)8只;L-NNA模型对照组(L组)6只;红曲组(L+M组)6只。使用放免法测定血浆ET和CGRP含量。L-NNA模型对照组与正常对照组相比,血浆ET明显升高(p<0.05);血浆CGRP略有下降但不具有统计学意义(p=0.8342);ET/CGRP比值明显升高(p<0.05)。红曲组血浆ET含量极显著低于L-NNA模型对照组(p<0.001)。实验结果提示血中ET的大幅度上升导致ET与CGRP之间平衡被打破,这一变化可能参与了L-NNA引起的大鼠高血压模型的产生;红曲有可能是通过降低L-NNA高血压模型大鼠血中ET水平而发挥降压作用的,但其作用机理有待进一步研究。

L-精氨酸对2型糖尿病大鼠胃排空功能的影响

观察氮-硝基-左旋精氨酸(L-NNA)和左旋精氨酸(L-Arg)对糖尿病大鼠胃排空的影响。实验结果表明,糖尿病大鼠早期静脉给L-NNA后,各测定值与糖尿病对照组差异显著(P<0.01),与正常对照组无差异(P!0.05);糖尿病大鼠延迟应用L-Arg后,各值也与糖尿病对照组差异显著(P<0.01),但未能恢复到正常对照组水平(P<0.01)。所以,糖尿病早期应用L-NNA能明显改善糖尿病大鼠胃排空延迟,保护调节胃动力。

硝基-L-精氨酸对脑梗死患者血浆内皮素含量的影响

目的探讨硝基-L-精氨酸对脑梗死的作用。方法用硝基-L-精氨酸治疗10例急性脑梗死患者(治疗组),与10例单用低分子右旋糖酐加胞二磷胆碱组(对照组)进行对比,观察脑梗死患者神经功能缺损程度与血浆内皮素的变化。结果治疗组患者其神经功能缺损程度的改善较对照组显著,总有效率为90.0%,总显效率60.0%,疗效优于对照组(分别为80.0%和40.0%,P<0.05)。患者血浆内皮素含量于硝基-L-精氨酸治疗3d后与对照组相比下降(P<0.05)。结论硝基-L-精氨酸能抑制血浆内皮素的生成与释放,对脑梗死有治疗作用。

灵芝孢子和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核、红核神经元存活及轴突再生的影响

目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂(L-NNA)联合应用能否促进脊髓半横断后受损伤的背核和红核神经元存活及其轴突再生。方法30只成年雌性大鼠被分为对照组、L-NNA组、灵芝孢子低剂量组、灵芝孢子低剂量+L-NNA组、灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组。灵芝孢子高剂量+L-NNA组动物在T11脊髓段半横断后注射L-NNA和胃饲高剂量灵芝孢子。结果脊髓半横断后30 d,对照组L1脊髓损伤侧背核神经元数量减少,NOS表达阳性。L-NNA组和灵芝孢子低剂量组损伤侧背核神经元增加,但NOS表达降低。灵芝孢子低剂量+L-NNA组和灵芝孢子高剂量组损伤侧背核神经元明显增加,NOS表达显著降低。灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧背核神经元最多,NOS表达最低,而且有些神经元胞体被荧光金标记。对照组和L-NNA组损伤侧红核神经元密度降低。灵芝孢子低剂量组和灵芝孢子低剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度提高。灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量+L-NNA组损伤侧红核神经元密度明显提高。结论灵芝孢子和L-NNA都能促进脊髓半横断后受损伤背核神经元的存活,两者联合应用能更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生。灵芝孢子也能促进受损伤的红核神经元存活。

大鼠体内硝基精氨酸的手性代谢动力学

目的 应用毛细管电色谱 (CEC)对大鼠体内的硝基精氨酸手性转化和代谢动力学进行研究。方法 采用手性配体交换法检测大鼠血浆中D型硝基精氨酸 (D NNA)和L型硝基精氨酸(L NNA)的浓度,应用非房室模型对所获得的血药浓度-时间数据进行拟合,计算药动学参数。结果 D NNA和L NNA在大鼠体内代谢具有明显的异构体选择性,清除率分别为(0 46±0 02)ml·h-1·kg-1和(0 17±0 03)ml·h-1·kg-1 (P<0 05 );T1 /2分别为 ( 1 44±0 28 )h和(3 48±0 41)h(P<0 05)。D NNA到L NNA的单项手性转化率为(50 03±8 5)%。结论 D NNA和L NNA在大鼠体内的代谢有明显的异构体选择性 (其差异可能主要源于D NNA到L NNA的单向手性转化)。