高效液相色谱法评定二肽水解的研究

用高效液相色谱法测定了仔猪小肠刷状缘膜囊 (BrushBorderMembraneVesicles ,BBMV)孵育体系中甘 -L -亮 (Gly -Leu)和L -组 -L -亮 (His -Leu)等两种二肽的含量。分别以水 (pH值为 5 .5 5 )和乙腈 -三氟乙酸 (三氟乙酸浓度为 0 .1% )为流动相 ,经PhenomennexODS分析柱(2 5 0mm× 4 .6 0mm ,5 μm ,C18)分离 ,检测波长为 190～ 4 0 0nm。结果表明 ,两种二肽在 0～30 0 μgmL- 1的之间 ,其峰面积 (X)对质量浓度 (Y ,μgmL- 1)回归得方程分别Y =0 .0 0 0 1X +0 .8719,R2 =0 .9999和Y =0 .0 0 0 0 6X +6 .6 312 8,R2 =0 .9982 ;回收率依次为 99.91%和10 0 .0 5 % ,保留时间依次为 2 .0 7和 1.0 1min ;最大吸收波长依次为 197和 199nm。该方法快速、简便和准确 ,结果稳定 ,重现性好 ,可以用来评定该两种二肽在动物小肠BBMV体系中的水解状况。