从牛乳中分离出L型分枝杆菌

最近,L型分枝杆菌已引起研究者们的重视,这种微生物部分或完全丧失细胞组织,但在人工培养条件下,保持与自身结构相同的再生能力。他们是变形的生存并有繁殖能力的微生物。等报道,在许多农场中结核病的复发与L型分枝杆菌的持久感染有关。认为。

耐多药肺结核与结核分枝杆菌L型感染的临床研究

目的 :探讨结核分枝杆菌L型在耐多药肺结核形成及治疗过程中的变化规律 ,提高痰菌阴性肺结核的阳性诊断率。方法 :对 60例耐多药肺结核 ,40例无耐药初治肺结核病人分别于治疗前 ,治疗 1个月 ,治疗 3个月做痰结核分枝杆菌培养和结核分枝杆菌L型检测。结果 :初治无耐药肺结核分枝杆菌L型阳性率 (12 5 % )明显低于耐多药肺结核 (5 3 3 % )。随着耐药种类的增多 ,结核分枝杆菌L型阳性率增高 ;痰菌阴性的肺结核患者痰结核分枝杆菌L型仍可阳性。结论 :耐多药肺结核病人有较高的结核分枝杆菌L型感染率 ;复治 ,病情进展恶化 。

结核分枝杆菌L型研究现状与兽医临床

细菌L型（bacterial L-forms）是细菌在体内外受到各种直接或间接损伤细胞壁的理化和生物因素的影响,其细胞壁受到破坏或细胞壁的合成受阻而转化成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌（cell Wall-de-ficeint bacteria,CWDB）。结核分枝杆菌（Myco-bacterium Tuberculosis）也同其它细菌一样,在干扰细胞壁合成或破坏细胞壁结构的因素作用下以及在自然生长繁殖的过程中，发生细胞壁缺陷形成L型（MTB—L）。

尘肺并发结核患者耐多药结核分枝杆菌L型异烟肼耐药基因katG序列突变特点分析

目的探讨淮南矿区尘肺并发结核患者感染耐多药结核分枝杆菌(multiple drugs resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-MTB)L型异烟肼耐药基因katG突变特点。方法收集114株MTB菌L型临床分离株,用药敏试验鉴定MDR-MTB菌L型;抽提MDR-MTB L型和H37Rv标准菌株DNA,PCR法扩增katG基因,并对katG基因的突变集中区域进行测序分析。结果从114株临床分离株中检出MDR-MTB菌L型31株(27.2%),其katG基因突变率为61.3%(19/31);主要集中在315位点碱基置换突变,以Ser315Thr为主(AGC→ACC)(48.4%,15/31),其次是315位点Ser315Asn(AGC→AAC)突变(9.7%,3/31)以及431位点Ala431Val(GCG→GTG)突变(3.2%,1/31),未发现多位点联合突变,12株(38.7%,12/31)未发现katG基因突变;随机检测的10株异烟肼敏感株未见katG基因单链构象异常。结论淮南矿区尘肺并发结核患者感染的MDR-MTB菌L型异烟肼耐药情况较为严重,高度保守的katG基因突变是导致异烟肼耐药的分子基础,其突变位点呈多样性。

结核分枝杆菌L型检测对比噬菌体D29在结核病诊断和治疗的价值

目的结核分枝杆菌L型(MTB-L)检测对比噬菌体D29在结核病诊断和治疗上的价值。方法用噬菌体D29生物扩增法和改良痰IK抗酸染色涂片法、BACTEC MGIT960培养法、结核分枝杆菌L型培养法,对206例活动性结核病患者和160例非活动性结核病患者的晨痰进行结核分枝杆菌L型检测。结果与噬菌体D29生物扩增法相比较,改良痰IK抗酸染色涂片法和BACTEC MGIT960培养法在MTB-L检测上的灵敏度较低(P<0.0167),噬菌体D29生物扩增法较之MTB-L培养法,特异度差异不大。噬菌体D29对非活动性结核病患者的MTB-L检出率为26.9%;对结核病复治患者的MTB-L检出率为78.8%,显著高于初治患者的检出率51.6%(P<0.05);对耐药结核病患者的MTB-L检出率为83.8%,显著高于药敏患者检出率39.6%(P<0.05)。结论噬菌体D29在结核分枝杆菌L型的检测上具有灵敏度高、特异性高、方便快捷的特点,适合在结核病诊断上推广。噬菌体D29具有开发成为对抗结核病复发和耐药药物的潜力。

矽肺结核患者结核分枝杆菌L型感染情况调查

目的 研究矽肺结核患者结核分枝杆菌 L型的感染状况及其临床意义。方法 对矽肺结核组与矽肺组患者进行痰结核分枝杆菌和结核分枝杆菌 L 型培养 ,并采用 IK染色法对培养物作进一步鉴定。结果 矽肺结核组 12 6例患者中 ,结核分枝杆菌培养阳性 18例 ,检出率为 14 % ;结核分枝杆菌 L型培养阳性 6 4例 ,阳性率为5 1% ,两者相比差异极其显著 (P <0 .0 0 1)。且矽肺期别越高 ,痰结核分枝杆菌 L型的阳性检出率也越高 ( 期为38%、 期为 6 7%、 期为 91% ) ,各期患者间差异极其显著 (P <0 .0 0 1)。矽肺组 10 2例患者中 ,结核分枝杆菌培养均为阴性 ,而结核分枝杆菌 L型培养阳性 8例 ,阳性率为 8%。结论 矽肺结核患者结核分枝杆菌 L型的感染率较高 ,开展结核分枝杆菌 L 型检测 ,对减少矽肺结核复发的漏诊或误诊、提高矽肺结核的早期诊断率有着重要的意义。

结核分枝杆菌稳定L型耐乙胺丁醇embB基因的研究

目的探讨结核分枝杆菌L型形成乙胺丁醇耐药性的分子机制。方法采用非高渗分离培养法在不含乙胺丁醇与含乙胺丁醇的液体培养基内诱导形成结核分枝杆菌L型,过滤传代后获得稳定L型纯培养物。通过nPCR扩增、PCR-SSCP及PCR-DS技术分别对自发形成与诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型耐乙胺丁醇embB基因进行检测和分析。结果自发形成及药物诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型embB基因的nPCR及PCR-SSCP结果显示,与其亲代细菌型一致的DNA条带和带型;测序结果显示稳定L型embB基因序列与其亲代细菌相同没有发生改变,其结果与PCR-SSCP分析结果一致。结论 PCR-SSCP和PCR-DS技术可用于结核分枝杆菌L型耐乙胺丁醇基因的检测;无论是自发形成或药物诱导形成的稳定L型embB基因未发生突变,提示结核分枝杆菌L型对乙胺丁醇的耐药性同embB基因突变无关,细胞壁缺陷变异可能是导致结核分枝杆菌产生乙胺丁醇耐药性的一个重要机制。

原位聚合酶链反应检测结核分枝杆菌L型的初步研究

目的 :建立一种不需提取DNA的检测分枝结核杆菌L型的分子生物学方法。方法 :采用原位聚合酶链反应 (原位PCR)技术 ,扩增结核杆菌L型及其感染的人和小鼠血标本中的结核杆菌IS 6 110基因 ,再用免疫组化技术显色。结果 :结核杆菌L型菌株中的DNA被扩增 ,血标本中 ,可见到红细胞和淋巴细胞周围粘附大量结核杆菌DNA阳性颗粒。结论 :红细胞和淋巴细胞具有免疫粘附功能 ;原位PCR快速、简便 ,可用于检测稳定和不稳定分枝杆菌L型。

结核分枝杆菌L型的培养及临床研究

目的探讨肺结核患者结核分支杆菌L型培养结果与临床状况的关系。方法对151例活动性肺结核、31例非活动性肺结核、27例非肺结核作痰结核分支杆菌L型培养,并分别作痰抗酸涂片、培养、PCR检测,结核分支杆菌L型培养阳性病例进行病程长短、初复治、有无空洞的比较;对70例活动性肺结核、12例非活动性肺结核作外周血结核分支杆菌L型培养。结果151例活动性肺结核、31例非活动性肺结核、27例非肺结核痰结核分支杆菌L型培养阳性分别为30例、3例、0例,其中87例抗酸染色与罗氏培养均阴性的活动性肺结核结核分支杆菌L型培养阳性12例(13.79%)。病程大于12月者明显高于小于1月者(P<0.01),复治病人明显高于初治病人(P<0.01),有空洞者明显高于无空洞者(P<0.05)。结论结核病患者L型结核菌的存在是结核病难治、复发的主要原因之一。开展痰、血等标本的结核分支杆菌L型检测,对于提高结核病诊断正确率有重要意义。

PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌L型rpsL耐药基因

目的探索尘肺结核患者感染的结核分枝杆菌(MT)L型的耐药基因rpsL突变与耐受链霉素(SM)的关系。方法用PCR-SSCP方法检测rpsL基因,与采用常规SM药敏试验(AST法)的结果进行对比分析。结果采用AST法检测,52株结核分枝杆菌L型临床分离株中共有26株(50.0%)耐SM;PCR-SSCP法检出rpsL基因突变率为40.4%(21/52),2种方法检测耐药株的符合率为80.8%。结论结核杆菌L型对SM的耐药与rpsL基因突变有关。

3种方法检测结核分枝杆菌L型的诊断特性比较

目的:比较结核分枝杆菌L型的3种检测方法的诊断意义。方法:对103例耐多药肺结核患者的痰标本分别采用萋-尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法、聚合酶链反应(PCR)和结核分枝杆菌L型培养法进行检测。通过计算敏感度、特异度和阳性率指标,判断联合检测的准确程度和可靠程度。结果:结核分枝杆菌L型培养与抗酸染色法联合检测准确程度高于与PCR的联合检测,敏感度和特异度同时达到100%;L型培养法重复检测一次Bayes阳性预告率也达96.2%。结论:结核分枝杆菌L型培养与抗酸染色法联合检测准确程度高,重复性好。

糖尿病合并肺结核患者结核分枝杆菌L型感染的研究

目的研究糖尿病合并肺结核患者结核分枝杆菌L型的感染情况,探讨其对临床的指导意义。方法选取2009年1月至2011年12月淮南东方医院总院收治的初诊肺结核患者128例。其中,糖尿病合并肺结核患者60例(研究组),单纯涂阳肺结核(没有合并糖尿病)患者68例(对照组)。两组患者均进行痰结核分枝杆菌细菌型和L型培养,并对培养物进行涂片镜检、鉴定,同时对L型培养物进行PCR鉴定,并对所分离到的L型菌株进行回复性的实验。结果研究组60例糖尿病合并肺结核患者中,结核分枝杆菌细菌型培养阳性13例(21.67%),L型培养阳性28例(46.70%),两者之间差异极其显著(χ2=7.86,P<0.05);其中糖化血红蛋白(HbA1c)≤6.5%的糖尿病合并肺结核患者L型阳性检出率为33.40%,糖化血红蛋白(HbA1c)>6.5%L型阳性检出率为86.10%;两者之间差异显著(χ2=8.76,P<0.05)。经PCR鉴定,28例L型培养阳性物中,23例呈阳性反应,5例呈阴性反应。对照组68例单纯性肺结核患者中,细菌型培养阳性38例(55.89%),L型培养阳性4例(5.89%),PCR鉴定均呈阳性反应。结论糖尿病患者合并肺结核后结核分枝杆菌L型的感染率较高;其中血糖控制不佳的患者结核分枝杆菌L型的感染率比血糖控制较好的患者感染率高。大多数结核分枝杆菌L型具有回复为细菌型而导致结核病的内源性复发的潜在倾向。糖尿病是并发结核的高危因素,我们通过结核分枝杆菌L型检测可以发现隐藏的糖尿病合并肺结核阳性患者,减少漏诊、误诊现象。而治疗效果不佳的糖尿病合并肺结核患者,能通过结核分枝杆菌L型的检测证实有结核分枝杆菌L型的存在,能够及时调整治疗方案,提高诊疗效果,缩短病程。取得良好的社会效益。

p^(16)和bcl-2基因与结核分枝杆菌L型感染在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨p16抑癌基因和bcl-2凋亡抑制基因及结核分枝杆菌L型感染与前列腺癌的生物学行为。方法采用抗酸染色、免疫组化和核酸原位杂交等方法检测了58例前列腺癌患者中的结核分枝杆菌L型的检出率及p16和bcl-2基因的表达。结果58例前列腺癌中结核分枝杆菌L型检出率为37.9%(22/58),结核分枝杆菌抗原阳性表达为39.7%(23/58);p16蛋白表达阳性率51.7%(30/58),失表达率48.3%(28/58),其中Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的p16蛋白失表达率各为21.1%、56.3%、85.7%(P<0.05),p16mRNA失表达率分别为20%、40%、80%(P<0.05),而bcl-2蛋白表达阳性率60.3%(35/58),Ⅰ级、Ⅱ及、Ⅲ及分别为31.6%、68.8%、100%,bcl-2mRNA阳性表达率各为20%、60%、100%(P<0.05)。结论细菌L型感染可能和bcl-2、p16基因协同在前列腺癌发生和发展中起重要作用。p16基因的缺失、突变和高甲基化,bcl-2基因的异常表达在前列腺癌的发生和发展中起重要的作用。

矽肺结核患者结核分枝杆菌L型感染率调查(英文)

[目的]研究矽肺结核患者结核分枝杆菌L型的感染状况及其临床意义。[方法]对矽肺结核组与矽肺组患者进行痰结核分枝杆菌和结核分枝杆菌L型培养,并使用IK(intensifiedKinyoun)染色法对培养物作进一步鉴定。[结果]矽肺结核组126位患者中,结核分枝杆菌培养阳性18例,检出率为14％;结核分枝杆菌L型培养阳性64例,阳性率为51％,两者相比差异极其显著(P<0.001)。且矽肺期别越高,痰结核分枝杆菌L型的阳性检出率也越高(Ⅰ期为38％、Ⅱ期为67％、Ⅲ期为91％),各期患者间差异极其显著(P<0.001)。矽肺组102位患者中,结核分枝杆菌培养均为阴性,而结核分枝杆菌L型培养阳性8例,阳性率为8％。[结论]矽肺结核患者结核分枝杆菌L型的感染率较高,开展结核分枝杆菌L型检测对减少矽肺结核复发的漏诊或误诊,提高矽肺结核的早期诊断率方面有着重要的意义。

某矿区煤工尘肺结核患者结核分枝杆菌L型的耐药性分析

对某矿区煤工尘肺结核患者痰标本分离的32株结核分枝杆菌L型进行回复试验及药物敏感性检测。结果有24株(75.0%)回复为细菌型;且32株L型均为耐药株,对INH、RFP、EMB、SM耐药率分别为75.0%、90.6%、78.1%、50.0%,其中多耐药株27株;单耐药株5株。提示开展结核分枝杆菌L型及药敏试验对指导临床用药有重要意义。

用聚合酶链反应单链构象多态性分析技术检测结核分枝杆菌L型的rpoB基因突变

目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值。方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利福平耐药的结果进行对比分析。结果:采用常规法检测,52株临床分离株中有38株利福平耐药,耐药率为73.08%(38/52);PCR-SSCP方法对52株临床耐药株rpoB基因突变的检出率为65.38%(32/52),两种方法检测耐利福平的符合率为84.21%。结论:PCR-SSCP对利福平耐药的结核分枝杆菌L型菌株检出率较高,将其与常规药敏试验联合应用,是一种指导临床用药的好方法。

结核分枝杆菌L型血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能的相关性分析

目的研究结核分枝杆菌L型(TBL)血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能改变存在的关联。方法回顾性选取肺癌患者50例(其中TBL阳性者28例,阴性者22例),肺结核病人18例,健康人40例为对照组。采用溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色检测结核患者血液中的分枝杆菌L型,采用常规方法测定并比较三组患者血清红细胞C3b受体花环促进率(RFER)、抑制率(RFIR)、红细胞沉降率(ESR)、免疫复合物花环率(ICRR)和红细胞C3b受体花环率(C3bRR)。结果肺癌组、肺结核组较对照组的RFER均明显降低,但肺癌组与肺结核组比较差异无统计学意义(P>0.05);三组之间RFIR互相比较,差异无统计学意义(P>0.05);TBL阳性组的ESR比TBL阴性组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与TBL阴性组相比,TBL阳性组的ICRR和C3bRR显著偏低,差异有统计学意义(P<0.05);而两组的RFER均较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结核分枝杆菌L型血流感染与肺癌患者红细胞免疫功能存在关联。