金黄色葡萄球菌稳定L型DNA的提取及酶切

本文从一例恶性淋巴瘤合并金黄色葡萄球菌Ｌ型败血症患者的骨髓内分离得到金黄色葡萄球菌稳定Ｌ型，用玻璃微珠机械研磨方法提取ＤＮＡ，纯化后被ＥＣＯＲＩ酶切，酶切ＤＮＡ片段可用于核酸杂交等分子物生学研究。

金黄色葡萄球菌L型对肿瘤组织和培养细胞影响的研究

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型感染对C57小鼠肿瘤组织和体外培养猴肾细胞的影响。方法用金葡菌L型感染C57小鼠及猴肾细胞,再用革兰氏染色、免疫组化染色和聚合酶链反应(PCR)检测C57小鼠肝组织及诱发的小鼠肿瘤组织中金葡菌L型阳性率,并观察感染后猴肾细胞的病理形态学变化。结果C57小鼠肝组织及肿瘤组织中金葡菌L型感染率分别为0%(0/10)和70%(7/10),L型抗原表达率分别为0%(0/10)和70%(7/10);金葡菌L型DNA阳性表达率分别为0%(0/10例)和70%(7/10例)。猴肾细胞感染L型原生小体后体外培养48h部分出现空泡样变样(类似病毒感染后的形态学变化),局部区域细胞密集(轻度增生)。结论金葡菌L型DNA已在感染的体内、外细胞内出现,且在诱发的肿瘤细胞内表达显著增高,推测其在诱发体细胞增生和癌变中起重要作用,很可能和病毒的致瘤机理相似。

原位杂交检测子宫内膜癌中金黄色葡萄球菌L型DNA

目的 研究细菌L型感染与子宫内膜腺癌的相关性。方法 用革兰染色、免疫组化和DNA核酸探针原位杂交等方法 ,对 6 6例子宫内膜腺癌 ,30例子宫内膜增生症进行检测。结果 子宫内膜腺癌和内膜增生症中革兰氏染色细菌L型阳性率分别为 5 4 5 % ,5 6 7% ;免疫组化染色 (S -P法 )检测阳性率分别为 5 6 1%和 6 0 6 % ;2 0例子宫内膜腺癌标本 ,用金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )L型地高辛标记的核酸探针作原位杂交 ,结果发现 45 %的宫内膜腺上皮细胞核内显示有金葡菌L型DNA阳性颗粒。结论 提示细菌及其L型可侵入子宫内膜腺上皮细胞 ,导致细胞异常增生甚至肿瘤发生。证明子宫内膜腺癌的发生与细菌L型感染有一定的相关性。

金黄色葡萄球菌L型对胆囊癌细胞的致病变研究

目的研究金黄色葡萄球菌L型对胆囊癌细胞(GBC-SD)的致病变作用。方法金葡菌L型感染GBC-SD细胞后,采用光学显微镜、透射电子显微镜及PCR检测其能否侵入细胞,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、增殖细胞核抗原(PCNA)法检测其能否促进细胞增殖,采用基因芯片检测其引起的细胞基因改变。结果PCR检测以及光镜、电镜拍照显示金葡菌L型能够粘附并且进入GBC-SD细胞,MTT法、PCNA检测表明金葡菌L型能够促进GBC-SD细胞增殖。基因芯片结果显示金葡菌L型作用后的GBC-SD细胞有15个基因表达异常,取表达上调基因含表皮生长因子组件粘蛋白类似激素受体2(EMR2)、表达下调基因细胞外基质蛋白2(ECM2)进行RT-PCR法验证,与基因芯片结果符合。结论金葡菌L型能够进入GBC-SD细胞中并促进其增殖,引起细胞EMR2基因上调、ECM2基因下调,提示金葡菌L型可能与胆囊癌的发生、发展存在一定相关性。

金黄色葡萄球菌L型感染和k-ras基因点突变在卵巢癌发生发展中的相关性

背景与目的:探讨金葡菌L型感染和k-ras基因点突变在卵巢癌发生发展中的相关性。材料与方法:应用革兰染色、PCR-FLRP分析技术检测97例卵巢乳头状癌、23例卵巢乳头状瘤石蜡包埋组织中金葡菌L型的感染率及k-ras基因点突变情况。结果:卵巢乳头状癌组织中伴有金葡菌L型感染的有25例,检出率为25.8%(25/97),该组k-ras基因密码子12突变率为45.4%;卵巢乳头状瘤组织中伴有金葡菌L型感染的有3例,检出率为13.0%(3/23),该组k-ras基因密码子12突变率为8.7%。金葡菌L型感染与k-ras基因点突变的关系,经Spearman等级相关分析,乳头状癌组为r=0.5047,P<0.05,乳头状瘤组为r=-0.1195,P>0.05。结论:卵巢乳头状癌组织中金葡菌L型感染与k-ras基因点突变具有正相关关系,而乳头状瘤则不具有相关性。

金黄色葡萄球菌L型致间质性肺炎的实验动物模型的建立

目的观察各实验动物感染金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型后肺脏和其它重要脏器的病理变化.方法高渗培育金葡菌L型,经静脉和腹腔人工感染小白鼠、大白鼠等动物,光镜观察其相应脏器变化.结果发现主要脏器实质细胞发生变性、慢性炎细胞浸润和间质细胞增生性改变.结论细菌L型具有侵入和破坏组织脏器实质细胞的能力,引起相应脏器发生间质性炎症改变.

酶联免疫PAP法快速诊断金黄色葡萄球菌L型败血症的临床应用

目前国内外诊断细菌Ｌ型败血症的方法是进行细菌Ｌ型培养，需时间７～１４天。我们于１９９２年６月采用酶联免疫法快速诊断金黄色葡萄球菌Ｌ型败血症获得成功。经临床８２例对照分析：酶免阳性７２例，细菌Ｌ型培养７１例阳性。酶免快速诊断的准确度为９７．５％，敏感性９８．６％，特异性为９０％，可以在两日内出结果，较血培养可提前５～１０天明确诊断。

金黄色葡萄球菌L型耐药性10年分析

目的 研究金黄色葡萄球菌 L 型耐药性变化 ,确定当前临床用药。方法 对儿科感染性疾病 L型血培养金黄色葡萄球菌进行药敏试验 ,监测耐药性 10年变化。结果 金黄色葡萄球菌 L 型 196 0例 ,青霉素族、头孢菌素族、大环内酯类、氨基糖甙类及其他抗生素耐药性均升高 ,丁胺卡那霉素、白霉素、磷霉素、利福平、万古霉素上升幅度较小。结论 金黄色葡萄球菌 L 型耐药性呈上升趋势 ,丁胺卡那霉素、白霉素、磷霉素、万古霉素为有效抗生素。

对L型金黄色葡萄球菌败血症并发心包损害的诊断及治疗体会

L型金黄色葡萄球菌败血症所致心包损害目前临床上并非多见，也很少有文献报告。近几年来，我们遇有3例，现报告如下。

金黄色葡萄球菌L型致间质性肺炎的实验动物模型的建立

目的 :观察各实验动物感染金葡萄 L 型后肺脏和其他重要脏器的病理变化。方法 :高渗培养金黄色葡萄球菌 L型 ,经静脉和腹腔人工感染小白鼠、大白鼠等动物 ,光镜观察相应脏器变化。结果 :发现主要脏器实质细胞发生变性、慢性炎细胞浸润和间质细胞增生性改变。结论 :细菌 L 型具有侵入和破坏组织脏器实质细胞的能力 ,引起脏器发生间质性炎症改变。

金黄色葡萄球菌L型与血液病

目的：了解金黄色葡萄球菌L型在血液病患者发热时的分离情况。方法；应用改良的Kagan培养基及血平板进行分离培养和鉴定。结果：从6例血液病患者血及分泌物中检出金黄色葡萄球菌L型6株，其菌落、革兰氏染色及细胞壁染色均符合细菌L型特征。结论：金黄色葡萄球菌L型与血液病患者感染密切相关。

儿童L型败血症30例临床分析

目的:了解儿童L型败血症主要细菌对不同抗生素的敏感情况,以指导临床治疗。方法:对30例L型败血症患儿的血培养结果及药敏试验等临床资料进行分析。结果:金黄色葡萄球菌(金葡菌)对万古霉素高度敏感(敏感率为100%),其次为利福平,氯霉素;凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对万古霉素敏感率100%,其次为利福平、左氧氟沙星;以上致病菌均对青霉素耐药。30例患儿中治愈22例,治愈率73.33%;好转5例,好转率为16.67%。结论:应根据L型细菌的特点进行血培养以提高确诊率,并根据药敏结果选择敏感抗生素,提高治愈率。

应用聚合酶链反应检测细菌L型感染在实验动物体内、外细胞增生和癌变中的作用

目的探讨细菌L型感染对C57小鼠体细胞和体外培养的猴肾细胞致瘤作用.方法用聚合酶链反应(PCR)扩增技术检测金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型感染后,C57小鼠肝细胞及发生的小鼠肿瘤细胞中L型阳性率,以及用稳定的0.45μm滤过的金葡菌L型原生小体感染猴肾细胞后的病理形态学变化和L型感染情况.结果小鼠肝组织及肿瘤组织中金葡菌L型PNA阳性率分别为30%(3/10例),70%(7/10例).体外培养显示感染L型原生小体后的细胞部分出现空泡样变样(类似病毒感染后的形态学变化),局部区域细胞密集(轻度增生).结论细菌L型感染后的体细胞内可出现L型DNA,更在肿瘤细胞内出现频率较高,推测其诱发体细胞增生和癌变中起重要作用,很可能和病毒的致病机理相似.

PCR扩增检测增生、癌变细胞中金葡菌L型DNA的意义

目的 探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型感染对C57小鼠肿瘤组织和体外培养的猴肾细 胞的增生作用。方法 用金葡菌L型感染C52小鼠及猴肾细胞，再用革兰氏染色、免疫组化染色和聚合酶链反应(PCR)检测C57小鼠肝细胞及诱发的小鼠肿瘤细胞中金葡菌L型阳性率，并观察感染后猴肾细胞的病理形态学变化。结果 C57小鼠肝组织及肿瘤组织中金葡菌L型感染率分别为0?0／10)和70?7／10)，L型抗原表达率分别为0??0)和70％(7／10)；金葡菌L型DNA阳性表达率分别为30?3／10例)和70?7／10例)。感染L型原生小体后体外培养细胞部份出现空泡样变性(类似病毒感染后的形态学变化)，局部区域细胞密集(轻度增生)。结论 金葡菌L型DNA已在感染的体内、外细胞内出现，且在诱发的肿瘤细胞内表达显著增高，推测其在诱发体细胞增生和癌变中起重要作用，很可能和病毒的致瘤机理相似。

金黄色葡萄球菌L型对猴肾细胞致病变作用的研究

目的 研究细菌L型在体外培养的单层细胞中的致病作用。方法 用金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )、金葡菌稳定L型及经 0 45 μm滤过的L型原生小体感染猴肾细胞。结果 发现金葡菌L型及滤过的原生小体对细胞致病性降低 ,细胞不出现明显病变 ,部分细胞出现空泡样变 ,免疫组化及金葡菌PCR显示感染细胞内出现金葡菌抗原及DNA。结论 细菌L型在感染细胞中可出现类似病毒的致病特点 ,L型可在细胞内长期存在而不出现明显的细胞病变 ,其DNA可否与细胞DNA整合值得进一步研究。

金葡菌L型致间质性肺炎的实验动物模型的建立

目的 观察各实验动物感染金葡菌L型后肺脏和其它重要脏器的病理变化.方法 高渗培育金葡菌L型,经静脉人工感染小白鼠、大白鼠等动物,光镜观察相应脏器变化.结果 发现主要脏器实质细胞发生变性、慢性炎细胞浸润和间质细胞增生性改变.结论 细菌L型具有侵入和破坏组织脏器实质细胞的能力,引起相应脏器发生间质性炎症改变.