间歇性碱刺激对高磷诱导的大鼠血管环钙化的影响及可能机制

目的探讨间歇性碱刺激对高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化的影响及可能机制。方法体外分离大鼠胸主动脉血管环,将其随机分为正常对照组、高磷组(含10 mmol/Lβ-甘油磷酸的培养基)和间歇性碱刺激组(在高磷培养基的基础上调整pH值为7.7)。干预14天后,采用免疫组织化学方法检测L型钙通道(LTCC)β3亚基、Runt相关转录因子2(Runx2)和平滑肌蛋白22α(SM22α)的表达情况;采用硝酸银染色法和钙含量测定法检测血管环钙化程度。结果与正常对照组相比,高磷组的钙含量、Runx2和LTCCβ3亚基表达水平均增加(P<0.001);与高磷组相比,间歇性碱刺激组的钙含量、Runx2和LTCCβ3亚基表达水平均有显著增加(P<0.001)。同时,高磷组棕黑色钙化结节较正常对照组增多,间歇性碱刺激组棕黑色钙化结节较高磷组增多。与正常对照组相比,高磷组的SM22α表达水平下降(P<0.001);与高磷组相比,间歇性碱刺激组的SM22α表达水平显著下降(P<0.001)。相关性分析显示,LTCCβ3亚基与Runx2蛋白表达呈正相关(r=0.740,P=0.002),与SM22α蛋白表达呈负相关(r=-0.670,P=0.006)。结论间歇性碱刺激可以促进高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化,其可能通过上调LTCCβ3亚基表达,促进血管平滑肌细胞向成骨/成软骨表型转化,进而促进血管环钙化的发生。