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宫颈癌组织中HPV16L1蛋白质的表达及意义 被引量:1
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作者 潘贞贞 潘欢 +8 位作者 朱君玲 郑威楠 李洪涛 何鸿昌 任显显 武丹 王红英 杨昕 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第4期458-461,共4页
为探讨人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)16 L1蛋白表达与宫颈癌发生与发展的关系,为防治宫颈癌奠定基础。采用收集宫颈癌患者48例、宫颈上皮内瘤样病变(cervcal intraepithelial neoplasia,CIN)患者41例和慢性宫颈炎患者30例石... 为探讨人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)16 L1蛋白表达与宫颈癌发生与发展的关系,为防治宫颈癌奠定基础。采用收集宫颈癌患者48例、宫颈上皮内瘤样病变(cervcal intraepithelial neoplasia,CIN)患者41例和慢性宫颈炎患者30例石蜡组织标本用于免疫组织化学实验的方法。检测HPV16 L1蛋白在宫颈癌组织、CIN组织和慢性宫颈炎组织中的蛋白质表达状况。HPV16 L1蛋白质免疫组织化学实验的结果显示,慢性宫颈炎组织中阳性率为100%,而在宫颈癌组织中阳性率仅为27.1%,差异有统计学意义(P<0.01)。慢性宫颈炎组织的阳性率明显高于宫颈癌组织。由此可知,HPV16 L1蛋白质在宫颈原位癌开始表达减少,宫颈浸润癌表达减少更明显,可能可以用于诊断CINⅡ和CINⅢ或CINⅡ和宫颈癌。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16l1蛋白质 蛋白表达
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应用蛋白质L检测和纯化培养上清液中的单链抗体 被引量:1
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作者 李民友 虞东方 +4 位作者 张海涛 冯哲玲 李秀英 刘祖国 朱振宇 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期231-233,共3页
目的 探索一种检测和纯化单链抗体的新方法。方法 使用不同的酶标记物 ,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度。含单链抗体的培养上清液经超滤、313g L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L 琼脂糖亲和层析纯化单链抗体。结果 HRP标... 目的 探索一种检测和纯化单链抗体的新方法。方法 使用不同的酶标记物 ,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度。含单链抗体的培养上清液经超滤、313g L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L 琼脂糖亲和层析纯化单链抗体。结果 HRP标记蛋白质L可检测到 1∶16孔的阳性结果 ,而HRP标记蛋白质A仅检测到 1∶2孔的阳性结果。用 9E10单抗检测培养上清液中的单链抗体时 ,除加入未经稀释培养上清液孔略有显色外 ,其他加入稀释后的培养上清液孔均不显色。蛋白质L亲和层析纯化的单链抗体经SDS PAGE及ELISA鉴定 ,所得到的单链抗体纯度高、活性保持良好。结论 蛋白质L是一种能灵敏检测和有效纯化单链抗体的结合物 ,本实验建立的方法是一种有效。 展开更多
关键词 蛋白质l 单链抗体 培养上清液 检测 纯化
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蛋白质与胆固醇吸收有关
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《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第2期195-195,共1页
关键词 蛋白质 胆固醇 免疫组织化学法 NPC1l1蛋白质
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[1,6-双(L-α,-二氨基丙酸)]催产素的合成 被引量:2
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作者 吴凯群 翁玲玲 郑虎 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期818-821,共4页
通过7+2片段组合方式,,采用液相法合成了全新的含非蛋白质氨基酸L-α,β-二氨基丙酸(L-D ap)的催产素的类似物。合成中所需的保护氨基酸的α-氨基均采用苄氧羰基(Z)保护,L-D ap的侧链氨基采用叔丁氧羰基(Boc)保护。先用逐步增长方式采... 通过7+2片段组合方式,,采用液相法合成了全新的含非蛋白质氨基酸L-α,β-二氨基丙酸(L-D ap)的催产素的类似物。合成中所需的保护氨基酸的α-氨基均采用苄氧羰基(Z)保护,L-D ap的侧链氨基采用叔丁氧羰基(Boc)保护。先用逐步增长方式采用对硝基苯酚酯法缩合得到重要中间体七肽片段,再用叠氮法缩合得到保护九肽。Z-保护用催化氢化法脱除,Boc-保护用CF3COOH脱除。共合成了含L-D ap的新化合物8个,所有寡肽都通过了氨基酸分析以及质谱确证。 展开更多
关键词 蛋白质氨基酸l—α β-二氨基丙酸 催产素 苄氧羰基 叔丁氧羰基
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Comparison of Biochemical Substances in the Fiber Development of Different Cotton Varieties
5
作者 葛杰 罗淑萍 +2 位作者 马德英 羌松 姚正培 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2015年第3期439-441,共3页
Zhongmian 42 and Xinluzao 36 were used as raw materials to determine the contents of soluble sugar and protein, as well as dynamic changes of enzyme activities after flowering during cotton fiber growth. The results s... Zhongmian 42 and Xinluzao 36 were used as raw materials to determine the contents of soluble sugar and protein, as well as dynamic changes of enzyme activities after flowering during cotton fiber growth. The results showed that contents of soluble protein in the two species sharply declined 7 to 21 days after flowering, as the soluble sugar in Zhongmian 42 leveling off after 21 days of flowering while the soluble sugar in Xinluzao 36 dropped notably after 21 days of flowering before remaining stable after seven days later. The soluble sugar decreased 7 to 14 days after flowering before sharply rising to the maximum seven days later, and then began to decline quickly. The soluble sugar was the minimum after 35 days of flowering and then remaining stable. Peroxidase activity generally increased. Indole-3- acetic acid oxidase activities were low at 7 days after flowering. IAAO activity reached to the peaks on the 14th and 28th day after flowering. IAAO activity of two varieties decreased with the same trend 35 days after flowering. 展开更多
关键词 Cotton (Gossypium hirsutum l.) Cotton fiber Soluble sugar Soluble protein PEROXIDASE Indole-3-acetic acid oxidase
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Engineering of Corynebacterium glutamicum to Enhance L-ornithine Production by Gene Knockout and Comparative Proteomic Analysis 被引量:3
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作者 卢冬梅 刘建忠 毛宗万 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第4期731-739,共9页
Engineered Corynebacterium glutamicum was constructed for L-ornithine production by disrupting genes of argF and proB to prevent the flux away from L-ornithine.Effect of the inactivation of 2-oxoglutarate de-hydrogena... Engineered Corynebacterium glutamicum was constructed for L-ornithine production by disrupting genes of argF and proB to prevent the flux away from L-ornithine.Effect of the inactivation of 2-oxoglutarate de-hydrogenase complex(ODHC) on L-ornithine production was also investigated.It was found that the inactivation of ODHC by knockout of the kgd gene enhanced L-ornithine production.The engineered C.glutamicum ATCC13032(ΔargFΔproBΔkgd) produced L-ornithine up to 4.78 g·L-1 from 0.24 g·L-1 of the wild-type strain.In order to understand the mechanism of L-ornithine production in C.glutamicum ATCC13032(ΔargFΔproBΔkgd) and find out new strategies for further enhancing L-ornithine production,the comparative proteome between the wild-type and the engineered strain was analyzed.L-Ornithine overproduction in the engineered strain was related to the up-regulation of the expression levels of enzymes involved in L-ornithine biosynthesis pathway and down-regulation of the expression levels of proteins involved in pentose phosphate pathway.The overexpression of genes in the upstream pathway of glutamate to increase the availability of endogenous glutamate may further in-crease ornithine production in the engineered C.glutamicum and the ornithine synthesis enzymes(ArgCJBD) may not be the limiting enzymes in the engineered C.glutamicum. 展开更多
关键词 l-ornithine production gene knockout 2-oxoglutarate dehydrogenase Corynebacterium glutamicum proteomic analysis
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Partial and Total Replacement of Jojoba Meal (Simmondsia chinensis) Instead of Fishmeal in Nile Tilapia (Oreochromis niloticus) Fingerlings Diets 被引量:1
7
作者 H. A. Mabrouk E. M. H. Labib M. A. Zaki 《Journal of Agricultural Science and Technology(B)》 2011年第7期998-1007,共10页
The present study was carried out to investigate the total and partial replacement of Jojoba meal (JM), Simmondsia chinensis, with fishmeal (FM) at different levels (0%, 25%, 50%, 75%, and 100%) on growth perfor... The present study was carried out to investigate the total and partial replacement of Jojoba meal (JM), Simmondsia chinensis, with fishmeal (FM) at different levels (0%, 25%, 50%, 75%, and 100%) on growth performance, feed utilization, and carcass composition of Nile tilapia, Oreochromis niloticus fingerlings. Fingerlings with an average weight of 1.65 ± 0.01 g/fish stocked at a rate of 10 fish/aquarium for 84 days experimental period. All experimental diets were isocaloric (437.69 kcal/100 g Dry Matter, DM) and isonitrogenous (30.5% crude protein) and supplemented with 0.5% L-Methionine and 0.5% L-Lysine Hcl. Results showed that there were a significant differences (P 〈 0.05) in final body weights, average daily gain (g fish^-1 dayl), specific growth rate (SGR, % day^-1), feed conversion ratio (FCR), protein efficiency ratio (PER), protein productive value (PPV%) and energy retention (ER%) among the tested groups. Nile tilapia fingerlings fed on the diet containing 25% S. chinensis protein exhibited comparable growth performance to those fed FM protein based diet. Carcass composition of crude protein decreased significantly (P 〈_ 0.05) with increasing JM replacement level above 50%, while replacement 25% JM does not affect DM and Crude Protein of fish flesh. On the other hand, increasing JM replacement level up to 75% increased Ether Extract % significantly (P 〈 0.05) and increasing JM up to 100% increased ash content significantly (P ≤ 0.05) while energy content (EC) decreased. It could be concluded the replacement of 25% Jojoba meal instead of fishmeal in Nile tilapia fingerlings diets is possible without any adverse effects on its growth performance or feed utilization. 展开更多
关键词 Jojoba meal FISHMEAl REPlACEMENT plant proteins.
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日本新型纳米粒子可将药物送至癌细胞
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《中国科技产业》 2003年第8期75-75,共1页
关键词 日本 纳米粒子 药物输送系统 癌症 治疗 l蛋白质
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悬浮培养昆虫细胞表达重组HPV16 L1蛋白
9
作者 韩聪 王燕 +2 位作者 商庆龙 魏兰兰 陈思佳 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期352-354,共3页
目的用悬浮培养昆虫细胞方式表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白,为获得病毒样颗粒(VLPs)及进一步深入研究疫苗和诊断试剂盒打基础。方法优化昆虫细胞Si9的悬浮培养条件;优化扩增病毒和蛋白的条件;空斑试验测定病毒滴度;SDS—P... 目的用悬浮培养昆虫细胞方式表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白,为获得病毒样颗粒(VLPs)及进一步深入研究疫苗和诊断试剂盒打基础。方法优化昆虫细胞Si9的悬浮培养条件;优化扩增病毒和蛋白的条件;空斑试验测定病毒滴度;SDS—PAGE和Western Blot分析目的蛋白的表达情况;透射电镜观察细胞内HPV16 L1蛋白形成的VLPs。结果优化后,悬浮培养昆虫细胞初始接种密度为5×10^5 cell/ml,以MOI(Multiplicity of Infection)=10接种重组病毒rBacV/HPVl6L1,72~84h收获细胞沉淀为最佳。经透射电镜观察,在重组病毒感染的昆虫细胞内,存在HPV16L1蛋白形成的VLPs。结论优化了细胞悬浮培养、病毒扩增和蛋白表达的条件;电镜观察在重组病毒rBacV/HPV16L1感染的昆虫细胞中,HPV16L1蛋白可形成VLPs。 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 蛋白质l1 细胞 培养的 病毒样颗粒
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五种检测嵌合抗原受体表达方法的比较
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作者 王欢禹 常昊宛 +2 位作者 章崇祺 金卫林 魏芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期265-273,共9页
比较检测新型嵌合抗原受体(CAR)的5种方法。通过慢病毒感染得到稳定表达嵌合抗原受体的细胞。使用免疫球蛋白G抗体染色、蛋白质L染色、绿色荧光蛋白共表达法、实时荧光定量PCR的绝对定量和相对定量法5种方法检测不同嵌合抗原受体在Jurka... 比较检测新型嵌合抗原受体(CAR)的5种方法。通过慢病毒感染得到稳定表达嵌合抗原受体的细胞。使用免疫球蛋白G抗体染色、蛋白质L染色、绿色荧光蛋白共表达法、实时荧光定量PCR的绝对定量和相对定量法5种方法检测不同嵌合抗原受体在Jurkat细胞中的表达。成功构建6种CAR慢病毒表达载体(Meso-CAR、Met-CAR、R132H-CAR1-2-GFP、R132HCAR2-4-GFP、Dupixent-HL-CAR-GFP、Dupixent-LH-CAR-GFP),并得到其对应的CAR稳定表达Jurkat细胞。发现Meso-CAR和Met-CAR可同时用免疫球蛋白G抗体和蛋白质L染色鉴定其表达(免疫球蛋白G抗体染色效果较优),而其余4种CAR均不可以。对荧光法染色不可行的CAR可使用绿色荧光蛋白共表达法、实时荧光定量PCR的绝对定量和相对定量法间接检测CAR的表达,3种方法的结果之间存在一定的对应性。不同的CAR分子,可用不同方法确定细胞中CAR分子的表达情况。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体 免疫球蛋白G抗体 蛋白质l 绿色荧光蛋白 实时荧光定量PCR
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p21^(WAF1/CIP1)、细胞周期素D_1、p53在结肠癌的表达
11
作者 蓝斌 许东坡 戴起宝 《福建医科大学学报》 2004年第1期36-38,F002,共4页
目的 探讨 p2 1 WAF 1 /CIP1 、细胞周期素 D1 (cyclin D1 )及 p5 3在结肠癌的表达及三个基因产物间的相关性。方法 应用原位杂交技术及免疫组织化学技术检测 p2 1 WAF1 /CIP1、cyclin D1 的 m RNA及 p5 3蛋白在结肠癌中的表达。 结... 目的 探讨 p2 1 WAF 1 /CIP1 、细胞周期素 D1 (cyclin D1 )及 p5 3在结肠癌的表达及三个基因产物间的相关性。方法 应用原位杂交技术及免疫组织化学技术检测 p2 1 WAF1 /CIP1、cyclin D1 的 m RNA及 p5 3蛋白在结肠癌中的表达。 结果  p2 1 W AF 1 /CIP1 m RNA在癌组织的表达率为 84 .1 3% ,明显高于癌旁组织 6 1 .90 % (P<0 .0 5 )。 cyclin D1m RNA在癌组织表达率为 6 3.4 9% ,明显高于癌旁组织 4 4 .4 4 % (P<0 .0 5 )。 p5 3蛋白在结肠癌的阳性表达率为38.0 9% ,p5 3过表达组 p2 1 WAF 1 /CIP1 m RNA表达较 p5 3阴性组为低 ,二者存在显著差异 (P<0 .0 5 ) ,p5 3过表达组cyclin D1 m RNA表达较 p5 3阴性组为高 ,差异具有显著性 (P<0 .0 5 )。 p2 1 WAF 1 /CIP1 m RNA与 cyclin D1 m RNA表达存在相关性 (P<0 .0 5 )。 结论  p2 1 WAF 1 /CIP1、cyclin D1 、p5 3的异常表达及它们之间可能存在的相互作用 。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 原癌基因蛋白质p2l RAS 基因bal—1 基因P53 原位杂交 免疫组织化学
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呼肠病毒BYD1株诱导细胞凋亡能力及其穿膜蛋白结构分析
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作者 段鸿元 张宝元 +3 位作者 户义 宋立华 朱虹 端青 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期223-225,共3页
目的观察我国新分离呼肠病毒BYD1株诱导细胞凋亡能力,分析病毒致细胞凋亡与主要穿膜蛋白μl结构的关系。方法用流式细胞仪检测感染细胞凋亡比例,经Student t-test检验判断病毒诱导细胞凋亡的能力。通过Lasergen V6 Megalign软件分析比... 目的观察我国新分离呼肠病毒BYD1株诱导细胞凋亡能力,分析病毒致细胞凋亡与主要穿膜蛋白μl结构的关系。方法用流式细胞仪检测感染细胞凋亡比例,经Student t-test检验判断病毒诱导细胞凋亡的能力。通过Lasergen V6 Megalign软件分析比对BYD1株和呼肠病毒标准株T1L、T2J和T3D的μl蛋白582.675部分的一级结构;用SWISS MODEL数据库同源模建方法分析BYD1株μl蛋白的二级结构和三级结构。结果呼肠病毒BYD1株能够诱导HeLa细胞凋亡,其μl蛋白643—675氨基酸部分的α螺旋与同型标准株T2J存在差异。结论我国新分离呼肠病毒BYDl株具有诱导细胞凋亡的能力,其μl蛋白643—675氨基酸部分的α螺旋在细胞凋亡诱导中起重要作用。 展开更多
关键词 呼肠病毒科 凋亡蛋白质μl
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N-terminal of Lprotein of vesicular stomatitis virus contains a new signal sequence
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作者 NIE Yuchun, KE Yeyan, WANG Zai, YU Xiang, DENG Hongkui & DING Mingxiao Department of Cell Biology and Genetics, College of Life Sciences, Peking University, Beijing 100871, China Correspondence should be addressed to Ding Mingxiao (e-mail: mxding@china.com.cn) 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第13期1352-1357,共6页
The L protein (241 kD) of vesicular stomatitis virus (VSV) is the most important subunit of the replication complex. The existence of specific localization signal in the L protein was investigated by making recombinan... The L protein (241 kD) of vesicular stomatitis virus (VSV) is the most important subunit of the replication complex. The existence of specific localization signal in the L protein was investigated by making recombinant constructs expressing truncated mutants of the L protein fused to green fluorescent protein (GFP) in transient transfection assays. The chimeric genes encoding varied N-terminal of L and GFP gene were put under the control of T7 promoter or CMV promoter. The fusion proteins were transiently expressed in BHK-21, COS-7, CHO or Hep G2 cells. When more than 120 residues were deleted or only 96 residues were kept on the N-terminal, the fusion proteins were shown to be distributed throughout the cells, cytoplasm and nucleus under the confocal microscope. However, other chimeric proteins with 120 or more amino acids were dotted and distributed in the perinuclear regions. And the fusion protein with 96120 aa has the similar distribution. A thirteen-residue peptide QGYSFLHEVDKEA (108120) was identified as localization signal, whose function would be absolutely distributed with the deficiency of D or V. Our results show that there is an independent localizing signal in N-terminal domain of L protein of VSV and this functional signal is conserved in different cell lines. 展开更多
关键词 l蛋白质 水泡性口膜炎病毒 VSV 基因编码 绿色荧光蛋白质
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日本找到癌症干细胞标志蛋白
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《中华生物医学工程杂志》 CAS 2012年第6期455-455,共1页
新华社电,治疗癌症如果不把癌症干细胞彻底清除,癌症很容易复发和转移。日本京都大学的研究人员说,他们找到了癌症干细胞含有的一种标志蛋白,有望对癌细胞做到斩草除根。京都大学消化内科教授千叶勉领导的研究小组在研究中注意到消... 新华社电,治疗癌症如果不把癌症干细胞彻底清除,癌症很容易复发和转移。日本京都大学的研究人员说,他们找到了癌症干细胞含有的一种标志蛋白,有望对癌细胞做到斩草除根。京都大学消化内科教授千叶勉领导的研究小组在研究中注意到消化道中的一种蛋白质Dclkl,他们分析了罹患大肠癌的实验鼠,发现含这种蛋白质的细胞会在较长一段时间内持续产生癌细胞。他们通过基因操作成功地、有选择地清除了含Delkl蛋白质的细胞,实验鼠体内的大肠癌组织面积缩小了80%以上, 展开更多
关键词 日本京都大学 癌症干细胞 标志蛋白 大肠癌组织 l蛋白质 研究人员 基因操作 癌细胞
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