大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的 研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果 在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素对 [Ca2 +]i 均无影响 ;对 6 0mmol·L- 1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响 ,1μmol·L- 1 表现为促进作用 ;10 μmol·L- 1 无作用 ;10 0 μmol·L- 1 则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明 ,1μmol·L- 1 大黄素可明显促进L 型钙电流 ,10 μmol·L- 1 对L 型钙电流无影响 ;10 0 μmol·L- 1 明显抑制L 型钙电流。结论 大黄素对心肌细胞内钙及L

银杏苦内酯B对缺血豚鼠心室肌动作电位、L-型钙电流和延迟整流钾电流的作用

目的 :研究银杏苦内酯B对正常和缺血心室肌细胞动作电位 (actionpotential,AP) ,L 型钙电流 (L typecalciumcurrent,ICa-L)、延迟整流钾电流 (DelayedRectifierCurrennt,IK)的影响。方法 :用常规细胞内微电极方法记录豚鼠心室肌细胞动作电位 ,用全细胞膜片钳技术记录游离心室肌细胞离子流。结果 :①在生理条件下 ,银杏苦内酯B可缩短心室肌细胞动作电位时程 (actionpotentialduration ,APD) ,但对AP其他参数无影响 ,银杏苦内酯B可增大IK,呈浓度依赖性 ,但对ICa-L无显著作用 ;②在缺血条件下 ,APD50 、APD90 明显缩短 ,RP、APA减小 ,Vmax减慢 ,而银杏苦内酯B则可延缓和减轻缺血所引起上述参数的变化 ;3.在缺血条件下 ,IK 和ICa -L均受到抑制 ,但加入银杏苦内酯B后可逆转缺血所造成这两种离子流的减小。结论 :银杏苦内酯B可对抗心肌缺血所引起的心肌电生理的变化 ,提示银杏苦内酯B可预防心律失常的发生。

淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。

冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度及L-型钙电流的影响

目的 研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i以及ICa L的变化。结果 应用 0 1mg/mL (生药浓度 )冬虫夏草水提液 ,在静息状态下对 [Ca2 + ]i 无影响 ;对 6 0mmol/LKCl诱导的胞浆 [Ca2 + ]i升高有促进作用 ,峰值荧光强度在 12 0s时由12 0 4 3± 2 38 4增加至 185 5 2± 32 1 0 (n =6 ,P <0 0 5 )。膜片钳研究结果表明 ,冬虫夏草水提液可明显促进ICa L,使ICa L从 (- 15 1± 2 3)pA/ pF增加到 (- 19 7± 3 2 ) pA/pF (刺激电压为 10mV ,n =8,P <0 0 1)。 结论 冬虫夏草水提液促进心肌细胞钙内流 ,是该药治疗缓慢型心律失常的机制之一。

丹参酮对肥厚心肌L-型钙电流的影响

目的心肌肥厚是导致心力衰竭、心律失常和猝死的高危因素。丹参酮已被证实能够有效地拮抗心肌肥厚的发生,但是对于其能否改变肥厚心肌上存在的电生理异常尚不清楚。方法本实验拟通过膜片钳和胞内钙测定技术,观察比较丹参酮和卡托普利对“一肾一夹”手术导致的肥厚心肌细胞膜上动作电位时间、L型钙通道电流和胞内钙离子浓度的影响,来阐明丹参酮预防心脏肥厚发生心律失常可能的电生理基础。结果丹参酮可以显著的缩短肥厚心肌细胞中存在的动作电位时间延长(P<0.001)、降低膜电容和ICa,L峰值幅度(P<0.001),但不影响ICa,L密度,并能够显著减少胞内钙离子浓度。结论丹参酮能够在抗心肌肥厚的同时通过减少钙内流、缩短动作电位时间,起到预防心律失常的作用。

银杏苦内酯B对豚鼠模拟缺血心室肌细胞L-型钙电流及胞内游离钙的影响

应用全细胞膜片钳及激光共聚焦技术 ,研究银杏苦内酯B(ginkgolideB ,GB)对豚鼠心室肌细胞L 型钙电流及胞内游离钙的作用 ,并探讨GB心肌保护作用的机制。实验结果显示 ,在指令电压为 0mV时 ,GB对生理状态下豚鼠心室肌细胞L 型钙电流无明显作用。在模拟缺血状态下 ,L 型钙峰值电流减小 3 7 71% ,但加入 1μmol/LGB后 ,可逆转缺血引起的L 型钙电流的降低 ,与缺血对照组比较 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。 1μmol/LGB能使由于模拟缺血而上移的L 型钙电流 电压曲线回复正常。在生理状态下 ,0 1、1、10mol/LGB分别使心肌细胞内游离钙降低 10 5 8%(n =12 )、17 2 7% (n =12 )、16 3 5 % (n =10 ) ,与对照组相比有非常显著性差异。模拟缺血液灌流 12min时 ,细胞内游离钙浓度增加 2 0 15 % ,在模拟缺血液中分别加入 1μmol/Lnifedipine或 5mmol/LNiCl2 ,结果显示 :模拟缺血液灌流 12min ,与正常对照组相比细胞内钙分别增加 18 18% (P >0 0 5 )与 11% (P <0 0 5 )。在模拟缺血液中加入1mol/LGB灌流 12min时细胞内钙仅增加 9 60 % (n =12 ,P <0 0 0 1) ,与缺血对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结果表明 ,GB可逆转模拟缺血造成L 型钙电流的降低 。

左-甲状腺素所致豚鼠肥厚心室肌细胞L-型钙电流的变化

观察左 -甲状腺素造成的豚鼠肥厚心室肌细胞 L-型钙电流变化及与血浆 T3、T4水平增高的关系。豚鼠 ip左 -甲状腺素 ( Levothyroxine,L-thy,0 .5mg/kg× 1 0 d) ,造成心肌肥厚模型之后 ,部分豚鼠 ip普萘洛尔( propranolol,pro,5mg/kg× 3d)。用全细胞膜片钳技术测定单个心室肌细胞 L-型钙电流的变化。结果 ,电流强度、电流密度在肥厚组增幅分别达 32 .95%和 35.2 4 % ( P<0 .0 1 ) ,用 pro治疗后接近正常值 ( P>0 .0 5)。血浆T3、T4含量 ,pro治疗后仍明显高于正常组 ,但肥厚有所消退 ,消退率为 66.1 2 %。结论 ,左 -甲状腺素造成的豚鼠肥厚心室肌细胞 L-型钙电流增强 ,此变化与血浆 T3。

白藜芦醇苷对大鼠心室肌细胞L-型钙电流的抑制作用

研究表明，白藜芦醇苷（Polydatin）可对抗大鼠心肌缺血／再灌所致心脏功能损伤和细胞凋亡，以及抗心律失常。其心脏保护作用与心肌细胞ATP敏感钾通道开放、

壬基苯酚对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的观察环境激素壬基苯酚(NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响。方法应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;应用膜片钳全细胞方法观察NP对单个心室肌细胞ICa-L的影响。结果NP可抑制不同膜电位下的ICa-L,NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)使ICa-L峰值电流密度从(-3.2±1.5)pA.pF-1减少到(-1.6±0.8)pA·pF-1(P<0.01)和(-1.4±0.7)pA·pF-1(P<0.01);但对ICa-L激活动力学曲线无明显影响。结论NP可剂量依赖性抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L。

参松养心胶囊对大鼠心室肌细胞L-型钙电流和钾电流的抑制作用

目的:探讨参松养心胶囊对大鼠心室肌细胞L-型钙电流(Ica,L)和瞬时外向钾电流(Ito)的抑制作用。方法:酶解法分离大鼠心室肌细胞,使用参松养心溶液(0.5 mg/100 m L,0.5%)灌流心室肌细胞,利用全细胞膜片钳技术记录Ica,L和Ito,在细胞破膜后的20 min内记录所有数据,对每个细胞给药前后做自身对照,观察参松养心溶液对Ica,L和Ito通道电流的影响。结果:0.5%的参松养心溶液对Ica,L和Ito均有抑制作用,参松养心溶液对Ito的缓慢电流成分Itos无明显作用,但可以明显抑制Ito的快速电流成分Itof。在-10 m V测试电压下,在0.5%的参松养心溶液作用后,Ica,L的最大激活峰值电流密度从(-8.64+-2.43)p A/p F降为(-5.92+-2.15)p A/p F,抑制率为31.85%+10.25%,电流密度-电压(I-V)曲线上移;在-60 m V测试电压下,在0.5%的参松养心溶液作用后,Itof的最大激活峰值电流密度从(23.53+3.31)p A/p F降为(16.86+2.34)p A/p F,抑制率为(28.33+10.59)%,I-V曲线下移。参松养心溶液不改变Ica,L的通道动力学,但会使Ito通道失活后的恢复变慢。结论:参松养心溶液对Ica,L和Ito均有明显的抑制作用。

CPU86017对肥厚豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的 :观察药物CPU86 0 17对左 甲状腺素 (L thy)所致的肥厚豚鼠心室肌细胞L 型钙电流的影响。方法 :ipL thy ,诱导豚鼠心肌肥厚 ,用全细胞膜片钳技术测定CPU86 0 17对心室肌细胞L 型钙电流强度和密度的影响。结果 :终浓度为 30 μmol/L的CPU86 0 17对正常豚鼠心室肌细胞L 型钙电流强度的抑制率达 74 2 1% ;肥厚组 ,终浓度为 30 0 ,10 0 ,3 3μmol/LCPU86 0 17均能明显抑制钙电流强度 ,抑制率分别为 6 7 94 % ,4 3 2 5 % ,2 7 0 7%。结论 :CPU86 0 17可抑制正常和肥厚豚鼠心室肌细胞膜上的L 型钙电流 ,可减轻肥厚所致的钙超载 ,有利于预防病变心脏的心律失常。

压力负荷性心衰小鼠左心室跨壁L-型钙电流的变化

为了观察正常和心衰时心内膜下和心外膜下心肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的差别,我们采用主动脉弓狭窄的方法建立小鼠压力超负荷性心衰模型,采用全细胞膜片钳技术记录了正常、主动脉狭窄(band)及假手术对照(sham)组动物左心室游离壁内、外膜下心肌细胞的动作电位时程(action potential duration,APD)和ICa-L。结果显示:(1)与sham组同龄的正常小鼠左心室心内膜下细胞动作电位复极达90％的时程(APD90)为(38．2±6．44)ms,较心外膜下细胞的APD90(15.67±5.31)ms明显延长,二者的比值约为2．5:1;内膜下细胞和外膜下细胞ICa-L密度没有差异,峰电流密度分别为(-2.7±0.49)pA/pF和(-2.54±0．53)pA/pF;(2)Band组内、外膜下细胞的动作电位复极达50％的时程(APD50)、APD90均较sham组显著延长,尤以内膜下细胞延长突出,分别较sham组延长了400％和360％,内、外膜下细胞APD90的比值约为4.2:1;(3)与sham组相比, band组内膜下细胞ICa-L密度显著减小,在+10 mV～+40 mV的4个电压下分别降低了20．2％、21．4％、21.6％和25.7％(P< 0．01),但其激活电位、峰电位和翻转电位没有改变;band组外膜下细胞的ICa-L密度与同期sham组相比无明显变化;band组钙通道激活、失活及复活的动力学特征与sham组相比没有改变。以上结果提示,生理状态下小鼠左心室内、外膜下细胞ICa-L密度不存在明显差别,提示ICa-L与APD跨壁异质性的产生无关;心衰时左心室内、外膜下细胞APD明显延长,以内膜下细胞延长尤为突出,内膜下细胞ICa-L密度明显减少,而外膜下细胞ICa-L密度无明显改变,这种ICa-L的非同步变化在心衰时可能起到对抗APD延长、减少复极离散度的有益作用。

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对豚鼠心肌细胞电生理及L-型钙电流的作用

目的探讨血管紧张素及其受体拮抗剂对豚鼠心肌细胞动作电位间期及L型钙电流的作用。方法分离豚鼠乳头肌的单个心室肌细胞,采用内充3mol/L KCl的玻璃微电极记录心肌动作电位。采用膜片钳全细胞技术,钳制电位40mV,保持时间200ms,指令电位为0,并记录L型钙电流的最大峰电流。结果灌注血管紧张素可致多种机制的心律失常。灌注1min,动作电位振幅、动作电位复极90%的间期(APD90)、静息膜电位(RMP)较对照状态显著降低或缩短;灌注3min,动作电位复极30%和50%的间期(APD30和APD50)及有效不应期均较对照状态显著缩短。膜片钳研究示血管紧张素灌注5min,L型钙电流较对照状态显著增加,氯沙坦灌注1min L型钙电流显著降低,灌注3min较1min进一步降低,电压电流关系曲线形状均无显著变化。结论血管紧张素降低动作电位幅度,缩短动作电位时程及有效不应期,电压依赖性增加L型钙电流最大峰电流,具有致心律失常作用,氯沙坦电压依赖性地降低L型钙电流。

模拟缺血预适应对原代培养乳鼠窦房结细胞内钙及L-型钙电流的影响

目的 观察模拟缺血预适应(IP)对培养乳鼠窦房结细胞内Ca2+及I -LCa的影响,探讨IP对窦房结细胞的保 护机制。方法 取培养2d的乳鼠窦房结细胞,随机分为:①对照组;②模拟缺血 再灌注(I R)组;③模拟IP组。以免疫荧 光技术标记细胞内Ca2+,通过激光共聚焦显微镜检测荧光强度变化;以全细胞膜片钳技术检测I -LCa。结果 模拟IP能显 著降低I R后窦房结细胞内Ca2+荧光强度,增加相应电压下的I- LCa峰值,使电流 电压曲线相对下移。结论 模拟IP能 减轻I R引起的窦房结细胞内Ca2+超载及I -LCa抑制。

丹参对缺血心肌细胞L-型钙电流的影响

目的 :观察丹参对缺血心肌细胞L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法 :应用膜片钳全细胞记录技术。结果 :5 0 ,10 0 ,2 0 0mg/L丹参分别将缺血心肌细胞ICa L 的峰值从 (6 5 9.7± 14 8.5 ) pA降至 (5 31.9± 113.2 ) pA、(492 .4± 4 9.3) pA、(341.8± 72 .6 )pA(n =8,P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :丹参能有效地减少缺血心室肌细胞的ICa L 。

黄芪总黄酮对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮(TFA)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)及钠电流(INa)的作用。方法实验用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,利用全细胞膜片钳的方法记录心室肌细胞的ICa-L及INa。结果(1)应用TFA(20 mg.kg-1)后ICa-L从(-0.313±0.14)nA下降到(-0.402±0.27)nA,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)应用TFA(20 mg.kg-1)后与对照组比较,INa峰值从(-8.43±2.03)nA升高到(-6.37±1.58)nA,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TFA可以增加豚鼠心室肌细胞ICa-L的幅值,TFA可显著降低豚鼠心室肌细胞INa的幅值。

三七总皂甙对大鼠心肌细胞L-型钙电流的抑制作用

目的 :探讨三七总皂甙对大鼠心肌细胞L -型钙电流 (ICa-L)的抑制作用 .方法 :采用全细胞膜片钳方法分别观测不同浓度三七总皂甙对大鼠心肌细胞L -型钙电流的抑制作用 .结果 :PNS 10 0mg/L和30 0mg/L对ICa -L的抑制率分别为 (2 6 73± 4 5 ) %和 (4 9± 19 6 ) % (P <0 0 1) .结论 :三七总皂甙能阻滞大鼠心肌细胞ICa -L。

血管紧张素Ⅱ及卡托普利对豚鼠心肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

采用膜片钳全细胞记录方式研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及卡托普利对L 型钙电流及钠电流最大峰电流的作用。AngⅡ组L 型钙最大峰电流较对照状态明显增加 ,电压—电流关系曲线形状无明显变化 卡托普利组灌注 3,5min ,L 型钙最大峰电流较对照状态明显降低 ;卡托普利 +AngⅡ组灌注 3,5min ,L 型钙最大峰电流较对照状态也明显降低 ;卡托普利灌注 1min及 3min ,钠电流与对照状态比较均显著性地降低 血管紧张素Ⅱ具有电压依赖性地增加L 型钙电流的作用 ,卡托普利具有电压依赖性地降低L 型钙电流 ,降低钠电流的峰电流 。

小剂量辣椒素对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响(英文)

应用全细胞膜片钳技术研究低浓度辣椒素(capsaicin,cAP)对单个豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响及其作用机制。CAP(1-25 nmol/L)可浓度依赖性增加电压依赖性的ICa-L的峰值并下移I-V曲线。CAP 1,10,25 nmol/L使ICa-L最大峰值分别由-9.67±0.7pA/pF增至-10.21±0.8 pA/pF(P>0.05),-11.37±0.8 pA/pF和-12.84±0.9 pA/pt(P<0.05)。CAP 25 nmol/L可明显使稳态激活曲线左移,激活中点电压(V0.5)由-20.76±2.0mV变至-26.71±3.0mV(P<0.05),表明低浓度CAP改变了钙通道激活的电压依赖性。CAP25 nmol/L对电压依赖性稳态失活曲线和ICa-L从失活状态下复活过程无明显影响。辣椒素受体(VRl)阻断剂钌红(RR,10 μmol/L可阻断低浓度辣椒素的效应。以上结果表明,低浓度辣椒素使钙通道稳态激活曲线左移,增加ICa-L这一效应可能由VR1介导。