大肠杆菌工程菌高密度发酵生产L-抗坏血酸-2-葡糖苷酶

为提高大肠杆菌基因工程菌E.coli-p ET21a高密度培养生产L-抗坏血酸-2-葡糖苷酶产量,采用摇瓶培养的方法,通过考察培养液菌体量和酶产量,筛选适用于E.coli-p ET21a液体深层发酵的培养基。50 L发酵罐采用适用于工业化大生产的搅拌、供氧、p H控制和过程补料方式,进行液体深层发酵放大培养,大幅度提高酶产量。通过优化发酵过程控制p H和诱导温度,发酵液酶活提高至88 U/m L,达到摇瓶培养的10.1倍。研究结果对大肠杆菌基因工程菌高密度培养,高效表达生物酶有重要的参考价值。

2-氧-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸酶法合成工艺优化

以L-抗坏血酸和β-环糊精为底物,利用海洋微生物Y112所产的环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)催化合成2-氧-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G)。在单因素试验的基础上应用Plackett-Burman试验设计筛选出3个对AA-2G产量有显著影响的因素(pH、底物浓度、加酶量),然后应用Box-Behnken方法进行三因素三水平的试验设计优化AA-2G酶法合成工艺。结果表明,最佳工艺条件为:加酶量90.78U/g·β-环糊精,pH 9.07,底物浓度56.81g/L,底物配比11(体积比),转化时间24h,温度45℃。该条件下,AA-2G的产量为10.62g/L。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的合成

以Ｌ抗坏血酸为基本原料合成Ｌ抗坏血酸２磷酸酯镁。对两种合成方法直接酰化法和基团保护法作实验比较和改进。直接酰化法中，采用混合碱（ 包括氧化镁） 可使磷酰化与成盐反应合并为一步进行，并能提高产率，而采用基团保护法能取得最佳的合成效果。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁霜外用治疗黄褐斑临床疗效观察

目的:观察L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁(VC-PMG)霜外用治疗黄褐斑的疗效及安全性。方法:外用10%VC-PMG霜治疗25例黄褐斑患者,并用MicroskinⅡ多功能偏振光皮肤镜图像分析系统对治疗前、后黄褐斑皮损进行客观测量及评价。结果:经10%VC-PMG霜外用治疗各型黄褐斑16周后,平均有效率为20%,其中单一蝶形皮损效果最佳,有效率为44.4%,同一患者治疗前后对色素斑L*、a*、b*值检测结果显示差异有统计学意义(P<0.05)。在临床治疗观察的整个过程中未见明显不良反应发生。结论:局部外用10%VC-PMG霜可以减少黄褐斑患者皮损部位的黑素含量、毛细血管扩张程度,以及减轻黄色素和脂色素以改善色素斑,达到治疗黄褐斑的目的。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的合成与纯化

L-抗坏血酸与丙酮反应生成5,6-O-异丙叉-L-抗坏血酸(IAA),再与三氯氧磷进行磷酰化反应,往反应混合液中加入等体积的95%乙醇,再加入CaCl2溶液,以沉淀出L-抗坏血酸-2-磷酸酯钙晶体;把制得的钙盐溶解在搅拌的阳离子交换树脂的悬浮液中,然后通过阳离子交换柱以除去金属离子,在pH=9下转化为L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁,收率为68.2%(以IAA计)。

L-抗坏血酸-2-三聚磷酸酯的研制

针对L-抗坏血酸结构不稳定、易被氧化的问题,研究了L-抗坏血酸-2-三聚磷酸酯的制备工艺。该工艺的最佳条件:以L-抗坏血酸为原料,以三偏磷酸钠为磷化剂,n(L-抗坏血酸)n∶(三偏磷酸钠)为11∶.4,催化剂添加量为5%,溶液pH值为9,反应温度控制在25℃,经过滤、喷雾干燥等工序得到L-抗坏血酸-2-三聚磷酸酯固体产品,收率达80%以上。

L-抗坏血酸-2-磷酸-6-棕榈酸酯的研究进展

对L-抗坏血酸-2-磷酸-6-棕榈酸酯的物化性质、合成及其抗氧化性及其应用方面进行了综述。

RP-HPLC测定水产饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯含量

建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定水产饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯含量的分析方法。采用ZORBAX SB-C18分析柱(250mm×4.0mm,5μm),以甲醇-离子对试剂缓冲液(15:85,v/v)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为254nm,柱温为30℃,在此色谱条件下,L-抗坏血酸-2-磷酸酯在1.0～100.0mg/l浓度范围内线性关系良好,相关系数r>0.9999,在10.0～50.0mg/kg加标浓度范围内,样品平均回收率为88.7%～101.6%,日内相对标准偏差为1.84%～5.31%,日间相对标准偏差为5.04%～9.13%,方法的检出限为2.0mg/kg。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的制备研究

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁是一种稳定的维生素C衍生物,是维生素C转化的较好途径。改进了基团保护法的催化剂并探讨反应条件对反应的影响。

L-抗坏血酸-2-磷酸-6-棕榈酸酯的合成工艺研究

以L-抗坏血酸-2-磷酸酯和棕榈酰氯为原料,DMAP为催化剂,酰氯化法合成L-抗坏血酸-2-磷酸-6-棕榈酸酯。研究了L-抗坏血酸-2-磷酸酯与棕榈酰氯的摩尔比、反应温度、反应时间等工艺条件对收率的影响。工艺条件优化后,收率达到85%。

牙周膜细胞膜片构建过程中L-抗坏血酸-2-磷酸酯的应用及观察

目的探讨牙周膜细胞(PDLCs)膜片的构建方法,并观察膜片聚合体的组织学特征。方法通过组织块培养法获得PDLCs,经体外鉴定扩增后,用添加50μg/mL的L-抗坏血酸-2-磷酸酯的DMEM培养基连续培养2周,构建PDLCs膜片,将构建的PDLCs膜片在该培养条件下自行聚合获得膜片聚合体,HE染色进行形态学观察。结果 PDLCs被成功分离、培养、鉴定。在加入L-抗坏血酸-2-磷酸酯的DMEM培养基中连续培养2周后获得白色膜状PDLCs膜片。倒置显微镜下观察显示,细胞呈复层生长,且呈典型的纺锤状。PDLCs膜片在该培养条件孵育7d,皱缩形成约米粒大小的球样。经HE染色显示,细胞密度较大,且细胞与细胞之间存在着大量细胞外基质。结论 L-抗坏血酸-2-磷酸酯可以通过增加细胞外基质而促进PDLCs膜片的形成,为利用PDLCs膜片修复牙周组织及牙周缺损提供了技术保证。

L-抗坏血酸-2-三聚磷酸酯的制备及其热稳定性研究

以Vc及三偏磷酸钠为原料,一定温度条件下在水介质中进行酯化反应,一步制得目的产物L-抗坏血酸-2-三聚磷酸酯(AsTP);采用紫外分光光度法对产品定量分析,最后对制备的AsTP与Vc的热稳定性作了对比研究。试验结果表明,制备AsTP的最佳制备工艺条件为:溶液中Vc初始质量分数为10%,三偏磷酸钠与Vc物质的量比为1.2,反应温度为50℃,反应时间为50min,溶液pH值为10,相应Vc-2-三聚磷酸钠转化率可达84.45%。在80℃高温下将相同浓度的Vc与Vc-2-三聚磷酸钠在相同搅拌速率条件下处理90min,处理后Vc有效率仅有2.9%,大部分Vc已经因分解而损失,而AsTP处理后有效率为91.01%,表明其热稳定性比Vc高得多。

L-抗坏血酸-2-单磷酸酯盐的研制

为了制备高效价的L-抗坏血酸-2-单磷酸酯,通过单因素及正交实验,对L-抗坏血酸与三偏磷酸钠在无催化剂存在下反应制备高效价的L-抗坏血酸-2-单磷酸酯的工艺进行了研究。结果表明:n(L-抗坏血酸):n(三偏磷酸钠)=1∶0.392、n(L-抗坏血酸)∶n(氢氧化钠)=1∶0.7、n(L-抗坏血酸)∶n(氢氧化钙)=1∶0.8,溶液pH值为9,反应温度为45 ℃,有效VC 含量为41.8%,L-抗坏血酸-2-单磷酸酯的含量为38.3%。该工艺无需催化剂,三偏磷酸钠加入量少,有效VC和L-抗坏血酸-2-单磷酸酯含量高,反应液成冻快,适合闪蒸干燥以及分离提纯化妆品级L-抗坏血酸-2-单磷酸酯盐。

HPLC法测定L-抗坏血酸中的有关物质及探讨

目的:建立HPLC法测定L-抗坏血酸中的有关物质,并分析L-抗坏血酸中部分降解产物的产生机理。方法:采用Alltima Amino色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8 g,用水溶解并稀释至175 m L,滤过,用水稀释至1000 m L)-乙腈(1︰2,v/v)为流动相;流速:1.0 m L·min-1,检测波长:210 nm,柱温:45℃,进样量:20μL。结果:样品中的杂质2-酮基古洛糖酸和2-酮基古洛糖酸甲酯能被很好地检出,各杂质与主峰间的分离度良好,检测限为0.02μg;并分析了部分降解产物的降解机理。结论:本方法简便,结果准确,为L-抗坏血酸中有关物质的控制提供了参考。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁霜联合氨甲环酸治疗黄褐斑的临床疗效及安全性

目的探讨L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁霜（VC．PMG）联合氨甲环酸治疗黄褐斑的临床疗效及安全性。方法2012年1月至2014年3月94例黄褐斑患者，随机分为两组，观察组47例行VC-PMG外用联合氨甲环酸口服治疗，对照组47例单行氨甲环酸治疗，对两组患者治疗效果及安全性进行分析。结果观察组治疗总有效率为82．98％，对照组为68．09％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；观察组不良反应发生率为8．5l％，对照组为25．53％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；对观察组患者治疗前后的皮损、皮周部位L＊、a＊、b＊、ITA°值进行分析显示，治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）。结论黄褐斑行VC-PMG联合氨甲环酸治疗效果显著，可减少皮损部位的毛细血管扩张程度及黑色素含量．缓解黄色素及脂色素。从而改善色素斑，疗效确切。

HPLC法测定L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的含量

目的测定L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的含量。方法采用Waters Symmetry C18柱，以醋酸钠盐溶液为流动相。检测波长为254nm．流速为0．8mL·min-1，柱温为30℃，测定L-抗坏血酸．2．磷酸酯镁含量。结果L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁在0．6mg·mL-1～3．Omg·mL-1。进样量范围内线性关系良好。r=0．9999（n=6），进样精密度为0．52％。结论本法操作简便、快速。精确。适用于该产品的含量测定。

高效价L-抗坏血酸-2-磷酸酯的稳定性研究

介绍了高效价L -抗坏血酸 -2 -磷酸酯的合成原理及在饲料加工过程中的稳定性 ,与其它类型的VC类产品相比 ,性能优良 ,VC利用率高 。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯合成工艺研究进展

本文介绍了L-抗坏血酸-2-磷酸酯的用途,综述了L-抗坏血酸-2-磷酸酯的合成工艺,并分析了各生产工艺的优缺点,为我国L-抗坏血酸-2-磷酸酯合成工艺的优化提供依据和参考。

L-抗坏血酸-2-磷酸镁的合成与应用研究进展

目的L-抗坏血酸-2-磷酸镁的最佳合成条件和反应混合物的后处理过程的方法探索。方法在HI(57%)、乙酰氯、干燥HCl、SnCl2·2H2O、CuSO4/H2SO4等催化及分子筛填充回流脱水或无水Na2SO4索氏回流脱水下,L-抗坏血酸转化成5,6-异丙叉-L-抗坏血酸。在吡啶或氢氧化钾水溶液中调节PH=12～13,使5,6-异丙叉-L-抗坏血酸2-位羟基被POCl3磷酰化。加水水解磷酰氯成磷酸酯,并通过强酸性阳离子交换树脂脱去保护基团及除去K+,再转变成镁盐。结论该方法产品纯度较高,反应混合物的后处理方法产率较高。

L-抗坏血酸-2-棕榈酸酯钠的合成工艺研究

以L-抗坏血酸和棕榈酰氯为基本原料,以5,6-O-异亚丙基-L-抗坏血酸为中间产物,在无水吡啶中进行酯化反应,经成盐和脱保护反应,制得最终产品。总收率为47%—51%。