L-硝基精氨酸甲酯对大鼠肢体缺血再灌注继发心肌损伤的影响

目的研究L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对肢体缺血再灌注(LIR)后心肌损伤的影响。方法止血带法制作LIR大鼠模型,随机分成缺血再灌注组(A组)、L-NAME处理组(B组)、对照组。B组在再灌注前经静脉给予L-NAME 10 mg/kg,A组和对照组静注等量生理盐水。观察三组心肌组织丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆磷酸激酶(CK)、磷酸激酶同工酶(CK-MB)及NO含量;心脏插管检测平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、收缩期左室内压上升最大速率(DP/DTm ax)、舒张期左室内压下降最大速率(-DP/DTm ax);光镜下观察心肌组织的形态学变化。结果A、B组心肌组织MDA、MPO和TNF-α含量增加(P<0.01,<0.05),血浆CK、CK-MB及NO水平升高(P<0.01),MAP、LVSP等血流动力学指标下降,镜下可见心肌细胞水肿等组织损伤征象。静脉给予L-NAME后,心肌组织MDA、MPO含量增加和血浆CK、CK-MB及TNF-α升高更加明显(P<0.01或P<0.05),NO、DP/DTm ax、-DP/DTm ax显著下降(P<0.01),光镜下心肌组织的损伤性表现加重。结论L-NAME可能通过抑制体内NO生成而加重大鼠LIR继发的心肌损伤。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠生精功能的影响

目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。 方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 (NS) ,1次 /d ,共 12d。于最后 1次给药后 2h颈动脉放血处死动物。收集血清于- 70℃冻存 ,放射免疫法测定血清内睾酮含量 ;Greiss法测定血清NOx-(硝酸盐 /亚硝酸盐 )含量 ;流式细胞术(FCM)测定睾丸内各级生精细胞DNA含量 ,计算 1c、2c、4c期细胞的百分比。 结果 :SNP组血清内NOx-含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,睾酮含量低于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞减少 (P <0 .0 1) ;L NAME组血清内NOx-含量低于NS组(P <0 .0 1) ,睾酮含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞增加 (P <0 .0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,血清内NOx-、睾酮的含量及 1c细胞与NS组无显著性变化 (P >0 .0 5 )。 结论 :增加外源性NO可抑制精子的产生 ,而抑制NO生成途径则可促进精子的生成。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。 方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡。 结果 FCM结合TUNEL法检测发现SNP组亚单倍体峰 (AP峰 )及凋亡指数 (AI)较生理盐水组明显增高 ,L NAME组AP峰及AI显著低于生理盐水组 (P<0 0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,AP峰及AI与生理盐水组无显著性差异 (P >0 0 5 )。 结论 SNP促进生精细胞的凋亡 ,L NAME抑制生精细胞的凋亡 ,其对生精细胞凋亡的调节可能是由一氧化氮 (NO)介导的。

L-硝基-精氨酸甲酯对严重烫伤早期大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:观察L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对严重烫伤早期大鼠血脑屏障(BBB)通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨L-NAME对血脑屏障的保护作用。方法:健康SD大鼠,随机分为正常对照组、假烫伤组、烫伤组、烫伤+L-NAME治疗组。烫伤后又设3、6、12、24、48h等5个时相点,用透射电镜观察BBB超微结构变化;紫外分光光度计检测脑伊文氏蓝(EB)含量;免疫组织化学观察脑MMP-9表达。结果:烫伤后脑EB含量明显增高,MMP-9表达升高,差别具有显著性。电镜显示烫伤后大脑皮质的神经细胞线粒体肿胀或溶解。脑毛细血管周围出现空泡化,内皮肿胀,基底膜厚薄不均。L-NAME治疗后,脑EB含量明显下降,MMP-9表达恢复至正常水平,脑毛细血管、神经细胞、突触及基底膜等超微结构基本恢复正常。结论:烫伤后血脑屏障通透性增高与脑内MMP-9表达升高密切相关,提示MMP-9是严重烫伤后血脑屏障损伤的关键因素。早期应用L-NAME能明显减轻烫伤对BBB的损伤,可能与L-NAME抑制MMP-9表达有关。

尾加压素Ⅱ对大鼠血流动力学的影响及L-硝基-精氨酸甲酯的拮抗作用

目的:观察肺动脉内尾加压素Ⅱ(UⅡ)注射给药对正常大鼠血流动力学的影响以及L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)的拮抗作用。方法:①从正常大鼠肺动脉内注入不同剂量的UⅡ溶液(0.1～30.0nmol·kg-1),对照组注入等量的生理盐水;记录收缩压(SP)、舒张压(DP)、脉压(PP)、平均颈动脉压(mCAP)、平均肺动脉压(mPAP)和心率(HR)的变化。②L-NAME组大鼠预先注入L-NAME(26mg·kg-1)进行预处理,10min后再注射UⅡ(10.0nmol·kg-1);对照组预先注入等量的生理盐水,10min后再注射UⅡ(10.0nmol·kg-1),然后观察UⅡ作用的峰值变化。结果:随肺动脉内UⅡ注射剂量的增加而增强降低SP、DP、mCAP的作用,用L-NAME预处理能削弱其降压作用约60%,而对PP、mPAP、HR无影响。结论:肺动脉内注射UⅡ可剂量依赖性地降低正常大鼠SP、DP、mCAP。L-NAME能削弱其降压作用,表明UⅡ的降压作用部分是通过L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径而实现的。

大鼠孤束核微量注射L-精氨酸对电针抗应激性胃黏膜的损伤

目的:L-精氨酸在一氧化氮合酶的催化作用下生成内源性一氧化氮,观察孤束核内一氧化氮对电针抗应激性胃黏膜损伤的影响。方法:实验于2005-05/12在咸宁学院医学院生理教研室完成。84只健康SD大鼠随机分为正常对照组、单纯应激组、电针+应激组、生理盐水+电针+应激组、L-精氨酸+电针+应激组、L-硝基精氨酸甲酯+电针+应激组,每组14只,7只用于溃疡指数检测,7只用于胃黏膜血流量、胃液酸度和胃黏液量的测定。孤束核微量注射:动物麻醉后固定在脑立体定位仪上,参照paxinos和watson图谱进行定位。注射溶液体积为0.2μL(L-硝基精氨酸甲酯2μg,L-精氨酸5μg),20s内注射完毕。注射完毕后30min再电针。用生理盐水作参照注射。电针方法:将大鼠放置大小适当的特制有机玻璃笼中,双后肢充分暴露。选取双侧足三里穴,1寸毫针刺入。以电针仪给予电刺激,频率为20Hz,强度以大鼠下肢轻微抖动为度,连续电针30min再应激造模。采用冷束缚法制备大鼠应激性溃疡模型,测定各组大鼠胃黏膜的溃疡指数、胃黏膜血流量、胃壁结合黏液量、胃液酸度。组间比较采用t检验。结果:84只大鼠均进入结果分析。与正常对照组比较,单纯应激组胃黏膜溃疡指数、胃液酸度增高,胃黏膜血流量和胃黏液量减少[0分,(41.32±7.20)mmol/L,(323.10±32.40)mV,(1.56±0.30)mg;(37.50±4.20)分,(60.15±9.40)mmol/L,(179.40±41.20)mV,(1.13±0.40)mg,P<0.05～0.001]。与单纯应激组比较,电针+应激组胃黏膜溃疡指数和胃液酸度明显降低,胃黏膜血流量和胃黏液量明显升高[(37.50±4.20)分,(60.15±9.40)mmol/L,(179.40±41.20)mV,(1.13±0.40)mg;(25.40±3.10)分,(49.25±6.50)mmol/L,(234.30±39.10)mV,(1.65±0.30)mg,P<0.05～0.001]。与生理盐水+电针+应激组比较,L-精氨酸+电针+应激组大鼠胃黏膜溃疡指数、胃液酸度增高,胃黏膜血流量和胃黏液量减少[(26.30±3.50)分,(48.63±6.30)mmol/L,(233.20±35.40)mV,(1.61±0.20)mg;(33.20±3.90)分,(58.36±6.90)mmol/L,(191.30±32.30)mV,(1.21±0.30)mg,P<0.05,P<0.01],L-硝基精氨酸甲酯电针+应激组胃黏膜溃疡指数、胃液酸度明显降低,胃黏膜血流量和胃黏液量明显增加[(26.30±3.50)分,(48.63±6.30)mmol/L,(9233.20±35.40)mV,(1.61±0.20)mg;(21.10±3.20)分,(41.45±6.00)mmol/L,(284.50±36.30)mV,(2.01±0.40)mg,P<0.05,P<0.01]。结论:孤束核内一氧化氮参与了电针抗应激性胃黏膜损伤的病理生理过程。

L-精氨酸对深低温停循环脑血流及代谢的影响

目的 通过深低温停循环 (DHCA)转流模型 ,研究L 精氨酸 (L arg)在低温缺血时对脑血流和代谢的影响。方法 采用 3～ 4周龄上海种白猪 ,按临床方法建立体外循环。于转流前、降温 5min、降温末、复温 5min、复温末、常温 6 0min、转流结束等时间点分别测定颈动脉流量、颈内静脉一氧化氮和乳酸含量、脑氧代谢率、脑皮质ATP及一氧化氮合酶活性。结果 L arg能增加脑血流量和加快停循环后脑组织ATP、颈内静脉乳酸含量的恢复 ;L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)却使脑血流量降低和减慢停循环后脑组织ATP及颈内静脉乳酸含量的恢复。结论 在DHCA时应用L arg具有较好的脑保护作用 ;而应用L NAME具有脑损害作用。

侧脑室注射L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠运动能力和运动疲劳后下丘脑一氧化氮表达的影响

一氧化氮（NO）作为一种不同于经典递质的信息传递物质,介导了许多生理过程.在运动中,它对运动系统、心血管系统、免疫系统以及神经系统的功能都有重要影响.一氧化氮合酶（NOS）作为NO的生物合成酶广泛存在于下丘脑[1-4].

L-NAME对大肠癌细胞侵袭和转移的影响

目的探讨N-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对人大肠癌细胞(LS-1 7 4T)侵袭、运动能力的影响及其可能的机制。方法用不同浓度的L-NAME干预LS-1 7 4T细胞,用硝酸还原酶法测定L-NAME对细胞分泌NO的影响;用重组基底膜侵袭实验观察药物对癌细胞侵袭、运动能力的影响;用RT-PCR法检测MMP 2和TIMP 2的表达。结果(1)L-NAME降低了SL-1 7 4T细胞NO的分泌,呈浓度依赖性。(2)0.2 mmol/L,0.4 mmol/L,0.8mmol/L和1.0mmol/L L-NAME处理SL-1 7 4T细胞72 h,对细胞侵袭重建基底膜的抑制率分别为1 0.2 9%,1 9.6 2%,3 4.0 8%和4 2.2 3%(P<0.0 5或P<0.01);(3)对细胞趋化运动抑制率分别为2 0.7 6%,2 4.9 5%,3 9.4 3%和4 6.8 5%(P<0.0 1),同时可降低细胞MMP 2mRNA的表达,而提高TIMP 2mRNA的表达。(4)NO浓度与MMP 2 mRNA表达呈正相关(r=0.8 1 2 4,P<0.0 1),而与TIMP 2mRNA呈负相关(r=-0.7 1 0 6,P<0.0 1)。结论L-NAME具有抑制SL-1 7 4T细胞侵袭和转移的作用;L-NAME的抗侵袭活性与肿瘤细胞MMP 2mRNA和TIMP 2mRNA的表达有关。

奈必洛尔对L-NAME致高血压大鼠左心室重构和Cx43表达的影响

目的观察奈必洛尔对L-NAME致高血压大鼠左心室重构及心肌连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的影响。方法将24只Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组、模型组、奈必洛尔组和阿替洛尔组。除空白对照组,其余三组给予LNAME(60 mg/kg)制备高血压模型鼠,药物治疗组同时分别给予奈必洛尔(8 mg/kg)和阿替洛尔(80 mg/kg)。给药8周,期间每周测定一次收缩压。实验结束后,3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉大鼠,快速分离心脏,免疫组化和Western blot观察左心室Cx43分布和蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠在给予L-NAME 1周后血压逐渐升高,到给药第8周时高达(192.36±6.95)mm Hg。奈必洛尔组血压较模型组显著降低,且明显较阿替洛尔组低。模型组左心室重构,Cx43蛋白表达降低。奈必洛尔抑制左心室重构,增加Cx43表达,改善L-NAME致高血压大鼠Cx43排列紊乱,但阿替洛尔仅增加Cx43表达(P<0.05),对左心室重构无显著影响。结论奈必洛尔在显著降压的同时,可改善L-NAME高血压大鼠左心室重构,增加心肌Cx43表达。

一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对大鼠脑缺血耐受诱导的影响

采用大鼠四血管闭塞全脑缺血耐受模型和脑组织切片形态学方法 ,观察应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂L NAME对大鼠海马CA1区脑缺血耐受 (BIT)诱导的影响 ,在整体水平探讨一氧化氮 (NO)在BIT诱导中的作用。 5 4只Wistar大鼠凝闭双侧椎动脉后分为 6组 :( 1)假手术组 (n =6) :分离双侧颈总动脉 ,但不阻断脑血流 ;( 2 )损伤性缺血组 (n =6) :全脑缺血 10min ;( 3 )预缺血 +损伤性缺血组 (n =6) :脑缺血预处理 (CIP) 3min ,再灌注 72h后行全脑缺血 10min ;( 4)L NAME组 :分别于CIP前 1h和后 1、12及 3 6h腹腔注射L NAME ( 5mg/kg) ,每个时间点 6只动物 ,其余步骤同预缺血 +损伤性缺血组 ;( 5 )L NAME +L 精氨酸组 (n =6) :于CIP前 1h腹腔注射L NAME ( 5mg/kg)和L 精氨酸 ( 3 0 0mg/kg) ,其它步骤同L NAME组 ;( 6)L NAME +损伤性缺血组 (n =6) :于腹腔注射L NAME ( 5mg/kg) 72h后行全脑缺血 10min。实验结果表明 ,( 1)单纯 10min全脑缺血可使海马CA1区组织学分级增加 (表明损伤加重 ) ,神经元密度降低 (P <0 0 1) ;( 2 )预缺血 +损伤性缺血组的海马CA1区组织学分级、神经元密度与假手术组相比 ,无显著性差别 (P >0 0 5 ) ;( 3 )L NAME组中 ,应用L NAME后海马CA1区组织学分级增加 ,神经元密度降低 ,与预缺血

L-NAME对新生鼠缺氧性脑损伤内源性NO和ET的影响

目的 用新生大鼠急性缺氧模型 ,探讨 NO合成酶抑制剂 L-硝基 -精氨酸甲酯 (L- NAME)在缺氧后脑损伤中的作用 ,进而探讨一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)在早期缺氧性脑损伤中的作用地位 .方法 检测正常对照组、缺氧组和缺氧前应用 L- NAME预处理的新生大鼠血浆 ET及脑组织匀浆 NO含量及 NOS的活性 ,并观察各组大鼠脑组织病理改变及毛细血管充盈不良程度 .结果 缺氧组血浆 ET水平较正常对照组显著升高 (P<0 .0 1) ,而脑 NO水平及 NOS活性无显著变化 (P>0 .0 5 ) ,脑毛细血管充盈不良程度与正常对照组相比明显加重 (P<0 .0 5 ) ;L- NAME组血浆 ET水平较缺氧组显著升高 (P<0 .0 5 ) ,脑 NO含量及 NOS活性较缺氧组显著下降 (P<0 .0 1) ,脑毛细血管充盈不良程度与缺氧组相比明显加重 (P<0 .0 5 ) .结论 急性缺氧早期 ,ET异常增高是脑损伤的主要因素 ;此时抑制内源性 NO的合成 。

一氧化氮在枸橼酸铋钾对胃粘膜损伤保护中的作用

的:探讨一氧化氮(Nitric oxide,NO)在枸橼酸铋钾对大鼠胃粘膜损伤保护中的作用。方法:在乙醇诱导大鼠胃粘膜损伤前,预先给予枸橼酸铋钾(80 mg/ kg)灌胃,L-硝基-精氨酸甲酯(L- NAME,4 mg/ kg)、L-精氨酸(2 5 0mg/ kg)及D-精氨酸(2 5 0 mg/ kg)静脉注射。采用激光多普勒血流计(L DF)测定胃粘膜血流量(GMBF) ,镉粒还原和比色法测定胃粘膜和血浆NO- 2 / NO- 3含量,并观察了胃粘膜损伤指数(UI)、溃疡坏死组织和中性粒细胞浸润严重程度的变化。结果:与模型损伤组比,枸橼酸铋钾组大鼠UI明显降低(P<0 .0 1) ,溃疡坏死组织和中性粒细胞浸润程度明显减轻(P<0 .0 1)。预先用L - NAME处理后,枸橼酸铋钾保护胃粘膜损伤作用明显减弱;L - NAME抑制作用可被L -精氨酸拮抗,而不被D-精氨酸拮抗。向胃内灌注枸橼酸铋钾,可增加GMBF、胃粘膜和血浆NO- 2 / NO- 3,L - NAME可逆转这种作用。结论:枸橼酸铋钾对大鼠胃粘膜损伤保护作用与NO有关。

微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗脊髓损伤的实验研究

目的探讨微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME对脊髓继发性损伤的治疗保护作用及机制。方法健康SD大鼠,随机分为对照组、微囊化兔嗅球组织移植组、微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗组,损伤组又设1、3、7、14、28d 5个时相点,紫外分光光度计检测脊髓伊文氏蓝含量,干湿重法测定脊髓组织含水量;免疫组织化学技术检测MMP-9的表达;神经功能评分法(BBB法)评价大鼠术后运动功能的恢复情况。结果脊髓损伤后脊髓伊文氏蓝含量增加、脊髓血管源性水肿、MMP-9表达上调,大鼠的运动功能缺失,经微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗后血脊髓屏障通透性降低、水肿明显减轻、MMP-9表达下调,大鼠的运动功能恢复。结论微囊化异种嗅球组织移植对脊髓继发性损伤有较好的疗效,联合应用嗅球组织细胞和L-NAME在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。

脑缺血再灌注早期L-NAME的脑保护机制研究

目的通过L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠脑缺血再灌注损伤早期MMP-9、GFAP动态表达及与血脑屏障形态、功能关系的研究,探讨脑缺血再灌注早期L-NAME的脑保护机制。方法 108只SD大鼠随机分为3组:假手术组,损伤组,L-NAME治疗组。干湿重法测定缺血脑组织含水量,伊文思蓝测定血脑屏障通透性,免疫组织化学技术检测脑组织的MMP-9蛋白、GFAP蛋白的表达,电镜研究血脑屏障超微结构。结果脑缺血再灌注损伤后大脑皮质的神经细胞线粒体肿胀或溶解;脑毛细血管周围出现空泡化,内皮肿胀,基底膜厚薄不均。脑缺血再灌注损伤后脑含水量和EB含量明显增高,MMP-9、GFAP表达升高,差异具有统计学意义。L-NAME治疗后,脑含水量和EB含量明显下降,MMP-9、GFAP表达恢复至正常水平,脑毛细血管、神经细胞、突触及基底膜等超微结构基本恢复正常。结论 L-NAME对脑缺血再灌注损伤早期具有明显的保护作用,其机制与抑制MMP-9、GFAP表达,清除自由基和调节星形胶质细胞适度增生有关。

CO释放抑制剂ZnPP Ⅸ和NO释放抑制剂L-NAME对大鼠阴茎组织cGMP含量影响的研究

目的:探讨CO释放抑制剂锌卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)和NO释放抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠阴茎组织中cGMP含量的影响。方法:180～220g Wistar大鼠30只,随机均分为3组(正常对照组,ZnPPⅨ组,L-NAME组),ZnPPⅨ组给予ZnPPⅨ[45μmol/(kg.d)],L-NAME组给予L-NAME[50mg/(kg.d)],正常对照组给予生理盐水[1ml/(kg.d)]。用药7d后断头处死大鼠,取阴茎制成匀浆。测定匀浆液中NOS、NO、CO、cGMP含量。结果:与对照组比较,应用CO释放抑制剂ZnPPⅨ后,大鼠阴茎组织中CO、NOS、NO、cGMP含量有一定程度的下降(P<0.05);应用NO释放抑制剂L-NAME后,大鼠阴茎组织中CO、NOS、NO、cGMP含量也较对照组有一定程度的下降(P<0.05)。结论:ZnPPⅨ与L-NAME能够降低大鼠阴茎组织中CO与NO的浓度,同时cGMP的含量也降低。

一氧化氮合酶抑制剂对大鼠创伤性休克的治疗作用

目的 :评价选择性诱导型一氧化氮合酶 ( i NOS)抑制剂氨基胍 ( AG)和非选择性一氧化氮合酶抑制剂L 硝基精氨酸甲酯 ( L NAME)对创伤性休克的治疗效果。方法 :30只 SD大鼠制作创伤性休克动物模型。双侧股骨干砸伤后并经股动脉放血至平均动脉压 ( MAP) 35～ 45 m m Hg( 1mm Hg=0 .133k Pa) ,维持 30 m in,然后回输失血和等量的林格氏液。随机分为休克组 ( 10只 )、AG组 ( 10只 ,复苏时静脉注射 AG8mg/ kg)、L NAME组 ( 10只 ,复苏时静脉注射 L NAME8mg/ kg) ,观察休克前后血浆一氧化氮 ( NO)浓度的动态变化 ,观察 2 4h大鼠存活率 ,2 4h后留取肺、肝、肾、小肠组织 ,观察病理改变。结果 :大鼠创伤性休克后 ,血浆 NO水平明显高于休克前 ;AG组动物复苏后血浆 NO的水平明显降低 ,各脏器的病理损害亦显著减轻 ,存活率明显提高 ;L NAME组动物复苏后血浆 NO的水平也明显降低 ,各脏器的病理损害无明显变化 ,存活率无明显提高。结论 :NO在创伤性休克的病理发展过程中起着重要作用 ,应用 AG有助于创伤性休克的纠正 ,而L NAME能降低 NO的水平 ,但对休克的预后无明显改善。