束缚应激抑制大鼠血小板L-精氨酸转运

目的观察束缚应激7h对大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)通路的影响,并探讨其影响机制。方法制备大鼠束缚-浸水(waterimmersionrestraint,WIR)应激7h模型,采用Greiss法测定血小板孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量;同位素示踪法检测血小板一氧化氮合酶(NOS)活性及L-Arg转运。结果WIR应激组较对照组血小板NOS活性降低45%;L-Arg最大转运速率(Vmax)减少30%,Km增加38%(P<0.01),转运效率(Vmax/Km)减少50%(P<0.05);孵育液NO2-含量减少53%(P<0.01);胃溃疡出现。结论WIR应激损伤血小板L-Arg/NO通路,抑制血小板L-Arg转运和NOS活性,减少血小板NO生成。

硫化氢下调大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路

目的观察硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮(L-Arg/NOS/NO)通路的影响以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法离体孵育大鼠血小板,加入H2S气体溶液(10-6～10-3mol/L)孵育2h,采用Greiss法测定血小板孵育液亚硝酸盐(NO2-)含量;同位素示踪法检测血小板NOS活性及L-Arg转运。结果一次性给予H2S(10-6～10-3mol/L)孵育2h,呈浓度依赖的抑制了L-Arg/NO通路,血小板孵育液中NO2-含量比对照组分别降低6%、11%(均P>0.05)、24%、36%和52%(均P<0.01);NOS活性分别下降1%、14%(P>0.05)、25%、37%和42%(P<0.01);L-Arg转运分别减少12%(P>0.05)到72%(P<0.01);IC50分别为53.02、41.63及21.53μmol/L(P<0.01)。结论H2S通过抑制血小板L-Arg转运和NOS活性,下调L-Arg/NOS/NO通路,从而减少血小板NO生成。

硫化氢下调大鼠主动脉L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路

目的 观察H2S对血管L-精氨酸/一氧化氮（L-Arg/NO）通路的影响以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法 离体孵育大鼠主动脉薄片, 加入H2S供体NaHS（10^-7～10^-4 mol·L^-1）孵育4 h,及50 μmol·L^-1NaHS分别孵育2、4和6 h.采用Greiss法测定血管亚硝酸盐含量；同位素示踪法检测血管组织一氧化氮合酶（NOS）活性及L-Arg转运, RT-PCR检测eNOS、CAT1基因表达。结果 一次性给予50 μmol·L^-1NaHS,孵育2 h,孵育液中NO2-含量比对照组低62%,血管NOS活性下降48%,L-Arg转运减少50%（P〈0.01）;孵育6 h,NO2-含量比对照组低19%（P〈0.05）,而NOS活性和L-Arg转运已基本恢复（P〉0.05）.NaHS（10^-7～10^-4 mol·L^-1）,呈浓度依赖的抑制了L-Arg/NOS/NO通路,IC50分别为0.499、3.198及3.927 μmol·L-1（P〈0.01）；而给予50 μmol·L^-1NaHS后，eNOS和CAT-1A的mRNA表达分别减少34.3%和55.1%（P〈0.01）。结论 H2S通过抑制血管组织L-Arg转运和NOS活性和基因表达,下调L-Arg/NOS/NO通路,从而减少血管NO生成。

冠心病介入术患者血管内皮依赖性舒张功能与血小板L-精氨酸/一氧化氮通路的关系

目的探讨冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)手术前、后血小板L-精氨酸(L-Arg)/一氧化氮合成酶(NOS)/一氧化氮(NO)通路和血管内皮依赖性舒张功能(FMD)的变化和关系。方法对照组17例,为健康体检者;PCI组20例,为接受PCI成功的冠心病患者。分别于对照组体检当天及PCI组术前、术后即刻、术后24h和术后72h,检测肱动脉FMD、血小板孵育液亚硝酸盐(NO2-)水平、NOS活性及L-Arg转运量,分析FMD与血小板NO、NOS和L-Arg转运量间的关系。结果 PCI组术前FMD和血小板NO2-水平、NOS活性、L-Arg转运量较对照组显著降低(P<0.01);术后即刻进一步下降(P<0.01),术后24h逐渐恢复,术后72hFMD、NO2-、NOS、L-Arg转运均恢复到术前水平(P>0.05);PCI手术前、后FMD与血小板NO2-、NOS、LArg转运改变均呈显著正相关(P<0.01)。结论检测血小板L-Arg/NO通路可反映PCI血管内皮功能的改变。

白藜芦醇对束缚应激大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮通路的影响

目的探讨白藜芦醇对急性应激大鼠血小板聚集功能和L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路的保护作用及机制。方法复制水浸-束缚应激(WRS)大鼠模型,分对照组,应激组,白藜芦醇低、中、高剂量组,白藜芦醇各组于应激前分别按30、601、20mg/kg灌胃;对照组和应激组灌服同等容量的生理盐水。应激8h后测定血小板最大聚集率、血小板孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量、血小板NOS活性和L-Arg转运。结果白藜芦醇明显抑制WRS时血小板最大聚集率的升高,缓解WRS所致的血小板L-Arg转运、NOS活性和孵育液NO2-含量下调,以白藜芦醇中剂量组作用显著(P<0.05或P<0.01);person相关分析,白藜芦醇对WRS大鼠血小板最大聚集率的影响与NO释放呈显著负相关,r=-0.808 7,P<0.01。结论白藜芦醇可抑制WRS刺激的血小板聚集,改善应激损害的L-Arg/NO通路功能,两者的改变呈负相关。

动脉粥样硬化家兔主动脉左旋精氨酸/一氧化氮途径的变化

目的 通过观察动脉粥样硬化家兔主动脉一氧化氮 (NO)产生及主动脉左旋精氨酸 (L Arg)转运的变化 ,探讨动脉粥样硬化疾病发生的可能机制。方法 12只家兔分为高脂组及对照组 ,每组 6只 ,分别喂以高脂饮食及普通饮食 6周 ,取血测定血浆胆固醇 (T Chol)、甘油三酯 (TG)及低密度脂蛋白 (LDL)水平 ,测定血浆亚硝酸盐 (NO-2 )含量 ,测定主动脉孵育液中NO-2 含量及主动脉L Arg转运变化。结果 (1)高脂组T Chol、TG及LDL水平明显高于对照组 ,分别是 18.6倍、2 .4倍及 48.8倍 (P <0 .0 1) ;(2 )高脂组血浆NO-2 含量高于对照组约 2 0 0 % (P <0 .0 1)。主动脉孵育液NO-2 含量高于对照组 17% (P <0 .0 1) ;(3)高脂组主动脉L Arg转运低亲和力Vmax较对照组增加 9倍(P <0 .0 1) ,Km较对照组增加 1.8倍 (P <0 .0 1) ;(4)高脂组主动脉总的一氧化氮合酶 (tNOS)活性较对照组显著增强 ,比对照组高 73% ,诱导性合酶 (iNOS)比对照组高约 2 0 0 % ,原生型合酶 (cNOS)比对照组低 40 % (P <0 .0 1) ;(5 )血浆精氨酸水平两组间无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 动脉粥样硬化时血管组织L Arg/NO系统功能紊乱 ,内皮源性cNOS活性明显降低 ,而非内皮源性的L Arg转运与iNOS活性显著增强 ;血管L

自发性高血压大鼠心脏与红细胞L-Arg转运的改变

研究自发性高血压大鼠 (spontaneouslyhypertensiverats ,SHR)心脏L 精氨酸 /一氧化氮 (L Arg/NO)系统的改变及其与红细胞L Arg转运的关系。检测 12周龄 (W)、16W、captopril治疗 4周后的 16WSHR (SHR +C)及同龄Wistar Kyoto (WKY)大鼠心脏的L Arg转运、tNOS活性、NO 2 +NO 3 和cGMP含量以及红细胞L Arg转运的改变。结果显示 ,SHR心室肌组织L Arg高亲和转运成分的最大转运速率 (Vmax)及低亲和转运成分的米氏常数 (Km)均明显低于WKY大鼠 ;但高亲和转运成分的Km 值和低亲和转运成分的Vmax则无明显改变 ;SHR +C组的改变基本同 12W组。心肌组织tNOS活性的变化无统计学意义。NO 2 +NO 3 及cGMP含量则分别较WKY组降低 2 4 6 %、19 8% (P >0 0 5 ,P <0 0 5 ,12W组 ) ,5 2 5 %、6 0 4% (P <0 0 1,P <0 0 1,16W组 )和 14 8%、2 3 % (P >0 0 5 ,P <0 0 5 ,SHR +C组 )。tNOS活性、cGMP含量与LVW/BW呈负相关 ,r=0 45 0 7,P =0 0 5 (NOS) ,r=0 6 898,P <0 0 1(cGMP)。红细胞L Arg转运的改变与心脏一致 ,且其Vmax与心肌组织高亲和转运成分的Vmax呈正相关 ,r=0 5 6 0 6 ,P =0 0 1;与LVW /BW呈负相关 ,r=- 0 6 2 31,P <0 0 1。以上结果表明 ,SHR心室肌组织L Arg/NO系统活动被抑制 。

高血压大鼠主动脉一氧化氮合成途径的变化

目的 观察高血压大鼠主动脉内膜、中膜和外膜一氧化氮合成途径的改变 ,并探讨其可能的病理生理意义。方法 Wistar大鼠缩窄腹主动脉复制高血压模型 ,动物随机分为对假手术组和高血压组。取大鼠主动脉 ,分离血管内膜、中膜和外膜。分别测定其亚硝酸盐 (NO2- )生成量、一氧化氮合酶 (NOS)活性及L -精氨酸 (L Arg)转运 ,免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的分布。结果 与假手术组相比 ,高血压大鼠血浆中一氧化氮代谢产物 (NOx)高2 6 .2 % (P <0 0 5 ) ;主动脉NO2- 生成低 6 5 .8% (P <0 0 1) ,中膜及外膜孵育液的NO2- 生成量分别高 5 9.6 %和 12 3.6 % (均P <0 0 1) ;主动脉内膜NOS活性低 5 9.3% (P <0 0 1) ,中膜和外膜NOS活性分别高 6 2 .6 %和 118.7% (均P <0 0 1) ;血管内膜L Arg转运率低 6 2 .5 % (P <0 0 1) ,中膜和外膜L Arg转运率分别高 5 3.7%和 99.8% (均P <0 0 1)。iNOS免疫组化染色显示 ,高血压大鼠血管中膜和外膜尤其是外膜iNOS阳性染色明显增强。结论 高血压大鼠血管壁一氧化氮合成与代谢发生改变 ,血管内膜L Arg NOS NO途径受抑 ,而中膜和外膜尤其是外膜的L Arg NOS NO系统的活性增强 ,血管生成的NO增多。提示血管中膜和外膜源NO增多在高血压时可能具有一定的代偿作?

运动对血小板内NO影响的研究进展

运动锻炼对高血压的发生、发展有良好的防治作用,其作用机制是多途径的。血小板内存在L-精氨酸/一氧化氮系统,自身能合成一氧化氮。血小板源一氧化氮,在调节血小板的粘附、聚集、血小板再摹集功能中起重要作用,并能延缓动脉血栓的形成。高血压时血小板内L-精氨酸/一氧化氮系统的功能下降,运动锻炼可改善血小板L-精氨酸/一氧化氮系统的功能,促进血小板L-精氨酸跨膜转运,提高血小板一氧化氮合酶的活性和血小板源一氧化氮活性。运动锻炼对血小板L-精氨酸/一氧化氮系统的调节作用可能是运动防治高血压血栓性并发症的一个新机制。

束缚性应激对大鼠血小板NO合成通路的影响

目的观察急性应激对大鼠血小板一氧化氮(NO)释放的影响及其机制。方法大鼠浸水-束缚应激(WRS)2、4和8 h,以胃溃疡指数(UI)作为应激损伤的标识,采用Greiss法测定血小板孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量;同位素法测其一氧化氮合酶(NOS)活性和L-精氨酸(L-Arg)转运量。结果WRS 2 h血小板L-Arg转运量、NOS活性和孵育液NO2-含量较对照组显著增加,但随应激时间延长,其呈下降趋势,应激8 h时均显著低于对照组,胃溃疡逐渐加重。结论WRS应激早期阶段可上调血小板L-Arg/NO通路,促进血小板NO生成;长时间应激下调L-Arg/NO通路,减少NO释放。