反向高效液相色谱测定发酵液中的聚苹果酸

采用高效液相色谱柱Alltima^TM C18（4．6mm×150mm,4μm）上定量测定发酵生产的聚苹果酸，流动相为乙腈和0．025mol／L磷酸二氢钾混合溶液（磷酸调pH2．5）（V：V=5：95），流速1．0mL／min，检测波长210nm，柱温25℃，进样量5μL。发酵液经离心除菌体、纯沉除多糖、水解处理后进样，可以将其中的L-苹果酸完全分离定量。采用液相方法的回收率为98．70％-100．65％，RSD为0．4-1．11％。采用试剂盒的方法的回收率为96．7-97．23％，RSD为0．57-1．19％。可见，液相的精确度和试剂盒相差不大。但液相的价格相对比试剂盒要便宜很多，说明该法是测定发酵液中聚苹果酸的一种很有效的方法。

出芽短梗霉发酵液中聚苹果酸测定方法的比较

应用α-2,7-萘二酚法和酶试剂盒法分别对L-苹果酸标准品和出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)发酵液中的聚苹果酸进行检测,比较二者的差异,并研究了酸解过程对两种检测方法的影响。结果表明:检测L-苹果酸标准品,α-2,7-萘二酚法回收率为99.58%～100.1%,相对标准偏差为0.71%～0.95%,酶试剂盒法回收率为99.6%～100.22%,相对标准偏差为0.55%～0.6%,经统计学分析两种方法的准确度和精密度无显著性差异;检测发酵液中聚苹果酸,α-2,7-萘二酚法相对标准偏差为2.49%～3.61%,酶试剂盒法相对标准偏差为0.81%～1.18%,经统计学分析两种方法的准确度和精密度无显著性差异;酸解过程对两种检测方法均无显著影响。