一种L-选择素配体合成酶在子宫内膜异位症种植窗期内膜中的表达

目的检测N乙酰氨基葡萄糖6磺基转移酶(Nacetylglucosamine6Osulfotransferase),一种合成L选择素配体的关键酶,在生育年龄的子宫内膜异位症患者及非子宫内膜异位症妇女种植窗期子宫内膜中的表达。方法采用RTPCR技术检测8例子宫内膜异位症患者和20例非子宫内膜异位症妇女种植窗期子宫内膜中N乙酰氨基葡萄糖6磺基转移酶的表达。结果种植窗期子宫内膜有该酶的表达;子宫内膜异位症组表达的灰度值为0.124±0.069,明显少于对照组0.511±0.25(P<0.05)。结论子宫内膜异位症患者在位子宫内膜种植窗期N乙酰氨基葡萄糖6磺基转移酶的基因表达呈降调状态,这种异常表达可能与子宫内膜异位症患者胚胎的种植率低下以及异位病灶的发病机制有关,成为导致不孕的病理环节之一。

L-选择素配体合成酶在卵巢癌组织的表达

目的探讨L-选择素配体合成酶N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶在卵巢癌组织中的表达。方法选取卵巢癌患者28例(恶性组)、卵巢上皮性囊腺瘤患者10例(良性组)和围绝经期子宫肌瘤行全子宫及附件切除术患者所切除卵巢组织10例(对照组)。应用RT-PCR方法检测N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶在卵巢组织中的表达。结果恶性组N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶mRNA的表达水平显著高于良性组和对照组(P<0.05)。良性组和对照组的表达无差异。上皮性卵巢癌组织中N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶的mRNA的表达水平随临床分期增加而增加。结论N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶作为L-选择素配体合成酶在卵巢癌的发生、发展、转移侵袭过程中发挥作用。

人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化

目的利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombi-nant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径。方法将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性。结果sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%。结论sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性。

N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(FucT-VII)在输卵管上皮的表达与输卵管妊娠的关系

目的:探讨输卵管上皮内N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(Fuc T-VII)表达与输卵管妊娠发生的关系。方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RTPCR)的方法,检测输卵管妊娠患者的输卵管胚囊着床部位组织(EP-2组,n=23),输卵管胚囊着床旁部位组织(EP-1组,n=23),正常输卵管组织(CT组,n=16)的CHST2和Fuc T-VII的表达情况。结果:免疫组织化学法检测到输卵管妊娠胚囊着床部位CHST2和Fuc T-VII表达明显上调,与正常组相比差异有显著统计学意义(P<0.05)。RT-PCR方法检测CHST2 m RNA和Fuc T-VII m RNA在输卵管妊娠胚囊着床部表达水平高于正常组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:L-选择素与其配体相结合的机制可能参与了输卵管妊娠的发生。