辛伐他汀对兔急性心肌梗死后心室肌细胞L-钙离子通道电流的影响

目的通过研究辛伐他汀预处理对兔急性心肌梗死后24h心室肌细胞L-钙离子通道电流(ICa-L)的影响,探讨他汀类药物抗心律失常的细胞学离子机制。方法45只新西兰大耳白兔随机分为3组:心梗组、辛伐他汀治疗组和假手术对照组。采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死(AMI)动物模型,采用酶解的方法分离心室肌外膜单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录ICa-L,同时检测各组血脂水平。结果各组动物血脂水平无显著差异。对照组、心梗组和他汀组ICa-L电流密度峰值(0mV)分别为(-4.56±1.01)pA/pF(n=15),(-3.23±0.91)pA/pF(n=12)和(-4.18±0.95)pA/pF(n=12)。心梗组较对照组明显下降(P<0.05),他汀组较心梗组明显升高(P<0.05)。另外,心梗组ICa-L失活曲线较对照组左移,他汀组较心梗组右移。结论急性心肌梗死可导致梗死区心肌细胞ICa-L明显下降,辛伐他汀预处理可减轻ICa-L异常变化,逆转电重构,而不依赖于降血脂效应,可能为他汀类药物降低心律失常发生率的细胞学离子机制。

Na_v 1.7与L-型钙离子通道在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨钙离子通道1.7亚型(Na_v1.7)与L-型钙离子通道在子宫颈癌中的表达及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测60例宫颈癌组织、10例经放化疗前后的宫颈癌组织、10例正常宫颈组织中的Na_v1.7与L-型钙离子通道的表达。结果:Na_v1.7在宫颈癌中平均值为1.640 3,在正常宫颈组织中不表达,两者相比有显著性差异(P<0.01)。Na_v1.7 mRNA在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为0.960 1、0.991 8及1.901 4,低分化组Na_v1.7 mRNA表达高于高、中分化组,差异有统计学意义(P<0.05)。Na_v1.7 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期的表达为0.986 7,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期中的表达为1.899 3,差异有统计学意义(P<0.05),Na_v1.7 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.401 0与放化疗后的0.300 1相比,有显著性差异(P<0.01)。L-型钙离子通道α21C亚单位mRNA(L-Ca+α_1C mRNA)在正常宫颈组织中与宫颈癌组织中的灰度值的平均值为0.091 4及0.357 3,差异有统计学意义(P<0.05)。LCa^(2+)α_1C mRNA在高分化癌、中分化癌及低分化癌中的表达分别为0.291 2、0.304 3及0.493 5,差异有统计学意义(P<0.05)。L-Ca^(2+)α_1C mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中的表达为0.475 4,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期中的表达为0.833 7,差异有统计学意义(P<0.01)。L-Ca2+α_1C mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中的表达为0.531 6与放化疗后的0.102 4相比,有显著性差异(P<0.01)。结论:Na_v1.7与L-型钙离子通道在宫颈癌中高表达,与宫颈癌的不良预后有关。放化疗可降低Na_v1.7与L-型钙离子通道基因的表达,与疗效相关。

不同银杏叶提取物浓度对痴呆大鼠海马神经元L-型钙离子通道的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract.EGB761)对痴呆大鼠海马神经元L-型钙离子通道的作用。方法:酶加机械分离方法获得痴呆大鼠海马神经元,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流。结果:①细胞外给予EGB对正常的高电压激活钙通道电流(IHvA)没有影响。②使用β-淀粉肽(1-40)(β-amyloid peptideI-40,AβI-40)后分别使用1μmol/L,10μol/L,20μmol/L EGB,显示L型钙电流(ICa-L)/电压(I-V)曲线逐渐上移,但出现电流峰值的电压不变,这表明EGB可抵消Aβ对IHvA的增强作用。结论:银杏叶提取物可通过抑制钙离子内流对神经元起一定保护作用。

乙醇对兔心室肌细胞L-型钙离子通道电流的影响

【目的】观察乙醇对兔心室肌细胞L-型钙离子通道电流(ICa,L)的影响。【方法】采用蛋白酶消化的成年兔单个心室肌细胞及膜片钳全细胞技术,记录不同浓度乙醇对ICa,L的作用。【结果】(1)乙醇抑制ICa,L峰值,24 mmol/L和240 mmol/L乙醇抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)24、80、240 mmol/L乙醇使ICa,L的电流-电压(I-V)曲线上移,在各测试电压下,电流均减小,但不影响曲线形状,用乙醇后最大激活电压仍在0mV左右。【结论】致毒浓度(24 mmol/L)的乙醇对ICa,L具有明显抑制作用。可导致心肌产生负性肌力作用,动作电位时程缩短,诱发心律失常。

L-型钙离子通道抑制剂药效团模型的构建

目的构建L-型钙离子通道抑制剂的药效团模型,为从中药化学成分中发现具有钙离子通道抑制作用的成分提供了新的方法,同时为先导物改造成为活性较好的钙离子通道抑制剂提供思路。方法以来源于NCBI数据库中对新西兰兔心脏L-型钙离子通道具有抑制作用的12个化合物为研究对象,利用HipHop定性药效团模型构建方法,建立L-型钙离子通道拮抗剂的药效团模型,利用数据库搜索方法对药效团模型进行优劣评价。结果获得最优药效团模型具有以下几个特征:2个氢键受体和4个疏水基团,其综合评价指数CAI为2.78。结论构建的定性药效团具有一定的可靠性,可用于开展活性化合物筛选和指导先导化合物的结构改造,有助于指导发现中药中的L-型钙离子通道阻滞剂。

Leptin对大鼠肥厚心肌细胞L-型钙离子通道的影响

Lepfin主要是由白色脂肪细胞分泌的蛋白质类激素，除促进脂肪代谢外，还对多种心血管疾病有保护作用，如可加速心肌重塑等。心肌细胞L-型钙离子通道是重要的离子电流之一，在心肌动作电位形成和机械收缩活动中起作用。因此，本研究通过给予肥厚心肌细胞不同浓度Lepfin处理，观察其对L-型钙离子通道的影响。

急性心肌梗死L-型钙离子通道变化的仿真模拟

本文利用Zhang等构建的完整兔子的心脏窦房结—心房细胞体系二维解剖模型为研究对象,通过计算机仿真模拟,研究了细胞外钙离子浓度和迷走神经调节对心肌细胞L-型钙离子通道电流的影响。结果发现:一方面,细胞外钙离子浓度在一定范围内升高时,心律会适当加快;在钙离子浓度较高的情况下,心脏会停止跳动。另一方面,迷走神经释放的递质——乙酰胆碱浓度升高,心肌细胞运动电位周期变短,心律加快。上述结果表明,细胞外钙离子浓度和乙酰胆碱浓度对心肌细胞L-型钙离子通道电流具有明显的抑制作用,可导致心肌细胞产生负性肌力作用,诱发心律失常。

氯沙坦对静态牵张刺激导致肥大心室肌细胞中L型钙离子通道表达的影响

目的探讨氯沙坦对静态牵张刺激导致的肥大心室肌细胞中L-型钙离子通道Cav1.2亚基及其蛋白表达的影响。方法 1d龄SD乳鼠,采用胰酶消化法分离获得心室肌细胞分为对照组、静态牵张组、氯沙坦组、静态牵张+氯沙坦组。定量分析细胞蛋白/DNA比值、BNP及细胞面积以鉴定牵张有效性。实时荧光定量PCR检测Cav1.2的mRNA水平;蛋白质印迹法检测Cav1.2蛋白表达水平。结果静态牵张刺激导致心室肌细胞蛋白/DNA比值,BNP基因表达,心室肌细胞面积增大。静态牵张刺激导致心室肌细胞Cav1.2mRNA及蛋白表达水平下调,氯沙坦干预该效应。结论氯沙坦可以抑制静态牵张刺激导致的心室肌细胞Cav1.2基因及蛋白水平的低表达。

三碘甲腺原氨酸对缺氧/复氧致乳小鼠心室肌细胞钙离子通道异常的影响及其信号通路机制

目的观察三碘甲腺原氨酸(T3)对缺氧/复氧(H/R)乳小鼠心室肌细胞钙离子通道异常的影响及PI3K/Akt信号通路在其中的作用。方法分离乳小鼠心室肌细胞并建立细胞H/R模型,设置正常对照(Control)组、H/R组、T3+H/R组、T3+H/R+LY294002(LY)组、H/R+LY组。利用膜片钳技术,观察L-型钙离子通道电流(ICaL)的变化,Western blot检测心肌细胞PI3K/Akt信号通路的表达。结果与Control组比较,H/R组ICaL峰值电流减小(P<0.01),I-V曲线上移;与H/R组比较,T3+H/R组ICaL峰值电流增大(P<0.01),H/R+LY组ICaL峰值电流减小(P<0.01);与T3+H/R组比较,T3+H/R+LY组ICaL峰值电流减小(P<0.01)。与Control组比较,H/R组V1/2明显减小(P<0.05),失活曲线右移,失活减慢。与H/R组比较,T3+H/R组V1/2增大(P<0.05),失活曲线左移,失活加快。与Control组比较,H/R组V1/2升高(P<0.05),激活曲线左移,激活加快;与H/R组比较,T3+H/R组V1/2减小(P<0.05),激活曲线右移,激活减慢。与Control组比较,H/R组心肌细胞P-PI3K及P-Akt表达减少(P<0.01);与H/R组比较,T3+H/R组心肌细胞P-PI3K及P-Akt表达增加(P<0.01),H/R+LY组心肌细胞P-PI3K及P-Akt表达减少(P<0.01);与T3+H/R组比较,T3+H/R+LY组心肌细胞P-PI3K及P-Akt表达减少(P<0.01)。结论心肌细胞H/R时ICaL电流减小,影响心肌细胞兴奋收缩,而T3可以通过激活PI3K/Akt信号通路保护L-型钙离子通道,减少通道电流的下降,从而发挥其心脏保护作用。

L型钙离子通道的生物学特性及其在听觉功能中的作用

电压门控性钙离子通道(voltage-gatedcalciumchannel,VGCC)是钙内流的主要途径,依据电生理和药理学特性可以分为L、N、P/Q、R和T五型,能被二氢吡啶类(dihydropyridines,DHPs)拮抗的VGCC通道属于L-型钙离子通道(L-type Ca^2+channels,LTCCs)。作为钙离子通道中的重要一员,LTCCs广泛存在于各种兴奋细胞及许多非兴奋细胞中,介导的细胞功能包括兴奋-收缩耦联、信号转导、神经递质的释放等,在听觉系统的发育、内耳钙离子稳态以及听觉功能的正常发挥中起重要作用。本文对L型钙离子通道的生物学特性及其在听觉功能中的作用进行综述。

雌激素对大鼠阴道平滑肌细胞兰尼碱受体1和L-型钙通道V1.3表达的影响

目的:研究卵巢去势大鼠阴道平滑肌中兰尼碱受体1(RyR1)和L-型钙通道V1.3(Cav1.3)的表达,以探讨RyR1和Cav1.3与雌激素在女性性功能障碍中的相关性。方法:40只8周龄雌性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组)、假手术4周组(B组)、去势2周组(C组)和去势4周组(D组)。术后2、4周运用全自动化学发光免疫法测定各组大鼠血清雌激素水平,RT-PCR和免疫组化法检测阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的mRNA及其蛋白表达。灰度比值表示RyR1和Cav1.3的mRNA表达量,积分光密度值表示RyR1和Cav1.3蛋白表达量。结果:血清雌激素水平C组[(0.210±0.026)nmol/L]较A组[(0.505±0.053)nmol/L]显著降低(P<0.01),D组[(0.130±0.031)nmol/L]较B组[(0.476±0.058)nmol/L]显著降低(P<0.01)。RyR1和Cav1.3在各组大鼠阴道平滑肌内均有表达。RyR1mRNA灰度比值C组(0.680±0.073)较A组(0.950±0.064)显著降低(P<0.01),D组(0.220±0.032)较B组(0.890±0.072)显著降低(P<0.01);Cav1.3mRNA灰度比值C组(0.580±0.043)较A组(0.870±0.019)显著降低(P<0.01),D组(0.190±0.020)较B组(0.820±0.021)显著降低(P<0.01)。RyR1蛋白表达积分光密度值C组(96.67±7.75)较A组(123.69±10.66)显著降低(P<0.01),D组(86.45±8.16)较B组(109.31±9.87)显著降低(P<0.01);Cav1.3蛋白表达积分光密度值C组(87.97±6.96)较A组(106.46±8.04)显著下降(P<0.01),D组(69.43±8.30)较B组(97.38±7.56)显著降低(P<0.01)。结论:RyR1和Cav1.3在大鼠阴道平滑肌内均有表达,雌激素可能通过影响大鼠阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的表达参与女性性反应调控。

葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响

目的观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道的作用。方法采用酶加机械分离法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果低浓度葛根素(1.2mmol/L、2.4mmol/L)对L-型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8mmol/L、9.6mmol/L时,L-型钙离子通道平均开放时间对照组由(11.77±4.84)ms缩短到(7.95±2.51)ms和(4.53±0.83)ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol/L时,通道开放时间降至(3.042±0.792)ms。当葛根素达到一定浓度(4.8mmol/L,9.6mmol/L)时,通道开放概率对照组由(1.1×10-3±1.0×10-4)%降低到(5.3×10-4±1.8×10-4)%和(3.2×10-4±1.3×10-4)%,随着浓度的进一步增加(19.2mmol/L),开放概率降至(2.1×10-3±9.0×10-5)%。结论葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。

葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响

目的:观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道的作用。方法:采用酶加机械分离的方法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果:低浓度葛根素(1.2,2.4mmol·L-1)对L型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8,9.6mmol·L-1时,L型钙离子通道平均开放时间由对照组的11.773±4.838ms分别减少到7.948±2.513ms和4.533±0.828ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol·L-1时,通道平均开放时间降至3.042±0.792ms(P<0.05)。当葛根素达到一定浓度(4.8,9.6mmol·L-1)时,通道开放概率由对照组的0.0011±0.0001分别减小到0.00053±0.00018和0.00032±0.00013(P<0.05),随着浓度的进一步增加(19.2mmol·L-1),开放概率降至0.00021±0.00009(P<0.05)。总体而言,葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。结论:葛根素可以抑制大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道,减少通道开放时间,降低通道开放概率,并成浓度依赖性。提示临床上葛根素治疗缺血性中风可能与其抑制神经细胞L型钙离子通道的开放,防止钙超载有关。

天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠血清Ca^(2+)浓度及血管平滑肌细胞钙通道的影响

目的:探讨天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠(SHR)的血压及血管平滑肌细胞钙通道电生理特征的影响,阐明天麻钩藤饮对血压干预的作用机制。方法:选用12周龄自发性高血压雄性大鼠45只,随机分为5组。治疗4周后测量收缩压,用全自动图像分析系统进行分析,测定血清游离钙浓度,用全细胞模式膜片钳技术记录分析血管平滑肌细胞L型电压依赖性钙通道的特性。结果:①天麻钩藤饮组用药4周后SHR血压下降最明显(P<0.01);②用药前后天麻钩藤饮组血清游离钙浓度改变没有统计学意义(P>0.05);③天麻钩藤饮组有明显减少血管平滑肌细胞Ica-L内流的作用。结论:①天麻钩藤饮和硝苯地平能够抑制早期的高血压,天麻钩藤饮长期降压效果优于硝苯地平;②天麻钩藤饮有明显的阻滞血管平滑肌细胞L型钙离子通道的作用,这可能是其降压作用机制之一。

利用重定位策略从中药中发现L-型钙离子通道作用降压药

该文以来源于NCBI数据库中对新西兰兔心脏L-型钙离子通道具有抑制作用的12个化合物为研究对象,利用Hip Hop定性药效团模型构建方法,建立L-型钙离子通道拮抗剂的药效团模型,利用数据库搜索方法对药效团模型进行优劣评价,同时,以所得的最优药效团模型对Drugbank和TCMD进行筛选,通过匹配程度和文献验证分别对从Drugbank中筛选所得的已上市药物进行降压作用重定位和从TCMD中筛选所得中药有效成分进行降压作用评价。结果获得最优药效团模型具有2个氢键受体和4个疏水基团,其综合评价指数CAI为2.78,从Drugbank中筛选的已上市药物93个,从TCMD筛选的中药有效成分285个。该文所构建的定性药效团具有一定的可靠性,可用于活性化合物筛选;Drugbank中筛得化合物,如普伐他汀,具有潜在的L-型钙离子通道抑制作用;TCMD筛选的中药化学成分,如白花前胡素Ⅲ、牛蒡苷元是潜在的降压药物。该策略有助于从中药中开展L-型钙离子通道的药物重定位研究。

快速心房起搏对家兔心房肌细胞内钙离子浓度及L-型钙通道表达的影响

房颤是临床常见的心律失常，但对房颤产生的具体机制缺乏统一的观点。尽管研究发现细胞内钙超载导致心房肌发生了电生理重构，引起房颤的发生和维持，但对房颤早期心房肌细胞内是否存在钙超载仍缺乏直接证据。本文通过建立兔的快速心房起搏（rapid atrial pacing，RAP）模型，检测不同时相点心房肌细胞内游离钙离子浓度和L-型钙离子通道的基因表达改变，为揭示房颤早期的电生理机制提供实验依据。

血管平滑肌细胞离子通道与高血压发生机制的研究进展

L-型钙离子通道、电压门控型钾离子通道和大电导钙激活钾离子通道是冠状动脉平滑肌细胞上的主要离子通道,其中L-型钙离子通道和电压门控型钾离子通道主要调节血管收缩,而大电导钙激活钾离子通道主要调节血管舒张。近年来,细胞电生理研究表明高血压时上述三种离子通道的结构和功能发生异常,表现为高血压时L-型钙离子通道表达上调、电压门控型钾离子通道及电导钙激活钾离子通道表达下降。

辛伐他汀对快速起搏家兔心房重构的影响

目的建立家兔快速心房起搏模型,探讨辛伐他汀对快速心房起搏早期心电图心房有效不应期(AERP)变化及心房L型钙离子通道α1c亚单位蛋白表达的影响。方法42只家兔均分为对照组、心房快速起搏组、辛伐他汀干预组。辛伐他汀干预组每天5 mg/(kg·d)辛伐他汀灌胃2周,其余组以等量生理盐水灌胃2周,对照组不行起搏。心房快速起搏组和辛伐他汀干预组行快速心房起搏(800次/分)建立急性心房纤颤模型,分别测定各组在0、1、2、4、6、8 h(记为P0、P1、P2、P4、P6、P8)时的心房有效不应期(AERP150和AERP200)及AERP200-AERP150的频率适应性,用Western blot法检测急性起搏8 h后右房组织L型钙通道α1c蛋白表达,同时检测各组血脂水平。结果各组动物血脂水平差异无统计学意义。心房快速起搏组在不同基础刺激作用下AERP明显缩短,AERP200-AERP150的频率适应性明显下降(P<0.05),辛伐他汀干预组AERP缩短程度减轻,AERP200-AERP150频率适应性同对照组相比差异无统计学意义。心房快速起搏组起搏8 h后心房肌细胞L型钙通道的α1c亚单位的蛋白表达水平较对照组明显下降(P<0.01),辛伐他汀干预组蛋白表达水平较对照组下降不明显。结论快速心房起搏早期心房快速起搏组较对照组有效不应期明显缩短、频率适应性降低,辛伐他汀预处理可明显改善不应期缩短程度,快速起搏前后频率适应性基本维持。快速起搏8 h后L型钙通道的α1c亚单位的蛋白表达水平下降,主要的机制可能是与快速起搏引起的钙超载导致离子通道转录水平的下降有关,辛伐他汀预处理可明显减轻蛋白表达水平下降的程度,而不依赖于降血脂效应,可能为辛伐他汀降低心律失常发生率的细胞学离子机制之一。

动物CACNA2D1基因研究进展

CACNA2D1基因是编码动物L-型钙离子通道2αδ1亚基的基因。有研究表明,CACNA2D1基因可影响钙离子通道钙流的性质,其单核苷酸变异与某些疾病有关。综述了CACNA2D1基因在生物学特性、染色体上的位置、基本功能、表达调控及其单核苷酸多态性与疾病的关系等方面的最新研究成果。

CACNA1S基因与低钾周期性麻痹

CACNA1S基因是L-型钙离子通道α1亚单位的编码基因,CACNA1S的基因突变会引起人低钾周期性麻痹及猪高温综合症,有关研究推测该基因是影响猪肉质性状的候选基因。笔者对CACNA1S基因的生物学特性、结构组成和CACNA1S基因突变引发的遗传病及CACNA1S基因的研究进展作了综合性阐述。