L-鸟氨酸-L-天冬氨酸治疗肝衰竭肝性脑病的疗效观察

目的:观察L-鸟氨酸-L-天冬氨酸(L-Ornithine-L-Aspartate,OA)治疗肝衰竭肝性脑病的临床疗效。方法:对本科收治的51例肝衰竭合并肝性脑病的患者,在综合治疗的基础上给予门冬氨酸鸟氨酸持续静脉输入。OA给药方法:5g/h,持续外周静脉或深静脉输入,应用至患者意识清楚,肝性脑病消失。观察治疗前后血氨、ALT、TBIL、PA的变化以及患者意识恢复、肝性脑病消失所需时间及用药后不良反应。结果:51例肝性脑病患者给予OA治疗后,血氨显著降低,I期肝性脑病需要用药时间短,而II、III期肝性脑病用药时间长,治疗前后肝脏功能比较差异无统计学意义,无严重不良反应发生。结论:OA治疗肝性脑病安全、耐受性好,可显著降低血氨水平。

L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸治疗慢性重型肝炎40例

目的：探讨Ｌ－鸟氨酸－Ｌ－天门冬氨酸（阿波莫斯注射液）治疗慢性重型肝炎的临床疗效。方法：治疗组４０例慢性重型肝炎给予阿波莫斯注射液及其他基础综合治疗。结果：治疗组慢性重型肝炎患者肝功能变化与对照组比较，有明显改善（Ｐ＜０．０５）；治疗总有效率（６２．５％）与对照组（３０％）有极显著差异（Ｐ＜０．０１）；慢性重型肝炎早、中期疗效明显（治疗组存活率分别为７８．７％和６２．５％），与对照组（４２．９％和２９．４％）比较有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论：阿波莫斯注射液能广泛用于治疗慢性重型肝炎，并能预防及治疗肝性脑病，且临床应用安全。

双酶法制备L-天冬氨酸的循环生产工艺

目前,工业上采用化学法将马来酸转化为富马酸,然后用L-天冬氨酸裂解酶菌株全细胞催化富马酸和氨水生产L-天冬氨酸,并采用硫酸酸化方法使L-天冬氨酸结晶。两步催化反应步骤繁琐,并且全细胞催化富马酸为L-天冬氨酸的菌体消耗量大,硫酸结晶法会产生废品硫酸铵。为了克服以上不足,将两步反应合并,利用实验室构建的马来酸异构酶和L-天冬氨酸裂解酶共表达的大肠杆菌(Escherichia coli BL21(DE3)Bptm-Easp)细胞裂解液催化马来酸铵生产L-天冬氨酸;对酶催化反应条件进行了优化,得到最佳条件:采用pH8.0的200 g/L马来酸铵溶液作为底物,加入马来酸异构酶总活力为2000 U/L的E.coli BL21(DE3)Bptm-Easp细胞裂解液,于40℃反应24 h,马来酸可转化完毕;反应液经活性炭脱色后,采用马来酸代替硫酸使L-天冬氨酸结晶,经洗涤、干燥后得到L-天冬氨酸晶体,结晶收率达到81.80%;采用碳酸氢铵和少量氨水中和结晶后的马来酸滤液,作为下一批次反应的底物溶液;在此基础上进行了4批次马来酸滤液转化反应,马来酸转化率均在99%以上,L-天冬氨酸结晶收率均在80%以上,L-天冬氨酸纯度达到98%以上。

局部应用腺苷A2a受体拮抗剂对慢性高眼压大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶(GS)和L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响

目的观察腺苷A2a受体拮抗剂对慢性高眼压大鼠视网膜中谷氨酰胺合成酶(glutamamin synthetase,GS)和L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(L-glutamate-L-aspartate transporter,GLAST)表达的影响,探讨其在高眼压下的视神经保护机制。方法 Sprague Dawley雄性大鼠共66只,均通过巩膜上静脉结扎法制作大鼠慢性高眼压模型,选取右眼作为造模眼,左眼作为对照眼,其中12只于造模后1周、2周和3周测量眼压,观察比较双眼眼压变化情况。余54只随机分为3组,眼局部分别应用SCH442416滴眼液、ZM241385滴眼液和载体滴眼液滴术眼,分别为SCH442416滴眼液组、ZM241385滴眼液和载体滴眼液组,连续滴用3周后采用Real-time PCR和Western blot方法检测视网膜GS和GLAST mRNA和蛋白的表达变化。结果造模后1周、2周和3周造模眼眼压均明显高于对照眼,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。滴用SCH442416滴眼液或ZM241385滴眼液3周后,慢性高眼压大鼠视网膜中GS和GLAST mRNA表达与载体滴眼液组相比均明显升高,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);而SCH442416滴眼液组和ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST mRNA的表达,两组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。同时,SCH442416滴眼液组或ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST蛋白表达与载体滴眼液组比较均明显升高,差异均具有统计学意义(均为P<0.05);而SCH442416滴眼液组和ZM241385滴眼液组大鼠视网膜中GS和GLAST蛋白的表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论巩膜上静脉结扎能建立大鼠高眼压模型,方法稳定可靠。腺苷A2a受体拮抗剂SCH442416和ZM241385对慢性高眼压大鼠视网膜中GS和GLAST的表达具有调控作用,两种不同的拮抗剂作用似乎无明显差异。

L-天冬氨酸-L-半胱氨酸-石墨烯修饰玻碳电极测定铅的研究

利用L-半胱氨酸-石墨烯-L-天冬氨酸纳米复合膜构建Pb2+的新型电化学传感器实现了环境水样中铅的灵敏测定。首先将石墨烯和L-半胱氨酸通过电聚合制备了L-半胱氨酸-石墨烯修饰玻碳电极,然后利用戊二醛通过共价键合连接上L-天冬氨酸,制备了L-天冬氨酸-L-半胱氨酸-石墨烯修饰玻碳电极。由于L-天冬氨酸的良好选择性以及石墨烯的好导电性能,提高了传感器对Pb2+的信号响应和选择性。试验结果表明,测定1×10-7 mol/L的Pb2+,10倍量的Cu2+、Ca2+、Co2+、Cd2+、Mn2+、Zn2+、Ni 2+、Hg2+几乎不干扰测定(峰电流改变小于5%)。在pH4.5的醋酸盐缓冲溶液中,铅离子的浓度与峰电流呈良好的线性关系,线性范围为2.0×10-9～6.0×10-6 mol/L,检出限为6.0×10-10 mol/L(S/N=3)。该修饰电极用于环境水样中铅的测定,测定值与ICP-AES的测定值基本一致。

N-甲酰-L-天冬氨酸酐的合成

在乙酸酐溶剂中 ,以氧化镁为催化剂 ,L 天冬氨酸与甲酸进行甲酰化反应并脱水生成N 甲酰 L 天冬氨酸酐。考察了温度、时间、甲酸和乙酸酐用量比对反应的影响 ,得到了优化的反应条件为 :反应温度 5 0℃ ,反应时间 5h ,甲酸与L 天冬氨酸的物质的量比为 1 6∶1 0 ,乙酸酐与L 天冬氨酸的物质的量比为 2 3∶1 0 ,此时产物收率达 90 35 %。

L-赖氨酸-L-天冬氨酸盐在小麦粉及馒头和面条中的应用研究

在小麦粉中分别强化764.55、1529.10和2293.65 mg/kg的L-赖氨酸-L-天冬氨酸盐(赖氨酸复合盐,简称LA),与对照组比较,作了基础分析,并制作了馒头和面条。研究表明:在本试验范围内,适度强化LA对面团的拉伸特性有一定的改善作用;不会对馒头感官品质产生不良影响;对面条的感官品质会产生良好作用。

N-甲基丙烯酰-L-β-异丙基天冬氨酸苄酯的合成

N-甲基丙烯酰-L-β-异丙基天冬氨酸苄酯是一个手性分子,并含有可聚合双键与温敏性官能团,可以用于药物传递系统或小分子探针的研究。以正交保护的氨基酸为原料合成了N-甲基丙烯酰-L-β-异丙基天冬氨酸苄酯的方法,其结构经1H-NMR和13C-NMR以及高分辨质谱表征。

2-L-天冬氨酸-2-脱氧-D-葡萄糖的合成及热裂解分析

以D-果糖和L-天冬氨酸单钾盐为原料合成了2-L-天冬氨酸-2-脱氧-D-葡萄糖,利用傅里叶变换红外光谱、~1H核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)、^(13)C NMR和高分辨率质谱技术进行结构表征。应用热重-微商热重和在线裂解气相色谱/质谱联用技术分别研究了2-L-天冬氨酸-2-脱氧-D-葡萄糖的热失重和热裂解行为。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除法和还原能力法对其体外抗氧化活性进行测定。结果表明:合成产物为目标化合物;目标化合物的裂解温度为187.8℃,700℃时总失重达到91.26%;目标化合物裂解产物的数量随温度的升高而增多,裂解产物包括杂环类、酮类、羧酸类、醛类、酚类、烯烃类、醇类和芳烃类等化合物,裂解产物表现出烘焙香、甜香、焦甜香、可可香、花香和奶香等香韵;目标产物具有较强的DPPH自由基清除能力和还原能力,是一种潜在的抗氧化剂。

N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸的合成

探讨了以N-甲酰-L-天冬氨酸酐和L-苯丙氨酸为主要原料制备甜味剂阿斯巴甜中间体(N-甲酰--αL-天冬氨酰-L-苯丙氨酸)的合成工艺.以乙酸为溶剂,N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸进行缩合反应生成N-甲酰--αL-天冬氨酰-L-苯丙氨酸,考察了乙酸用量、反应温度、时间和N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸的比例对反应收率的影响,得到优化的工艺条件为:反应温度40℃,反应时间5 h,乙酸的量为L-苯丙氨酸质量的3.53倍,N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸的质量比为0.95∶1,此时产物收率达95.46%.并且α-异构体与β-异构体的比例达到75∶25.

以牡蛎壳为钙源的L-天冬氨酸螯合钙的合成及其生物利用度研究

目的探究以牡蛎壳为钙源制备L-天冬氨酸螯合钙的合成路线,并分析产品的生物利用度。方法制定合成路线,并按照4因素3水平进行正交试验,得到产率最高的反应条件;对最优反应条件下生成的产物进行生物利用度研究,并与葡萄糖酸钙进行对照试验。结果以牡蛎壳为钙源与酸性氨基酸L-天冬氨酸直接作用合成了L-天冬氨酸螯合钙,最合适的pH为3、摩尔配比(牡蛎∶L-天冬氨酸)为1∶2、反应温度为80℃、反应时间1h;产品具有较高的生物利用度。结论以牡蛎壳为钙源的天冬氨酸螯合钙的合成工艺可行,产率较高,产品的生物利用度较葡萄糖酸钙高。

L-天冬氨酸诱导叠层碳酸钙微晶的形成

利用气相扩散的方法得到一种特殊形貌的碳酸钙层状聚集体。探讨了L-天冬氨酸的浓度、反应时间对碳酸钙的形貌和晶型的影响。采用扫描电镜(SEM)、X射线粉末衍射(XRD)及红外吸收光谱(FT-IR)对合成出的样品的形貌、结构进行了表征。结果表明:L-天冬氨酸的浓度及反应时间对碳酸钙的形貌和晶型有着重要的影响,并对L-天冬氨酸浓度影响碳酸钙的形貌和晶型的机理进行了解释。

L-天冬氨酸在银胶体中吸附状态的表面增强拉曼光谱研究

利用表面增强拉曼光谱 (Surface EnhancedRamanScattering,SERS)研究了L 天冬氨酸在银溶胶体中的吸附状态及其浓度变化对表面增强拉曼散射效应的影响 ,并探讨了L 天冬氨酸在银溶胶表面的吸附作用特点和规律。实验结果表明 ,L 天冬氨酸在银溶胶中有明显的SERS信号 ,经过分析表明 ,该化合物能够吸附在银表面 ,这种吸附是通过羧基和氨基中的氮原子与银结合来实现的 ,L 天冬氨酸分子中带有负电荷的羧基和氨基中带有孤对电子的氮原子都能与银原子配位 ,其中羧基在银表面的增强为电荷转移机制增强 ,具有化学吸附的特征 ;氨基在银表面的增强为电磁场增强机制 ,为物理吸附。而且SERS强度随着L 天冬氨酸浓度的变化而改变 ,当其浓度为 10 - 3mol·L- 1 时增强效果较好 ,当浓度降低 。

L-天冬氨酸生产、应用与市场前景

L-天冬氨酸广泛应用于食品、化工、医药等领域,具有巨大的开发价值和广阔的应用前景。文中介绍了L-天冬氨酸国内外生产方法和产品应用领域,并对L-天冬氨酸在我国的开发前景进行了概述。

L-苹果酸对苹果酸天冬氨酸穿梭转运蛋白及酶基因表达的作用研究

采用半定量RT-PCR方法,对小鼠给予L-苹果酸后肝线粒体苹果酸天冬氨酸穿梭相关的两种线粒体酶:线粒体天冬氨酸氨基转移酶(mitochondrialaspartateaminotransferase,mAST)及线粒体苹果酸脱氢酶(mitochondrialmalatedehydrogenase,mMDH)及线粒体内膜上的天冬氨酸谷氨酸转运蛋白(AGC)与α-酮戊二酸苹果酸转运蛋白(OMC)的基因表达进行检测,探讨了L-苹果酸对肝线粒体苹果酸天冬氨酸穿梭的关键酶及转运蛋白mRNA表达规律。半定量RT-PCR结果表明:剂量组小鼠肝线粒体转运蛋白AGCmRNA的表达显著高于空白对照组,而mAST、mMDH及转运蛋白OMCmRNA的表达无显著性差异。由此可知,L-苹果酸能促进TCA循环及苹果酸天冬氨酸穿梭,其分子生物学机理与L-苹果酸提高AGC的基因表达水平有关。

中空纤维膜反应器转化L-天冬氨酸生成L-丙氨酸

采用中空纤维膜反应器 ,利用假单胞菌P dacunhaeDQ p1转化L 天冬氨酸生成L 丙氨酸 ,最适pH6 0 ,最适温度 3 0℃ ,EDTA和Tween 80对细胞产酶有促进作用 ,游离细胞半衰期为 93h。采用对流扩散式中空纤维膜反应器转化L 天冬氨酸生成L 丙氨酸 ,转化率超过 90 %。

天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞制备L-天冬氨酸合成条件优化

以反丁烯二酸和氨水为原料,采用天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞生物催化法合成L-天冬氨酸。通过响应面法考察反丁烯二酸浓度、温度、p H对合成L-天冬氨酸的影响。结果表明,固定化天冬氨酸酶基因工程菌合成L-天冬氨酸最佳条件为:底物反丁烯二酸的质量浓度为300 g/L,反应温度为37℃,底物p H为7.5,L-天冬氨酸的产率为96.7%。固定化细胞可连续使用10批次。通过电镜观察发现天冬氨酸酶基因工程菌均匀分布于载体,天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞具有良好的稳定性。

N-甲基D,L-天冬氨酸对肥育猪生长性能和胴体品质的影响

本试验以杜长大肥育猪为试验对象 ,研究了N 甲基D ,L 天冬氨酸对其生长性能和胴体品质的影响。结果表明 ,在日粮中添加 50mg/kgN 甲基D ,L 天冬氨酸使肥育猪 ( 1 )日增重提高 9.31 % (P <0 .0 1 ) ,饲料转化率提高 7.1 6 % (P <0 .0 2 ) ;( 2 )胴体瘦肉率提高 6 .53% (P <0 .0 1 ) ,脂肪比率降低 1 1 .76 %(P <0 .0 1 ) ,背膘厚降低 1 9.72 % (P <0 .0 1 ) ,眼肌面积提高 2 1 .0 1 % (P <0 .0 4 ) ;( 3)背最长肌、股二头肌和半膜肌重量分别增加 1 1 .3% (P <0 .0 1 )、1 0 .0 9% (P <0 .0 1 )和 1 4 .4 4% (P <0 .0 1 )。

L-天冬氨酸α-脱羧酶工程菌株的构建及其培养条件研究

L-天冬氨酸α-脱羧酶以L-天冬氨酸为底物,脱去α-羧基后生成β-丙氨酸.利用PCR扩增技术,将Escherichia coliDH5α中的PanD基因克隆后连接到pET28c(+)载体上,先转化E.coliDH5α中,经过50μg/mL卡那霉素抗性筛选和酶切、测序验证后,转化表达菌株E.coliBL21(DE3),得到具有L-天冬氨酸α-脱羧酶活性的工程菌株E.coliBL21(DE3)/pET28c(+)-panD.经乳糖诱导该基因能有效表达C-末端具有组氨酸标签的L-天冬氨酸α-脱羧酶.通过对乳糖诱导时间、乳糖诱导质量浓度、诱导温度、诱导菌龄和培养基诱导初始pH值等发酵条件的优化,得到最佳培养条件为:乳糖诱导时间20 h,乳糖质量浓度12 g/L,诱导温度为35℃,诱导菌龄为3.5 h,诱导培养基初始pH 5.5,通过对转化产物β-丙氨酸的检测结果分析显示,工程菌株E.coliBL21(DE3)/pET28c(+)-panD在优化条件下,酶活力达186 U.

聚L-天冬氨酸/多壁碳纳米管复合膜修饰玻碳电极测定亚硝酸根

采用滴涂法和电聚合法制备了聚L一天冬氨酸／多壁碳纳米管复合膜修饰玻碳电极，利用循环伏安（CV）法研究了亚硝酸根（NO。）在该修饰电极上的电化学行为，建立了一种电化学测定NO2的新方法。实验结果表明，该修饰电极对于NO。的氧化具有良好的电催化性能，并且显著促进Nq在电极表面的电化学过程。利用差分脉冲伏安法测定，在2．0×10^6～2．0×10^4mol／L浓度范围内，NO0的氧化峰电流与浓度呈现良好的线性关系，相关系数为0．9989。信噪比为3时，NO2的检出限为2．0×10^7mol／L。方法成功地用于环境水样中NO，测定。