宫颈上皮内瘤变及早期宫颈癌组织中P16、HPV L-1壳蛋白的表达及与HR-HPV载量相关性研究

目的：探讨宫颈上皮内瘤变（CIN）及早期宫颈癌组织中P16、HPV L-1壳蛋白的表达及与高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）载量的相关性。方法：分别采用免疫组化法和第二代杂交捕获法（hybrid captureⅡ,HC-2）检测26例慢性宫颈炎组织、83例低度鳞状上皮内病变（LSIL）（CINⅠ83例）、109例高度鳞状上皮内病变（HSIL）（CINⅡ49例,CINⅢ60例）、11例早期宫颈鳞癌组织中P16蛋白、HPV L-1壳蛋白的表达及HR-HPV载量,并分析其相关性。结果：1在宫颈癌前病变中随病变级别增高,HR-HPV阳性率增加,差异有统计学意义（P〈0.01）。各组织学分级中病毒载量分布差异有统计学意义,HSIL（44.95%）及早期宫颈癌组织（63.64%）中皆以低病毒载量（1~100 RLU/CO）为主。从慢性宫颈炎、LSIL、HSIL到早期宫颈癌,P16蛋白阳性表达率分别为11.54%（3/26）,55.42%（46/83）,85.32%（93/109）,100.00%（11/11）,差异有统计学意义（P〈0.01）;L-1壳蛋白阳性率分别为15.38%（4/26）,28.92%（24/83）,14.68%（16/109）,0.00%（0/11）,差异有统计学意义（P〈0.05）。2229例宫颈组织中,随HPV载量增加,P16蛋白表达增强;L-1壳蛋白阳性表达率增加,差异有统计学意义（P〈0.01）。3在慢性宫颈炎组中,P16蛋白阳性表达与HPV载量呈正相关（r=0.491,P〈0.05）。在LSIL组中,P16蛋白与HPV载量（r=0.459,P〈0.01）及L1壳蛋白表达（r=0.297,P〈0.01）皆呈正相关。4在HSIL及早期宫颈癌组中,P16蛋白、L-1壳蛋白表达与HPV载量三者之间无明显相关性（P〉0.05）。结论：P16、HPV L-1壳蛋白异常表达是宫颈癌前病变发生发展的早期分子事件,对判断CINⅠ有参考价值,可能比HR-HPV载量更具有预测价值。

植物乳杆菌素L-1对冷却肉的防腐保鲜效果研究

本实验研究了植物乳杆菌素L-1对冷却肉的防腐保鲜效果。实验中对冷却肉的微生物、感官品质和理化指标三方面进行了检测。结果显示,效价320AU/ml组效果与Nisin相近,效价640AU/ml组的效果优于Nisin,通过对照,效价640AU/ml的植物乳杆菌素L-1处理组可将冷却肉的保质期从3d延长至12d。植物乳杆菌素L-1对冷却肉中主要污染菌——假单胞菌和潜在致病菌——单增李斯特菌有较好的抑制效果。植物乳杆菌素L-1作为冷却肉的生物防腐剂,具有广阔的应用前景。

补阳还五汤和其有效部位对大鼠脑缺血再灌注后IL-1β及相关因子表达的影响

目的研究补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素1β(IL-1)β及其相关因子mRNA表达的影响。方法采用颈内动脉线栓法建立大鼠MACO再灌注模型,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定缺血脑组织IL-1β、IL-1R1、IL-1ra、ICAM-1 mRNA的表达。结果脑缺血2h再灌注22h后,模型组IL-1β、IL-1R1、IL-1ra和ICAM-1 mRNA表达较假手术组均显著增强(P<0.05和P<0.01)。补阳还五汤组IL-1β表达显著高于假手术组(P<0.05),而生物碱组和苷组较模型组有所降低;补阳还五汤组IL-1R1表达较模型组显著降低(P<0.05),而生物碱组和苷组IL-1R1表达均显著高于假手术组(P<0.05),与模型组接近。补阳还五汤组、生物碱组和苷组IL-1ra表达均显著高于假手术组(P<0.05和P<0.01)。补阳还五汤组、生物碱组、苷组ICAM-1表达低于模型组(P<0.05)。结论补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷通过抑制IL-1β、IL-1R1I、CAM-1 mRNA的表达,从而减少炎症因子及炎症介质的表达,对缺血脑组织起保护作用。各药对脑缺血后IL-1ra表达无影响。

P16蛋白、HPV L-1壳蛋白在CIN和早期宫颈癌组织中的表达及其筛查价值

目的分析P16蛋白、人乳头瘤病毒(HPV)L-1壳蛋白在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中的表达及筛查价值。方法选取2014年1月至2016年6月淮安市妇幼保健院妇产科CIN和早期宫颈癌共50例患者,通过第二代杂交捕获法与免疫组化法分析P16蛋白、HPV L-1壳蛋白在其组织中的表达。结果 P16蛋白在慢性宫颈炎(9.09%)、低度鳞状上皮内病变(52.94%)、高度鳞状上皮内病变(84.21%)及早期宫颈癌(100.00%)中的阳性表达率逐渐升高(χ2=45.38,P=0.00),人乳头瘤病毒L-1壳蛋白阳性表达率亦存在明显差异,分别是18.18%、35.29%、15.79%及0(χ2=12.59,P=0.00);随着病毒载量提高,P16蛋白与人乳头瘤病毒L-1壳蛋白阳性表达率均有所改变(χ2值分别为41.37、32.95,均P<0.01)。在慢性宫颈炎中,P16蛋白表达阳性率与高危型人乳头瘤病毒呈正相关关系(r=0.52,P=0.01);在低度鳞状上皮内病变中,P16蛋白、人乳头瘤病毒L-1壳蛋白阳性表达率与高危型人乳头瘤病毒均呈正相关关系(r值分别为0.58、0.33,均P<0.05);在高度鳞状上皮内病变及早期宫颈癌中,P16蛋白、人乳头瘤病毒L-1壳蛋白阳性表达率与高危型人乳头瘤病毒均未存在显著相关性(r值分别为0.12、0.26、0.62,均P>0.05)。结论 P16蛋白、人乳头瘤病毒L-1壳蛋白表达阳性可作为宫颈癌前病变出现的分子事件,在筛查CIN和早期宫颈癌中的价值较高,临床上值得应用和推广。

非线性l-1模极小化问题的极大熵差分进化算法

针对一类非线性l-1模极小化问题目标函数非光滑的特点给求解带来的困难,利用差分进化算法并结合极大熵函数法给出了解决此类问题的一种有效算法。利用极大熵函数将l-1模极小化问题转化为一个光滑函数的无约束最优化问题,利用差分进化算法对其进行求解。实验结果表明,该方法是有效的。

白屈菜对大鼠软组织损伤中炎性因子1L-1β的影响

为研究满药白屈菜对大鼠急性软组织损伤模型中炎性因子1L-1β的影响,探究白屈菜对急性软组织损伤的治疗机制,选取48只雄性SD大鼠,随机分为4个大组,即实验组(白屈菜组)、药物对照组(扶他林组)、模型对照组、空白对照组。采取打击法造模,并在造模成功后1 h开始敷药,于第1、3、7、10 d采用酶联免疫法检测损伤组织中1L-1β的浓度。结果显示大鼠损伤肌肉组织中1L-1β、软组织损伤证候指数评分在造模后第3 d达到高峰。在造模后第3、7 d,白屈菜组、扶他林组低于模型对照组,而白屈菜组与扶他林组无显著性差异。因此,白屈菜能够抑制大鼠急性软组织损伤后组织释放IL-1β,可以有效缓解损伤局部组织炎症反应,对治疗急性软组织损伤有一定疗效。

宫颈上皮内瘤变及早期宫颈癌组织中P16、HPV L-1壳蛋白的表达分析

目的探讨P16、HPV L-1壳蛋白的表达及在早期宫颈癌、宫颈上皮内瘤变中的筛查价值。方法本次研究纳入67例CIN患者及15例早期宫颈鳞状上皮细胞癌患者,另选取慢性宫颈炎患者31例,应用第二代杂交捕获法及免疫组化法检测HR-HPV载量、P16及HPV L-1壳蛋白表达并对相关性进行分析。结果P16蛋白在早期宫颈癌、HSIL、LSIL及慢性宫颈炎阳性表达率升高,HPV L-1壳蛋白阳性表达率有显著差异(P<0.05)。随着病毒载量不断增加,HPV L-1及P16蛋白阳性表达率均出现变化(P<0.05)。慢性宫颈炎P16蛋白表达阳性率及高危型HPV病毒呈正相关(P<0.05)。LSIL病变中P16蛋白表达阳性率与高危型HPV病毒呈正相关(P<0.05)。HSIL病变中P16蛋白表达阳性率与高危型HPV病毒无相关性(P>0.05)。结论P16、HPV L-1壳蛋白表达阳性在CIN及早期宫颈癌筛查中的应用价值较高。

L-1-^13C-苯丙氨酸呼气试验在慢性肝病临床分期中的应用

用L-1-^13C-苯丙氨酸对12例正常对照、8例慢性乙型肝炎G2S2期患者、12例肝硬化代偿期患者、12例肝硬化失代偿期患者进行6h呼气试验，共采集气样24次，用气体同位素比值质谱仪检测气样中^13CO2浓度，试验参数选用30min^13C排除速率^13CER30、60min累计^13C排除率^13Ccum60、^13CO2半排除时间T1/2。结果显示，所有受试者^13C排除均呈单峰；T1/2在正常人、慢性肝炎患者、肝硬化代偿和失代偿患者之间差异有显著性(P<0．05)．而^13CER30、^13Ccum60仅在正常人肝硬化代偿和失代偿患者之间差异有显著性(P<0．05)；^13CER30、^13Ccum60、T1/2与除丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)外的部分临床常规肝功能血清学检查值存在不同程度的相关性。提示L-1-^13C-苯丙氨酸呼气试验是一项安全、简便、定量、有效的肝功能检测手段，可用于慢性肝病的临床分期。

解磷黑曲霉L-1菌株原生质体诱变育种

以从龙泉山地区酸性红壤中分离的黑曲霉L-1(Aspergillus niger sp.L-1)为出发菌株,通过研究菌株L-1原生质体的形成和再生条件,发现培养30 h的菌丝体在以0.15 mol/L氯化钾为渗透压稳定剂的基本培养基上经过再次培养20 h后,所得菌丝体用0.3%纤维素酶和0.4%蜗牛酶在30℃条件下处理120 min可得大量原生质体,其再生率可达到11.3%。菌株L-1原生质体经过紫外诱变选育后得到L-17,可以使培养基中可溶性磷浓度增加5.7倍,较出发菌株提高3.6倍。L-17在酸性红壤中的解磷能力比解磷巨大芽孢杆菌J1提高2.5倍。

单硝酸异山梨酯对SHR肺组织NO、iNOS、IL-1及IL-6水平的影响

目的:了解单硝酸异山梨酯对自发性高血压大鼠(SHR)肺组织NO、i NOS、IL-1及IL-6水平的影响与意义。方法:14周龄Wistar和SHR雄性大鼠各20只,分别随机分成W0、W1、S0、S1四组,每组各10只。其中,W0和S0组饲喂生理盐水和普通饲料,W1和S1组饲喂单硝酸异山梨酯和普通饲料。喂养12周后,取大鼠肺组织检测NO、i NOS、IL-1、IL6的浓度。结果:W1组NO、i NOS、IL-1、IL6与WO组相比,水平偏高且差异均有统计学意义(P<0.05);S1组NO、i NOS、IL-1、IL6与SO组相比,水平偏高且差异均有统计学意义(P<0.05);W1、S1组NO、i NOS水平均与IL-1、IL-6呈正相关。结论:(1)单硝酸异山梨酯会导致正常大鼠肺组织NO、i NOS、IL-1、IL6的显著增加,即预示着慢性炎症的存在;(2)长期饲喂单硝酸异山梨酯后,可能会导致高血压大鼠机体炎症因子的增加,加重肺组织的炎症状态,造成肺组织的损害。

非线性l-1模极小化问题的极大熵粒子群算法

针对非线性l-1模极小化问题,利用粒子群算法并结合极大熵函数法给出了此类问题的一种新混合算法。该算法首先利用极大熵函数将非线性l-1模极小化问题转化为一个光滑函数的无约束最优化问题,将此光滑函数作为粒子群算法的适应值函数;然后应用粒子群算法来优化此问题。数值结果表明,该算法收敛快、数值稳定性好,是求解非线性l-1模极小化问题的一种有效算法。

HD基因和UCHL-1基因多态性与Huntington病关系的研究

目的探讨Huntington病患者发病年龄与HD基因和UCHL-1基因S18Y多态性相关情况。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测两个HD家系(53人)、6例非家系HD患者和51名正常对照组HD基因CAG重复次数;应用聚合酶链式反应-限制性内切酶分析(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测UCHL-1基因S18Y多态性的分布情况。结果在两个家系中确诊了5例HD病人,在其有高度遗传风险的子女中发现4例症状前患者。UCHL-1基因S18Y多态性的基因型和等位基因分布频率在两个家系和正常对照组中无统计学差异(SY型基因型在三种基因型中最常见,频率>50%)。非家系患者中未见YY基因型,SS基因型多于SY型,S等位基因多于Y型,与正常对照组差别有统计学意义。多元线性回归研究显示11例病人发病年龄变异的15.6%是由其UCHL-1基因S18Y多态性造成的。CAG重复次数可解释发病年龄变异的71.4%。结论HD基因CAG重复次数是决定患者发病年龄变异的最主要因素,但不是唯一因素。UCHL-1基因S18Y多态性是HD的调节基因,对发病年龄有微弱的调节作用,提示UCHL-1可能参与HD的发病机制。

结核性脑膜炎患者脑脊液S100B、IL-1β动态演变及临床意义

目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液S100B、白细胞介素-1β(IL-1β)动态变化及二者的相关性。方法43例结核性脑膜炎患者(TBM组)分为昏迷组和无昏迷组,均给予标准抗结核治疗。选择无神经系统疾病的腰麻术患者28例作为对照组。TBM组和对照组均于发病后1～6天首次采集脑脊液,以后每隔5～7天采集1次,共5次。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫法测定3组患者不同病程脑膜炎S100B、IL-1β含量。结果15例发生昏迷(昏迷组),28例未发生昏迷(无昏迷组)。昏迷组和无昏迷组S100B、IL-1β含量较对照组均显著增高(P<0.05);昏迷组较无昏迷组患者脑脊液S100B、IL-1β含量增高明显。随时间的延长,S100B维持于较高水平,而IL-1β的含量不断下降。结论结核性脑膜炎患者脑脊液S100B含量的高低能够反映病情的严重程度,IL-1β对治疗反应更灵敏。

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达的影响

目的:探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注模型大鼠脑组织中的1L-1β和ICAM-1含量,同时利用TTC染色法测脑梗死体积。结果:川芎嗪组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小,川芎嗪组脑组织中的1L-1β和ICAM-1免疫阳性细胞在各时间点的表达与模型组相比明显减少(P【0.05)。结论:川芎嗪能显著降低脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达从而防止脑缺血再灌注炎性损伤,起到脑保护作用。

Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺组织中的表达及临床意义

目的本研究从蛋白水平分析Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同阶段乳腺组织中的表达情况,探讨三者在乳腺癌发生、发展中可能的作用。方法收集正常乳腺组织、导管上皮不典型增生及乳腺癌标本共176例,采用罗氏全自动免疫组化染色法检测Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺组织中的表达,比较其差异并分析Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺疾病中的表达情况以及与主要病理学特征的关系。结果①Mel-18在正常乳腺组织中的表达明显高于乳腺癌,差异显著(P<0.05);Notch-1和PLK-1在乳腺癌中的表达要明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。②Notch-1的过表达与组织学分级、临床分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与年龄和肿瘤直径之间无明显相关性(P>0.05)。PLK-1的表达仅与肿瘤的组织分级呈正相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、临床分期及淋巴结转移之间无明显相关性(P>0.05)。结论 Mel-18为乳腺癌的肿瘤抑制基因,由于乳腺癌中Notch-1通路的激活使得乳腺增殖加速,细胞的分化状态降低。PLK-1蛋白的过量表达引起乳腺细胞的分裂和增殖,促进了乳腺癌的形成。联合检测3个指标对判定乳腺癌的预后有重要意义。

鸡β-防御素Gal-1 cDNA的克隆及序列分析

利用细胞总RNA提取试剂盒,从1月龄SPF鸡白细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素(Gal-1)cDNA片段。PCR产物经凝胶回收纯化后与pMD18-T载体连接,转化感受态JM109细胞,在含X-gal、IPTG的LB平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR与质粒限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段ORF大小为198bp,用Blast程序进行检索比较表明该序列与Genbank中发表的鸡Gal-1 cDNA编码区序列同源性高达99.5%。该cDNA序列编码65个氨基酸,包括信号肽、前片段和成熟肽,成熟肽由40个氨基酸残基组成。

复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎IL-1β、TNF-α干预作用的研究

目的:观察复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α水平的影响,探讨复方补筋片的作用机理,为本院制剂的推广与开发应用提供科学依据。方法:收集漳州市中医院2010年6月～2011年6月骨伤科门诊和康复科门诊就诊符合纳入条件的肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者,共60例。将纳入患者用随机数字表分为两组,治疗组口服漳州市中医院本院制剂复方补筋片;对照组口服壮骨关节丸组,治疗周期均为4周,所有患者分别在治疗前及治疗周期结束1周内测定血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量。结果:1.在降低肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量比较,(P<0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。2.治疗组与对照组在临床疗效方面比较,(P<0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。结论:复方补筋片可能通过降低关节滑液中IL-1β、TNF-α含量,从而保护膝关节软骨及软骨下骨、改善膝骨性关节炎患者的症状。

L-1-^(13)C-苯丙氨酸呼气试验在慢性肝病临床分期中的应用

用L-1-13C-苯丙氨酸对12例正常对照、8例慢性乙型肝炎G2S2期患者、12例肝硬化代偿期患者、12例肝硬化失代偿期患者进行6 h呼气试验,共采集气样24次,用气体同位素比值质谱仪检测气样中13CO2浓度,试验参数选用30min13C排除速率13CER30、60min累计13C排除率13Ccum60、13CO2半排除时间T1/2。结果显示,所有受试者13C排除均呈单峰;T1/2在正常人、慢性肝炎患者、肝硬化代偿和失代偿患者之间差异有显著性(P<0.05),而13CER30、13Ccum60仅在正常人肝硬化代偿和失代偿患者之间差异有显著性(P<0.05);13CER30、13Ccum60、T1/2与除丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)外的部分临床常规肝功能血清学检查值存在不同程度的相关性。提示L-1-13C-苯丙氨酸呼气试验是一项安全、简便、定量、有效的肝功能检测手段,可用于慢性肝病的临床分期。

FL-1多功能吸附树脂对沙棘叶总黄酮的分离纯化

目的 考察 FL- 1多功能吸附树脂对沙棘叶中总黄酮的分离纯化方法。方法 根据沙棘叶黄酮的结构特征 ,考察了 FL - 1树脂的吸附性能 ,并采用高效液相色谱法对沙棘叶总黄酮进行了定量分析。结果 FL - 1树脂对沙棘叶总黄酮具有较高的吸附选择性 ,70 %乙醇作为脱附剂 ,产品中总黄酮含量为 4 0 .2 %。结论 FL- 1树脂用于沙棘叶总黄酮的分离纯化简便有效。

IL-10对大鼠肝纤维化的治疗作用及对TNF-α、IGF-1及IGF-1R表达的影响

目的外源性白介素10(IL10)对大鼠肝纤维化的治疗作用及对肿瘤坏死因子α(TNFα)和胰岛素样生长因子1(IGF1)及其受体(IGF1R)表达的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组和CCl4诱发肝纤维化模型组。至造模第9周,模型组随机分为3组,S组造模结束即处死,I组IL10治疗2周后处死,R组为自然恢复2周后处死。通过HE染色评价各组肝纤维化的程度,SP免疫组化检测各组大鼠肝脏TNFα、IGF1、IGF1R表达情况。结果肝病理组织学显示:I组纤维化程度有明显改善,R组纤维化程度没有明显改善。TNFα、IGF1、IGF1R在S组表达显著升高(P<0.05),在R组及I组表达下降,但I组下降较R组明显,与R组比较差别有显著意义(P<0.05)。结论外源性IL10能明显抑制炎性细胞因子TNFα的表达和IGF1及IGF1R的表达,这可能是IL10对大鼠肝纤维化治疗作用的机制之一。