基于L-Arg/NOS/NO通路探讨八段锦干预原发性高血压的机制研究

目的通过对原发性高血压(EH)患者进行24周的八段锦运动干预,从L-Arg/NOS/NO通路阐明八段锦调控EH患者血压的作用机制。方法选取62例EH志愿者,随机分为八段锦组和对照组各31例,对照组进行常规治疗与健康教育;八段锦组在此基础上进行八段锦运动,共干预24周。检测2组干预前后精氨酸酶Ⅱ(Arg-Ⅱ)蛋白表达、一氧化氮合酶蛋白(NOS)活性和蛋白表达、一氧化氮(NO)水平,分析比较2组干预前和干预后每4周的血压值。结果与干预前比较,八段锦组NOS蛋白表达水平、蛋白活性和NO水平均明显提高(P<0.05),其中NOS蛋白表达水平和NO水平高于对照组(P<0.05);2组患者的收缩压(SBP)在时间、组别以及时间与组别的交互效应上均有统计学意义(P<0.05);2组患者的舒张压(DBP)在时间、组别上具有统计学意义(P<0.05),在交互效应上无统计学意义(P>0.05)。结论八段锦运动具有降低EH患者SBP与DBP的作用,其机制可能与上调L-Arg/NOS/NO通路中的NOS表达与促进NO生成有关。

交通心肾法对老龄雌性大鼠血管内皮L-Arg/NOS/NO通路的影响

目的探讨交通心肾法对老龄雌性大鼠血管内皮L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮(LArg/NOS/NO)通路的影响。方法选用15月龄雌性SD大鼠,随机将其分为老龄空白组、中药治疗组、西药对照组和中药对照组,分别给予生理盐水、交通心肾方药(20.65 g/kg)、戊酸雌二醇(0.12 mg/kg)和更年安(0.65 g/kg)灌胃,共28 d,另选3月龄大鼠作为青年组。采用放免法检测大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH),硝酸还原酶法测定主动脉外膜NO,比色法测定主动脉外膜NOS、L-Arg。结果与老龄空白组相比,中药治疗组NOS无明显差异(P>0.05),西药对照组和中药对照组NOS含量均明显下降,且有显著性差异(P<0.05)。与老龄空白组相比,中药治疗组和西药对照组L-Arg含量无显著性差异(P>0.05);中药对照组L-Arg含量明显下降,且有显著性差异(P<0.05)。与老龄空白组相比,中药治疗组和西药对照组NO均升高,且有显著性差异(P<0.05),中药对照组NO稍有升高,但无显著性差异(P>0.05)。雌激素和NO呈正相关性。结论交通心肾法能升高老龄雌性大鼠雌激素水平,对血管内皮L-Arg/NOS/NO通路有一定的调节作用。

补充NO前体L-Arg对耐力训练大鼠骨骼肌NOS基因表达的影响

目的 :(1)观察耐力运动和补充外源性NO前体左旋精氨酸 (L -Arg)对骨骼肌不同亚型NOS基因表达的影响 ;(2 )观察耐力运动和补充外源性NO前体L -Arg对骨骼肌NO生成能力的影响。方法 :将 30只SD大鼠随机分成安静组、运动对照组和运动用药组 ,进行 4周跑台耐力训练和一次力竭运动 ,其中运动用药组每天给予 4 0mg每千克体重L -Arg灌胃 ,测定力竭运动后即刻大鼠股外肌两种亚型NOS基因表达水平、NOS活性和NO浓度的变化。结果 :(1)运动大鼠股外肌cNOS与iNOS基因表达均显著升高 ,但运动用药组与运动对照组无显著差异 ;(2 )运动大鼠股外肌NOS活性与安静组相比均有升高 ,但无显著性意义。以上结果表明 :(1)耐力性运动能够使大鼠骨骼肌中的cNOS与iNOS基因表达上调 ,小剂量的外源性NO前体L -精氨酸对其表达的调节无明显影响 ;(2 )小剂量外源性L

耐力训练与补充不同剂量L-Arg对大鼠股外肌NOS基因表达的影响

目的 :本研究旨在探讨耐力训练和补充不同剂量外源性L -Arg对耐力训练后和力竭运动恢复期大鼠股外肌NOS基因表达的影响。方法 :采用定量反转录聚合酶链式反应 (QRT -PCR)检测股外肌NOS三种亚型 (eNOS、nNOS、iNOS)的基因表达。结果 :耐力训练显著上调eNOS、nNOS表达 (P <0 .0 1) ,有上调iNOS表达的趋势 ;补充小剂量L -Arg可下调nNOS的表达 (P <0 .0 5 ) ,有上调iNOS表达的趋势 ;补充大剂量上调nNOS表达 (P <0 .0 5 ) ,有下调iNOS表达的趋势。结论 :耐力训练上调eNOS、nNOS、iNOS的表达 ;补充外源性L -Arg对nNOS。

电针通过调控NOS神经元改善慢性应激致肠易激综合征大鼠的内脏痛敏的研究

目的:观察电针“天枢”“足三里”“大肠俞”对慢性应激致肠易激综合征(IBS)模型大鼠粪便粒数、内脏痛敏及结肠-氧化氮合酶阳性(NOS)神经元表达的影响,探讨电针干预IBS的机制。方法:70只大鼠随机分为正常组、模型组、天枢组、足三里组和大肠俞组,每组14只。模型组、天枢组、足三里组和大肠俞组采用慢性避水应激(WAS)方法和慢性不可预测轻度应激(CUMS)法联合建立动物模型。天枢组、足三里组、大肠俞组分别电针大鼠双侧“天枢”“足三里”“大肠俞”穴。采用腹壁回撤反射(AWR)、腹直肌肌电(EMG)评估大鼠内脏敏感性,采集结肠电信号,免疫组化法、Western blot法检测结肠NOS阳性神经元表达。结果:造模后,与正常组比较,模型组大鼠粪便颗粒数先增多后减少,差异有统计学意义(P<0.05),AWR评分升高,差异有统计学意义(P<0.01),结肠慢波频率减慢,差异有统计学意义(P<0.01),腹直肌放电、结肠NOS阳性神经元和NOS蛋白表达均增多,差异有统计学意义(P<0.05)。电针治疗均可逆转上述变化,且天枢组AWR评分低于大肠俞组、足三里组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针“天枢”“足三里”“大肠俞”可通过下调结肠肌间神经网NOS阳性神经元的表达,减轻其内脏敏感性,从而恢复结肠运动,缓解肠易激症状;电针“天枢”穴对内脏敏感性的调节作用较“足三里”“大肠俞”穴更为明显。

NOS2基因DNA甲基化编辑调节NO浓度影响肌肉发育通路基因的表达

旨在探究对一氧化氮合成酶(NOS)2进行DNA甲基化编辑后对肌红蛋白的调控作用机制,并研究其对神经元一氧化氮合酶(nNOS)和内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的表达水平是否有影响。本试验采用DNA甲基化编辑技术在猪肾细胞系PK-15细胞对基因NOS2进行甲基化编辑,在猪肾细胞中检测NOS2基因启动子DNA甲基化水平、NOS2表达水平、细胞内一氧化氮浓度以及肌纤维和肌红蛋白相关基因的表达。结果发现,NOS2基因启动子前500 bp区域平均DNA甲基化水平降低,但差异不显著,而gRNA2结合位点附近的CpG位点甲基化水平增高。此外,对NOS2进行甲基化编辑后,NOS2基因表达量和其iNOS蛋白质表达量显著降低。随着NOS2表达降低,nNOS和eNOS表达显著增加。MYHC-Ⅱb和MYHC-Ⅱx的表达水平显著下降,Myoglobin蛋白表达也显著下降。综上,NOS2基因的异常表达能够影响细胞中的NO生成,同时也会影响NOS1和NOS3的表达,以及和肌肉发育相关基因的表达。

微小杆菌NOS基因密码子偏好性分析

对微小杆菌NOS基因密码子偏好性进行分析,为后续NOS基因的功能验证及遗传转化等研究提供理论依据。研究表明:微小杆菌NOS基因的密码子偏好性较弱,偏好使用G/C结尾的密码子;比较分析不同细菌NOS基因的密码子偏好性参数,发现不同细菌NOS基因密码子偏好性存在一定差异,整体看,放线菌NOS基因密码子偏好性比蓝藻,厚壁菌门强;与其他细菌NOS基因的CDS序列及RSCU值聚类分析表明,微小杆菌NOS基因与放线菌NOS基因表现出相近的密码子使用偏好性;中性绘图、PR2-plot和ENc-plot分析均表明,自然选择是影响NOS基因密码子偏好性形成的主要因素;与7种模式生物的基因组密码子使用频率比较发现,在异源转化受体选择中,大肠杆菌原核表达系统较酵母菌真核表达系统更适合微小杆菌NOS异源表达,常见5种作物均可作为微小杆菌NOS基因的遗传转化受体,其中水稻更理想。本研究初步揭示了微小杆菌NOS基因密码子使用规律,对后续开展基因功能验证有重要的指导作用,同时也可为生物一氧化氮合成酶进化提供一定科学依据。

丁苯酞对脑梗死后血管性认知功能障碍患者认知功能及血清NO/NOS的影响

探讨丁苯酞对脑梗死后血管性认知功能障碍患者认知功能及血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。方法 选取2021年2月~2023年2月在广西壮族自治区凭祥市人民医院接受治疗的脑梗死后血管性认知功能障碍患者80例为研究对象,以随机数字法分为对照组(n=40)、观察组(n=40)。运用MMSE评分量表评定脑梗死后血管性认知功能障碍患者认知功能,同时检测血清NO/NOS水平。对照组给予传统性二级预防药物治疗,观察组在传统性二级预防药物治疗基础上给予丁苯酞治疗,两组内服药物连续口服至少90天。比较两组患者治疗前后MMSE分值变化、血清NO/NOS水平以及MMSE分值与血清NO、NOS水平的相关性。结果 丁苯酞观察组治疗后MMSE评分(28.72±1.50)分明显高于对照组的(24.31±2.54)分,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者的血清NO和NOS水平分别为(58.46±0.70)μmol/L和(31.09±4.59)μmol/L,明显高于对照组的(44.25±6.27)μmol/L、(24.55±4.08)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05),并且两者呈正相关性(r=0.511,P<0.05)。结论 丁苯酞可以通过增加血清 NO和 NOS含量水平使脑梗死后血管性认知功能障碍患者的认知水平提升。

补充NO前体L-Arg对耐力训练大鼠疲劳状况的影响

目的 :(1)观察耐力运动和补充外源性NO前体L -Arg(左旋精氨酸 )对机体各组织NO生成能力的影响 ;(2 )观察补充外源性NO前体L -Arg对机体运动疲劳状况的影响。方法 :将 30只SD大鼠随机分成安静组、运动对照组和运动用药组 ,运动组大鼠进行 4周跑台耐力训练和一次力竭运动 ,其中运动用药组每天给予 4 0mg每kg体重L -Arg灌胃 ,测定了力竭运动后即刻大鼠组织NO生成能力以及血清生化指标的变化。结果 :(1)所有运动组大鼠血清、肌肉、心肌、肝脏NOS活性均有升高趋势 ,尤其以血清、心肌和肝脏的升高具有显著性意义 ;(2 )运动用药组大鼠血清血尿素 (BUrea)、谷丙转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH)均较运动对照组有升高趋势。结论 :(1)补充外源性L -Arg对机体整体生成NO的能力 ,尤其是心脏等器官生成NO的能力可能有促进作用 ;(2 )补充外源性NO前体L

藏鸡高海拔适应与肺组织NOS活力的研究

为研究藏鸡高海拔适应机制，本试验测定了藏鸡和低地鸡种在高海拔环境饲养时的右心指数，分析了海拔和品种对鸡肺组织一氧化氮合酶（NOS）活力的影响。结果表明在高海拔环境中。藏鸡的右心指数平均为22．91％，在正常范围内；而对照的矮小隐性白（D）和寿光鸡（S）右心指数分别为28．8096和29．89％，表现不同程度的右心增大；藏鸡肺组织NOS活力明显高于低地鸡，特别是在高海拔环境中差异更加显著，比低地鸡高35％～118%。藏鸡NOS活力较高可能是藏鸡在高海拔环境右心指数保持正常的原因．是高海拔适应生理特征之一。

VEGF、b-FGF、NOS_2和NOS_3在非小细胞肺癌的表达及其临床意义

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b -FGF)、一氧化氮合酶 2 (诱生型 ,NOS2 )、一氧化氮合酶 3(内皮型 ,NOS3)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其与肿瘤血管形成和淋巴结转移的关系。方法 :用免疫组化 (S -P法 )染色技术对 95例NSCLC石腊组织标本的VEGF、b -FGF、NOS2 和NOS3及肿瘤内微血管密度 (IMVD)进行检测和分析。结果 :VEGF、b FGF表达与TNM分期、IMVD及淋巴结转移有关 (P<0 .0 5) ,两者共表达与IMVD有关 (P <0 .0 1 )。NOS3与组织学分型、IMVD和淋巴结转移有关 (P <0 .0 5) ;NOS2与IMVD有关 (P <0 .0 5)。相关分析显示促血管形成因子 (VEGF、b FGF)与一氧化氮合酶 (NOS2 、NOS3)的表达呈正相关 (r=0 .30 1 8,P <0 .0 5)。结论 :VEGF和b FGF在促进血管形成和促进肿瘤转移方面可能起到协同作用 ,并且有NO的参与 ;VEGF、b FGF、NOS2

大骨节病患者血清NO、NOS、sFas/APO-1检测分析

目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、可溶性Fas(sFas)诱导大骨节病发生发展的作用与特点,为大骨节病防治研究提供新的思路。方法选择陕西省永寿县、榆林市榆阳区大骨节病区与咸阳市渭城区非大骨节病区120例调查对象,分为成人、儿童大骨节病组;成人、儿童病区对照组;成人、儿童非病区对照组,每组20例,平均年龄、性别无差别。用酶还原法检测了血清NO,化学比色法检测了血清NOS、iNOS,ELISA法检测了血清sFas水平。结果①大骨节病成人组血清NO、iNOS显著高于病区和非病区成人对照组(P< 0.05);血清NOS、sFas/APO鄄1水平高于非病区成人对照组(P< 0.005)。②大骨节病儿童组血清NO高于非病区儿童对照组(P< 0.05);血清NOS、iNOS均高于病区和非病区儿童对照组(P< 0.005)。结论儿童大骨节病发生发展中NO诱导途径起一定的作用,而Fas途径作用不明显。当疾病发展到成人大骨节病时,二者均起一定作用。

异丙酚抑制炎性痛大鼠脊髓NOS神经元的c-fos表达

用福尔马林致痛模型、c fos基因免疫组织化学法和NADPH d组织化学技术 ,研究大鼠脊髓结构对福尔马林痛刺激的反应及异丙酚在其调节过程中的影响。结果表明 ,福尔马林痛刺激后 ,刺激侧脊髓背角出现大量Fos免疫样阳性神经元 ,其中部分为FLI/NOS双标记神经元 ;痛刺激之前或之后给予异丙酚 ,背角各层FLI神经元和FLI/NOS双标记神经元的数量均显著减少 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;单纯腹腔注射异丙酚或生理盐水 ,脊髓未见或偶见FLI神经元。上述结果提示

四种复方中药和黄芪多糖对鲫鱼生长、组织中NO含量与NOS活性的影响

将四种复方中药(分别编号为AB、AH、CD、IV)和黄芪多糖(APS)作为添加剂添加入基础料饲料中,连续饲喂1龄鲫鱼45d,于第45d及第60d分别采样,测定鱼体重和肝脏、脾脏、肾脏中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,研究中药复方对鲫鱼生长及免疫功能的影响。结果显示:45d时称量体重,复方AH、复方AB两组增重率显著高于对照组及其他三种中药复方组,饲喂60d对照组及所有中药组增重率均无显著差距。投喂45d,方剂AB显著降低鲫鱼肝脏、肾脏中NO的含量,五种中药方剂均能提高鲫鱼脾脏中NO含量。AH、AB、IV、APS四种方剂饲喂的鲫鱼肝脏中NOS含量明显高于对照组。投喂60天,五种中药方剂饲喂的鲫鱼脾脏中NO含量均高于对照组,除IV外,均差异显著。肝脏中NOS含量各组无显著差异,脾脏中IV组TNOS含量最高,APS组iNOS含量最高。肾脏中APS方剂组的iNOS含量显著高于对照组。

从NO、NOS变化探讨瓜蒌薤白白酒汤对心肌缺血再灌注损伤的防治作用

目的:研究瓜蒌薤白白酒汤(LGXD)对家兔心肌缺血再灌注损伤模型血清中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,并探讨其对再灌注损伤的可能性保护机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支法复制心肌缺血再灌注损伤模型,分离血清检测血清中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,摘取左室心肌做常规病理切片。结果:与假手术组比较,模型组NO含量和NOS活性均显著增高,与模型组比较,高、低剂量药物组NO含量和NOS活性均降低,低剂量组比高剂量组低,病理结果显示低剂量组优于高剂量组。结论:瓜蒌薤白白酒汤对家兔心肌缺血再灌注损伤的心肌有保护作用,其机制可能与抑制NOS的活性,减少NO的过量产生有关,且低剂量药物组疗效优于高剂量组。

ACTH及电针对甲醛痛敏大鼠脊髓NOS阳性神经元增多的影响

本文采用ＮＡＤＰＨｄ组化染色技术，研究鞘内注射（ｉ．ｔ．）ＡＣＴＨ及电针剌激（ＥＡ）对甲醛痛敏大鼠脊髓背角浅层ＮＯＳ阳性神经元增多的影响。结果显示ＡＣＴＨ（０．５Ｕ，ｉ．ｔ．）及电针（１ｍＡ５０Ｈｚ，５ｍＡ５Ｈｚ，１ｍＡ５Ｈｚ）剌激“夹脊穴”３０ｍｉｎ均可显著抑制脊髓背角浅层ＮＯＳ阳性神经元增多；ｉ．ｔ．ＡＣＴＨ（０．５Ｕ）和电针剌激（１ｍＡ５Ｈｚ）同时给予时，抑制作用显著增加；ｉ．ｔ．ＮＯ前体左旋精氨酸（ＬＡｒｇ，１０ｎｍｏｌ）可部分逆转ＡＣＴＨ的抑制作用，ｉ．ｔ．阿片受体阻断剂纳络酮（ＮＬＸ，１０μｇ）可部分逆转电针的抑制作用。结果提示ＡＣＴＨ和电针可能通过不同机制抑制甲醛痛敏大鼠脊髓ＮＯＳ阳性神经元增多。

铅对大鼠中枢神经系统中NOS的影响

本文采用 SD成年大白鼠饮用醋酸铅水染毒 30天 ,然后用改进的 NADPH测定法及免疫组化 SP法观察脑组织中 NOS酶活性及 NOS酶蛋白亚型的变化。大白鼠分为五组 ,3个剂量组 ,高铅组为 2 0 .0 g/ L 醋酸铅 ,中铅组为 5 .0 g/ L 醋酸铅 ,低剂量为 1.0 g/ L 醋酸铅 ,分别经饮水染毒 ;阳性对照组为 1.0 g/ L 天冬酸 ;阴性对照组为普通自来水。结果显示 ,染铅组脑组织海马及小脑的 NOS酶活性水平明显下降 ,小脑区 n NOS及 i NOS蛋白与对照相比无显著性差异 ,而海马区的i NOS酶蛋白的表达高于对照组。这一结果表明 ,铅染毒后对大鼠中枢神经系统中 NOS酶活性具有抑制作用 ,这可能是铅中毒引起学习记忆功能障碍的重要机制之一。

针灸内关预处理对心肌缺血再灌注损伤兔血清NO、NOS及腺苷含量的影响

目的观察针灸内关预处理对心肌缺血再灌注损伤兔血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及腺苷含量的影响。方法将32只新西兰大耳白兔随机分为假手术组、缺血再灌注组、电针组和艾灸组。采用结扎左冠状动脉前降支40 min再灌注60 min的方法,建立心肌缺血再灌注损伤模型。假手术组于末次捆绑结束48 h后开胸,穿线静置40 min,拔线,继续静置60 min后取材;缺血再灌注组于末次捆绑结束后48 min行缺血再灌注后取材,电针组和艾灸组分别在针刺、艾灸内关穴之后48 h再行缺血再灌注。高效液相色谱法测定血清腺苷含量,采用硝酸还原酶化学比色法检测血清NO、NOS的含量。结果缺血再灌注组血清NO、NOS及腺苷的含量较假手术组相比明显下降(P<0.05);电针组与艾灸组血清NO、NOS及腺苷的含量较缺血再灌注模型组相比均明显升高(P<0.01),而电针组与艾灸组两组间无明显差异(P>0.05)。结论电针、艾灸内关穴预处理可以提高兔血清中NO、NOS及腺苷的含量,即可以增强延迟性保护机制的细胞信号转导通路中触发物质NO、NOS、腺苷的活性和含量,表明了针灸预处理内关穴可以在48 h这一延迟时相产生针对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。

电针对急性脑缺血大鼠血清NO、NOS、ET-1的影响

目的探讨电针对急性脑缺血的大鼠作用机制。方法将60只大鼠随机分为5组,即:空白组,假手术组,模型组,模型+电针人中、内关组(中内模型组),模型+电针曲池、足三里组(曲足组)。每组12只大鼠,随机分为甲、乙两小组。采用改良Longa线栓法制作大鼠急性脑缺血再灌注损伤模型。甲组大鼠在24 h时处死,乙组大鼠在48 h时间点处死。采颈动脉血检测血清中NO、NOS和ET-1的含量。结果与空白组比较,模型组、中内模型组、曲足组大鼠血清NO、NOS、ET-1升高,差异有统计学意义(P<0.05)。中内模型组血清中NO、NOS、ET-1的含量明显低于模型组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论电针能抑制NO、NOS、ET-1的过度升高,可能是电针中内模型组对急性脑缺血大鼠的作用机制之一。

蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠NO／NOS水平及抗氧化能力的影响

目的研究蛇葡萄素对2型糖尿病大鼠的降糖作用及NO/NOS水平和抗氧化能力的影响。方法采用高糖高脂饲料饲养大鼠1个月,再一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素,建立2型糖尿病大鼠模型。观察高、低剂量蛇葡萄素对糖尿病大鼠的降糖作用,并检测各组动物血清NO/NOS及肾脏组织SOD,MDA,GSH-Px含量。结果高、低剂量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平,抑制糖尿病大鼠血浆NO、iNOS水平,降低肾脏组织MDA含量,提高SOD,GSH-Px活性。与模型组比较差异显著(P<0.05或0.01)。结论蛇葡萄素能够降低2型糖尿病大鼠血糖,增强糖尿病大鼠机体抗氧化作用及抑制糖尿病大鼠血清NO/iNOS水平。