延胡索和L-THP对吗啡依赖大鼠胃肠多巴胺系统的影响

目的:研究延胡索及左旋延胡索乙素(L-THP)对吗啡依赖大鼠胃肠损伤的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠180只随机分为9组,20只/组,分别为正常对照组、模型组、生理盐水治疗组及延胡索低、中、高剂量组和L-THP低、中、高剂量组。除正常对照组外各组大鼠颈背部皮下吗啡剂量递增注射后,分别置于黑箱和白箱中进行条件性位置偏爱(CPP)训练,连续10 d(白箱为吗啡伴药箱),在最后一次训练48 h后进行条件性位置偏爱实验测试,并处死正常对照组及模型组大鼠检测各项指标,以确认成功建立吗啡条件性位置偏爱模型。造模成功当日,延胡索低、中、高剂量组分别按生药0.5、1、2 g/kg灌胃延胡索水提液,L-THP低、中、高剂量组分别灌胃L-THP0.94、1.88、3.76 mg/kg,生理盐水治疗组灌胃生理盐水,治疗6 d后再次条件性位置偏爱测试后处死取材。多巴胺递质含量和D2R的表达检测分别采用荧光分光光度法和Western blot技术。结果:与生理盐水治疗组比较,延胡索1、2 g/kg组及L-THP 1.88、3.76 mg/kg组大鼠在白箱停留时间显著减少(P<0.01),同时其胃和十二指肠多巴胺递质含量升高(P<0.01);胃贲门、胃体和十二指肠中D2R表达显著下调(P<0.01)。结论:延胡索和L-THP能逆转吗啡依赖胃肠损伤大鼠胃和十二指肠多巴胺递质的异常减少和D2R的异常增加,这可能是其保护吗啡依赖继发胃肠损伤的作用机制之一。

L-THP对脑缺血大鼠脑组织NO含量变化影响的研究

目的：通过检测局灶性脑缺血大鼠脑组织中ＮＯ含量的变化及左旋四氢巴马汀（Ｌ－ｔｅｔｒａｂｙｄｒｏｐａｌｍａｔｉｎｅ，Ｌ－ＴＨＰ）的影响．从而探讨Ｌ－ＴＨＰ的脑保护作用机制。方法：采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻断（ＭＣＡＯ）模型。 应用硝酸还原酶法检测缺血３ｈ及４８ｈ脑组织 ＮＯ含量的变化及Ｌ－ＴＨＰ对ＮＯ含量的影响。结果：缺血３ｈ及４８ｈ脑组 织 ＮＯ含量明显升高，且４８ｈ缺血组ＮＯ含量高于３ｈ缺血组。缺血前３０ｍｉｎ应用Ｌ－ＴＨＰ２０ｍｇ／ｋｇ可明显降低３ｈ及 ４８ｈ脑缺血组织中ＮＯ含量。结论：Ｌ－ＴＨＰ可降低局灶性脑缺血脑组织中ＮＯ的含量。其脑保护作用是通过抑制ＮＯ介 导的神经毒性作用实现的。

延胡索及L-THP对吗啡条件性位置偏爱大鼠奖赏环路多巴胺系统的影响及比较

目的:研究延胡索及左旋延胡索乙素(L-THP)对吗啡条件性位置偏爱(CPP)模型大鼠奖赏环路各脑区多巴胺递质与D2受体的影响及比较。方法:吗啡剂量递增颈背部皮下注射CPP训练10 d(起始剂量10 mg·kg-1,每天递增10 mg·kg-1,至注射10 d时为100 mg·kg-1),末次训练后48 h CPP检测确认模型建立成功,即日(12 d)延胡索水提液2,1,0.5 g·kg-1(分别含L-THP 0.153,0.077,0.038 mg),以及L-THP 3.76,1.88,0.94 mg·kg-1灌胃治疗,共6 d,第18天再次CPP检测,次日取材用高效液相法测定其中脑腹侧被盖区-伏核-前额叶皮质(VTA-NAc-PFC)奖赏神经环路各脑区多巴胺递质含量,免疫组化和Western blotting检测D2受体的表达。结果:与生理盐水治疗组比较,延胡索2,1 g·kg-1,以及L-THP 3.76,1.88 mg·kg-1组大鼠在白箱(吗啡伴药箱)停留时间明显减少(P<0.01或P<0.05),同时VTA,NAc和PFC内多巴胺含量降低,D2受体表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论:下调奖赏神经环路中升高的多巴胺含量和上调D2受体的表达,可能是延胡索与L-THP加速吗啡CPP效应消退的机制之一;对于抑制吗啡CPP效应以及对多巴胺系统的影响,含1倍量L-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约24倍L-THP单体的效果。

基于网络药理学探讨罗勒抗炎抗菌分子机制

利用网络药理学探究罗勒抗炎抗菌的作用机制,并通过体外试验进行初步验证。通过相关数据库筛选到罗勒的18种化合物和6种挥发油成分,作用靶点521个,获得抗炎抗菌相关靶点975个。使用Venny 2.1做药物和疾病靶点交集的韦恩图,得到88个罗勒抗炎抗菌靶点。构建蛋白互作PPI网络,并进行GO和KEGG富集分析。根据蛋白关联度可知核心靶点涉及TNF-α,IL-1β,IL-6等,主要通过对细菌的反应、对脂多糖的反应等信号通路发挥抗炎抗菌作用。体外细胞试验采用LPS及热灭活痤疮丙酸杆菌(Cutibacterium acnes,C.a)诱导的THP-1两种炎症细胞模型。采用ELISA法检测添加不同含量罗勒精油(Ocimum basilicum L.essential oil,OBEO)细胞的TNF-α,IL-1β、IL-6的分泌量。结果显示,体积分数为0.025%的OBEO能够抑制两种炎症损伤模型TNF-α,IL-1β,IL-6的表达;且OBEO对灭活C.a致THP-1细胞炎症损伤的抑制作用显著,分别降低TNF-α,IL-1β,IL-6的表达24%,45%,13%左右。

四氢原小檗碱同类物对α_1肾上腺素受体的拮抗作用

用放射配体结合实验与离体血管收缩功能实验相结合的方法，研究了４种四氢原小檗碱（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｒｏｂｅｒｂｅｒｉｎｅ，ＴＨＰＢ）同类物对α＿１－肾上腺素受体（α＿１－ＡＲ）的作用。结果显示左旋四氢巴马汀（ｌ－ＴＨＰ），左旋千金藤立陡碱（ｌ－ＳＰＤ），四氢原小檗碱－１８（ＴＨＰＢ－１８）和四氢小檗碱（ＴＨＢ）￣（１２５)ＩＢＥ２２５４￣（１２５)Ｉ－２－β（４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－ｅｔｈｙａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ－ｔｅｔｒａｌｏｎｅ，￣（１２５)ＩＢＥ）与大鼠脑皮质α＿１－ＡＲ的结合呈竞争性拮抗作用，ｐＫ１值分别为５．５４±０．３６，５．５６±０．４７，５．７５±０．５６和６．０１±０．６０，Ｈｉｌｌ系数接近于１．０。并拮抗苯肾上腺素（ｐｈｅｎｙｌｅｐｈｒｉｎｅ，ＰＥ）介导大鼠主动脉的收缩，ｐＡ＿２值分别为５．４８±０．５８，５．６６±０．５４，５．６４±０．３４和５．４５±０．７６，斜率与１．０无显著性差别。结果提示，４种四氢原小檗碱同类物对α＿１－ＡＲ均有非亚型选择性拮抗效应，且亲和性相同。

左旋四氢巴马汀对麻醉大鼠血流动力学影响

L-THP 6mg/kg iv仅显著降低麻醉大鼠血压,LVP-过性降低。iv L-THP 18mg/kg在显著降低血压的同时伴有LVP,±(dP/dt)_(max),(dP/dt)P^(-1)降低及HR减慢。但血压下降程度比心室收缩性能下降为大。L-THP依剂量降低DAP,且降低程度大于SAP。表明L-THP能降低外周阻力,大剂量时对心脏收缩性能有抑制作用。

左旋四氢巴马汀对几种激动剂所致气管收缩作用的影响

在离体豚鼠气管螺旋条L—THP抗BaCl_2,KCl,5-HT,His,Ach所致收缩作用与Ver及Pap均不同。L-THP抗BaCl_2,KCl,5-HT,His次最大反应量所致收缩的IC_(50)值分别为3.5×10^(-5)mol/L,4.5×10^(-5)mol/L,2.5×10^(-5)mol/L,8.9×10^(-5)mol/L。各激动剂对L—THP的敏感性与其对胞外钙的相对依赖性顺序相一致。但L-THP抗KCl及5-HT的作用强度无显著差异,提示L-THP能阻断钙内流并具相似强度的抗5-HT作用。

左旋四氢巴马汀对吗啡条件性位置偏爱的影响

目的探讨不同剂量的左旋四氢巴马汀(lTetrahydropalmatine,lTHP)对吗啡诱导的条件性位置偏爱(CPP)的影响以及自身能否产生CPP效应。方法本实验采用倾向性实验程序,①对♂SD大鼠sc吗啡(5.00mg·kg-1)或生理盐水(NS)训练8d,d9测定大鼠对伴药侧的偏爱效应或测试前40minipNS或不同剂量的lTHP(1.25～5.00mg·kg-1),观察这些预处理对该效应的影响;②测量不同剂量的lTHP(1.25～5.00mg·kg-1)慢性用药(每天1次,ip)对CPP效应消退的影响;③测试ipNS或lTHP(1.25～5.00mg·kg-1)能否诱导大鼠对伴药侧产生偏爱(方法同吗啡)。结果5.00mg·kg-1吗啡诱导大鼠对伴药盒产生明显的CPP;测试前ip2.50mg·kg-1或5.00mg·kg-1的lTHP明显降低吗啡诱导的CPP效应的表达(P<0.05),其慢性给药明显加速吗啡CPP效应的消退;3个剂量的lTHP均不能诱导大鼠形成CPP。结论lTHP能抑制吗啡的奖赏效应,可在吗啡成瘾的治疗中发挥一定的作用。

大鼠肠道对左旋延胡索乙素及其消旋体的吸收差异研究

考察延胡索乙素(THP)的吸收机制,并研究其消旋体与左旋延胡索乙素(l-THP)在大鼠肠道的吸收差异。应用单向灌流模型,采用HPLC法测定THP及l-THP在灌流液中的浓度变化。灌流液中THP质量浓度为8,16,32μg.mL-1时,THP吸收速率常数和有效吸收系数均无统计差异(P>0.05),各肠段的吸收速率常数和有效吸收系数也无统计差异(P>0.05);l-THP和THP在大鼠肠道吸收存在显著性差异(P<0.05);在肠道灌流液中加入P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米后,THP吸收显著增加,而l-THP吸收几乎不变。THP在肠黏膜的转运为被动扩散过程,无特殊吸收窗口;THP消旋体与l-THP的吸收差异可能与P-gp与右旋THP的选择性结合有关。

延胡索和左旋延胡索乙素对大鼠吗啡条件性位置偏爱效应消退作用的比较

目的观察并比较延胡索及其有效成分左旋延胡索乙素(l-tetrahydropalmatine,l-THP)对大鼠吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)效应消退时间的影响。方法剂量递增法建立大鼠吗啡CPP模型,雄性SD大鼠颈背部注射吗啡和生理盐水训练10 d,在12 d确认CPP模型建立成功后,连续21 d给予延胡索2,1,0.5 g.kg-1水提液(分别含l-THP0.153,0.077,0.038 mg),以及l-THP 3.76,1.88,0.94 mg.kg-1灌胃治疗,观察各组大鼠吗啡CPP效应的消退时间。结果与生理盐水对照组比较,吗啡模型组大鼠在伴药箱停留的时间明显延长(P<0.05);治疗后,延胡索2,1g.kg-1水提液和l-THP 3.76,1.88 mg.kg-1组的CPP效应在用药6 d消退,而模型组、延胡索0.5 g.kg-1和l-THP0.94 mg.kg-1组在用药第2天消退。结论延胡索和l-THP均能加速大鼠吗啡CPP效应的消退,但含一倍量l-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约24倍l-THP单体的效果。

延胡索乙素临床应用的研究进展

回顾分析了近年来延胡索乙素的临床研究文献 ,大量有关研究证实延胡索乙素除用于镇痛、镇静、安定外 ,还是治疗阵发性房颤、快速型室上性心律失常安全有效的药物 ,并对顽固性呃逆。

左旋四氢巴马汀对局灶性脑缺血再灌注大鼠凋亡蛋白P53、HSP70表达的影响

目的:观察左旋四氢巴马汀(L-THP)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及对神经元凋亡蛋白P53、HSP70表达的影响,探讨L-THP的神经保护作用及机制。方法:采用改良Longa法建立局灶性脑缺血再灌注模型,11分法对大鼠进行神经行为症状评分,比色法测定大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)活力,HE染色观察大鼠脑组织神经元病理形态学变化,免疫组织化学染色法分别检测缺血侧海马CA1区P53、HSP70阳性细胞表达。结果:L-THP能够明显改善局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经行为症状以及脑组织形态结构,降低血清LDH活力,并且能够降低大鼠海马CA1区P53蛋白的阳性表达,在再灌注早期增强HSP70的阳性表达。结论:L-THP对局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制凋亡蛋白P53的表达,增强HSP70的表达有关。

左旋四氢巴马汀对大鼠和小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察左旋四氛巴马汀 (THP)对脑缺血再灌注损伤的保护作用 ;方法 :采用大鼠和小鼠脑缺血再灌注模型。结果 :在大鼠和小鼠脑缺血再灌注模型上 ,THP30 ,6 0mg/kg ,iv及 6 0 ,12 0mg/kgiv ,可显著提高下脑组织乳酸脱氢酶 (LDH)及超氧化物歧化酶 (SOD)活性、明显降低丙二醛 (MDA)含量。在大鼠局灶性脑缺血 2h再灌注 2 4h模型上 ,THP30 ,6 0mg/kg ,iv可明显缩小梗死灶面积 ,并显著抑制脑缺血组织中LDH和SOD活性降低 ,减少MDA过量生成。结论 :THP对大鼠和小鼠脑缺血再灌注损伤有显著保护作用。

左旋四氢巴马丁抗动脉粥样硬化作用的体外研究

目的:研究左旋四氢巴马丁(l-THP)对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与单核细胞THP-1的黏附作用及对血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨l-THP在抗动脉粥样硬化方面的作用。方法:以TNF-α刺激体外培养的HU-VECs细胞,加入不同浓度的l-THP处理,测定HUVECs与单核细胞THP-1的黏附能力,并用酶联免疫吸附实验(ELISA)及西点法(western blotting)测定血管细胞黏附分子-1的表达。结果:l-THP(30μM)可以明显抑制TNF-α诱导的HUVECs与THP-1的细胞间黏附作用,其黏附率仅为TNF-α组的70.37±1.64%;ELISA实验中30μM浓度的抑制率为38.36±0.5%;western blotting实验同样显示l-THP(30μM)能显著降低VCAM-1的表达。结论:l-THP能够抑制内皮细胞与单核细胞的黏附及VCAM-1的表达,提示其在抗动脉粥样硬化作用中具有潜在的价值。

左旋四氢巴马汀对大鼠脑缺血再灌注损伤后p53表达的影响

目的观察左旋四氢巴马汀(L-THP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及p53表达的影响。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)建立局灶性脑缺血实验模型,于MCAO前30min腹腔注射L-THP,观察不同浓度L-THP(5、10、20mg/kg)对脑缺血再灌注损伤后大鼠脑梗死体积的改变;免疫组化法检测p53的表达改变;TUNEL法检测神经细胞凋亡的数量改变。结果①各用药组脑梗死体积明显小于缺血再灌组;②与缺血再灌组相比,各用药组p53蛋白表达明显下降;③各用药组凋亡细胞均较缺血再灌组明显减少。结论L-THP可能通过抑制p53表达以减少神经细胞的凋亡。

左旋四氢巴马汀对电针抑制兔大脑皮层牙髓诱发电位作用的影响

我们在兔耳钾离子透入测痛模型上观察到左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmarine，L-THP)可加强电针的镇痛作用。本工作采用兔大脑皮层牙髓诱发电位(tooth pulp voked potentials，TPEFs)为痛的指标，拟在感觉水平上进一步了解L-THP与电针镇痛的协同关系。

左旋四氢巴马汀对急性全脑缺血-再灌注大鼠肝组织血红素氧合酶-1与内源性一氧化碳的影响

目的考察左旋四氢巴马汀在大鼠急性全脑缺血-再灌注损伤时对肝组织血红素氧合酶-1(HO-1)和内源性一氧化碳(CO)的影响。方法采用四血管阻塞法建立大鼠急性全脑缺血-再灌注模型,分别检测假手术组(S组,仅行假手术)、脑缺血-再灌注组(I组,制备全脑缺血-再灌注模型,0.9%氯化钠注射液每隔6h腹腔注射1次)和左旋四氢巴马汀治疗组(R组,制备全脑缺血-再灌注模型,左旋四氢巴马汀20mg·kg-1每隔6h腹腔注射1次),分别于脑缺血-再灌注后2,6,12,24,48h处死大鼠6只,检测肝组织HO-1活性和血液中碳氧血红蛋白含量。结果左旋四氢巴马汀可在2,6,12,24h提高CO及HO-1水平(均P<0.05),且在12hCO及HO-1的水平达到最高峰(均P<0.05)。结论左旋四氢巴马汀可通过升高HO-1活性使CO增加,从而减轻脑缺血-再灌注时肝组织炎症损伤,对肝组织起保护作用。

静脉注射左旋四氢巴马汀及其同类物加强家兔电针镇痛

左旋四氢巴马汀(L-tetrahydyropalmatine，L-THP)又称颅通定(rotundine)是临床常用的一种非麻醉性镇痛药，具有镇痛、镇静、肌松和抗心律失常等多种药理功能。本工作在家兔身上试将L-THP与电针联合应用，观察L-THP对电针镇痛的影响，比较其同类物四氢檗碱(tetrahydroberberine，THB)和左旋千金藤立定(L-steph0Iidine，L-SPD)对电针镇痛的作用。旨在为临床寻找合理的针麻增效药提供实验资料。

荷叶生物碱对THP-1单核细胞源性巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响

目的观察荷叶生物碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人THP-1巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的可能机制。方法建立THP-1源性泡沫细胞模型后,采用不同剂量荷叶生物碱(0、25、50、100 mg/L)分组共孵育24 h。油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况;分别用荧光定量PCR、Wesetern Blot检测细胞中SR-BⅠmRNA水平和蛋白水平。结果与空白对照组比较,ox-LDL对细胞内脂滴积聚呈浓度依赖性;且细胞SR-BⅠ的mRNA水平(分别为1.00±0.00、0.53±0.04、0.30±0.04和0.18±0.03)及蛋白表达(分别为1.00±0.00、0.62±0.10、0.39±0.08和0.22±0.05)呈浓度依赖性降低(P<0.01);加入荷叶生物碱干预后,细胞内脂滴随荷叶生物碱浓度的增加而减少,细胞SR-BⅠmRNA水平(分别为0.32±0.02、1.07±0.02、1.28±0.03和1.49±0.03)及蛋白表达(分别为0.28±0.03、1.06±0.02、1.32±0.03和1.41±0.02)浓度依赖性增加(P<0.01)。结论荷叶生物碱上调人THP-1单核细胞源性泡沫细胞SR-BⅠ的表达,促进细胞内胆固醇流出,可能是荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的机制之一。

sFlt-1对人单核细胞系THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用

目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1[sFlt-1(1-3)]对人单核细胞系THP-1细胞向血管内皮生长因子(VEGF)迁移的抑制作用。方法应用腺病毒包装系统构建携带人sFlt-1(1-3)/FLAG融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sFlt-1/FLAG)。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫荧光分析所构建的重组腺病毒载体在L293细胞中的表达。通过Transwell实验观察sFlt-1(1-3)对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。分别观察5种浓度(0、0.1、1、10和100ng/mL)的VEGF对THP-1的趋化作用。观察4种浓度(0.1、1、10和100ng/mL)的sFlt-1(1-3)/FLAG表达上清对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。结果成功构建了Ad-sFlt-1/FLAG融合基因的重组腺病毒载体,通过ELISA和免疫荧光检测显示构建的腺病毒载体携带的sFlt-1(1-3)基因能够在L293细胞中得到表达。在感染重组腺病毒(Ad-sFlt-1/FLAG)的L929细胞培养上清可以检测到sFlt-1(1-3)/FLAG蛋白的表达,浓度为503.7ng/mL。VEGF终浓度为1、10和100ng/mL时,迁移的THP-1细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。sFlt1(1-3)/FLAG浓度为100ng/mL时THP-1细胞迁移数约为sFlt1(1-3)/FLAG浓度为0ng/mL时的25.7%。结论 VEGF对THP-1细胞具有趋化作用,sFlt-1(1-3)可以有效地抑制THP-1细胞向VEGF迁移。