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痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜annexinl和aldolase A表达影响的同步研究 被引量:1
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作者 梁清华 何国雄 +1 位作者 杨波 蔡颖 《实用预防医学》 CAS 2006年第6期1401-1405,共5页
目的通过中药复方痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜annexinl、aldolase A表达影响的同步研究,探讨痹肿消汤治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis.RA)的作用机制。方法采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎(col... 目的通过中药复方痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜annexinl、aldolase A表达影响的同步研究,探讨痹肿消汤治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis.RA)的作用机制。方法采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,并设立正常对照组。采用免疫印迹法(Western blot)同步检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜annexinl、aldolase A的表达,运用ImageTool 3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析。结果造模25d后,模型组滑膜annexm 1表达低于正常组(P<0.05),aldolase A表达高于正常组(P<0.05)。随着免疫时间的延长,模型组滑膜annexin 1表达呈水平递减趋势(P<0.05),aldolase A表达则逐渐递增(P<0.05)。痹肿消汤治疗后,annexin 1表达在各时间点明显均高于模型组(P<0.05),表达呈递增趋势(P<0.05),aldolase A表达则明显低于同时间模型组(P<0.05),在25、35和45d水平,表达呈递减趋势(P<0.05)。BZXD能上调CIA大鼠滑膜annexin 1表达、下调aldolase A表达。结论在CIA病理过程中,随着关节炎症状加重,annexin 1表达下调,aldolase A表达上调。提示anncxin 1、aldolase A与RA滑膜病变(关节炎症、骨质侵蚀)密切相关;BZXD上调CIA大鼠滑膜annexin 1表达、下调aldolase A表达,这可能是其阻抑RA关节炎症、骨质侵蚀的重要机制之一。 展开更多
关键词 痹肿消汤 胶原诱导性关节炎 ANNEXIN 1 aldolase A 类风湿关节炎 免疫印迹法 大鼠
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Prion Protein Binds to Aldolase A Produced by Bovine Intestinal M Cells 被引量:1
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作者 Yuya Nagasawa Yu Takahashi +15 位作者 Wataru Itani Hitoshi Watanabe Yusuke Hidaka Shotaro Morita Kei Suzuki Kouichi Watanabe Shyuichi Ohwada Haruki Kitazawa Morikazu Imamura Takashi Yokoyama Motohiro Horiuchi Suehiro Sakaguchi Shirou Mohri Michael T. Rose Tomonori Nochi Hisashi Aso 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2015年第3期43-60,共18页
Microfold (M) cells are a kind of intestinal epithelial cell in the follicle-associated epithelium (FAE) of Peyer’s patches. They can transport antigens and microorganisms to lymphoid tissues. Bovine spongiform encep... Microfold (M) cells are a kind of intestinal epithelial cell in the follicle-associated epithelium (FAE) of Peyer’s patches. They can transport antigens and microorganisms to lymphoid tissues. Bovine spongiform encephalopathy (BSE) is a fatal neurodegenerative disorder in cattle. It is linked to variant Creutzfeldt-Jakob disease in humans. Although it is thought that M cells transport the BSE agent, the exact mechanism by which it crosses the intestinal barrier is not clear. We have bovine intestinal epithelial cell line (BIE cells), which can differentiate into the M cell type in vitro after stimulation, and which is able to transport the BSE agent. We show here that M cells are able to incorporate large numbers of PrP coated magnetic particles into intracellular vesicles, which we collected. The results of 2-DE show a specific protein associated with the PrP-coated particles, compared with non-coated particles. This protein was identified as aldolase A, a glycolytic pathway enzyme, using LC-MS/MS analysis. Aldolase A was synthesized and secreted by BIE cells, and increased during M cell differentiation. In the villi of the bovine intestine, aldolase A was detected on the surface of the epithelium and in the mucus droplet of goblet cells. In the FAE of bovine jejunal and ileal Peyer’s patches, aldolase A was localized on the surface and the apical part of the M cells. The binding of rbPrP to aldolase A was clearly detected and inhibited by pre-treatment of anti-aldolase A antibody. Aldolase A was co-stained with incorporated PrPSc in M-BIE cells. These results suggest that bovine M cells and goblet cells synthesize aldolase A, and that aldolase A may have the ability to bind PrP and associate with PrP in cellular vesicles. Therefore, aldolase A-positive M cells may play a key role in the invasion of BSE into the body. 展开更多
关键词 Peyer’s PATCH M Cell BIE Cells aldolase A PRP Binding Protein
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Measurement and Correlation on Liquid DifFusion Coefficients of Aqueous L-Threonine Solutions from 298.15K to 328.15 K 被引量:1
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作者 赵长伟 马沛生 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2004年第2期267-271,共5页
The diffusion coefficients of aqueous L-threonine solutions were determined from 298.15 K to 328.15 K by the metallic diaphragm cell method with accuracy, promptness and convenience. Meanwhile, the densities and visco... The diffusion coefficients of aqueous L-threonine solutions were determined from 298.15 K to 328.15 K by the metallic diaphragm cell method with accuracy, promptness and convenience. Meanwhile, the densities and viscosities of the solutions were also determined and correlated. Based on a semi-empirical model for correlating the diffusion coefficients of some amino acids in their aqueous solutions, a new semi-empirical model for correlating the diffusion coefficients involving temperature was provided, which is more comprehensive and less experiment dependent compared to the previous model. The fitting results are satisfactory. Compared to a former model for correlating the diffusion coefficients of solid organic salts in their aqueous solutions, this model provides significant improvement in correlation of diffusion coefficients with different temperatures avoiding arduous work. 展开更多
关键词 l-threonine diffusion coefficient metallic diaphragm cell method semi-empirical model
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Spinach aldolase interactions with rabbit, chicken, and fish muscle phosphofructokinase-1
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作者 Anita Williams Ami Abbott +6 位作者 Jessica Chadwick Alicia Thomas Nathalia Cruz Alice Deng Leah Ordinanza John Tat Percy Russell 《Advances in Enzyme Research》 2013年第4期121-131,共11页
Previous studies showed that rabbit muscle phosphofructokinase-1 (PFK-1) activity losses due to dilution, due to inhibition by ascorbate, and due to some lithium salts were prevented by rabbit muscle aldolase. Chicken... Previous studies showed that rabbit muscle phosphofructokinase-1 (PFK-1) activity losses due to dilution, due to inhibition by ascorbate, and due to some lithium salts were prevented by rabbit muscle aldolase. Chicken PFK-1 and fish PFK-1 interacted with ascorbate and were inhibited, consistent with a previously proposed function that ascorbate facilitates glycogen in resting muscle by inhibiting glycolysis. This report shows that a plant enzyme, spinach aldolase, has the same ability to prevent rabbit muscle PFK-1 activity loses as rabbit muscle aldolase and in some instances it was a better protector from activity losses than rabbit aldolase. Spinach aldolase also protected chicken and fish PFK-1s from inhibitions by ascorbate and from activity losses due to dilution. Prevention of losses PFK-1 activities from animal species by a plant protein, spinach aldolase, suggests an evolutionary conservative relationship between PFK-1s and aldolases. 展开更多
关键词 Phosphofructokinase-1 SPINACH aldolase Interactions Carbonate Inhibitions RABBIT aldolase Evolutionary Conservative Relationships Ascorbate Inhibition
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A developmental biological study of aldolase gene expression in Xenopus laevis
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作者 KOICHIRO SHIOKAWA, ERI KAJITA, HIROSHI HARA, HITOMI YATSUKI, KATSUJI HORI1 Laboratory of Molecular Embryology, Department of Biological Sciences, Graduate School of Science, TheUniversity of Tokyo, Hongo 7-3-1, Bunkyo ku, Tokyo 113-0033, Japan 2Medical Re 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期85-96,共12页
We cloned cDNAs for Xenopus aldolases A, B and C. These three aldolase genes are localized on different chromosomes as a single copy gene. In the adult, the aldolase A gene is expressed extensively in muscle tissues, ... We cloned cDNAs for Xenopus aldolases A, B and C. These three aldolase genes are localized on different chromosomes as a single copy gene. In the adult, the aldolase A gene is expressed extensively in muscle tissues, whereas the aldolase B gene is expressed strongly in kidney, liver, stomach and intestine, while the aldolase C gene is expressed in brain, heart and ovary. In oocytes aldolase A and C mRNAs, but not aldolase B mRNA, are extensively transcribed. Thus, aldolase A and C mRNAs, but not B mRNA, occur abundantly in eggs as maternal mRNAs, and strong expression of aldolase B mRNA is seen only after the late neurula stage. We conclude that aldolase A and C mRNAs are major aldolase mRNAs in early stages of Xenopus embryogenesis which proceeds utilizing yolk as the only energy source, aldolase B mRNA, on the other hand, is expressed only later in development in tissues which are required for dietary fructose metabolism.We also isolated the Xenopus aldolase C genomic gene (ca. 12 kb) and found that its promoter (ca. 2 kb)contains regions necessary for tissue-specific expression and also a GC rich region which is essential for basal transcriptional activity. 展开更多
关键词 Amino Acid Sequence Animals Cloning Molecular DNA Complementary Fructose-Bisphosphate aldolase Models Anatomic Models Genetic Models Molecular Molecular Sequence Data RNA Messenger Sequence Homology Amino Acid Time Factors Tissue Distribution Xenopus laevis
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Pressure relief-dipping-microwave assisted polymerization of melamine-L-aspartic acid resin at activated carbon for purification of L-threonine fermented crude product
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作者 Bin Li Wenshuai Tang +1 位作者 Aiguo Yuan Guanping Jin 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第10期2034-2039,共6页
L-threonine(L-Thr) obtained by fermentation often contains vestigial hydrosoluble Pb(Ⅱ), Fe(Ⅱ), L-glutamic acid(L-Glu) etc., which affect the product quality. Poly melamine and L-aspartic acid(L-Asp) resin functiona... L-threonine(L-Thr) obtained by fermentation often contains vestigial hydrosoluble Pb(Ⅱ), Fe(Ⅱ), L-glutamic acid(L-Glu) etc., which affect the product quality. Poly melamine and L-aspartic acid(L-Asp) resin functional coconut shell activated carbon composite(PMA/AC) was prepared by a pressure relief-dipping-microwave assisted polymerization method for the simultaneous removals. The adsorption capacities of Pb(Ⅱ), Fe(Ⅱ) and L-Glu could reach to 82.34 mg·g^(-1), 57.82 mg·g^(-1) and 102.58 mg·g^(-1) at conditions of pH 5.0, 45 °C and 4 h with an initial concentration of 0.01 mol·L^(-1), respectively. The present PMA/AC was successfully used to the simultaneous removals of vestigial Pb(Ⅱ), Fe(Ⅱ) and L-Glu from the fermented crude product solution of L-Thr. Moreover, the PMA/AC was carefully characterized by FE-SEM, IR et al. analysis techniques, the results show that abundant PMA particles evenly distributed at the inner and outside surface of AC with a size of(50 ± 20) nm. 展开更多
关键词 l-threonine fermented crude product Simultaneous removals Activated carbon composites Absorption
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Reinvestigation of the Crystal Growth of “L-Proline Succinate” and “L-Threonine Zinc Acetate” Showing Use of Infrared Spectra for Product Identification
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作者 Subramanian Natarajan Bikshandarkoil R. Srinivasan Kalimuthu Moovendaran 《Journal of Crystallization Process and Technology》 2014年第2期121-125,共5页
Reinvestigation of the growth of L-proline succinate (1) (Paramasivam and Ramachandra Raja, Journal of Crystallization Process and Technology, 2 (2012) 21 - 24;Balamurugaraj et al., Journal of Material Physics and Che... Reinvestigation of the growth of L-proline succinate (1) (Paramasivam and Ramachandra Raja, Journal of Crystallization Process and Technology, 2 (2012) 21 - 24;Balamurugaraj et al., Journal of Material Physics and Chemistry 1 (2013) 4 - 8) and L-threonine zinc acetate (2) (Puhal Raj and Ramachandra Raja, Photonics and Optoelectronics, 2 (2013) 56 - 64) is reported. Slow evaporation of an aqueous solution containing equimolar quantities of L-proline and succinic acid (for 1) and L-threonine and zinc acetate (for 2) results in the fractional crystallization of succinic acid (in the first case) and L-threonine (in the second case) and not any novel organic non-linear optical (NLO) crystals. In this paper, the usefulness of infrared spectra for correct product characterization is demonstrated. 展开更多
关键词 L-PROLINE SUCCINATE l-threonine Zinc ACETATE X-Ray Cell Data IR Spectra Non-Linear Optical Crystals
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兄弟两人因糖原累积病Ⅻ在新生儿期发病的病例分析
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作者 孙艳波 李存宇 陈敏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期636-640,共5页
糖原累积病(GSD)是一组常染色体隐性遗传的糖代谢障碍性疾病,在糖原的合成或分解途径中发生先天性酶缺乏而引起代谢障碍,导致糖原在脏器组织上累积。根据酶缺乏的种类,GSD分为十几个类型,其中GSDⅫ是一种超罕见的GSD分型。本文报道年龄... 糖原累积病(GSD)是一组常染色体隐性遗传的糖代谢障碍性疾病,在糖原的合成或分解途径中发生先天性酶缺乏而引起代谢障碍,导致糖原在脏器组织上累积。根据酶缺乏的种类,GSD分为十几个类型,其中GSDⅫ是一种超罕见的GSD分型。本文报道年龄相差5岁的兄弟两人以新生儿重度窒息、肌无力、心肌损害、贫血、智力低下为主要临床表现,在新生儿期发病的GSDⅫ纯合型病例。基因检测结果显示两患儿ALDOA基因存在核苷酸与氨基酸改变:c.619G>A,p.E207K,为纯合型,患儿父母的基因为杂合型。本文通过对GSDⅫ型的临床特点、诊断及治疗进行总结,为出生后即出现重度窒息、肌无力、贫血及多脏器损害新生儿的病因探寻及治疗提供参考。 展开更多
关键词 糖原累积病 醛缩酶A缺乏症 新生儿 肌无力 贫血
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G-四链体在糖酵解相关基因中的分布及调控
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作者 刘鹏宇 蒋兴伟 +5 位作者 马骏 高峰华 王哲 任素萍 巩家媛 于群 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期517-525,共9页
目的探讨G-四链体(G4)在糖酵解相关基因中的分布及调控。方法选取200个糖酵解相关基因转录起始位点上游1500 bp至5′非翻译区的序列进行生物信息学分析,初步确定含有潜在G-四链体形成序列(PQS)的相关基因;圆二色谱法和非变性聚丙烯酰胺... 目的探讨G-四链体(G4)在糖酵解相关基因中的分布及调控。方法选取200个糖酵解相关基因转录起始位点上游1500 bp至5′非翻译区的序列进行生物信息学分析,初步确定含有潜在G-四链体形成序列(PQS)的相关基因;圆二色谱法和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测G4形成;外切酶Ⅰ(ExoⅠ)水解实验在0,0.5,2,8,16和32 min检测G4稳定性;构建将相关基因的特定片段插入到荧光素酶表达序列之前的报告基因质粒,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶的表达水平进而判断G4对启动子活性的影响;实时荧光定量PCR检测荧光素酶的mRNA水平进一步验证G4的转录调控作用。结果①生物信息学分析表明,200个糖酵解相关基因中有12个基因含有PQS,进一步结合PQS长度及结构分析,醛缩酶A(ALDOA)和磷酸变位酶2(PGAM2)的PQS理论上可形成稳定G4。②ALDOA和PGAM2均在260 nm处有最大正吸收峰,在240 nm处有最大负吸收峰,符合平行结构G4的特征构象,同时二者的PQS可形成G4。③ExoⅠ消化后,ALDOA和PGAM2无明显水解,证明G4具有稳定性,同时二者的PQS突变后均可逐渐被水解。④ALDOA突变后荧光素酶的表达水平和mRNA水平显著升高(P<0.01);PGAM2突变后荧光素酶的表达水平和mRNA水平显著降低(P<0.01)。结论糖酵解相关基因的序列中存在大量PQS,其中ALDOA和PGAM2的PQS可形成稳定G4,并具有转录调控作用。 展开更多
关键词 G-四链体 潜在G-四链体形成序列 糖酵解 醛缩酶A 磷酸变位酶2 转录调控
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L-苏氨酸醛缩酶:C-C键手性合成的绿色催化剂
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作者 郑文隆 徐刚 +1 位作者 杨立荣 吴坚平 《生物加工过程》 CAS 2023年第5期521-531,共11页
L-苏氨酸醛缩酶(LTA)是一种重要的生物催化剂,能够催化醛和甘氨酸生成β羟基α氨基酸。因为β羟基α氨基酸具有两个手性中心,是重要的手性砌块,广泛应用于医药、食品和农业等领域。利用LTA催化手性C—C键合成反应原子经济性高,符合绿色... L-苏氨酸醛缩酶(LTA)是一种重要的生物催化剂,能够催化醛和甘氨酸生成β羟基α氨基酸。因为β羟基α氨基酸具有两个手性中心,是重要的手性砌块,广泛应用于医药、食品和农业等领域。利用LTA催化手性C—C键合成反应原子经济性高,符合绿色可持续发展理念,是目前的研究热点之一。但是,野生LTA存在非对映体选择性不高、酶活低及稳定性差等缺点,限制了其在手性合成中的应用。近年来,利用LTA合成高价值手性化学品的理论研究和工业应用取得了重大突破。基于此,本文综述了LTA新酶挖掘、机制解析、分子改造和手性砌块合成等方面的最新研究进展,为LTA的深入研究和工业应用提供思路和借鉴。 展开更多
关键词 L-苏氨酸醛缩酶 非对映体选择性 理性设计 定向进化 手性砌块
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果糖二磷酸醛缩酶C在结肠癌组织和细胞中的表达及其对生物学行为的影响 被引量:1
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作者 程多 褚菲菲 +5 位作者 张楠 王晶晶 陈梦阁 岳文莉 郜辉 梁芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第15期1893-1900,共8页
目的 观察果糖二磷酸醛缩酶C(fructose-bisphosphate aldolase C,ALDOC)在结肠癌组织和细胞中的表达及其对生物学行为的影响。方法 利用GEPIA数据库分析结肠癌组织ALDOC的表达水平。以患者癌旁组织或正常结肠上皮细胞FHC为对照,RT-qPCR... 目的 观察果糖二磷酸醛缩酶C(fructose-bisphosphate aldolase C,ALDOC)在结肠癌组织和细胞中的表达及其对生物学行为的影响。方法 利用GEPIA数据库分析结肠癌组织ALDOC的表达水平。以患者癌旁组织或正常结肠上皮细胞FHC为对照,RT-qPCR及免疫组化检测结肠癌组织和癌细胞SW620、SW480、HT-29、HCT-116中ALDOC mRNA和蛋白的表达,并分析ALDOC mRNA表达与患者临床病理因素的关系。将结肠癌细胞SW620分为对照组、NC inhibitor组和ALDOC inhibitor组;通过Lipofectamine2000将ALDOC inhibitor或阴性对照转染各组SW620细胞;MTT法及癌细胞单克隆形成检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;RT-qPCR检测细胞ALDOC mRNA的表达;Western blot检测细胞ALDOC、金属基质蛋白酶-2/9(MMP-2/9)的表达。结果 GEPIA数据库显示结肠癌组织ALDOC的表达水平高于正常组织(P <0.05);与癌旁组织或FHC相比,结肠癌组织和细胞SW620、SW480、HT-29、HCT-116中ALDOC mRNA和蛋白上调,且ALDOC mRNA水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移有明显的相关性(P <0.05);下调ALDOC mRNA能够下调MMP-2、MMP-9蛋白水平,抑制细胞生长,减少划痕愈合和侵袭细胞数(P <0.05)。结论 ALDOC水平在结肠癌组织和细胞中表达上调,且与结肠癌患者的不良预后紧密相关。ALDOC通过调节MMP-2/9调控结肠癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 果糖二磷酸醛缩酶C 结肠癌 侵袭 迁移 增殖
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基于生物信息学分析醛缩酶B在肝细胞癌中的表达及临床意义
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作者 李定桦 连芳 邬国斌 《广西医学》 CAS 2023年第6期680-685,共6页
目的基于生物信息学分析醛缩酶B在肝细胞癌中的表达水平及临床意义。方法从癌症基因组图谱数据库下载肝细胞癌组织和正常肝脏组织的RNA测序数据,利用人类蛋白质表达图谱数据库和R软件分析醛缩酶B蛋白和mRNA在肝细胞癌组织和正常肝脏组... 目的基于生物信息学分析醛缩酶B在肝细胞癌中的表达水平及临床意义。方法从癌症基因组图谱数据库下载肝细胞癌组织和正常肝脏组织的RNA测序数据,利用人类蛋白质表达图谱数据库和R软件分析醛缩酶B蛋白和mRNA在肝细胞癌组织和正常肝脏组织中的表达情况。利用STRING数据库对与醛缩酶B直接相互作用的蛋白进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)分析,并对编码上述蛋白的基因进行基因本体论(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。分析醛缩酶B mRNA表达量与肝细胞癌患者临床病理特征的相关性,采用COX回归模型分析肝细胞癌患者预后的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析醛缩酶B mRNA表达量预测肝细胞癌患者预后的效能。结果醛缩酶B蛋白和mRNA在肝细胞癌组织中均呈低表达。PPI分析结果显示,醛缩酶B与二羟基丙酮激酶、果糖1,6-二磷酸酶1、果糖1,6-二磷酸酶2等10个蛋白直接相互作用。GO功能富集分析和KEGG通路富集分析结果显示,与醛缩酶B直接相互作用的蛋白参与的生物过程以单糖代谢过程、己糖代谢过程、果糖1,6-二磷酸代谢过程为主,细胞组分以转移酶复合物-转移含磷基团为主,分子功能以单糖结合、碳水化合物激酶活性、单磷酸腺苷结合为主,参与的信号通路富集在糖酵解/糖异生、碳代谢、果糖和甘露糖代谢等方面。不同TNM分期、病理学分期、组织学分级、血清甲胎蛋白含量的肝细胞癌患者之间醛缩酶B mRNA表达量差异均具有统计学意义(均P<0.05)。生存曲线显示,醛缩酶B mRNA低表达的肝细胞癌患者中位生存期短于高表达者(P<0.05);COX回归模型分析结果显示,醛缩酶B mRNA表达量是影响肝细胞癌患者预后的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,醛缩酶B mRNA表达量预测肝细胞癌患者预后具有一定的准确性(曲线下面积为0.818),特异度为88.0%,灵敏度为73.3%。结论醛缩酶B蛋白及mRNA在肝细胞癌组织中呈低表达,醛缩酶B mRNA表达量与肝细胞癌患者的临床病理特征和预后密切相关,醛缩酶B mRNA低表达者的肿瘤恶性程度更高,且预后更差。醛缩酶B有可能成为诊断肝细胞癌及判断患者预后的新型分子标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 醛缩酶B 预后 生物信息学
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苏氨酸醛缩酶的结构与功能及其在药物合成中的应用
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作者 何远志 冯雁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第5期962-977,共16页
β-羟基-α-氨基酸(β-hydroxy-α-amnio acids,HAAs)是一类广泛应用于制药工业的重要手性中间体。由于其含有双手性中心(C_(α)和C_(β)),探索其严格立体选择性的生物合成方法备受关注。苏氨酸醛缩酶(threonine aldolase,TA)可在温和... β-羟基-α-氨基酸(β-hydroxy-α-amnio acids,HAAs)是一类广泛应用于制药工业的重要手性中间体。由于其含有双手性中心(C_(α)和C_(β)),探索其严格立体选择性的生物合成方法备受关注。苏氨酸醛缩酶(threonine aldolase,TA)可在温和条件下催化不同类型的醛与氨基酸缩合构筑丰富的HAAs产物库,显示了工业应用潜力。由于目前表征的TA普遍存在对Cβ立体选择性不严格、活性较低以及催化机制不清晰等问题,为其在HAAs合成中的应用带来了挑战。本文综述了TA在新酶挖掘、结构与催化机理解析、蛋白质工程以及合成应用等方面的研究进展,为推动酶催化绿色、高效合成手性药物提供参考。 展开更多
关键词 苏氨酸醛缩酶 β-羟基-α-氨基酸 晶体结构 立体选择性 蛋白质工程
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PKM2和ALDOA在胃癌中的表达与病理特征的相关性
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作者 周淑萍 盛晓曼 《安徽理工大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第4期103-108,共6页
目的 检测M2型丙酮酸激酶(PKM2)和醛缩酶A(ALDOA)在胃癌组织中的表达,分析胃癌组织中PKM2和ALDOA的表达水平与其病理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学法检测30例胃癌组织中的PKM2和ALDOA的表达水平,并与临床病理特征的关系进行相... 目的 检测M2型丙酮酸激酶(PKM2)和醛缩酶A(ALDOA)在胃癌组织中的表达,分析胃癌组织中PKM2和ALDOA的表达水平与其病理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学法检测30例胃癌组织中的PKM2和ALDOA的表达水平,并与临床病理特征的关系进行相关性分析。结果 免疫组化显示,PKM2在胃癌组织中的高表达率为57%,ALDOA的高表达率为60%;在浸润深度T_(1)~T_(2)胃癌组织中的PKM2高表达率低于T_(3)~T_(4)组,在Ⅰ~Ⅱ期中的高表达率低于Ⅲ~Ⅳ期胃癌,低分化组低于高分化组(P<0.05);ALDOA的高表达率在浸润深度为T_(1)~T_(2)的胃癌组织中低于T_(3)~T_(4)组,在低分化组中低于高分化组(P<0.05);但胃癌组织中PKM2和ALDOA的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、有无淋巴转移和有无神经、血管侵犯等因素无明显关联(P>0.05)。结论 PKM2和ALDOA在胃癌组织中的高表达与胃癌的发生发展相关,或许会成为胃癌新的治疗靶点和诊断指标。 展开更多
关键词 胃癌 丙酮酸激酶M2 醛缩酶A 免疫组织化学
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草鱼醛缩酶B基因部分序列的SNP多态性及其与生长性状的关联分析 被引量:10
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作者 曹婷婷 白俊杰 +1 位作者 于凌云 樊佳佳 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期481-488,共8页
通过佛山市白金水产良种选育场提供的草鱼EST库的醛缩酶B基因重叠群的2个Contig扩增该基因的序列片段,采用直接测序法,经过序列比对,共筛到C+687G、C+1042A和A117C等3个颠换SNPs位点。C+687G位于醛缩酶B基因外显子6的63 bp处,为同义突变... 通过佛山市白金水产良种选育场提供的草鱼EST库的醛缩酶B基因重叠群的2个Contig扩增该基因的序列片段,采用直接测序法,经过序列比对,共筛到C+687G、C+1042A和A117C等3个颠换SNPs位点。C+687G位于醛缩酶B基因外显子6的63 bp处,为同义突变;C+1042A位于外显子8的43 bp处,为错义突变;A117C位于内含子7的117 bp处。采用Snapshot方法对同一群体的296尾草鱼的这3个SNPs位点进行检测和分型,并统计基因型频率。3个SNPs位点中AA的频率分别为42.9%、32.8%、32.8%;AB的频率分别为42.9%、45.9%、45.6%;BB的频率分别为14.2%、21.3%、21.6%。利用一般线性模型分析3个SNPs位点与草鱼体质量、体长等重要生长性状的关系,关联分析结果显示,C+687G位点不同基因型只在体长/尾柄长比值上存在显著差异(P<0.05),和体质量等重要生长性状不相关。A117C和C+1042A两个位点都在体质量等4个生长性状上存在显著差异(P<0.05)。将3个SNPs位点不同基因型两两位点组成3个组合的双倍型(都去掉了频率小于3%的组合),结果显示,C+687G和A117C以及C+687G和C+1042A的2个组合分别组成的7种双倍型在体质量等5个生长性状上都存在显著差异(P<0.05);A117C和C+1042A组成的3种双倍型在体质量、眼间距等2个生长性状上都存在显著差异(P<0.05)。研究认为,可以考虑将草鱼醛缩酶B基因作为生长相关的候选基因,用于草鱼的分子辅助育种。 展开更多
关键词 草鱼 醛缩酶B 基因型 双倍型 生长关联分析
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蒿甲醚对日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶、醛缩酶、磷酸甘油酸变位酶和烯醇化酶的影响 被引量:7
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作者 翟自立 尤纪青 +3 位作者 郭惠芳 焦佩英 梅静艳 肖树华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期336-338,共3页
[目的 ]观察蒿甲醚 (Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶 (GPM )、醛缩酶 (ALD)、磷酸甘油酸变位酶 (PGM)和烯醇化酶 (ENO)的影响。 [方法 ]小鼠感染血吸虫尾蚴 4~ 5wk后 ,1次灌服Art10 0mg/kg或 30 0mg/kg ,并于 2 4~ 48h后剖... [目的 ]观察蒿甲醚 (Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶 (GPM )、醛缩酶 (ALD)、磷酸甘油酸变位酶 (PGM)和烯醇化酶 (ENO)的影响。 [方法 ]小鼠感染血吸虫尾蚴 4~ 5wk后 ,1次灌服Art10 0mg/kg或 30 0mg/kg ,并于 2 4~ 48h后剖杀 ,收集日本血吸虫雌虫和雄虫 ,按NADPH的生成量或NADH的耗用量测定虫体的上述 4种酶活力。 [结果 ]经Art 10 0mg/kg作用 2 4h后 ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO活力分别较对照组下降 15 %、 19%、 5 0 %和 46 % ,其间差别均具有显著意义 ,而雄虫仅PGM和ENO活力分别下降 2 2 %和 32 % ;48h后 ,雄虫的GPM和ALD活力亦分别下降 2 1%和 18% ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO及雄虫的PGM和ENO活力则进一步下降。经Art 30 0mg/kg作用后 2 4~ 48h ,雌虫和雄虫的上述 4种酶活力均明显下降 ,且呈一定的时间效应关系。 [结论 ]Art对日本血吸虫尤其是雌虫的上述 4种酶有抑制作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 烯醇化酶 蒿甲醚 GPM ALD PGM
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念珠菌优势抗体检测方法的建立及临床诊断价值评估 被引量:9
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作者 马春芳 陆静芬 +3 位作者 孔倩倩 韩丹丹 廖红 李芳秋 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第11期1138-1141,共4页
目的侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)是免疫功能损伤或低下患者常见的感染和死亡原因,近年来检测IC患者血清中特异性抗体的血清学诊断方法成为研究热点。本文旨在建立检测念珠菌烯醇化酶(Enolase,Eno)、果糖二磷酸醛羧酶(fruct... 目的侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)是免疫功能损伤或低下患者常见的感染和死亡原因,近年来检测IC患者血清中特异性抗体的血清学诊断方法成为研究热点。本文旨在建立检测念珠菌烯醇化酶(Enolase,Eno)、果糖二磷酸醛羧酶(fructose-bisphosphate aldolase,Fba1)特异性抗体的ELISA方法,评估其在IC早期诊断中的应用价值。方法利用基因重组技术获得的Eno、Fba1重组蛋白作为包被抗原,建立测定人血清相应抗体的ELISA,并对方法的敏感性、特异性进行考查。结果建立了检测IC患者血清抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA,cut-off值分别为吸光度(A)值0.370和0.610。ELISA结果显示,IC患者血清中的抗Eno、抗Fba1抗体水平明显高于健康对照和非IC患者对照(P<0.001)。抗Eno和抗Fba1对诊断IC的敏感性和特异性分别为72.3%(73/101)和98%(196/200),87.1%(88/101)和96%(192/200),联合检测可提高敏感性至91.0%。且与细菌感染及其他真菌感染患者(如曲霉病)无交叉反应。IC患者中40.6%(41/101)可以在血培养阳性前检测到抗Eno、49.5%(50/101)可以在血培养阳性前检测到抗Fba1。结论建立了检测抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA法,检测念珠菌菌丝相分泌蛋白IgG抗体特异性和灵敏度良好,在念珠菌感染诊断中具有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 念珠菌 烯醇化酶 果糖二磷酸醛羧酶 抗体 ELISA
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筋脉通治疗糖尿病周围神经病变的临床观察 被引量:79
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作者 梁晓春 崔丽英 +7 位作者 郭赛珊 张克俭 郝炜欣 贾力 张宏 孙仁宇 李本红 杜红 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期517-519,共3页
目的 :观察中药筋脉通治疗糖尿病周围神经病变 (diabeticperipheralneuropathy ,DN)的临床疗效并探讨其作用机理。方法 :检测 2 8名健康人和 66例DN患者的红细胞醛糖还原酶活性 (redbloodcellaldolsereductaseactivity ,RBC -AR)和红细... 目的 :观察中药筋脉通治疗糖尿病周围神经病变 (diabeticperipheralneuropathy ,DN)的临床疗效并探讨其作用机理。方法 :检测 2 8名健康人和 66例DN患者的红细胞醛糖还原酶活性 (redbloodcellaldolsereductaseactivity ,RBC -AR)和红细胞山梨醇 (redbloodcellsorbitol,RBC -S)等指标的变化。并随机将 66例DN患者分为筋脉通治疗组和金匮肾气治疗组 (各 33例 )观察其对RBC -AR活性、RBC -S浓度、神经传导速度等指标的影响。结果 :DN患者RBC -AR活性和RBC -S浓度明显高于健康人。用筋脉通治疗后RBC -AR活性和RBC -S浓度明显下降 ,神经传导速度增快 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,在某些神经传导速度及波幅的改善方面优于金匮肾气治疗组。结论 :筋脉通能够减轻DN患者临床症状 ,改善病变神经传导速度 ,降低醛糖还原酶活性 ,减轻红细胞山梨醇的蓄积 ,对防治糖尿病神经病变有较好的疗效。 展开更多
关键词 糖尿病 周围神经病变 筋脉通 神经传导速度
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花生果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因AhFBA1的克隆与表达 被引量:16
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作者 陈娜 潘丽娟 +7 位作者 迟晓元 陈明娜 王通 王冕 杨珍 胡冬青 王道远 禹山林 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期934-941,共8页
以花生品种花育33为试材,根据cDNA文库中已知的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FBA)基因全长序列设计引物,通过RT-PCR克隆到该基因,命名为AhFBA1。AhFBA1全长为1489 bp,开放阅读框为1200 bp,编码400个氨基... 以花生品种花育33为试材,根据cDNA文库中已知的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FBA)基因全长序列设计引物,通过RT-PCR克隆到该基因,命名为AhFBA1。AhFBA1全长为1489 bp,开放阅读框为1200 bp,编码400个氨基酸。预测该基因编码的蛋白含有Glycolytic保守结构域,可能定位于叶绿体中。蛋白序列比对和进化树分析表明,花生与大豆(Glycine max)、苜蓿(Medicago truncatula)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)和菜豆(Phaseolus vulgaris)等豆科植物中的FBA序列相似性最高,亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,在高盐和干旱胁迫下,AhFBA1在花生叶和根中的表达均受明显诱导,说明该基因可能参与花生对高盐和干旱胁迫的适应性调控;AhFBA1在花生根和叶中均受ABA的明显诱导,说明该基因对花生非生物胁迫的调控可能是依赖ABA的。 展开更多
关键词 花生 果糖-1 6-二磷酸醛缩酶 克隆 系统发育分析 非生物胁迫 荧光定量PCR
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GST沉降技术验证弓形虫醛缩酶与肌动蛋白的相互作用 被引量:6
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作者 郑斌 尹志奎 +2 位作者 何蔼 李卓雅 詹希美 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期363-367,共5页
目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙... 目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法纯化表达产物。采用腹部皮内多点注射免疫SD大鼠15只,首次免疫Actin-His6蛋白量为200μg/只,第2次起免疫蛋白量为100μg/只,共免疫4次,每次间隔7 d,末次免疫后5 d收集心脏血,制备Actin-His6抗血清。以纯化的GST-Aldolase蛋白作为探针蛋白与Actin-His6蛋白液进行GST沉降实验,实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果获得了弓形虫aldolase和actin基因序列,构建了相应的原核表达载体。表达并纯化了GST-Aldolase和Actin-His6蛋白。Actin-His6蛋白免疫SD大鼠后获得其抗血清,经抗体亲和纯化柱纯化,获得Actin-His6多克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,GST沉降实验产物中的蛋白条带可被Aldolase-His6多克隆抗体和Actin-His6多克隆抗体识别。结论弓形虫醛缩酶与肌动蛋白存在相互作用。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 醛缩酶 肌动蛋白 GST沉降技术 蛋白相互作用
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