壳聚糖改性脂质体的制备与稳定性研究

实验通过乙醇注入法制备壳聚糖包覆脂质体.以粒径作为指标,通过单因素正交实验优化,确定关键工艺为:大豆卵磷脂浓度为10 mg/mL,壳聚糖浓度为150 mg/mL,剪切速度为7000 r/min、剪切时间为2 min,超声时间为10 min,该工艺制备的脂质体粒径为711.38 nm.再考察酪蛋白酸钠、辛烯基酸琥珀酸酐、吐温20和吐温804种稳定剂(1%大豆卵磷脂质量比)对脂质体的影响表明,吐温80效果最佳.研究获得一种稳定性强,粒径较小的包覆脂质体.

壳聚糖修饰脂质体的制备和性质研究

目的制备壳聚糖修饰的脂质体,考察不同相对分子质量壳聚糖对脂质体性质的影响。方法本实验将壳聚糖通过静电作用修饰到脂质体表面,制备了3种不同相对分子质量壳聚糖修饰的脂质体(chitosan-modified liposomes;CMLs),用透射电镜、激光衍射粒度分析仪测定CMLs的形态、粒径和表面电位;通过葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离的壳聚糖,计算壳聚糖的结合率;并且对CMLs在体外血清条件下的稳定性以及细胞毒性进行了考察。结果制备得到CMLs粒度均匀,Zeta电位均在+40mV左右;不同相对分子质量壳聚糖在脂质体上的结合率分别为44.13%,88.50%,84.40%。血清存在条件下,相比于空白脂质体,较高相对分子质量CMLs具有更好的稳定性和抗血清能力。CMLs的细胞毒性要小于阳离子脂质体。结论CMLs具有作为基因给药载体的优点,特别是在体内应用中将会有很好的前景。

壳聚糖修饰脂质体的环境压力和体外消化稳定性

以壳聚糖修饰的粗脂质体和纳米脂质体为研究对象,通过加速氧化(加热)、紫外照射-自由基诱导和模拟体外消化等处理后的脂质体平均粒径、表面电荷、丙二醛含量等的变化,表征壳聚糖修饰的粗脂质体的稳定性。结果表明,经过加热、紫外照射和消化处理后,壳聚糖修饰脂质体的稳定性明显比未修饰的脂质体高,并且壳聚糖的质量浓度越高,脂质体抵抗环境压力和体外消化稳定性越强。

胶原、壳聚糖包覆的小单层脂质体的体外稳定性评价

为了提高小单层脂质体（ＳｍａｌＵｎｉｌａｍｅｌａｒＶｅｓｉｃｌｅｓ，ＳＵＶ）的体外稳定性，以５（６）－羧基荧光素（５（６）－ＣＦ）为荧光探针，研究了脂质体被胶原蛋白和壳聚糖这两种天然生物大分子包覆后的通透性。发现，胶原蛋白、壳聚糖和磷脂酰胆碱（ＰＣ）的重量比分别为２：１和８：１时，已能明显降低脂质体的通透性。并以一种分子内电荷转移化合物３－甲氧基－４＇－Ｎ，Ｎ－二甲氨基黄酮（ＤＭＭＦ）为探针，用荧光偏振法研究了胶原蛋白、壳聚糖和ＰＣ在上述比例下，对脂质体膜流动性的影响，发现脂质体在被包覆前后，其膜的流动性没有明显的改变。可见，胶原蛋白、壳聚糖包覆脂质体能够在基本不干扰脂质体膜流动性的情况下。

海藻酸钠-壳聚糖表面修饰维生素C/β-胡萝卜素复合脂质体的制备

为了增强脂质体的稳定性,本研究将壳聚糖、海藻酸钠逐层修饰在维生素C(Vc)/β胡萝卜素(βC)复合脂质体(L)的表面,制备出了壳聚糖单层修饰脂质体(C-L)和海藻酸钠-壳聚糖双层修饰脂质体(S-C-L),并对三种脂质体的包埋率、粒度分布、微观形态、形成机理和贮藏稳定性进行了研究。结果表明,表面修饰前后,脂质体中活性成分的包埋率无显著变化,其中Vc的包埋率高于75%,βC的包埋率高于95%;动态光散射(DLS)和透射电子显微镜(TEM)结果表明,经表面修饰后,脂质体的z-平均粒径从250.1 nm增大到541.9 nm;Zeta-电位和傅里叶红外光谱(FT-IR)分析表明壳聚糖和海藻酸钠通过静电相互作用成功修饰在脂质体表面,不改变脂质体的内部结构;贮藏稳定性结果表明,C-L和S-C-L中Vc和βC的保留率在同一条件下要比L中Vc和βC的保留率约高2%~10%,说明脂质体经表面修饰后,其贮藏稳定性增强。

壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的稳定性

考察壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体在体外的稳定性。分别从最适pH、最适温度、储存稳定性、酸碱稳定性、热稳定性,以及抗胰蛋白酶水解的能力等方面,对比游离L-天门冬酰胺酶及壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体。结果表明:游离L-天门冬酰胺酶和壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的最适pH分别为7.5和7.0,最适温度分别为60℃和50℃,壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的储存稳定性、酸碱稳定性、热稳定性,以及抗胰蛋白酶水解的能力均优于游离酶。因此,壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体能明显提高游离酶的稳定性。

层层自组装法制备双重修饰脂质体及其体外消化稳定性

以粒径、电位、包覆率、沉淀量为指标,采用层层自组装法制备海藻酸钠(sodium alginate,AL)、壳聚糖(chitosan,CH)双重修饰脂质体海藻酸钠-壳聚糖-脂质体(AL-CH-L),研究AL-CH-L的物化性质、微观形貌及其体外消化稳定性。结果表明:0.6%壳聚糖和0.5%海藻酸钠制备的AL-CH-L平均粒径为(330.6±37.3)nm,分布集中,Zeta电位为(-15.8±0.7)mV,透射电镜观察双重修饰脂质体的外层成功包裹了海藻酸钠和壳聚糖聚合物,呈现典型的核-壳结构。以钙黄绿素为荧光标记物对未修饰和双重修饰脂质体进行体外消化实验,结果表明双重修饰脂质体表现出更高的体外消化稳定性。

壳聚糖修饰脂质体对姜黄素的包载作用

通过改变壳聚糖的浓度探讨不同浓度壳聚糖修饰的脂质体对姜黄素的包载作用。采用薄膜蒸发法制备姜黄素脂质体,并以不同浓度的壳聚糖对姜黄素脂质体进行修饰。通过测定修饰后的姜黄素脂质体的物理化学性质,探讨不同浓度的壳聚糖对姜黄素脂质体的包封率以及姜黄素的稳定性、抗氧化性以及荧光、紫外光谱性质的影响。当壳聚糖质量分数由0增大到0.4%时,脂质体内姜黄素的稳定性以及DPPH自由基清除能力也不断增大。当壳聚糖质量分数进一步增加到0.5%~0.7%时,姜黄素的稳定性与抗氧化能力逐渐减小。由此表明存在最佳的壳聚糖质量分数（0.4%）,在此条件下壳聚糖修饰脂质体对姜黄素的保护作用最佳,姜黄素的稳定性、抗氧化能力最高。

栀子黄脂质体的制备、表面修饰及体外消化稳定性研究

为了制备栀子黄脂质体,以栀子黄色素为研究对象,采用乙醇注入法制备栀子黄脂质体,以栀子黄包封率(EE)为指标,通过响应面法优化制备栀子黄脂质体的反应参数,并通过Zeta电位与平均粒径、傅里叶红外光谱(FT-IR)和透射电子显微镜(TEM)等技术对其结构与形态进行表征。采用壳聚糖对栀子黄脂质体进行表面修饰,通过分析经紫外光照射、加热和体外模拟消化等处理后脂质体中的Zeta电位、平均粒径及释放率等指标的变化,研究壳聚糖修饰栀子黄脂质体的稳定性。结果表明,最优反应条件为:搅拌温度51.5℃,卵磷脂与胆固醇质量比5.2∶1,缓冲液体积为32.4 mL,所得栀子黄脂质体EE为78.36%。根据Zeta电位与平均粒径、FT-IR及TEM分析结果可知,已成功制备未修饰栀子黄脂质体与壳聚糖修饰栀子黄脂质体,其平均粒径从203.77 nm增加至282.17 nm。紫外光照射、加热和体外模拟消化试验结果表明,壳聚糖修饰脂质体的稳定性明显高于未修饰脂质体。本研究可为水溶性类胡萝卜素脂质体的制备及应用提供一定的理论依据。

壳聚糖修饰植物甾醇脂质体的制备及稳定性研究

采用乙醇注入法制备植物甾醇脂质体(Phytosterol Liposome,PLs),并以不同浓度壳聚糖进行修饰优化制备工艺;通过粒径、Pd I、电位和稳定性指数,分析评价了壳聚糖修饰植物甾醇脂质体(Chitosan modified Phytosterol Liposome,CS-PLs)在不同环境下的稳定性;并对壳聚糖修饰前后PLs进行了体外胃肠消化环境稳定性实验。结果表明:当壳聚糖浓度为0.3 mg/mL时可获得粒径小、分布均一的CS-PLs;且pH、温度和离子强度及种类均对CS-PLs稳定性有显著影响;PLs经壳聚糖修饰前后,胃消化稳定性均良好,但在模拟肠消化环境中,经壳聚糖修饰后的PLs表现出更好的稳定性。

牛血清白蛋白/壳聚糖双层修饰载肉桂醛脂质体的制备

目的 制备牛血清白蛋白(BSA)/壳聚糖(CTS)双层修饰的载肉桂醛(CA)脂质体(BSA/CTS-Lip-CA),以提高脂质体纳米粒子对药物的缓释效果和储存稳定性。方法 采用薄膜分散法制备载药脂质体(Lip-CA)和空白脂质体(Lip-Blank),然后利用静电吸附作用制备CTS修饰脂质体(CTS-Lip-CA)和BSA/CTS-Lip-CA。对所制脂质体进行表征,并考察其体外释药特性和储存稳定性。结果 所制BSA/CTS-Lip-CA的粒径为(177.8±4.0)nm、Zeta电位为(-15.6±1.5)mV,呈类球形;傅里叶红外光谱分析结果显示,BSA、CTS的修饰未对脂质体的内部结构产生影响。体外释药特性考察结果显示,Lip-CA、CTS-Lip-CA、BSA/CTS-Lip-CA在10 h内的累积释放量分别为82.9%、74.1%、72.9%。储存稳定性考察结果显示,储存30 d后,Lip-CA、CTS-Lip-CA和BSA/CTS-Lip-CA的粒径分别为(134.2±2.1)、(151.7±0.4)、(164.8±1.5)nm,其对模型药物CA的保留率分别为65.4%、82.5%、90.2%。结论 成功制得BSA/CTS-Lip-CA;其具有一定的缓释作用,且可在一定程度上提高药物的储存稳定性。

芹菜素脂质体的制备、修饰、表征及抗氧化活性研究

目的:为提高芹菜素水溶性、稳定性,促进其充分发挥抗氧化生物活性,本研究拟制备芹菜素脂质体(Apigenin liposomes,AP-L),并用壳聚糖(Chitosan,CS)修饰脂质体表面。方法:比较低速离心法和过膜法两种包封率测定方法的适用性。以包封率为评价指标,比较薄膜分散-超声法和乙醇注入-超声法两种AP-L制备方法,并通过单因素实验和响应面试验优化AP-L制备工艺。通过静电吸附方式将壳聚糖吸附于脂质体表面,得到壳聚糖芹菜素脂质体(Chitosan apigenin liposomes,CS-AP-L)。考察修饰前后脂质体的外观、微观形态、粒径大小及分布、电位、包封率和稳定性的变化。通过DPPH和ABTS+自由基清除实验考察芹菜素水分散体(Apigenin dispersion,AP-D)、AP-L和CS-AP-L的抗氧化能力。结果:低速离心法测定脂质体包封率更准确。薄膜分散-超声法制备AP-L包封率更高。AP-L最佳制备工艺为:芹菜素6 mg,芹菜素磷脂质量比1:24,磷脂胆固醇质量比6:1,乙醇6.3 mL,磷酸盐缓冲液20 mL,水化温度50℃,超声时间20 min。AP-L粒径为157.34±1.87 nm,多分散系数(Polydispersity index,PDI)为0.240±0.025,包封率为66.50%±1.00%,CS-AP-L粒径为564.22±39.7 nm,PDI为0.292±0.022,包封率为60.17%±1.97%。稳定性实验显示常温保存30 d后,AP-L渗漏率为21.92%±4.84%,CS-AP-L渗漏率为10.64%±0.28%,CS-AP-L更稳定。DPPH和ABTS+自由基清除实验表明,AP-L和CS-AP-L均可以提高芹菜素的自由基清除能力,且CS-AP-L的自由基清除能力更强。结论:本研究制备的CS-AP-L粒径大小合适,分布均匀,包封率较高、稳定性较好,具有促进芹菜素抗氧化活性的潜力,可为开发芹菜素衍生产品提供参考依据。

壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体血浆稳定性及药动学的初步研究

目的考察壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的血浆稳定性及药动学特性。方法血浆稳定性:于不同时间点,分别测定L-天门冬酰胺酶和壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体在大鼠空白血浆中的活性。大鼠静脉注射L-天门冬酰胺酶和壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体后,分别考察其药动学特性。采用DAS药动学软件计算药动学参数。结果在空白血浆中,壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的活性高于L-天门冬酰胺酶;壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的活性-时间曲线下面积(AUC_(0-48 h))约为L-天门冬酰胺酶的3.3倍,壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体的平均滞留时间(MRT_(0-48 h))约为ASP的2.3倍。结论壳聚糖修饰的L-天门冬酰胺酶脂质体能提高L-天门冬酰胺酶的血浆稳定性及生物利用度。

N-三甲基壳聚糖包覆茵陈总黄酮脂质体的制备及对小鼠急性肝损伤的保护作用

使用乙醇注入法制备茵陈总黄酮脂质体,再利用带正电荷的N-三甲基壳聚糖对脂质体进行包覆。为了增强脂质体的贮存稳定性,采用冷冻干燥工艺制备冻干品。单因素试验结果显示,采用6%海藻糖作冻干保护剂时冻干品表面光滑平整、再分散性能良好。冻干前后药物包封率为(91.8±0.5)%和(92.5±0.3)%,平均粒径为(164.0±4.2)和(165.5±5.9)nm,多分散性指数(PDI)为0.255±0.007和0.361±0.030,ζ电位为(23.8±0.2)和(21.6±0.4)mV。冻干脂质体复溶后在透射电镜下呈均匀类球形。进一步采用四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型考察本品的肝保护作用。结果显示,与模型组相比,本品可明显降低小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝组织中丙二醛的水平,对急性肝损伤保护作用显著。本研究可为难溶性中药成分口服给药系统的设计提供新思路。