期刊文献+
共找到118篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
布氏杆菌pCDNA3.1-L7L12核酸疫苗的构建及其免疫学评价 被引量:25
1
作者 曾政 王英 +6 位作者 赵光宇 周华 于三科 韩岳 罗德炎 马丽娟 王希良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期208-212,共5页
目的 获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重... 目的 获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重组质粒转化BL2 1(DE3) ,所表达蛋白经SDS PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠 ;pCDNA3.1 L7 L12重组质粒配以GM CSF同时肌肉注射免疫小鼠 ,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价。结果 ELISA、Westernblot检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生 ,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA疫苗 ;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明DNA疫苗以诱发TH1 型免疫为主。结论 所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力 ,DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗 ,可作为潜在的布氏菌新型疫苗 。 展开更多
关键词 布氏杆菌 L7/l12蛋白 DNA疫苗
下载PDF
羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达 被引量:7
2
作者 司瑞 白文涛 +5 位作者 张芳琳 刘艳丽 胡刚 吴兴安 阎岩 徐志凯 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期961-964,共4页
目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达。方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入p... 目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达。方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入pGEM7Zf(+)中测序并进行分析。将3种基因片段亚克隆入pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western-blot进行分析鉴定。结果SDS-PAGE结果表明3个目的蛋白均以融合蛋白的方式成功表达,在相对分子量57kDa、49kDa、38kDa处有表达条带,经薄层扫描分析,目的蛋白分别占全菌蛋白的42%、36%、40%。Western-blot证实3种融合蛋白均能被布鲁氏菌免疫兔血清识别。结论成功构建了3种蛋白的表达载体并进行了高效表达,3种蛋白均具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 羊布鲁氏菌 BCSP31蛋白 OMP31蛋白 L7/l12蛋白 基因表达
下载PDF
基于第一性原理L12-Al3Sc点缺陷结构及成键行为的计算 被引量:5
3
作者 孙顺平 李小平 +6 位作者 雷卫宁 王洪金 汪贤才 江海锋 李仁兴 江勇 易丹青 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期2147-2155,共9页
运用第一性原理平面波赝势方法计算金属间化合物L12-Al3Sc的基本物性,并通过计算点缺陷形成能推测L12-Al3Sc点缺陷的主要存在形式,结合电荷密度和态密度的分析揭示L12-Al3Sc的成键行为。结果表明:L12-Al3Sc的晶格常数为4.107?,体模量为8... 运用第一性原理平面波赝势方法计算金属间化合物L12-Al3Sc的基本物性,并通过计算点缺陷形成能推测L12-Al3Sc点缺陷的主要存在形式,结合电荷密度和态密度的分析揭示L12-Al3Sc的成键行为。结果表明:L12-Al3Sc的晶格常数为4.107?,体模量为86.5 GPa,形成焓为-43.83 kJ/mol。L12-Al3Sc的点缺陷主要为Al亚晶格上的Al空位和Sc反位缺陷。L12-Al3Sc中Sc空位与Al反位缺陷的形成能较为接近,表明富Al合金中Sc空位和Al反位缺陷易于共同存在;Sc反位缺陷的形成能小于Al空位的,表明富Sc合金的点缺陷为Sc反位缺陷。L12-Al3Sc的成键电荷密度呈纺锤状,表现出Sc d-Al p的轨道杂化效应,其杂化轨道主要为Sc dz2-Al pz轨道杂化。 展开更多
关键词 l12-Al3Sc 点缺陷结构 第一性原理计算 成键行为 杂化
下载PDF
布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的表达纯化及生物活性鉴定 被引量:4
4
作者 司瑞 白文涛 +5 位作者 张芳琳 刘艳丽 胡刚 吴兴安 阎岩 徐志凯 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期872-874,共3页
目的:原核表达系统表达布鲁菌核糖体蛋白L7/L12与GST的融合蛋白GST-L7/L12,并纯化蛋白L7/L12,建立检测特异性抗体的间接ELISA方法。方法:对含有L7/L12的原核表达载体pGEX-4T-1-L7/L12进行了原核表达。利用亲和层析柱分别纯化融合蛋白GST... 目的:原核表达系统表达布鲁菌核糖体蛋白L7/L12与GST的融合蛋白GST-L7/L12,并纯化蛋白L7/L12,建立检测特异性抗体的间接ELISA方法。方法:对含有L7/L12的原核表达载体pGEX-4T-1-L7/L12进行了原核表达。利用亲和层析柱分别纯化融合蛋白GST-L7/L12和蛋白L7/L12,并用SDS-PAGE及Western印迹分析鉴定。以L7/L12为抗原包被微量板,优化抗原包被浓度和羊抗鼠IgG-HRP稀释度,建立间接ELISA方法,并检测其特异性。结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量为38000和12000处可见纯化蛋白的条带,Western印迹分析表明这2条带均能被免疫兔血清识别,表明获得了纯化的有生物活性的融合蛋白GST-L7/L12和蛋白L7/L12。间接ELISA方法的L7/L12抗原包被浓度为5μg/mL,羊抗鼠酶标二抗稀释度为1∶1000。小鼠免疫血清与L7/L12抗原出现阳性反应,而与布鲁菌融合蛋白OMP31、结核分枝杆菌抗原85b及牛血清白蛋白则呈阴性。结论:成功地对布鲁菌核糖体蛋白L7/L12进行了原核表达和纯化,以其为基础建立的间接ELISA方法稳定且特异。 展开更多
关键词 布鲁菌 核糖体蛋白L7/l12 ELISA
下载PDF
一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系F7基因信号肽区L12R和3''非翻译区c11814-insAA复合性突变与表型分析 被引量:2
5
作者 刘珊 张敬宇 +3 位作者 李峥嵘 王艳 牛志云 林凤茹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期508-515,共8页
目的:通过对一个遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症患者家系成员表型与基因型分析,研究其基因突变与临床表型的关系,探讨其分子发病机制。方法:对先证者及其父母进行活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原和FⅦ活性(FⅦ:C)... 目的:通过对一个遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症患者家系成员表型与基因型分析,研究其基因突变与临床表型的关系,探讨其分子发病机制。方法:对先证者及其父母进行活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原和FⅦ活性(FⅦ:C)、FⅦ抗原(FⅦ:Ag)检测,对其F7基因的全部外显子及侧翼、启动子区进行测序,以寻找致病基因突变。根据信号肽预测数据库构建包含所发现突变的FVII蛋白分子模型,进行功能预测,推断其对蛋白合成和功能的影响。结果:先证者APTT正常,PT明显延长(58.3 s),FⅦ:C显著下降(1.1%),FⅦ:Ag重度降低(0.9%),其父母的APTT、PT、FⅦ:C和FⅦ:Ag均在正常范围内。先证者和其父亲的F7基因第1a外显子第556位核苷酸发生杂合性T/G突变,导致相应氨基酸由亮氨酸(L)变成精氨酸(R),即L12R。功能预测分析提示,L12R突变影响到信号肽区不同区域的分割及其相应功能,进而导致成熟蛋白质的合成减少和因子活性明显降低。同时,先证者F7基因还存在自发性3'非翻译区c11814-ins AA杂合性突变,而其父母均无此突变。结论:发现1例F7基因L12R突变,位于信号肽区的该杂合突变是导致此例遗传性FVII缺乏症发生的主要分子基础,而位于3'非翻译区的自发性c11814-ins AA突变则进一步造成了FⅦ合成的减低。 展开更多
关键词 凝血因子Ⅶ缺陷 F7基因 信号肽区l12R 3'非翻译区 c11814-insAA复合性突变
下载PDF
布鲁氏菌L7/L12、OMP31基因的克隆、测序及免疫原性分析 被引量:4
6
作者 张广雷 苗利光 +3 位作者 刘艳环 李海涛 李庆超 庄风歧 《特产研究》 2009年第4期5-8,共4页
为研制鹿布鲁氏菌病工程疫苗,根据已发表的布鲁氏菌核糖体蛋白L7/L12、外膜蛋白OMP31基因设计两对引物进行扩增,PCR产物连接pGEM-Teasy载体,转化DH5α后测序,并进行基因分析。结果从布鲁氏菌疫苗株中克隆出L7/L12和OMP312个目的基因,同... 为研制鹿布鲁氏菌病工程疫苗,根据已发表的布鲁氏菌核糖体蛋白L7/L12、外膜蛋白OMP31基因设计两对引物进行扩增,PCR产物连接pGEM-Teasy载体,转化DH5α后测序,并进行基因分析。结果从布鲁氏菌疫苗株中克隆出L7/L12和OMP312个目的基因,同源分析L7/L12达97.1%,OMP31达100%,免疫原性分析可作为免疫优势抗原。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 核糖体蛋白L7/l12 OMP31 同源性
下载PDF
硼替佐米上调fas、bcl2l12、caspase-9和caspase-3基因表达 被引量:1
7
作者 卓志红 牧启田 +3 位作者 张乐鸣 欧阳桂芳 张怡 楼燕如 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期883-887,共5页
目的:探讨硼替佐米诱导慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡及新基因bcl2l12在其中的作用。方法:MTT比色法观察硼替佐米对K562细胞的生长抑制作用;Annexin-V标记和线粒体跨膜电位(Δψm)分析细胞凋亡;RT-PCR方法检测0、6、12和24hfas、b... 目的:探讨硼替佐米诱导慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡及新基因bcl2l12在其中的作用。方法:MTT比色法观察硼替佐米对K562细胞的生长抑制作用;Annexin-V标记和线粒体跨膜电位(Δψm)分析细胞凋亡;RT-PCR方法检测0、6、12和24hfas、bcl2l12、bcl-2、bim、bax、caspase-3和caspase-9基因表达变化。结果:硼替佐米抑制K562细胞生长呈时间和剂量依赖性,24h和48h半数抑制浓度分别为161.41nmol/L和96.33nmol/L;硼替佐米诱导K562细胞凋亡,12h Annexin-V阳性细胞就开始增高,并呈时间依赖性,Δψm减低;RT-PCR显示fas、bcl2l12、caspase-3和caspase-9表达增高,但bcl-2、bim和bax表达无明显改变。结论:硼替佐米可以抑制K562生长并诱导凋亡,上调fas、bcl2l12,使线粒体膜电位下降,激活caspase-9和caspase-3基因,促使DNA发生断裂可能是其诱导凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 硼替佐米 K562细胞 基因 bcl2l12 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶类
下载PDF
核糖体蛋白L12-L10相互作用抑制剂的筛选及其抗结核活性的研究
8
作者 李妍 张雪莲 +3 位作者 李永臻 李东升 游雪甫 司书毅 《中国医药生物技术》 2014年第1期26-31,共6页
目的以L12-L10相互作用为靶点筛选具有抗结核活性的先导化合物。方法应用酵母双杂交模型AH109(pAD—L12+pBD—L10)通过生长抑制方法筛选阳性化合物,以AH109(pAD—T+pBD-53)作为对照;通过96孔板法检测阳性化合物对耻垢分枝杆菌... 目的以L12-L10相互作用为靶点筛选具有抗结核活性的先导化合物。方法应用酵母双杂交模型AH109(pAD—L12+pBD—L10)通过生长抑制方法筛选阳性化合物,以AH109(pAD—T+pBD-53)作为对照;通过96孔板法检测阳性化合物对耻垢分枝杆菌的抑制活性;应用定量微孔板快速显色法(MABA)检测抗结核杆菌活性;通过β-半乳糖苷酶活性定量检测判断阳性化合物在模型上对L12-L10相互作用的阻断活性;应用体外蛋白表达系统检测阳性化合物对蛋白表达的抑制作用;应用平皿二倍稀释法检测阳性化合物的药敏作用。结果筛选到4个在模型上具有活性的阳性化合物,其对耻垢分枝杆菌具有比较好的抑制活性,其最小抑制浓度(MIC)在3.125~12.5gg/ml之间;其中IBM—T275对结核分枝杆菌标准株和临床分离株均具有比较好的抑制活性,MIC在5~10gg/ml之间,而对细菌抑制活性较低,其MIC均在64μg/ml以上;IBM.T275能够抑制酵母模型内β-半乳糖苷酶的表达,并且能够体外抑制蛋白表达,其IC如为12.57μg/ml。结论筛选到1个具有抗结核杆菌活性的阳性化合物,其抗结核活性可能与阻断L12-L10蛋白相互作用相关。 展开更多
关键词 抗结核药 核糖体 l12-L10相互作用
下载PDF
抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12单克隆抗体制备及初步鉴定
9
作者 司瑞 徐志凯 +5 位作者 张芳琳 白文涛 吴兴安 王海涛 于澜 胡刚 《科学技术与工程》 2006年第19期3043-3046,共4页
制备抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的单克隆抗体(mAb),为进一步研制布鲁菌检测方法和免疫制剂提供基础。常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗核糖体蛋白L7/L12的mAb,并用Westernblot和ELISA方法对其特异性、抗原识别表位及相对亲和力等... 制备抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的单克隆抗体(mAb),为进一步研制布鲁菌检测方法和免疫制剂提供基础。常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗核糖体蛋白L7/L12的mAb,并用Westernblot和ELISA方法对其特异性、抗原识别表位及相对亲和力等做了初步鉴定。获得了4株抗L7/L12蛋白的mAb:1B1,2A2,2H9和2H10,相对亲和力为2A2>2H10>2H9>1B1,4株mAb识别的抗原表位相近,但仍存在一定的差异。得到的4株稳定的杂交瘤细胞系分泌的mAb能特异结合L7/L12蛋白。 展开更多
关键词 羊布鲁菌 核糖体蛋白L7/l12 单克隆抗体
下载PDF
布鲁菌L7/L12蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:4
10
作者 成璐 张冬星 +1 位作者 吴娟 李影 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期10-14,共5页
为制备布鲁菌(Brucella)L7/L12蛋白及其小鼠源多克隆抗体,根据猪布鲁菌(Brucella suis)S2株L7/L12基因序列,设计合成特异性引物,PCR扩增L7/L12基因并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a-L7/L12,经鉴定正确后转化... 为制备布鲁菌(Brucella)L7/L12蛋白及其小鼠源多克隆抗体,根据猪布鲁菌(Brucella suis)S2株L7/L12基因序列,设计合成特异性引物,PCR扩增L7/L12基因并将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a-L7/L12,经鉴定正确后转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明,重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为17ku的重组蛋白。将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫小鼠制备多克隆抗体,并测定其抗体效价。Western blot结果表明,原核表达后纯化的L7/L12蛋白能够与制得的小鼠抗L7/L12蛋白多克隆抗体特异性结合。成功获得了纯化的L7/L12重组蛋白和小鼠抗L7/L12多克隆抗体,为进一步研究L7/L12蛋白对布鲁菌感染的诊断方法和基因工程疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 布鲁菌 L7/l12蛋白 原核表达 多克隆抗体
下载PDF
Bcl2l12在乳腺癌中的研究进展 被引量:4
11
作者 韩洋 任建强 +1 位作者 盛宇伟 潘炯 《中国医药指南》 2018年第10期37-38,40,共3页
Bcl2L12作为Bcl-2家族的成员在细胞凋亡、肿瘤发生和抗癌治疗的细胞反应中发挥了重要作用。在不同的临床研究中,已经发现Bcl2L12的表达与乳腺癌患者的预后存在明显相关性。在不同类型的乳腺癌中,Bcl2L12的表达也存在明显差异。同时Bcl2... Bcl2L12作为Bcl-2家族的成员在细胞凋亡、肿瘤发生和抗癌治疗的细胞反应中发挥了重要作用。在不同的临床研究中,已经发现Bcl2L12的表达与乳腺癌患者的预后存在明显相关性。在不同类型的乳腺癌中,Bcl2L12的表达也存在明显差异。同时Bcl2L12的表达与乳腺癌的分期以及淋巴结转移的数量存在相关性。不同的抗癌药物治疗也会引起Bcl2L12在m RNA表达水平上的改变。然而,需要进一步研究Bcl2L12与乳腺癌预后、与乳腺癌细胞生物学行为的相关关系,为乳腺癌的治疗提供更有意义的临床价值和社会效益。 展开更多
关键词 Bcl2家族 Bcl2l12 乳腺癌
下载PDF
BCL2L12基因治疗对于小鼠阿尔兹海默病的影响及机制 被引量:2
12
作者 邹良玉 张丰 +4 位作者 黄鹤鸣 何奕涛 秦海燕 曹旭 潘建青 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期380-385,共6页
目的观察BCL2L12基因治疗对于阿尔茨海默病模型小鼠行为学及分子病理学的影响。方法应用立体定向仪将携带空壳基因及BCL2L12基因的腺相关病毒注射至C57小鼠海马CA1区,2周后相同部位注射Aβ(1μg),2周后进行行为学实验及免疫组织化学染色... 目的观察BCL2L12基因治疗对于阿尔茨海默病模型小鼠行为学及分子病理学的影响。方法应用立体定向仪将携带空壳基因及BCL2L12基因的腺相关病毒注射至C57小鼠海马CA1区,2周后相同部位注射Aβ(1μg),2周后进行行为学实验及免疫组织化学染色(6E10及AT8)。结果旷场实验发现,空壳基因治疗组与目的基因治疗组在中心区的时间与记录总时间的比值显著低于空白对照小鼠,两治疗组之间差异无统计学意义。水迷宫实验发现,目的基因治疗组及空白对照组平均潜伏期均于第2天显著缩短,而空壳基因治疗组平均潜伏期于第3天显著缩短。6E10及AT8免疫荧光染色发现空壳基因治疗组及目的基因治疗组小鼠染色脑片平均吸光度显著高于空白对照组小鼠,空壳基因治疗组小鼠染色脑片平均吸光度高于目的基因治疗组小鼠,但差异无统计学意义。结论应用BCL2L12基因治疗无法改善AD小鼠的焦虑情绪,但是可以提高AD小鼠的学习记忆功能,可能与BCL2L12基因治疗减少Aβ沉积以及Tau蛋白磷酸化有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 BCL2l12基因 TAU蛋白 行为学实验 小鼠
下载PDF
Bcl2L12蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
13
作者 韩洋 任建强 盛宇伟 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2018年第3期53-55,共3页
目的探讨Bcl2like 12(Bcl2L12)蛋白在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集乳腺癌患者的石蜡包埋组织标本132例,采用免疫组织化学EnVision二步法检测Bcl2L12蛋白的表达水平,并分析Bcl2L12与临床病理学特征之间的关系,以及与患... 目的探讨Bcl2like 12(Bcl2L12)蛋白在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集乳腺癌患者的石蜡包埋组织标本132例,采用免疫组织化学EnVision二步法检测Bcl2L12蛋白的表达水平,并分析Bcl2L12与临床病理学特征之间的关系,以及与患者的无病生存期(DFS)、总生存期(OS)之间的关系。结果乳腺癌组织中Bcl2L12蛋白阳性表达呈棕黄色弥漫染色或颗粒状,主要定位于胞质。原发肿瘤>2cm、有淋巴结转移、组织学分级为Ⅱ—Ⅲ级Bcl2L12蛋白表达阳性率均明显高于原发肿瘤≤2cm、无淋巴结转移、组织学分级为Ⅰ级(均P<0.05)。Bcl2L12蛋白表达与原发肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级呈正相关(r=0.206、0.197、0.179,均P<0.05),Bcl2L12蛋白表达与年龄无关(r=-0.002,P>0.05)。Bcl2L12蛋白低表达者有更高的无病生存率(85.7%)和总生存率(96.4%)。结论 Bcl2L12蛋白的高表达与乳腺癌的发生、发展有关,其表达对乳腺癌患者具有病情判断和预后评估的价值。 展开更多
关键词 乳腺癌 Bcl2l12蛋白 免疫组织化学 Kaplan-Meier生存分析 临床意义
下载PDF
BCL2-L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的关系 被引量:3
14
作者 杨迪 马晓欣 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第4期610-613,共4页
目的:通过测定BCL2-L12在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织中的表达情况,探讨BCL2-L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的相关性。方法:应用Real time PCR法检测36例良性病变切除子宫患者(对照组)的正常内膜组织及64例子宫内膜癌患... 目的:通过测定BCL2-L12在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织中的表达情况,探讨BCL2-L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的相关性。方法:应用Real time PCR法检测36例良性病变切除子宫患者(对照组)的正常内膜组织及64例子宫内膜癌患者(实验组)病变内膜组织中BCL2-L12的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果:BCL2-L12在子宫内膜癌组织中的表达低于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);BCL2-L12在子宫内膜癌组织中的表达水平与肌层浸润程度有关,差异有统计学意义(P<0.05)。BCL2-L12在子宫内膜癌组织中的表达与其他临床病理特征(比如病理学分期、组织学分化程度等)差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BCL2-L12在子宫内膜癌组织中呈现低表达,且表达水平与肌层浸润程度有关,提示BCL2-L12可能在子宫内膜癌的发生发展中起抑制作用。 展开更多
关键词 BCL2-l12 子宫内膜癌 REAL-TIME PCR
下载PDF
新疆羊种布鲁氏菌分离株的鉴定与L7/L12蛋白的原核表达和生物信息学分析
15
作者 刘升 江雅丽 +6 位作者 付强 史慧君 李爽 孟露萍 郭飞 张辉 陈创夫 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期564-573,共10页
【目的】分离并鉴定新疆羊种布鲁氏菌。原核表达该菌的L7/L12蛋白,检测该蛋白的反应原性及进行部分生物学分析。【方法】采用细菌划线培养、形态学观察、PCR检测以及生化试验进行布鲁氏菌分离鉴定。利用常规分子生物学方法表达并纯化羊... 【目的】分离并鉴定新疆羊种布鲁氏菌。原核表达该菌的L7/L12蛋白,检测该蛋白的反应原性及进行部分生物学分析。【方法】采用细菌划线培养、形态学观察、PCR检测以及生化试验进行布鲁氏菌分离鉴定。利用常规分子生物学方法表达并纯化羊种布鲁氏菌分离株的L7/L12蛋白,应用Western Blot分析融合蛋白的反应原性。使用生物信息学软件对该蛋白进行了生物信息学分析。【结果】分离鉴定确定该菌株为羊种布鲁氏菌。经过测序与酶切鉴定,正确构建了表达载体p ET-28a-L7/L12.SDS-PAGE试验显示纯化的L7/L12蛋白为单一条带;经过Western Blot检测,该融合蛋白具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。【结论】鉴定出该分离菌株,表达并纯化了该菌的L7/L12融合蛋白,Western Blot证明该蛋白具有良好的反应原性,为后续该蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 羊种布鲁氏菌 L7/l12 蛋白纯化 反应原性 生物学
下载PDF
核糖体蛋白L12(RPL12)在猪繁殖与呼吸综合征病毒复制中的作用
16
作者 殷杰 赵永祥 +3 位作者 薛江东 刘锴 李彬 马德慧 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第3期686-693,共8页
为研究宿主细胞核糖体蛋白L12(RPL12)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制中的作用,本研究通过荧光定量PCR和Western-blotting等方法,检测了PRRSV感染对Marc-145细胞中RPL12表达... 为研究宿主细胞核糖体蛋白L12(RPL12)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制中的作用,本研究通过荧光定量PCR和Western-blotting等方法,检测了PRRSV感染对Marc-145细胞中RPL12表达的影响,以及过表达或敲减RPL12对PRRSV复制的影响。结果显示,PRRSV感染可上调Marc-145细胞中RPL12基因的表达。过表达RPL12可促进PRRSV的复制,而敲减RPL12可抑制PRRSV的复制。通过免疫共沉淀和共聚焦显微镜检测,进一步研究发现RPL12蛋白与PRRSV GP2b蛋白存在相互作用,并共定位于细胞质中。本研究首次发现了宿主蛋白RPL12能够促进PRRSV复制,并与PRRSV GP2b蛋白存在相互作用,为进一步研究PRRSV的感染与复制机制以及与宿主的相互作用提供了新的切入点,为抗病毒药物的研发提供了有益的探索。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 核糖体蛋白l12(RPl12) PRRSV GP2b蛋白
下载PDF
MRPL12在肺腺癌中的表达和预后分析 被引量:2
17
作者 熊雷 易茜 +1 位作者 许明芳 陈健 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1033-1040,共8页
目的·分析线粒体核糖体蛋白L12(mitochondrial ribosomal protein L12,MRPL12)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和正常组织中的表达差异和对患者预后的影响,以及预测其生物学功能。方法·利用肿瘤浸润性免疫细胞分析数据库T... 目的·分析线粒体核糖体蛋白L12(mitochondrial ribosomal protein L12,MRPL12)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和正常组织中的表达差异和对患者预后的影响,以及预测其生物学功能。方法·利用肿瘤浸润性免疫细胞分析数据库TIMER和GEPIA(gene expression profiling and interactive analyses)交互式网站服务器分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中MRPL12在不同癌组织中的表达情况的影响。利用Sangerbox生物信息分析平台对MRPL12差异表达的癌症类型进行Cox回归和Kaplan-Meier生存分析,评估风险比(hazard ratio,HR)、95%置信区间(confidence interval,CI)和Log-rank P值。采用UALCAN数据分析平台评估MRPL12蛋白表达与临床病理参数的关系。使用LinkedOmics数据库筛选与MRPL12表达相关的基因。采用DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。定量聚合酶链反应验证MRPL12在细胞中的转录水平。结果·MRPL12在多种癌组织中显著高表达,但只有在LUAD中MRPL12的高表达与患者较差的总体生存期(overall suivival,OS)和疾病特异性生存期(disease-specific survival,DSS)相关;肿瘤分级程度越高的LUAD患者MRPL12蛋白表达水平越高;在LUAD基因表达数据集中与MRPL12负相关的基因富集到癌症通路(P=0.000)、癌症蛋白聚糖(P=0.000)、非小细胞肺癌(P=0.000)等癌症相关的通路。MRPL12在LUAD细胞(H1395、H1975和HCC827)中的mRNA表达水平高于正常细胞(Beas-2B),差异有统计学意义(P<0.05)。结论·MRPL12高表达的LUAD患者可能预后较差;MRPL12可以作为LUAD预后不良的潜在生物标志物和潜在的治疗新靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 线粒体核糖体蛋白l12 生存分析 预后 生物标志物 治疗靶点
下载PDF
dCAPS markers developed for nitrate transporter genes TaNRT2L12s associating with 1000-grain weight in wheat 被引量:2
18
作者 HUANG Jun-fang LI Long +4 位作者 MAO Xin-guo WANG Jing-yi LIU Hui-min LI Chao-nan JING Rui-lian 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期1543-1553,共11页
Nitrate transporters(NRTs)are regulators of nitrate assimilation and transport.The genome sequences of TaNRT2L12-A,-B and-D were cloned from wheat(Triticum aestivum L.),and polymorphisms were analyzed by sequencing.Ta... Nitrate transporters(NRTs)are regulators of nitrate assimilation and transport.The genome sequences of TaNRT2L12-A,-B and-D were cloned from wheat(Triticum aestivum L.),and polymorphisms were analyzed by sequencing.TaNRT2L12-D in a germplasm population was highly conserved.However,38 single nucleotide polymorphisms(SNPs)in TaNRT2L12-A coding region and 11 SNPs in TaNRT2L12-B coding region were detected.Two derived cleaved amplified polymorphic sequences(dCAPS)markers A-CSNP1 and A-CSNP2 were developed for TaNRT2L12-A based on SNP-351 and SNP-729,and three haplotypes were identified in the germplasm population.B-CSNP1 and B-CSNP2 were developed for TaNRT2L12-B based on SNP-237 and SNP-1227,and three haplotypes were detected in the germplasm population.Association analyses between the markers and agronomic traits in 30 environments and phenotypic comparisons revealed that A-CSNP2-A is a superior allele of shorter plant height(PH),length of penultimate internode(LPI)and peduncle length(PL),B-CSNP2-G is a superior allele of higher grain number per spike(GNS).Hap-6B-1 containing both superior alleles B-CSNP1-C and B-CSNP2-A is a superior haplotype of 1 OOO-grain weight(TGW).Expression analysis showed that TaNRT2L12-B is mainly expressed in the root base and regulated by nitrate.Therefore,TaNRT2L12 may be involved in nitrate transport and signaling to regulate TGW in wheat.The superior alleles and dCAPS markers of TaNRT2L12-A/B are beneficial to genetic improvement and germplasm enhancement with molecular markers-assisted selection. 展开更多
关键词 TRITICUM AESTIVUM L. TaNRT2l12 association analysis single NUCLEOTIDE POLYMORPHISM dCAPS MARKER haplotypes
下载PDF
布鲁氏菌L7/L12和GroES真核表达载体的构建及免疫效果分析
19
作者 周诗淼 于秀剑 +4 位作者 冀梦瑶 肖丽荣 张志强 史秋梅 吴同垒 《河北科技师范学院学报》 CAS 2022年第1期32-37,共6页
利用Overlap PCR方法连接基因L7/L12和GroES,分别利用pET32a和pcDNA3.1构建原核和真核表达质粒,分别命名为pET32a-LG和pcDNA3.1-LG。原核表达并纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,用于验证真核表达载体目的基因的表达;重组真核表... 利用Overlap PCR方法连接基因L7/L12和GroES,分别利用pET32a和pcDNA3.1构建原核和真核表达质粒,分别命名为pET32a-LG和pcDNA3.1-LG。原核表达并纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,用于验证真核表达载体目的基因的表达;重组真核表达质粒pcDNA3.1-LG转染293T细胞,经间接免疫荧光和Western blot验证蛋白成功表达。真核质粒免疫小鼠后,利用ELISA方法检测血清抗体水平,淋巴细胞转化试验检测细胞免疫水平,结果显示,该重组质粒具有良好的免疫效果。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 L7/l12基因 GroES基因 真核表达
下载PDF
番茄SlSIP1L12基因负调控种子萌发的研究
20
作者 崔宝禄 陈国平 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期168-175,共8页
【目的】鉴定番茄中Trihelix转录因子SIP1亚家族SlSIP1L12基因的生物功能,【方法】利用RT-PCR分析了SlSIP1L12基因的表达模式、对外源激素和非生物胁迫的响应;利用RNAi干扰技术获得了SlSIP1L12转基因植株,利用ELISA鉴定转基因种子体内AB... 【目的】鉴定番茄中Trihelix转录因子SIP1亚家族SlSIP1L12基因的生物功能,【方法】利用RT-PCR分析了SlSIP1L12基因的表达模式、对外源激素和非生物胁迫的响应;利用RNAi干扰技术获得了SlSIP1L12转基因植株,利用ELISA鉴定转基因种子体内ABA的含量。【结果】(1)基因克隆分析表明:番茄AC++中,SlSIP1L12基因编码长度为1125bp,编码374个氨基酸;进化分析表明,番茄SlSIP1L12基因进化明显。(2)表达模式证实:SlSIP1L12基因主要在茎、成熟叶中表达,花和果实中次之。(3)外源处理显示:SlSIP1L12受外源激素ABA和脱水胁迫诱导,说明SlSIP1L12功能与ABA有关。(4)SlSIP1L12转基因株系的种子发芽速度快于对照;相同条件下,胚根伸长速度明显比对照快。(5)发芽7 d时,转基因种子体内ABA含量明显小于对照。【结论】SlSIP1L12基因负调控番茄种子萌发的机制与ABA含量密切相关。 展开更多
关键词 番茄 SlSIP1l12基因 种子萌发 ABA响应
下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部