刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析

【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位;同时,通过在己糖缺陷型酵母菌株EBY.VW4000中异源表达VdERD6L15探究其功能;此外,通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列,该编码序列长1461 bp,可编码486个氨基酸,具有膜蛋白特征,属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株EBY.VW4000中进行异源表达,验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析,发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析,进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白,具有转运葡萄糖的功能;VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500~1000 bp之间。

卵巢癌患者血清Romo-1、sFRP-4、MRPL15水平及与淋巴结转移及预后生存关系

目的:探讨卵巢癌(OC)患者血清活性氧调节剂-1(Romo-1)、分泌型卷曲蛋白4(sFRP-4)、线粒体核糖体蛋白L15(MRPL15)水平及与淋巴结转移及预后生存关系。方法:回顾性收集本院2019年7月-2021年3月住院治疗的132例OC患者为OC组,良性病变患者为病变组,体检健康者132例对照组。对OC患者随访3年分为死亡组(n=82)和生存组(n=50)。检测各组血清Romo-1、sFRP-4、MRPL15水平;Cox回归分析影响OC患者预后的相关因素;运用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Romo-1、sFRP-4、MRPL15对OC患者预后生存的预测价值。结果:对照组、病变组、OC组血清Romo-1、MRPL15水平依次升高,血清sFRP-4水平依次降低;OC组淋巴结转移患者血清Romo-1、MRPL15水平高于未转移患者,血清sFRP-4水平低于未转移患者(均P<0.05)。死亡组FIGO分期Ⅲ期~Ⅳ期占比(86.6%)、淋巴结转移占比(74.4%)、低分化程度占比(58.5%)、血清Romo-1(3.81±0.67 ng/ml)、MRPL15(13.26±2.28 ng/ml)水平均高于生存组(48.0%、48.0%、28.0%、2.92±0.58 ng/ml、10.52±1.73 ng/ml),而血清sFRP-4水平(1.75±0.42 ng/ml)低于生存组(2.36±0.49 ng/ml)(均P<0.05)。血清Romo-1、sFRP-4、MRPL15、淋巴结转移、FIGO分期高、分化程度低为影响OC患者预后生存的相关因素(均P<0.05)。血清Romo-1、sFRP-4、MRPL15联合预测OC患者预后生存的曲线下面积为0.957,优于各自单独指标预测(P<0.05)。结论:OC患者血清Romo-1、MRPL15水平异常升高,血清sFRP-4水平异常降低,且与患者淋巴结转移及预后有关,3者联合检测对患者预后生存有较高的预测价值。

核糖体蛋白rpl15cDNA序列在真骨鱼类系统进化研究中的价值

应用RTPCR,从真骨总目(Teleostei)5目15种鱼类中首次克隆了核糖体大亚基蛋白L15(rpl15,ribosomalproteinL15)的完整cDNA序列。以海鲢形亚组(Elopomorpha)的鳗鲡作为外类群,对这些真骨鱼类的核糖体蛋白L15cDNA序列进行了系统发育分析,结果表明:(1)rpl15基因在真骨鱼类等许多真核生物进化中高度保守;(2)系统树中各物种之间的关系与形态分类一致。rpl15编码区适合于真骨鱼类目以上分类阶元的分子系统学研究。

鹌鹑和黑斑蛙核糖体蛋白L15 cDNA片段的克隆和序列分析

通过RT PCR方法,分别从两栖类的黑斑蛙(Rananigromaculata)和鸟类的鹌鹑(Coturnixcoturnixjaponica)中首次克隆了核糖体大亚基蛋白L15(RPL15,ribosomalproteinL15)的cDNA片段,并分析了其序列特征.黑斑蛙和鹌鹑的rpl15cDNA片段分别为467个核苷酸和408个核苷酸,推测分别编码155个氨基酸和136个氨基酸的蛋白片段,与其它已知的脊椎动物rpl15序列有高度的同源性.应用这两条cDNA序列和其它已知的脊椎动物rpl15序列构建的系统发育树显示聚类结果与传统分类一致.

芽孢杆菌L15菌株发酵培养条件的优化

芽孢杆菌L15菌株能有效降低刺参Apostichopus japonicas养殖水中的化学耗氧量(COD)和氨氮(NH+4-N)含量,促进刺参生长,为大量发酵培养L15菌株并降低培养成本,以豆粕、麦麸、玉米酒糟、棉籽粕为碳、氮源,对发酵培养L15菌株的最佳碳、氮源及其配比和最佳发酵条件(如装液量、接种量、转速等)进行了初步优化研究。结果表明:培养芽胞杆菌L15菌株的最佳碳、氮源为麦麸和豆粕,最佳添加量分别为3、2 g/L;最佳发酵培养条件为装液量1/3、接种量1%、转速160 r/min;在最佳培养基和最适培养条件下,发酵培养的L15菌株细菌数量可达1011cfu/m L,与用2216E培养基培养的L15菌株相比,在实验室条件下,对海参底泥COD的去除率虽无明显变化,但培养成本却降低了91%。研究表明,用豆泊和麦麸作为培养基培养L15菌株具有可行性,不仅细菌数量达标,且培养成本显著降低。

玉米ClpR2同源基因PL5L15的克隆及其在不同光周期处理下的表达分析

光周期敏感是热带、亚热带玉米种质在温带地区利用的主要障碍。本研究在构建的受长日诱导特异表达的差减文库基础上,以热带玉米CML288为材料,克隆了库中一个基因PL5L15的cDNA序列。该cDNA全长1410bp,具有879bp完整的ORF阅读框,编码一条292个氨基酸残基的肽链,包含一个Clp蛋白家族保守的Clp-protease结构域,是玉米Clp蛋白酶家族的ClpR2-LIKE基因,位于第9染色体上。Real-time PCR分析显示,在短日条件下该基因正常水平的表达有利于生殖分化,而在长日条件下持续过量高表达,推测该基因可能与玉米光周期反应过程中的生殖分化有关。

鲇鱼和斜带石斑鱼核糖体蛋白L15完整cDNA的克隆和序列分析

通过RT PCR和3′ RACE方法,分别从鲇鱼(Silurusasotus)和斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)中克隆了核糖体大亚基蛋白L15(ribosomalproteinL15,RPL15)的完整cDNA,并详细分析了其序列特征.这两种鱼的RPL15蛋白cDNA均包含一个615个核苷酸的完整阅读框,推测分别编码一个204个氨基酸的蛋白.不论是核苷酸序列还是推测的氨基酸序列,这2个序列分别与同属的南方大口鲇和同科的大眼鳜rpl15序列同源性最高,与其他已知的脊椎动物rpl15序列也有较高的同源性.基于这2个序列的编码区和其他鱼类的rpl15编码序列进行分子系统学分析,与传统的形态分类结果是一致的.

高效菜豆根瘤菌L15菌株抗血清制备及研究初探

作者对一株高效固氮且具显著增产效益的菜豆根瘤菌 L15菌株及11株参考菌株的抗血清制备及血清学反应进行了初步研究,结果表明:菜豆根瘤菌,豌豆根瘤菌和三叶草根瘤菌之间,苜蓿根瘤菌和快生型大豆根瘤菌之间以及慢生型大豆根瘤菌和豇豆根瘤菌之间均存在类属抗原.说明依靠血清学方法对根瘤菌进行分类是可行的.

IL15/PAP融合蛋白基因克隆及其原核与植物表达载体的构建

将IL15和PAP基因通过一甘氨酸接头(Gly4Ser)3连接在一起,构建原核和植物表达载体,以期表达具有导向杀伤活性的融合蛋白.在引物设计中,通过引物在IL15基因下游引入(Gly4Ser)3的编码序列和BamHI位点,然后采取分步克隆及PCR、酶切、连接等一系列分子克隆方法,将IL15和PAP基因融合在一起,构建融合蛋白的原核与植物表达载体.经PCR和NcoI/SalI双酶切鉴定及测序,证实原核表达载体pET32a-IL15/PAP及植物表达载体pB-I P中均插入了正确的融合基因序列.

本田L15B型发动机动力性能检测方法及其动力性能下降的原因分析

随着人们生活水平的提高以及我国公路建设的大力发展,汽车普及率逐年提高。汽车在正常使用的情况下,随着行驶里程的增长,其发动机动力性能将逐渐下降,轻则影响驾驶员的驾驶体验,重则引发交通事故。现以本田L15B型发动机为例,阐述了汽车发动机动力性能的评价指标、动力性能检测方法,分析了发动机动力性能下降的主要原因。

松下L15录象机典型故障分析检修

松下Ｌ１５录象机典型故障分析检修章平，王佐臣，赵建平松下Ｌ１５录象机１９８９年进入我国，社会拥有量很大，现已到故障多发期，现将部分典型故障分析检修介绍如下。故障１每次出盒刚出仓门又自动返回仓底，须第二次出盒才能到位。装盒后常自动退出，又迅速装盒到位，...

巧用NV—L15 MIC插座

日本松下NV—L15录像机在众多的优越性能当中,最令电教工作人员青睐的是具有插入编辑和后配音功能,本人在实践中发现该机的MIC插座结构特殊,虽然插孔直径与我国现行Φ3.5mm的微型话简插头的直径一致,但是,用这种插头无法插到底,尚留5mm就插不进了,因而,这一后配音功能无法实现。本人曾写信向国内一些权威性杂志询问也无答复,国内的电子器材商店也打听过不少。

快速成型技术在L15研制中的应用

快速成型技术是一种新型的快速柔性制造技术,能直接通过零件的三维图形快速成型出各种复杂零件样件,而不需要任何工装,可以大大节省时间和加工费用,非常适合产品设计、开发阶段的试制生产。本文对高分子和有机可溶性材料的成型工艺进行了研究,并针对L15锁座铸件的结构特性进行了浇注工艺设计和模拟。

ZL15型轮式装载机行走制动器的改装

一台ZL15型轮式装载机,需解决行走制动不灵的问题.据驾驶员反映,该机自购入时行走制动就不理想,一是制动踏板太沉、踩不动;二是制动不灵,只慢不站.

松下NV—L15型录像机螺线管动作不停故障检修

故障现象：接通电源，螺线管动作不停，多功能显示屏上的字符显示及电源指示灯闪烁，带盒插不进，仓内有盒也弹不出．按操作面板上的电源通断按键（VTR键）也不起作用。

联想液晶显示器LXB-L15／LXM-L17AB无显示故障检修两例

例1：联想LXB-L15型显示器，电源指示灯间断闪亮，无显示，按任何键无反应，细听机内有轻微“嗒、嗒”声。

前期培养对芽孢杆菌L15菌株后期生长和有机质降解的影响

因益生菌能改善水质、提高饲料利用率、养殖动物产量和免疫力而被水产养殖者广泛使用。根据功能不同,水产益生菌分为用于提高水生动物生长、免疫及饵料利用率的饲料补助剂和用于改善水质的水质改良剂。作为饲料补助剂的益生菌使用方式分两种:最普通的使用方式是将益生菌直接与饲料混合,如与饲料制成小球、碎屑、