人胃癌SGC-7901/TCF7L2细胞株的建立及其生物学特性观察

目的建立人胃癌SGC-7901/TCF7L2细胞株,观察其生物学特性。方法使用质粒稳定转染技术,获得高表达TCF7L2蛋白的胃癌细胞株SGC-7901/TCF7L2及其空转对照组SGC-7901细胞株(SGC-7901/CON)。采用qRT-PCR和Western blot法分别检测SGC-7901/TCF7L2和SGC-7901/CON两细胞株中的TCF7L2 mRNA和蛋白表达水平;光学显微镜下观察并比较两种细胞株的细胞形态;划痕实验比较两者的迁移能力;用细胞计数法分别检测两者对顺铂和卡铂的耐药情况;裸鼠体内荷瘤实验比较两者在体内成瘤的能力。结果经稳定转染技术成功建立稳定的SGC-7901/TCF7L2细胞株,其TCF7L2的mRNA和蛋白表达量均较SGC-7901/CON细胞株明显升高;光镜下SGC-7901/TCF7L2细胞形态较对照细胞形态多样,伪足增多,体积增大,胞质内颗粒物质增多;迁移能力和对铂类的耐受性较对照细胞明显增强;SGC-7901/TCF7L2细胞在小鼠体内的成瘤能力也明显增强。结论 TCF7L2可以增强人胃癌细胞株SGC-7901的恶性生物学特性,SGC-7901/TCF7L2细胞株的建立为胃癌发生发展机制研究及其靶向药物开发提供基础。

β-catenin在L2、WB、HepG2、SMCC细胞株中的异常表达及意义

目的探讨β-catenin(β-连环素)异常表达在原发性肝癌的发生、分化中的意义。方法西安航天总医院肝胆外科用免疫细胞化学检测体外培养的细胞株的β-catenin的表达,进一步研究β-catenin在原发性肝细胞癌的形成、分化中的作用。结果 WB细胞表面表达C-kit抗体,免疫细胞化学结果显示L2细胞株β-catenin几乎全部分布在细胞膜,细胞质、细胞核中几乎无表达,WB细胞株中β-catenin主要分布于细胞膜、细胞质,细胞核中有较少表达,HepG2、SMCC细胞株中β-catenin几乎全部分布于细胞质、细胞核中并有较高表达,SMCC表达多于HepG2细胞株。western blot定量显示β-catenin在L2、WB、HepG2、SMCC细胞株的细胞膜表达逐渐减少,细胞质、细胞核中的表达逐渐增多。结论β-catenin由细胞膜逐渐向细胞质、细胞核的异位表达在原发性肝癌的发生、分化过程中可能具有重要作用。