RD、Hep-2、L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒学监测的实验研究

目的 :观察 RD、Hep- 2和 L 2 0 B用于脊髓灰质炎病毒学常规监测的实验结果 ,提高脊髓灰质炎病毒的检出率。方法:对 RD、Hep- 2和 L2 0 B用于脊髓灰质炎病毒监测进行了实验研究。用细胞培养法进行病毒分离。结果 :L2 0 B细胞对脊髓灰质炎病毒具有较强的敏感性和特异性 ,但非脊髓灰质炎肠道病毒 (NPEV)在 RD细胞上呈选择性增值 ,可能会造成 NPEV检出率下降。 结论:RD、Hep- 2和 L2 0

L20B细胞吸附法用于环境水中病毒的分离培养

目的 :建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法。方法 :细胞吸附浓集法 :将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后 ,加入适量的 L 2 0 B细胞 ,混匀 ,充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒 ,然后收集细胞培养、分离病毒。同时用 Al Cl3- Na Cl沉淀法浓集病毒 ,接种 L2 0 B细胞分离病毒 ,作为对照。结果 :4 0份水样 ,用 L2 0 B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒 ,用 Al Cl3- Na Cl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒。结论 :新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测 ,且检测的敏感性明显高于 Al Cl3- Na Cl沉淀法。

L20B RD与Hep-2三种细胞用于脊髓灰质炎病毒分离鉴定的比较

采用世界卫生组织（ＷＨＯ） 推荐使用的方法，用Ｌ２０Ｂ、ＲＤ和Ｈｅｐ２ 三种细胞进行脊髓灰质炎（脊灰）病毒的分离鉴定。结果表明，Ｌ２０Ｂ细胞具有良好的特异性，对非脊灰肠道病毒均不敏感。在脊灰分离株和粪便悬液标本中脊灰病毒的检出率分别为１００％ 和９３－３ ％ ，优于ＲＤ和Ｈｅｐ２ 细胞，特别是在病毒分布不均及混有非脊灰肠道病毒的情况下，能更好地、准确地捕捉到脊灰病毒。采用Ｌ２０Ｂ加ＲＤ细胞分离脊灰病毒优于ＲＤ加Ｈｅｐ２，但对非脊灰肠道病毒分离率有影响。

5株在L20B细胞复制的非脊髓灰质炎肠道病毒的鉴定及基因特征分析

目的鉴定L20B细胞[转人脊髓灰质炎(脊灰)病毒受体基因的小鼠肺细胞系]支持生长的非脊灰肠道病毒(Non-polio Enteroviruses,NPEV)的血清型,并分析病毒基因特征,探讨其对脊灰病毒(Poliovirus,PV)分离率的影响。方法收集宁夏回族自治区从健康人群和广西壮族自治区从急性弛缓性麻痹病例粪便标本中分离的5株L20B细胞支持生长的NPEVs,对病毒分离物采用逆转录-聚合酶链反应进行VP4编码区基因扩增和核苷酸序列测定和分析,根据序列比对结果确定血清型,再进行全长VP1编码区序列测定和分析,并和基因数据库下载的相应血清型NPEVs的VP1编码区核苷酸序列进行比对和分析,构建基因亲缘性关系树。结果 5株NPEVs均鉴定为柯萨奇A组病毒(Coxsackie Virus GroupA,CVA),其中1株为CVA4,另1株为CVA8,其余3株均为CVA10,均属A组人肠道病毒(Human Enteroviruses,HEV);通过比较全长VP1编码区核苷酸同源性和构建亲缘关系树发现,3个血清型的中国分离株都分别独立成簇,与其他国家分离的相应血清型的NPEVs及原型株病毒差异都较大,是本土流行病毒株。结论所研究的L20B细胞支持生长的5株NPEVs均属A组HEV,包括CVA4、CVA8、CVA10三个血清型。由于L20B细胞对PV的最初接种具有很高的敏感性,因此L20B细胞即使支持某些CVA生长,也不会影响PV分离率。但在近年来中国发生较大规模手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD)的背景下,由于这些A组HEV同时是HFMD的病原体,对这些病毒的鉴定对PV的鉴别诊断和HFMD的预防控制都有实际意义。

L20B细胞在脊髓灰质炎病毒分离鉴定中的应用

在脊髓灰质炎（脊灰）病毒分离鉴定中，细胞的选择非常重要，以往世界卫生组织（ＷＨＯ）推荐使用Ｈｅｐ－２和ＲＤ两种细胞同时进行脊灰病毒的分离鉴定。由于这两种细胞不仅对脊灰病毒敏感，对非脊灰肠道病毒（ＮＰＥＶ）同样敏感，分离到许多ＮＰＥＶ。最近ＷＨＯ推荐了一种新型的对脊灰病毒特异的Ｌ２０Ｂ细胞，我们使用这种细胞进行的实验显示。

L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒分离鉴定的实验观察

应用RD、Hep-2、L20B细胞对64株已知病毒和73份粪便标本悬液进行脊髓灰质炎病毒（PV）分离鉴定及效价滴定．实验结果证明，L20B细胞具有很好的特异性，用该细胞检测已知病毒标本，PV检出率达100％；检测粪便标本悬液PV检出率可达13.70％，均高于RD、Hep-2细胞的检出率，而对其它肠道病毒均不增殖．用RD、L20B进行病毒分离优于RD、Hep-2，用前者PV检出率可提高4.11％．从29株病毒效价滴定结果分析，三种细胞对病毒的敏感度依次为RD＞L20B＞Hep-2．

基于LabVIEW与Modbus协议的多点温度采集实验设计

为培养学生工业通信协议应用能力,设计一种基于LabVIEW与Modbus协议的多点温度采集实验。该实验以LabVIEW为上位机,以TAM-18B20-8L模块实现对温度信号的采集;上位机通过485通信接口及Modbus协议读取温度数据进行处理并显示,通过DatabaseConnectivity工具包完成Access数据库的建立及数据存储。学生可以通过该实验更好地掌握Modbus协议、数据库建立访问的设计方法和工程实现方法。

水样中脊髓灰质炎病毒检测方法的实验研究

目的:探索灵敏、简便、实用的检测水样中微量脊髓灰质炎病毒(脊灰病毒)的方法.方法:将L20B细胞加入含微量脊灰病毒的水样中,充分作用后收集细胞,作病毒分离培养,并以NaCl-AlCl3沉淀法作对照.结果:应用活的L20B细胞时,1 000 ml水样中含病毒100TCID50、10TCID50时能全部检出;当含1～2TCID50时14份样本可检出13份.NaCl-AlCl3沉淀法在100TCID50时4份样本中仅检出1 份,其他各浓度的4份样未能检出;应用固相化的L20B细胞处理污水时,2～3×106个细胞,甲醛固定4 h和48 h以上的细胞吸附的病毒量,均值都是18.1TCID50,用细胞吸附浓集法,在40份自然水样中,10份检出脊灰病毒,而NaCl-AlCl3沉淀法未能检出脊灰病毒.结论:应用活细胞吸附时敏感度达到1～2TCID50/1 000ml;应用甲醛固定的细胞吸附污水中病毒时敏感度可达到10 TCID50/1 000ml.

外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验研究

［目的］建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量脊髓灰质炎病毒的方法。［方法］将Ｌ２０Ｂ细胞 加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中，充分作用后收集细胞，作病毒分离培养。同时以 ＮａＣ１—Ａ１Ｃ１_３沉淀法作对照。 ［结果］１０００ｍｌ水样中含病毒１００、１０ＴＣＤ_５０时能全部检出：当合１～２ＴＣＤ_５０时１４份样本可检出１３份。ＮＳＣ１—Ａ１Ｃ１_３ 沉淀法在１００ＴＣＤ_５０时４份样本中仅检出１份，其它各浓度的４份样都未能检出。

外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验研究

建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量脊髓灰质炎病毒的方法。这种方法是将L2 0B细胞加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中 ,充分作用后收集细胞 ,作病毒分离培养。同时以NaCl-AlCl3 沉淀法作对照。结果表明 ,10 0 0ml水样中含病毒 10 0、10TCD50 时能全部检出 ;当含1～ 2TCD50 时 14份样本可检出 13份。NaCl-AlCl3 沉淀法在 10 0TCD50 时 4份样本中仅检出 1份 ,其它各浓度的 4份样都未能检出。

固相化细胞吸附浓集法分离污水中脊髓灰质炎病毒的实验研究

〔目的〕建立一个适用于污水中脊髓灰质炎病毒分离培养的方法。〔方法〕采用固相化的L2 0B细胞吸附法 ,浓集污水中的脊髓灰质炎病毒 ,将浓集物再用活的L2 0B细胞培养。〔结果〕能够检出 10 0 0ml水中的 0 .1～ 10TCID50 量的脊髓灰质炎病毒 ,在10 0 0ml预处理后的污水中加入 10TCID50 量的病毒 ,亦可以检出。〔结论〕本方法的有效检出限为 10TCID50 / 10 0 0ml,可用于污水中的脊髓灰质炎病毒的浓集和分离培养。

细胞吸附浓集法分离水中微量脊髓灰质炎病毒的实验研究

目的 :建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量病毒的方法。方法 :将 L 2 0 B细胞加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中 ,充分作用后收集细胞 ,作病毒的分离培养。同时以 Na Cl— Al Cl3沉淀法作对照。结果 :10 0 0 ml水样中含病毒 10 0、10 TCD5 0时能全部检出 ;当含 1— 2 TCD5 0 时 14份样本可检出 13份。 Na Cl— Al Cl3沉淀法 :在 10 0 TCD5 0 时 4份样本中仅检出 1份 ,其它各浓度的 4份样都未能检出。结论 :细胞吸附浓集法分离水中病毒敏感、实用。

三种细胞在脊髓灰质炎病毒检测中的特点观察

目的 :运用RD、Hep -2 及L2 0B细胞进行脊髓灰质炎病毒 (简称脊灰 )的分离鉴定。方法 :使用WHO推荐的 3种细胞对脊灰病毒分离鉴定。结果 :L2 0B细胞对脊灰病毒具有良好的特异性 ,对非脊灰肠道病毒不敏感。在脊灰分离株和粪便悬液标本中脊灰病毒的检出率为1 0 0 % ,优于RD用Hep -2 细胞。结论 :L2 0B细胞对脊灰病毒有较强的特异性和敏感性。

细胞吸附浓集法分离外环境水中脊髓灰质炎病毒

〔目的〕建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法。〔方法〕细胞吸附浓集法 :将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后 ,加入适量的L2 0B细胞 ,混匀 ,充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒 ,然后收集细胞培养、分离病毒。同时用AlCl3 -NaCl沉淀法浓集病毒 ,接种L2 0B细胞分离病毒 ,作为对照。〔结果〕40份水样 ,用L2 0B细胞吸附法检出 10株脊髓灰质炎病毒 ,用AlCl3 -NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒。〔结论〕新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测 ,且检测的敏感性明显高于AlCl3 -NaCl沉淀法。

三种细胞在脊髓灰质炎病毒检测中的应用比较

为了比较在常规应用条件下L2 0B细胞与RD、Hep 2细胞对脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒 (PV)的敏感性和选择性 ,同时用 3种细胞检测急性弛缓性麻痹 (AFP)病例 412份粪便标本 ,进行PV分离鉴定及效价测定。结果表明 ,L2 0B细胞对PV更敏感 ,对PV有完全的选择性和良好的特异性 ,对同时混有非脊灰肠道病毒 (NPEV)和PV的粪便标本 ,L2 0B细胞能更快地检测出PV ,而RD、Hep 2细胞被NPEV的生长所掩盖。L2 0B细胞的PV检出率 (5 34 % )高于RD(4 6 1% )、Hep 2细胞 (2 6 7% )。L2 0B、RD、Hep 2细胞对PV的敏感性分别为 88%、76 %、44 % ,但 3种细胞对PV都出现了不同程度的漏检。从 2 5株PV效价滴定结果分析 ,3种细胞对PV的滴度均为L2 0B、RD细胞高于Hep 2细胞。表明L2 0B细胞能简化粪便标本PV检测过程。它的应用对PV分离不失为一种便捷、省时、省力、经济和可靠的方法。