L612K变异MxA蛋白体外抑制水泡性口膜炎病毒复制的研究

目的研究L612K变异MxA蛋白抑制水泡性口膜炎病毒(VSV)复制活性。方法将野生型MxA蛋白重组表达载体pcDNA3.1-MxA(WT)和L612K变异MxA蛋白载体pcDNA3.1-MxA(L612K)分别瞬时转染Wish细胞,24h后VSV感染细胞,感染后48hMTT检测各组细胞增殖数;另取Wish细胞转染MxA载体和对照DNA,24h后加入VSV,感染24h后收集细胞,RT-PCR检测VSV mRNA水平,Western blot检测MxA蛋白的表达水平。结果野生型和L612K变异MxA蛋白均在Wish细胞有较好表达;MTT检测L612K变异组细胞增殖数明显低于野生型(t=1.13,P<0.01),RT-PCR检测L612K变异组VSV mRNA水平明显高于野生型组(t=0.13,P<0.01)。结论L612K变异可能使MxA蛋白降低了对VSV的抑制活性。