抑制CRIF1基因促进L615白血病细胞体内增殖的动物实验初步研究

目的探讨CRIF1基因对L615白血病细胞小鼠体内增殖的影响。方法实验分为3组,CRIF1-RNAi L615实验组(n=3):慢病毒干扰载体抑制L615细胞CRIF1-GFP基因表达;空载体对照组(n=3):空载体转染L615细胞;空白对照组(L615细胞空白对照)(n=3);建立白血病小鼠模型。通过肝脾印片、骨髓涂片及外周血流式细胞仪检测观察各组小鼠体内L615细胞增殖情况,比较各组小鼠的外周血白细胞计数(WBC)、生活质量和生存时间、肝脾指数。结果流式细胞仪检测:CRIF1-RNAi L615实验组、空载体对照组的小鼠外周血均见大量GFP阳性L615细胞;肝、脾印片及骨髓涂片结果显示肝、脾、骨髓均被白血病细胞浸润,3组小鼠均成瘤。CRIF1-RNAi L615实验组、空载体对照组及L615对照组小鼠在白血病细胞植入d5后外周血WBC(×109/L)分别为:42.23±15.08 vs 17.10±4.10 vs 17.30±5.05(P<0.01);生存时间(d)分别为:6.33±1.15 vs 10.00 vs 8.33±2.89(P<0.01);CRIF1-RNAi L615实验组小鼠脱毛、弓背等并发症出现提前;肝、脾指数分别为:122.31±2.83、35.21±0.45 vs 110.89±13.30、21.54±3.40 vs 89.76±5.56、24.71±2.48(P<0.05)。结论抑制小鼠L615白血病细胞CRIF1基因表达后,明显著促进L615白血病细胞在小鼠体内增殖、浸润并加快移植小鼠发病死亡。

参蝥复方对L615白血病小鼠红细胞免疫功能的影响

本文报道了参蝥复方（主药为红参、青黛）对正常６１５小鼠及Ｌ６１５白血病小鼠红细胞免疫功能的影响。实验结果表明，参蝥复方能明显提高正常实验小鼠红细胞Ｃ３ｂ受体花环率，而对红细胞免疫复合总环率及自然肿瘤红细胞花环率和直向肿瘤红细胞花环率影响不在；对Ｌ６１５白血病小鼠，参蝥复方则可全面改善上述各项红细胞免疫指标。提示参蝥复 改善机体红细胞免疫功能的作用。

L615小鼠白血病细胞表面标志的研究

为确定L615小鼠白血病的细胞类型,作者采用了多种淋巴细胞表面标志的检测技术,研究了L615白血病细胞的表面标志。结果表明,L615白血病细胞不具有B细胞的各种表面标志;诸如SmIg、IgG-FcR以及CR等。但它却与兔抗鼠脑血清和兔抗鼠胸腺细胞血清起特异性反应,表明它具有T细胞所特有的表面抗原-Thy-1和MsLA。由此确定,L615小鼠白血病是一株T细胞型白血病病株。

(C57BL/6×615)F1代小鼠L615白血病模型的建立

目的 了解 L6 15白血病细胞株能否在 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠体内建立白血病模型。方法 雄性 6 15小鼠与雌性 C5 7BL / 6小鼠采用长期同居法培育 (C5 7BL / 6× 6 15 ) F1小鼠 ,6 15、F1小鼠分别经腹腔接种不同数量 L 6 15白血病细胞株 ,观察其白血病发病情况 ;取发病濒死 F1小鼠脾脏 ,制备脾细胞悬液 ,按不同数量经腹腔注射分别接种予 F1小鼠 ,观察白血病发病情况。结果 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠接种 L6 15白血病细胞后 10 0 %发病 ,L6 15白血病细胞可在 (C5 7BL/ 6× 6 15 ) F1小鼠体内传代。结论 L6 15白血病细胞株能在 (C5 7BL/ 6× 6 15 )

T淋巴细胞白血病L615系小鼠血浆脂蛋白的变化

白血病患者和实验性白血病动物血清脂质和脂蛋白含量异常,其表现因白血病类型、病程长短及实验动物的种类而不同。我国已成功地建立了多种实验性白血病模型,并进行了大量研究,但在脂质代谢方面尚未见报道。我们观察了T淋巴细胞白血病615(L615)近交系小鼠血浆脂蛋白及肝、脾胆固醇含量的变化,并初步探讨其变化的原因。

紫金散抗L_(615)急性白血病的实验研究

紫金散是在《中国药典》中收载的紫金锭之基础上化裁,制成的散剂。紫金散方药组成有山慈菇、五倍子、红芽大戟、雄黄、朱砂、千金子霜等。具有清热消炎止痛、化痰、辟秽、解毒的作用。近年来,我们运用该方对急性白血病进行了初步实验研究,现将结果报告如下。

HPLC检测白血病细胞系CYP3A5活性方法的建立与应用

目的建立白血病(AL)细胞系CYP3A5活性检测方法,研究化疗药对其活性的调控。方法HPLC法检测药物干预后AL细胞系CYP3A5活性。结果以1×106细胞、氢化考的松终浓度100μmol/L、孵育24h为AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性检测的孵育条件。K562细胞CYP3A5活性显著高于HL-60、NB4和Jurkat细胞。柔红霉素作用24h后K562细胞CYP3A5活性增高,48h后活性显著增高;而NB4与Jurkat细胞在其作用后活性无改变。地塞米松作用24h后Jurkat细胞CYP3A5活性显著增高,48h后活性又显著增高。全反式维甲酸作用24h后NB4细胞CYP3A5活性显著增高,72h后活性又显著增高。结论HPLC检测AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性方法的建立可用于研究AL细胞CYP3A5活性。柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些AL细胞株CYP3A5活性。

L615小鼠白血病阿糖胞苷耐药模型的建立及其生物学特性

阿糖胞苷(Ara-C)是治疗急性粒细胞白血病的首选药物,但临床相当高比例的病人对Ara-C产生耐药性,致使化疗失败。因此,我们采用逐渐提高药量和连续传代的方法,建立了L615小鼠白血病体内Ara-C耐药模型(L615/Ara-C),最终耐药剂量稳定在150mg/kg。其生物学特性表现为L615/Ara-C小鼠经Ara-C治疗比L615小鼠经Ara-C治疗组存活时间明显缩短,流式细胞术检测证明G_0/G_1期细胞增加,S期细胞减少。有意义的是L615/Ara-C细胞对辐射的敏感性比L615细胞增高。

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱导型TNF受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,GITR)抗体对L615白血病(T淋巴细胞来源白血病)的抑制效应及其作用机制。方法以L615小鼠建立白血病模型,分3个实验组和1个阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间,检测外周血白细胞计数及分类,外周血和骨髓中白血病细胞形态变化,肝脾指数,肝脾组织病理改变。结果GITR抗体使用组能延长L615白血病小鼠的生存时间,可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死,肝脾指数降低。结论通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖,进而抑制白血病的发展。

GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱发型TNF受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,G ITR)的抗体对抗小鼠L615白血病(T淋巴细胞来源白血病)的效果和作用机制。方法以L615小鼠建立白血病模型,分3组实验组以及阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间、外周血白细胞计数及分类、外周血和骨髓中白血病细胞形态变化、肝脾指数、肝脾组织病理改变。结果G ITR抗体可以延长L615白血病小鼠的生存时间,可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死、肝脾指数降低、肝脾组织被白血病细胞浸润,提示G ITR抗体能够降低和缓解白血病细胞所致的小鼠外周血白细胞的升高和浸润,以及肝脾的肿大。结论通过免疫调节机制G ITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖,进而抑制白血病的发展。

蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究

目的探讨蟾酥对L615白血病的疗效及其可能机制,并对其临床应用提供参考。方法对小鼠行L615白血病造模。造模成功后,蟾酥溶液分别按低、中、高剂量进行腹腔注射给药,1次/d,连续10d,观测小鼠体重变化,生存时间,外周血白细胞计数、分类及血小板计数,肝脾指数,肝、脾、骨髓涂片及骨髓白细胞分类,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果L615模型组体重明显减轻,蟾酥低、中、高剂量组体重无明显变化;蟾酥低、中、高剂量组小鼠生存时间比L615模型组长,且中、高剂量具有显著差异(P<0.05或P<0.01);外周血象,同组不同病程,白细胞、血小板计数与实验前比较有显著差异(P<0.05或P<0.01),濒死期各组与L615模型组比较,白细胞、血小板计数,L615白血病细胞百分比有显著差异(P<0.05或P<0.01);白血病死亡小鼠蟾酥各组脾脏指数均低于L615模型组,且有差异(P<0.05);流式细胞术证实,蟾酥能诱导L615白血病细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论蟾酥对L615白血病具有一定的疗效,其机制之一是诱导白血病细胞凋亡,其次蟾酥能抑制L615白血病细胞对免疫系统的浸润。

长春新碱对可移植性小鼠淋巴细胞白血病的疗效及其机制研究

目的探讨长春新碱(Vincristine,VCR)对L615白血病的疗效及其可能机制。方法L615白血病造模成功后,分为对照组和VCR组,进行腹腔注射给药(对照组给生理盐水),隔日一次,连续6次。观测小鼠生存时间,体重变化,外周血白细胞计数,肝脾指数,肝脾骨髓涂片及骨髓白细胞分类,流式细胞术测定凋亡率。结果对照组体重明显减轻,VCR组体重无明显改变;VCR组小鼠生存时间是对照组的229%;外周血象,同组小鼠随病程的延长,白细胞逐渐上升,至濒死期则显著上升,与实验前比较有显著差异,且对照组更为显著,而血小板是先升后降,至濒死期,末梢血对照组出现大量L615白血病细胞,占白细胞总数的52.9%,VCR组L615白血病细胞占17.25%,两者具有显著差异(P<0.01);白血病死亡小鼠脾脏指数有差异(P<0.05),且VCR组脾指数大于对照组;流式细胞术证实,VCR能诱导L615白血病体内细胞凋亡,凋亡率达43.81%。结论VCR对L615白血病具有较好的疗效,其机制主要是诱导白血病细胞凋亡;VCR在抗肿瘤的同时,可能对正常组织尤其是免疫系统具有一定的损害作用。

用免疫缺陷型小鼠研究L615瘤株的继承性免疫和瘤苗免疫的原理

利用不同免疫缺陷小鼠研究转输正常脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的部分机理和瘤苗自动免疫的免疫细胞基础。结果表明:转输脾细胞诱导受体鼠产生免疫预防效应的有效脾细胞成分是T和/或NK细胞,似只有在受体鼠体内有T细胞的条件下才可使其产生免疫预防效应。还表明:MMC-L_(615)瘤苗诱导受体鼠产生的自动免疫保护效应,是通过体内T细胞介导实现的,T细胞可能是效应细胞。

鸡血藤含药血清对L_(1210)细胞的影响

目的:观察鸡血藤(SS)对白血病L1210细胞株的影响。方法:以白血病L1210细胞株为研究对象,以昆明小鼠含药血清为药物,用MTT法观察SS含药血清对白血病细胞株L1210细胞增殖的抑制作用。结果:SS含药血清对L1210细胞有抑制作用,其结果具有统计学意义。结论:SS含药血清具有一定抑制L1210肿瘤细胞增殖及其诱发的移植性肿瘤作用。

FL转基因细胞的构建及膜型FL对U937细胞的体外促增殖效应

目的构建稳定表达人膜型FL分子的转基因细胞株,观察膜型FL和可溶性FL对单核细胞性(M5型)白血病细胞株的体外促增殖效应。方法利用PCR方法克隆人FL全长基因,继而重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,转染包装细胞293T,用含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的转基因细胞。采用RT-PCR和流式细胞仪表型分析等方法进行鉴定。MTT法分析了L929/FL细胞和可溶性FL体外刺激U937细胞的增殖效应。结果成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞L929/FL,膜型FL在体外能够有效促进U937细胞增殖,而可溶性FL并不能有效促进U937细胞的体外增殖。结论成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞,并且提示膜型FL在白血病发病机理中可能具有重要作用。

参蝥复方对L615白血病小鼠红细胞免疫功能的影响

报道了参蝥复方（主药为红参、青黛）对正常615小鼠及L615白血病小鼠红细胞免疫功能的影响。实验结果表明，参蝥复方能明显提高正常实验小鼠红细胞C3b受体花环率，而对红细胞免疫复合物花环率及自然肿瘤红细胞花环率和直向肿瘤红细胞花环率影响不大；对L615白血病小鼠，参蝥复方则可全面改善上述各项红细胞免疫指标。提示参蝥复方有提高和改善机体红细胞免疫功能的作用。

榄香烯复合瘤苗主动免疫抗瘤效应增强途径的比较研究

将ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠的Ｈ２２ 腹水型肝癌和６１５ 系小鼠的Ｌ６１５ 白血病细胞经榄香烯或／和热休克等不同处理制成瘤苗， 进行体内主动免疫实验和致敏脾细胞的体外细胞毒活性实验。结果表明： 热休克和榄香烯复合瘤苗比单一因素处理的瘤苗免疫效果好， 经Ｈ２２和Ｌ６１５ 复合瘤苗免疫、攻击后两个月动物存活率分别达６０－０％ 、８５－０％ （ Ｐ＜０－０１）， 并且能够明显提高死亡小鼠的平均存活天数。瘤苗免疫动物脾细胞的细胞毒活性分别达５８－８％ 、６９－７％ （ Ｐ ＜ ０－０１） 。在制备复合瘤苗时先加入榄香烯后再热休克的免疫效果较好， 这在Ｌ６１５ 瘤苗更为明显， 从而为今后瘤苗免疫在临床上的应用提供了进一步的实验依据。