国内外食品快速检测方法评价技术研究

相比于国外成熟的快速检测方法评价技术体系,我国的评价技术体系发展滞后且有较多问题,严重制约了快检行业的发展。本文主要从验证方法、性能指标、测试要求等方面对各个评价技术体系做了对比分析。同时梳理了国内不同监管部门的评价技术体系发展与侧重,以期为我国食品快速检测方法确认政策和技术研究提供良好的借鉴,引导食品快速检测方法及产品的评价标准进一步规范,形成完善的科学评价方法和评价技术体系,促进我国食品安全及快速检测行业的健康发展。

抗PCV4 Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立可应用于猪圆环病毒4型(PCV4)候选疫苗特异性抗体检测与评价方法,本研究应用PCV4 Cap蛋白作为抗原,以PCV4多克隆兔源抗体作为一抗,优化各反应的最佳条件并建立了针对PCV4 Cap蛋白抗体的间接ELISA方法。最佳条件为2μg/m L PCV4 Cap纯化蛋白,4℃包被过夜,5%脱脂乳封闭60 min,待检血清稀释比例为1∶800,反应条件为37℃、45 min,酶标抗体稀释比例为1∶5000,反应条件为37℃、60 min,底物显色时间为10 min,Cut of f值为0.157,灵敏度可达102400倍。成功建立的抗PCV4Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性、重复性和特异性。可为检测PCV4候选疫苗的特异性抗体水平提供一种精准、高效的方法。

细毛羊主要毛用性状检测及其评定方法

羊毛品质的检测方法、检测标准在推动毛纺工业发展、羊毛贸易以及细毛羊育种中具有重要作用。通过归纳国内外相关文献及标准,总结了国内外主要毛用性状及其检测标准;依据已有标准并结合国内在生产中的实际应用,详细介绍了2个羊毛产量性状与6类羊毛品质性状的客观测定方法,最后系统介绍了澳大利亚和中国开发的羊毛表型目测评定方法。文章可为开展羊毛纤维品质的统一测定和评估提供参考。

牛冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立牛冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法,根据GenBank收录的牛冠状病毒AKS-01株N基因序列(KU886219)保守区设计特异性引物和探针,构建重组质粒并进行反应条件优化、特异性试验、重复性试验以及敏感性试验,建立一种检测BCoV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,建立的牛冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性、敏感性和重复性均良好。该方法BCoV重组质粒标准品在5.75×10^(7)~5.75×10^(3)copies/μL时与Ct值呈现良好线性关系,该方法对牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒3型均无交叉反应,特异性良好;该方法对BCoV重组质粒标准品最低检测限为5.75×10^(1)copies/μL;批内和批间重复性试验结果稳定,变异系数均小于2%。利用所建立的TaqMan荧光定量PCR方法对收集的132份样品进行检测,与常规PCR相比,两者符合率为96.21%,可为BCoV的临床检测和流行病学调查提供技术支持。

乙型肝炎病毒检测方法的现状研究

HBV感染是我国最主要的传染性疾病之一,目前临床主要使用体外诊断试剂对该病毒进行准确快速的检测,体外诊断试剂盒的方法学主要包括:免疫学方法和分子生物学方法。本文通过PubMed(检索时限自2017年1月至2023年12月)和万方数据库(检索时限自2017年1月至2023年12月)检索乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的检测方法、相关试剂盒的生产和临床应用的相关文献,详细列举最新检测方法的进展并比较不同方法学的优缺点,全面分析和讨论了我国目前乙型肝炎病毒检测的现状和研究进展。研究发现,我国HBV检测用商品化试剂盒的方法学分布存在集中现象,试剂盒的生产存在“东部多,西部少,大分散,小聚集”的特点。

猪传染性胃肠炎病毒RT-CPA检测方法构建及初步应用

为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA检测方法。本实验筛选最优条件为:Mg^(2+)浓度1.0 mmol/L,dNTP浓度0.8 mmol/L,Betaine浓度1.0 mol/L,BstDNA聚合酶浓度8.0 U,反应温度63℃,反应时间60 min,AMV逆转录酶5 U。本研究的扩增产物通过凝胶电泳显示出梯形条带,证明了其对TGEV的特异性检测和重复性良好,灵敏度高达10拷贝/μL。初步应用显示,该方法与TGEV抗原快速检测试剂盒的符合率超过90%,显示了高灵敏度。TGEV RT-CPA方法免去了RNA提取和cDNA合成的步骤,能够完成一步检测,且该方法不需要特殊仪器,适用于现场快速检测TGEV,为快速诊断和防控猪传染性胃肠炎提供了新的技术选择。

基于机器学习与DBN网络的网络入侵检测方法研究

随着计算机网络的发展,网络入侵的情况也越来越严重。传统网络入侵检测方法存在检测效率低、误判率高的情况,为了解决这些问题,提出了一种基于支持向量机的深度置信网络(SVM-DBN)的入侵检测方法。通过对支持向量机(SVM)进行优化,将支持向量机与深度信念网络(DBN)融合,利用SVM、DBN与SVM-DBN在网络入侵数据集中进行对比。结果表明,SVM-DBN算法的误差率最低,比DBN和SVM的误差率平均值分别低了8.95%,12.70%,且SVM-DBN算法在训练次数为140次时最大绝对百分比误差为4.8%,均优于对比方法。这说明SVM-DBN网络能够有效地提高网络入侵检测的精度和效率。

犬细小病毒感染生物标志物及其检测方法研究进展

犬细小病毒感染是诱发幼犬肠炎和死亡的重要病因之一,其对各类及各年龄段犬均有较大危害,通过特定生物标志物及配套检测方法对犬的感染状况进行评估,以及对于感染犬的快速诊断及其治疗方案的确定实施有重要意义。文章通过对国内外犬细小病毒感染相关生物标志物及其检测方法方面的研究进展进行总结归纳,以期为犬细小病毒病的检测和诊疗提供参考。

土壤有效硅检测方法样品前处理改进研究

为明确有效硅检测方法试液制备摇匀的处理条件,以达到每个样品浸提条件一致,保证数据准确度和精密度,对检测方法样品前处理进行探索研究。采用粘性较重的黄壤进行预试验,使用恒温振荡器,筛选较优的浸提转速和时间,再用标准物质考察准确度和精密度。预试验筛选出3组较优的处理分别是180 r/min-3 min、200 r/min-1 min、200 r/min-3 min,用标物对3种处理进行验证后,200 r/min-3 min处理有效硅的浸出量最大,准确度满足要求,精密度更高。土壤有效硅检测试液的制备可用恒温振荡器代替恒温箱保温5 h,每隔1 h在200 r/min下振荡3 min即可达到检测要求,使待检样品在同一条件下完成浸提,对粘性较重的土壤同样适用。

血清HBV RNA分子特征、检测方法及临床应用研究

肝细胞内共价环状闭合DNA(cccDNA)是乙型肝炎病毒(HBV)的复制中间体,与HBV复制密切相关。同时,它是前基因组RNA(pgRNA)的转录模板,而血清中的HBV RNA多来自未逆转录的pgRNA。近年来许多研究表明HBV RNA在监测疾病进展和预测慢性HBV感染患者的预后等方面有重要作用,是慢性乙型病毒性肝炎的一种潜在的生物标志物。该文从HBV RNA的分子特征、检测方法及临床应用研究进展进行概述。

一种温度补偿调焦红外系统丢包检测方法

在红外技术广泛应用于当前军事、安防、医疗等领域背景下,如何提高红外系统信号的传输质量和传输可靠性,成为了一个亟待解决的问题。本文通过研究温补技术在红外系统中的丢包应用问题,提出了一种失同步触发判断丢包检测方法,并对其性能进行了系统分析、测量和验证。本研究为提高红外系统信号传输质量和信号完整性、可靠性提供了一种新的解决思路和技术方法。

发制品透气性检测方法的研究

发制品已成为消费者更具时尚性和个性化的消费品。透气性能是衡量发制品穿戴舒适性的关键性能,也是消费者关注的重点。研究了发制品透气性的试验仪器和试验参数,最终制定了发制品透气性的检测方法。试验表明:测试夹具及试验参数可以有效区分不同结构帽底透气性能的好坏,检测方法重现性好,精密度达到可接受水平。

绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法的建立与应用

[目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。

水禽细小病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为了建立水禽细小病毒(WPV)快速检测方法,根据序列比对结果在水禽细小病毒NS基因SF3保守区域内设计特异性引物,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR通用检测方法。该方法的扩增效率(E)为90.0%,相关系数(R~2)=0.99,标准曲线方程为y=-3.607x+38.77;除WPV出现S形扩增曲线外,新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭肝炎病毒(DHAV)、鸭肠炎病毒(DEV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)样品均未出现S形阳性扩增曲线;批内变异系数(CV)为0.15%~0.23%,批间变异系数为0.09%~0.28%。结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法重复性好、灵敏度高和特异性强。临床样品检测结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR与普通PCR的符合率达98.4%,灵敏度是普通PCR的1 000倍。SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法不仅能定性检测WPV,还可以进行定量检测,可用于种鸭场、种鹅场的WPV净化检测,也可用于WPV临床大量样品的快速检测。

变压器绝缘缺陷放电发展特性及检测方法研究现状及展望

变压器爆燃事故的发生大多源于其内部绝缘缺陷的局部放电,并逐渐发展至火花放电和电弧放电,造成巨大的经济损失。研究内部放电信号特征及其快速检测方法对保障电力变压器安全可靠运行具有重要意义。国内外学者围绕变压器内部绝缘缺陷放电特性及检测方法开展了大量研究工作。为此从局部放电、火花放电和电弧放电3个阶段综述了相关研究成果,对不同放电发展阶段的脉冲电流、电磁波、声、光以及化学产物等理化特性进行了总结分析,同时概述了基于不同信号的检测方法和对检测设备的要求,并对比了不同检测方法的优缺点,最后提出了对于变压器绝缘缺陷放电发展检测的研究展望。该文对进一步深入研究油中放电信号特征提取、快速检测以及变压器主动保护技术具有指导意义。

防滑袜防滑性能检测方法的研究

文章结合防滑袜产品的实际使用场景,通过对现有的摩擦系数测试标准进行研究,确定了采用静摩擦系数来表征防滑袜防滑性能的方法。通过试验选择合适的标准平面(摩擦介质)、接触面积和滑块质量作为防滑袜防滑性能的测试参数。根据确定的试验参数,对收集的防滑袜样品进行测试,分析试验数据发现,带硅橡胶面的袜底其静摩擦系数大于织物面的袜底,本试验方法可以有效地反映出防滑袜防滑性能。

基于FMEA方法的射线检测实验室风险管理

射线检测是无损检测的主要方法,广泛应用于产品缺陷检测。X射线、γ射线是能量较高的电磁辐射,这使得射线检测实验室的管理不同于一般的实验室。基于此,应用故障模式及影响分析(FMEA)方法,参考质量、环境、职业健康安全国际管理体系标准的要求,对射线检测实验室的质量、环境、职业健康安全三大风险进行识别、分析、评价及控制。通过设计适用于三大风险的FMEA表和评分表对射线检测实验室的质量因素、环境因素、危险源开展识别及评价,通过计算风险优先数(RPN)获得重要质量因素、环境因素、危险源,并提出有效控制措施。研究结果对高等院校射线检测实验室的风险分析、评价及管理具有一定的参考价值。

遥感图像变化检测方法研究综述

遥感图像变化检测是遥感领域中一项重要的研究内容,其旨在利用遥感技术和图像处理方法来识别地表覆盖变化的模式和趋势。为了深入了解该方面的发展现状及其使用的技术方法,总结分析了大量的资料和文献,对遥感图像变化检测方法进行了较为全面的综述。介绍了变化检测的概念和处理流程;从6个角度总结了变化检测方法的分类体系,并回顾了其发展历程;概述了各类变化检测方法的原理和特点,对其优缺点进行了简要分析,从6个方面讨论了对遥感图像进行变化检测的现实应用价值;对存在的一些问题与不足进行了简要分析,提出了可能改善这些问题的方法,同时也预言了这些方法在实际应用中可能会遇到的阻碍。最后,对变化检测方法进行总结,并展望了未来的发展方向,以期更好地了解遥感图像变化检测方法的研究现状和发展趋势,为进一步的研究提供参考。

基于不同识别元件的β-内酰胺类药物快速检测方法研究进展

β-内酰胺类药物被广泛用于动物细菌性疾病的治疗,在世界抗生素市场中占据了超过一半的份额。然而,此类药物给食品动物大量使用会造成在动物源性食品中的残留,从而对消费者健康构成潜在威胁。因此,必须要对此类药物在动物源性食品中的残留进行检测。在β-内酰胺类药物的快速检测方法中,核心试剂是使用识别元件,它直接影响检测方法的选择性。受体、抗体、适配体、分子印迹聚合物等识别元件均具有特异性识别能力,已被用于不同兽药的残留检测。本文着重论述了近年来基于上述识别元件的方法在β-内酰胺类药物残留检测方面的应用,旨在为相关研究人员提供一些帮助。

柑橘倍性检测方法的优化研究

为了提高柑橘倍性检测效率以及降低倍性检测费用,进行了试剂用量、预处理方法以及检测液补水对柑橘倍性检测效果的试验。结果表明:25μL预混液处理后加入灭菌去离子水能正确检测出柑橘倍性;补水至混合液总体积在1000~1400μL范围内出峰效果较好,过多或过少均不利于检测出峰;同时将细胞核提取缓冲液和染色缓冲液按比例制成预混液,并采用解剖针粗头碾压的方式进行样品处理,试验效率比常规处理方法提高近2倍。综上,得到的优化方法能够大大降低柑橘倍性检测费用,实用方便,操作简单,在提高倍性检测效率的同时亦能提高试验操作的安全性,对柑橘品种改良以及倍性品种选育工作具有十分重要的意义。