HPLC-FD同时测定人血浆中沙库巴曲缬沙坦3种成分的浓度及其应用

目的建立人血浆样品中沙库巴曲、缬沙坦及其主要代谢产物LBQ-657的高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FD)分析方法。方法采用乙腈沉淀法处理血浆样品,SN-38作为内标进行内标法定量。采用Agilent Eclipse SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),荧光检测器;以甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0)(67∶33)为流动相;流速1.0 mL·min^(-1);柱温25℃;进样量20μL。采用多波长法,在0~6 min,λ_(EX)=380 nm,λ_(EM)=430 nm,定量检测SN-38;6~9.4 min,λ_(EX)=255 nm,λ_(EM)=314 nm,定量检测LBQ-657;9~12 min,λ_(EX)=255 nm,λ_(EM)=374 nm,定量检测缬沙坦;12~18 min,λ_(EX)=255 nm,λ_(EM)=314 nm,定量检测沙库巴曲。5例患者口服100 mg沙库巴曲缬沙坦钠片后1.5,3 h分别采样,检测血浆中沙库巴曲、缬沙坦及LBQ-657浓度。结果人血浆样品中各成分在0.1~20μg·mL^(−1)内线性关系良好(r>0.999),低、中、高质控血浆样品的提取回收率为80.30%~96.45%。日内、日间精密度、准确度和稳定性均符合生物样品分析要求。结论建立的HPLC-FD定量分析方法快速、灵敏、准确,可用于人血浆中沙库巴曲、缬沙坦及其主要代谢产物LBQ-657的含量测定。