超临界二氧化碳提取物中生育酚的LC/APCI-MS2测定(英文)

确定了一种简单,明确和灵敏的高效液相测定和检测超临界二氧化碳萃取物中生育酚的方法。通过加入携带剂,超临界二氧化碳从菜籽脱臭馏出物提取生育酚浓缩物,其分析在反向色谱柱ZorbaxC18上,用98%甲醇作为流动相,UV检测波长为292nm,α-生育酚作标准物。此方法线性相关性较高。APCI-MS和APCI-MS2检测的各生育酚的m/e与理论预测值一致。

高性能LC-02碳基吸附剂开发总结

中国石油化工股份有限公司齐鲁分公司开发了高性能LC-02碳基吸附剂,并对吸附剂进行了性能评价。以活性炭作为载体原料,采用挤出成型法制备了LC-02吸附剂,吸附剂制备工艺合理,重复性好。对LC-02吸附剂进行了详细的物化性能表征,LC-02吸附剂比表面积大于1000 m^(2)/g、孔体积大于0.7 mL/g,具有较多的碱性中心和丰富的表面官能团。考察了不同反应温度、反应空速、SO_(2)浓度对吸附剂性能的影响,在温度150℃、体积空速2500 h^(-1)、O_(2)的体积分数为3%、SO_(2)的体积分数为35~1000μL/L条件下,吸附剂穿透硫容可达22.0%以上,可以满足工业装置应用要求。考察了吸附剂再生性能,适宜的再生温度为350~380℃,吸附剂再生10次硫容保留率达90.2%,吸附剂易于再生并且具有良好的再生稳定性。

基于PFMEA的2LC06工艺风险评估与质量改善研究

2LC06是专用设备的关键零部件之一,提高其制造过程可靠性有着显著的意义。基于PFMEA方法,对2LC06加工过程存在的问题进行梳理分类,通过识别其失效模式、失效起因、失效影响以及失效的严重度S、频度O、探测度D进行风险分析和判定,并通过相乘计算风险优先数(RPN)得出高风险项,针对研磨棒球窝、设备五轴总成及压力棒三项高风险点提出改进措施。结果表明,经过改进后的风险优先数(RPN)有所下降,成功提高了2LC06加工过程的可靠性以及工件的质量。

LC/MS/MS鉴定莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物

目的：应用LC/MS/MS鉴定去甲乌药碱、莲心碱、异莲心碱、荷花碱4种莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物,推测其代谢途径。方法：100μmol/L生物碱作用Caco-2细胞3～12 h后收集并纯化样品,采用LC/MS/MS分析鉴定代谢产物。结果：去甲乌药碱的代谢产物有甲基化去甲乌药碱和去甲乌药碱葡萄糖醛酸苷;莲心碱和异莲心碱的代谢产物分别是去甲基莲心碱和去甲基异莲心碱;荷花碱的主要代谢物为莲心碱、异莲心碱和它们的进一步去甲基产物。结论：LC/MS/MS操作简便,可快速鉴定Caco-2细胞中的莲子心生物碱的代谢产物。莲子心生物碱主要代谢途径有甲基化、去甲基化和葡萄糖醛酸化。

LC-MS法测定槐果碱及其在Caco-2细胞上的转运特征

目的：建立槐果碱的LC—MS测定法，研究其在Caeo-2细胞上的转运特征。方法：采用Zorbax Extend-C18柱，流动相10mmol·L^-1醋酸铵水溶液-乙腈（85：15），流速0．2mL·min^-1。电喷雾离子化（ESI）方式，采用选择性离子检测法，检测离子为正离子，槐果碱的选择性离子为[m／z＋H]^＋247．3；考察了温度、药物浓度、时间对槐果碱在Caco-2细胞上转运的影响。结果：槐果碱在5—2000μg·L^-1呈良好的线性关系（r=0．9985），最低定量限为5μg·L^-1；槐果碱在Millicell系统上的转运量具有一定的浓度-时间依赖性，其转运表现为被动扩散，槐果碱的平均表观通透系数Papp为3．159×10^-5cm·s^-1。结论：该法灵敏、简单，专属性强，槐果碱在Caeo-2细胞上具有良好的转运。

LC-MS法测定槐果碱及其在Caco-2细胞上的摄取特性

目的：建立槐果碱的LC—MS测定法，研究其在Caco-2细胞上的摄取特性。方法：采用Zorbax Extend—C18柱（50mm×2．1mm，5μm），流动相为10mmol·L^-1醋酸铵水溶液-乙腈（85：15），流速0．2mL·min^-1。电喷雾离子化（ESI）方式，采用选择性离子检测法，检测离子为正离子，槐果碱的选择性离子为m／z：247．3[M＋H]，考察了温度、药物浓度、时间和pH值对槐果碱在Caco-2细胞上摄取的影响。结果：槐果碱在2～1000μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系（r=0．9997），最低定量限为2μg·L^-1；槐果碱在Caco-2细胞上的摄取具有一定的浓度、时间和pH值依赖性，其摄取表现为被动扩散。结论：该法灵敏、简单，专属性强，槐果碱在Caco-2细胞上具有良好的摄取。

梳状亲水性环氧基载体固定化Pseudomonas stutzeri LC2-8脂肪酶

以氯乙酰化聚苯乙烯微球(PS-acyl-Cl)为引发剂,亲水性丙烯酰胺(AM)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,CuCl及联吡啶(Bipy)为催化体系,通过原子转移自由基聚合反应(ATRP)制备得到梳状亲水性环氧基柔性载体(PS-acyl-P(AM-co-GMA)),通过改变AM与GMA配比,使载体环氧基含量和亲水性得到控制。用该柔性载体固定Pseudomonas stutzeri LC2-8脂肪酶,优化了固定化条件,并对柔性固定化酶性质进行考察。结果显示,当n(AM):n(GMA)=20:60,固定化时间为24 h,固定化温度为30℃,固定化pH为7.0时,固定化酶活力达到最高,为24.1U g 1。固定化酶的最适pH为8.0,最适温度为30℃,其热稳定性比游离酶高,重复使用8次,剩余酶活力80%左右。以上表明,以ATRP法合成的载体PS-acyl-P(AM-co-GMA)可成功用于脂肪酶的固定化,有效提高脂肪酶的稳定性和实用性。

iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术鉴定健康和死皮橡胶树胶乳差异表达蛋白

橡胶树死皮(Tapping panel dryness,TPD)是限制天然橡胶产量提高的关键因子之一,鉴定健康和死皮橡胶树胶乳差异表达蛋白对阐明橡胶树死皮发生机制具有重要意义。研究首次采用同位素标记相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)结合二维液相色谱串联质谱(Two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2D LC-MS/MS)技术对健康和死皮橡胶树胶乳蛋白质组的差异进行研究。结果显示,有16个蛋白差异表达,其中,在死皮树中表达上调的蛋白有2个,下调的蛋白有14个。进一步应用实时荧光定量RT-PCR对其中6个差异蛋白的基因进行表达分析,发现其表达趋势与蛋白质组水平的研究结果一致。功能分析显示,这些差异蛋白主要与细胞程序性死亡(如TCTP、HSP70、CaM、cysteine protease等)和橡胶生物合成(如SRPP和diphosphomevelonate decarboxylase)相关,从蛋白质组学角度进一步验证了橡胶树死皮发生过程中涉及细胞程序性死亡和橡胶生物合成途径。

天然药物成分分析2D-LC/MS技术平台的初步建立

目的:建立二维液相色谱/质谱法分析天然药物的技术平台。方法:以苦参生物碱为例,采用强酸性阳离子交换柱作预分离柱,柱后流动相修饰,使生物碱在富集柱上浓集,然后切换至分析柱系统,以反相柱,碱性流动相分离生物碱,用光二极管阵列检测器和质谱检测。从猪脑中提取的神经节苷脂,以氨基柱作预分离柱,反相色谱系统进行分离分析。结果:从苦参碱中检出了氧化苦参碱等5个生物碱;从神经节苷脂中检测出了单唾液酸神经节苷脂等5个成分。结论:已建立的分离分析系统高效、快速、自动化,可用于天然药物复杂体系的分离分析。

2×n阶LC蛛网网络的等效复阻抗研究

电阻网络模型的建立和研究有广泛的实际应用价值,尽管对蛛网电阻网络等效电阻的研究已经有了一定的成果,但是2×n阶LC蛛网模型的等效复阻抗问题尚没有研究成果.对2×n阶LC蛛网模型的等效复阻抗进行理论研究与分析,利用之前研究得到的2×n阶电阻蛛网模型的等效电阻公式通过变量代换及复数分析推导出2×n阶LC蛛网等效复阻抗的一般规律,并且采用MATLAB绘图软件绘制了等效复阻抗在不同情形下的基本特性图,发现了2×n阶LC蛛网等效复阻抗的振荡特性和共鸣性质.

EFL/ESL课堂LC_1与LC_2的跨文化对话性

本文以巴赫金的对话思想为理论依据,提出跨文化对话性是EFL/ESL教学核心的观点,认为EFL/ESL课堂是LC1与LC2持续对话的场所,跨文化对话是有效英语教学或学习的源动力,而跨文化对话理应该成为指导英语课堂教学活动的教学理念与实践方式。

不同碳源对干酪乳杆菌LC2W胞外多糖组成影响的研究

运用紫外光谱、红外光谱、HPLC和气相色谱对葡萄糖和乳糖两种碳源获得的胞外多糖(EPS)单一组分G1、G2和L1、L2的结构进行了初步分析。结果显示不同碳源对EPS的分子结构、分子量和单糖组成都有影响。紫外光谱分析都不含蛋白和核酸;红外光谱分析G1、G2和L1、L2均呈现多糖的特征峰,但波形、特征吸收波段、波峰强度有些差异;HPLC测定G1、G2、L1和L2的平均分子量分别为6.65×105Da、1.01×104Da、2.25×106Da和1.36×104Da;气相色谱分析G1、G2和L1、L2的主要单糖组成摩尔比分别为:鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖=3.07∶3.29∶1;鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖=2.84∶6.4∶1;甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=17.24∶6.03∶1;甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=28.71∶5.98∶1。

12位LC^2MOS工艺数模转换器总剂量电离辐射效应

为了研究数模转换器在电离辐射环境中的可靠性,选取12位LC2 MOS工艺的数模转换器作为研究对象,使用60 Coγ射线源对其进行了不同剂量率、不同偏置条件下的总剂量电离辐射效应研究。试验结果表明,LC2 MOS工艺的数模转换器对辐射剂量率非常敏感,高剂量率条件下的辐射损伤较低剂量率条件下的更为显著;不同偏置条件下,其辐射损伤程度也有很大不同,正常工作偏置下的数模转换器辐射损伤较非工作偏置的辐射损伤更为明显。

干酪乳杆菌LC2W对切达干酪蛋白质降解的影响

将益生菌干酪乳杆菌LC2W作为切达干酪的附属发酵剂,研究其在干酪成熟过程中对干酪蛋白质降解的影响。通过干酪内水溶性氮(WSN)、12%三氯乙酸可溶性氮(TCA-SN)和5%磷钨酸可溶性氮(PTA-SN)的测定以及pH值4.6水不溶性蛋白的Urea-PAGE图谱和pH值4.6水溶性多肽的肽谱确定乳杆菌对干酪蛋白质降解的影响。结果表明,随着成熟时间的延长,干酪内WSN、TCA-SN和PTA-SN的含量逐渐增大,到干酪成熟180 d时试验组干酪的WSN和PTA-SN含量显著高于对照组干酪;Urea-PAGE图谱和多肽肽谱表明,菌株LC2W影响干酪蛋白质降解可能是通过提高α-酪蛋白降解速率或为多肽降解提供相应的肽酶来实现的。

干酪乳杆菌LC2W胞外多糖的体外免疫活性研究

分别以葡萄糖、乳糖为碳源制得干酪乳杆菌LC2W胞外多糖，并对分别分离纯化得到的中性多糖组分体外细胞培养试验结果表明，G1、G2（以葡萄糖为碳源经LC2W发酵分离纯化制备两种均一多糖）和L1、L2（以乳糖为碳源经LC2W发酵分离纯化制备两种均一多糖）均无细胞毒性，在5~80μg/mL的浓度范围内，L1对B淋巴细胞增殖的抑制作用比G1强，具有明显的剂量效应，其抑制作用与浓度呈负相关；与此相反，在5～80μg/mL的浓度范围内，G2对B淋巴细胞增殖抑制作用比L2强，表现为明显的剂量效应，其抑制作用与浓度呈正相关。碳源的改变会影响干酪乳杆菌LC2W胞外多糖的组成，并引起其生理活性产生差异。

LC-MS测定雷公藤甲素及其在Caco-2细胞上的转运特征

目的:建立体外模拟体内肠道细胞的Caco-2细胞Transwell模型,以此研究雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上的跨膜转运特征。方法:采用聚酯碳酸酯膜连续培养Caco-2细胞21天,形成致密的单层细胞模型。然后对影响雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上转运特征的因素包括浓度、时间及跨膜转运蛋白(P-糖蛋白,多药耐药蛋白,乳腺癌耐药蛋白)进行考察;同时采用LC-MS对溶液中的雷公藤甲素的含量进行测定。结果:雷公藤甲素主要以主动转运的方式进行吸收,且随着时间和药物浓度的增加,转运量明显增加。结论:雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运存在一定的浓度及时间依赖性,且P-gp介导雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运。

HPLC-MS法测定关附甲素及其在Caco-2细胞上的摄取特性

目的建立关附甲素的LC-MS测定法,研究其在Ca-co-2细胞上的摄取特性。方法采用ShimadzuVP–ODS,C8柱,(250mm×2.1 mm,5μm),流动相:乙腈∶水=30∶70(V/V),用0.2%冰乙酸溶液,加入二乙胺适量调pH至4.0左右,流速:0.2 ml.min-1,电喷雾离子化(ES1)方式,采用选择性离子检测法,检测离子为正离子,关附甲素的选择性离子:[M+H],m/z 430。考察温度、药物浓度、时间和pH值对关附甲素在Caco-2细胞上摄取的影响。结果关附甲素在0.2～50.0μmol.L-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9988),最低定量限0.2μmol.L-1。关附甲素在Caeo-2细胞上的摄取具有一定的浓度、时间和pH值依赖性,其摄取表现为被动扩散。结论该法灵敏、简单,专属性强,关附甲素在Caco-2细胞上具有良好的摄取。

响应面法优化干酪乳杆菌LC2W代谢产α-葡萄糖苷酶抑制剂的发酵条件

通过单因素试验,从接种量、发酵温度、发酵时间3个方面对α-葡萄糖苷酶抑制剂(α-GI)抑制活性的影响进行初步分析。在单因素试验基础上,采用3因素3水平的响应面分析法,对干酪乳杆菌LC2W发酵乳中α-GI合成的发酵条件进行了优化,获得最优发酵条件为:接种量4%,发酵温度35℃,发酵时间100 h。在该条件下α-GI抑制活性可达(39.98±0.08)%。各因素影响显著性顺序为:发酵时间>发酵温度>接种量。验证试验表明,试验结果与模型预测值吻合,所建模型切实可行。

干酪乳杆菌LC2W细胞壁组分体外对巨噬细胞活性的影响

探讨干酪乳杆菌LC2W细胞壁组分体外对小鼠巨噬细胞功能的影响。以培养液单纯培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为对照,研究干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖对RAW264.7细胞代谢水平、吞噬中性红能力及释放NO的影响。不同浓度磷壁酸和肽聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞代谢MTT能力、吞噬中性红能力有明显增强作用,并呈一定的剂量效应,在相同质量浓度时,两种细胞壁组分激活巨噬细胞能力无显著差异。同时诱导产生NO量也随着浓度增大而增加,当浓度达到50μg/mL时,磷壁酸诱导能力显现出较高的水平。干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖能激活小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,提高其代谢水平及吞噬能力,同时可诱导具有杀瘤作用的活性因子,并具有一定的剂量效应。

干酪乳杆菌LC2W菌体的抗高血压作用

为探索干酪乳杆菌LC2W抗高血压作用的活性成分,收集了采用MRS液体培养基培养的干酪乳杆菌LC2W菌体,洗涤后重悬到10%（w/w）无菌脱脂乳中,至终浓度为1010CFU/mL。将菌悬液分成两组,一组直接进行冷冻干燥（活菌组）;另一组在100℃水浴10 min后再进行冷冻干燥（灭活组）。按2.0×109CFU/Kg的剂量（活菌组）或相当浓度的灭活菌体对鼠龄17~18周的自发性高血压大鼠单次或连续灌胃15日,每日一次,对照组给予同样体积的脱脂乳。采用尾环法测定大鼠的收缩压和心率。连续灌胃试验中,于灌胃后4 h测定大鼠的收缩压（Systolic blood Pressure,SBP）和心律（Heart rate,HR）。采用称重法测定大鼠第1 d和第15 d时的体重。结果表明,灌喂LC2W菌体可以显著降低SHR的收缩压,这种作用在灌胃后4 h最显著（P〈0.01）;在连续灌胃试验中,无论是活菌组还是灭活组在第1、4、8、11和15 d都有显著的抗高血压作用（P〈0.01）。未观察到LC2W菌体对实验动物心律和体重有明显的影响。上述结果表明在干酪乳杆菌菌体中存在热稳定性、具有抗高血压作用的物质。