中药款冬中肝毒吡咯里西啶生物碱的LC/MS^n检测

目的 :中药款冬中微量成分肝毒吡咯里西啶生物碱 (HPA)的检测。方法 :采用薄层色谱法(TLC)、液相色谱与多级质谱联用法 (LC/MSn)。结果 :从不同来源的款冬药材中检测到款冬中已有报道的 2种HPA ,并发现款冬中还含有另外 3种HPA ,分子量分别为 2 99、341和 36 6。结论 :从 7份款冬药材中共检测到 5种HPA ,对检测到的其他种类的HPA应进一步进行提取、分离与鉴定 ,并研究其毒性与活性 ;不同来源的款冬药材含有的HPA不完全相同 。

LC/MS^n法同时检测人尿液中艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑

目的 研究三氮唑苯并二氮类药物的质谱断裂规律 ,建立可同时检测人尿液中艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑的液相色谱 质谱 (LC MSn)联用法。方法 用LC MSn 技术 ,同时对 3种三氮唑苯二氮类药物进行色谱分离及质谱鉴定 ,并用质谱解析软件探讨该类化合物的裂解规律。结果 3种药物的 [M +H]+ 准分子离子均可生成脱去1分子N2 和 1个Cl原子的特征碎片离子 ,其最低检测限小于 0 5ng·mL- 1 。结论 该方法快速、灵敏、准确 。

HPLC-MS^n法鉴定葫芦巴碱及其在大鼠体内的主要代谢产物

目的建立快速灵敏的LC-MSn检测葫芦巴碱及其在大鼠体内代谢物的分析方法。方法以葫芦巴碱对LC-MS2色谱及质谱条件进行优化,分析其电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律,以此作为葫芦巴碱大鼠体内代谢物分析鉴定的依据。健康大鼠尾静脉注射8 mg.kg-1葫芦巴碱,收集0~48 h的尿样,经C18小柱固相萃取分离纯化后,直接采用LC-MSn方法对尿样进行测定。结果根据生物体内药物代谢转化规律及母体药物的色谱-质谱行为规律,在尿样中鉴定出母药及其N-去甲基、N-去甲基环氧化产物,以及母药及其N-去甲基环氧化物的甘氨酸轭合物。结论本方法灵敏、快速、选择性高、专属性好,可用于葫芦巴碱的代谢产物研究。

白背三七叶中吡咯里西啶生物碱的LC-MS^n检测

The pyrrolizidine alkaloids(PAs) in leaf of Gynura divaricata(L.) DC.was analyzed by LC-MSn technique.The result shows that two hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids(HPAs) are detected from the methanol extract of G.divaricata leaf,with relative molecular weight of 335 and 365,respectively and lower content.The constituent with relative molecular weight 335 is a retronecine-type alkaloid,and identified as integerrimine;another constituent with relative molecular weight 365 is an otonecine-type alkaloid,speculated to be isomer of usaramine or 18-hydroxyinterrimine.

HPLC和LC-MS^n分析葛根素及其注射剂中的有关物质

目的研究葛根素及其注射剂中的有关物质。方法采用HPLC对9批葛根素原料药和18批葛根素注射剂中的有关物质进行了系统考察,采用LC-MSn技术对葛根素及其注射剂中有关物质的结构进行了初步鉴定。结果葛根素及其注射剂中存在5种主要有关物质,其中2种为相对分子质量432的同分异构体,推测可能为3′-羟基葛根素和染料木素-8-C-葡萄糖苷。结论建立的方法可有效分离主成分葛根素与有关物质,对有关物质能进行初步鉴定。

LC/MS^n鉴定咖啡酸在大鼠体内的代谢产物

目的研究咖啡酸(CA)在大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃(50mg·kg-1)给予CA后采集0～4h尿样,用电喷雾离子阱多级质谱法对CA在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果大鼠灌胃给予CA后,在体内可测到2个原形药的甲基化代谢物、2个原形药的单葡萄糖醛酸结合物、1个原形药的双葡萄糖醛酸结合物、2个原形药的单硫酸结合物、2个甲基化物的葡萄糖醛酸结合物和2个甲基化物的硫酸结合物。结论CA在大鼠体内广泛代谢,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。

LC-MS^n比较分析三种传统中草药中绿原酸及其衍生物组分(英文)

利用LC-MSn分析了杜仲叶、金银花叶以及鱼腥草叶甲醇提取物中绿原酸及其异构体和衍生物。发现3种样品中都含有3种单咖啡酰奎尼酸(绿原酸),分别是3-咖啡酰奎尼酸(3-caffeoylquinic acid,3-CQA)、4-CQA和5-CQA。杜仲叶和金银花叶中5-CQA为主要成分,但鱼腥草叶中以3-CQA和4-CQA为主要成分。在杜仲叶中首次发现咖啡酰奎尼酸糖苷;另外还发现金银花叶中有少量5-阿魏酰奎尼酸(5-feruloylquinic acid,5-FQA);鱼腥草叶含有少量的3-FQA和4-肉桂酰奎尼酸(4-p-coumaroylquinic acid,4-pCoQA)。本文首次报道鱼腥草叶中绿原酸异构体成分,为3-CQA和4-CQA的开发提供了来源(植物中绿原酸的结构一般以5-CQA为主)。

福白菊化学成分LC-MS^n定性分析及HPLC-UV法多成分含量测定

建立LC-MS^n法对福白菊化学成分进行定性研究,鉴定了22个化学成分,包括13个黄酮类成分和9个酚酸类成分;采用HPLC-UV法,同一色谱条件下测定福白菊中5种化学成分含量,包括:绿原酸(1)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(3)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸(4)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(5),建立5种化学成分的回归方程,线性关系均良好(r>0.999 9),加样回收率为98.72%~103.16%,采用此方法成功检测了10个福白菊样品中上述5种成分的含量。本文建立分析方法简便可靠,可定性及定量分析福白菊中的主要化学成分,适用于福白菊药材的质量分析。

基于LC-MS/MS同时测定小鼠血浆中对乙酰氨基酚及其毒性代谢产物对乙酰氨基酚半胱氨酸的浓度

目的建立一种同时测定小鼠血浆中对乙酰氨基酚(APAP)及其毒性相关代谢产物对乙酰氨基酚半胱氨酸(APC)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法以茶碱为内标,采用蛋白沉淀后取上清液挥干复溶的方法进行血浆样品前处理。采用Agilnet Zorbax SB-C_(18)(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱进行梯度洗脱,水相为含0.1%甲酸的水溶液,有机相为含0.1%甲酸的甲醇溶液。选择三重四极杆质谱仪(TSQ Quantum Ultra),采用电喷雾离子化方式(ESI),在选择反应离子监测(SRM)模式下进行正离子检测,同时对APAP(152.1行正离子检测)和APC(271.0行正离子检测)进行定量分析。结果APAP在60~3000 ng·mL^(-1)的范围内线性关系良好,APC在20~1000 ng·mL^(-1)的范围内线性关系良好,该方法选择性、批内和批间准确度、批内和批间精密度、基质效应、提取回收率均符合生物样品分析要求。结论本研究所建立的LC-MS/MS方法可应用于APAP及APC在小鼠体内药代动力学研究。

HPLC法测定复方片剂中依那普利相关物质

目的建立复方依那普利片剂中依那普利相关物质限度检查的分析方法。方法采用液相色谱质谱联用法 (LC MSn)对依那普利的两种相关物质 (依那普利拉及二酮哌嗪 )进行定性分析 ,采用反相高效液相色谱法 (HPLC UV)对依那普利的 2种相关物质进行定量分析。结果复方依那普利片剂中的各种物质均实现了有效的分离 ,相邻两峰之间的分离度均大于 1 5。结论该方法专属性强 。

水环境和水产品中β-N-甲氨基-L-丙氨酸(BMAA)检测方法和检出情况的研究进展

本文对蓝藻毒素β-N-甲氨基-L-丙氨酸(β-N-methylamino-L-alanine,BMAA)的结构形态、检测方法、环境和食物中的检出情况等方面进行系统综述.研究结果表明,BMAA主要存在3种赋存形态(游离态、溶解结合态、沉淀结合态);环境和食物中的BMAA类目前主要采用经过AQC衍生的LCMS/MS法检测,样品需经形态分离后、采用MCX固相萃取小柱处理.水环境、水产品和藻类保健品中BMAA类的污染已被大量报道.亚洲、北美洲、欧洲的相关环境和食物中均有一定的检出(检出浓度:水样<0.01—25.3μg·L^(-1);藻类<0.01—300μg·g^(-1);非鲨鱼水产品中0.08—115.3μg·g^(-1);藻类保健品中0.04—0.73μg·g^(-1)).BMAA存在生物积累和生物放大的现象,水产品中营养级别越高的生物检出浓度就越高,如鲨鱼类产品中检出浓度高达34—2011μg·g^(-1),需要引起重视.我国目前对BMAA的相关研究还很有限,未来应加强检测方法、现场调查、风险评估等相关方面的研究,以全面了解我国人群对BMAA类物质的暴露风险.

烟气中烟草特有亚硝胺LC-MS/MS分析方法的改进

为更加快速准确地测定不同类型卷烟烟气中TSNAs含量,进行了液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法测定条件改进试验。结果表明：①10 mmol/L乙酸铵水溶液可以替代100 mmol/L乙酸铵水溶液作萃取剂;②萃取液经0.45μm水相滤膜过滤后可直接进行LC-MS/MS仪分析;③同时用NNN-d4,NNK-d4,NAT-d4,NAB-d4作内标定量结果更为准确;④TSNAs的检出限为0.06~0.14 ng/mL,回收率91%~100.6%,RSD 0.76%~5.42%。该方法适用于混合型、烤烟型卷烟样品主流烟气中TSNAs的定量分析。

丹参中丹酚酸成分的ESI-MS(n)行为及LC-MS(n)特征图谱研究

目的:研究丹参中丹酚酸成分的ESI-MS规律,建立其LC-MS(n)特征图谱。方法:以丹酚酸B为代表,初步探讨丹酚酸成分的ESI-MS(n)规律。应用LC-MS(n),ESI(-)模式,以0.5%甲酸水溶液-乙腈为流动相,检测波长287nm,梯度洗脱绘制丹参中丹酚酸成分的特征图谱。结果:得出丹酚酸成分的ESI-MS(n)可能的裂解途径,得到其LC-MS(n)特征图谱,对特征图谱中7种主要化合物进行了精确归属。结论:丹酚酸类成分具有相似的ESI-MS(n)行为,根据质谱提供的各流份的分子量信息及多级质谱的裂解信息,可用于鉴别丹酚酸类成分。所得到的丹参丹酚酸成分的MS(n)TIC图,可用于丹参药材中丹酚酸类成分的指纹鉴别。

LC/MS/MS测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度

目的:用高效液相色谱-质谱联用方法同时测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度。方法:大鼠血浆用乙醚萃取法处理后,采用 LC/MS/MS 方法,测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度。HPLC 条件:大连依利特 Hypersil BDS C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,3μm),流动相:水(含0.1%甲酸)-乙腈(39:61,v/v),柱温:12℃,流速:200 μL·min^(-1),进样量:10 μL;质谱检测参数为电喷雾电离源(ESI);喷雾电压:3500 V;碰撞压力:0.1333 Pa;源内碰撞诱导电压:普萘洛尔,10 V;4-羟普萘洛尔,15 V;N-去异丙基普萘洛尔,15 V;扫描时间:0.3 s;检测离子:普萘洛尔 m/z 260[M+H]^+;4-羟普萘洛尔 m/z 276[M+H]^+;N-去异丙基普萘洛尔218[M+H]^+。结果:普萘洛尔线性范围2—1000 ng·mL^(-1),最低定量限为2 ng·mL^(-1)。4-羟普萘洛尔和 N-去异丙基普萘洛尔的线性范围1～200 ng·mL^(-1),最低定量限为1 ng·mL^(-1)。普萘洛尔的萃取回收率在90%以上,4-羟普萘洛尔和 N-去异丙基普萘洛尔的萃取回收率均为50%以上,日内、日间 RSD 皆小于15%。结论:适用于测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度及药动学的研究。

LC-MS/MS法同时测定干血斑中伏立康唑及其主要代谢产物氮氧化伏立康唑的质量浓度

目的建立一种同时测定干血斑中伏立康唑及其主要代谢产物氮氧化伏立康唑质量浓度的LC-MS/MS法。方法将2滴血滴在Whatman 903滤纸上制备干血斑,干血斑经甲醇萃取后直接进样分析。色谱柱为Hypersil GOLD aQ,流动相为甲醇-1 mL·L^-1甲酸溶液,梯度洗脱。正离子检测,扫描方法为选择性反应监测,伏立康唑、氮氧化伏立康唑和内标酮康唑的检测离子对分别为m/z 350.1→281.0,365.8→224.1和531.3→489.2。结果干血斑中伏立康唑和氮氧化伏立康唑的质量浓度在0.01~10.00μg·mL^-1范围内线性关系良好,二者的最低定量下限为0.01μg·mL^-1。伏立康唑和氮氧化伏立康唑的日内和日间精密度均小于15%,日内和日间相对误差均在-15%~15%范围内,伏立康唑和氮氧化伏立康唑的提取回收率分别为84.65%~90.49%和85.41%~95.72%,二者无显著基质效应。红细胞压积对二者的测定无显著影响,二者在室温下保存24 h和-80℃保存1个月的条件下稳定。该方法成功应用于伏立康唑和氮氧化伏立康唑在ICU患者体内的药物动力学研究。结论建立的LC-MS/MS法具有采血无创伤、易于操作和仅需微量血液等优点。

鬼点灯正丁醇提取物成分检测及止咳作用机制挖掘

目的 鉴定鬼点灯正丁醇提取物的成分,探讨其止咳作用机制。方法 采用液相色谱-质谱(LC-MS)法对其成分进行检测,并结合自建数据库进行结构鉴定。通过中草药系统药理学平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)、Batman-TCM数据库收集成分靶点,通过GeneCard,OMIM,DisGeNET,TTD数据库筛选疾病相关靶点基因,通过Venny 2.1.0软件获取成分-疾病共有靶点,通过Cytoscape 3.8.0软件进行可视化处理,构建成分-疾病-靶点网络,通过String数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,通过R 4.4.1软件进行基因功能(GO)分析、京都基因和基因组数据库(KEGG)通路富集分析。结果 鉴定出55个成分,主要包括有机酸类17个、黄酮类16个、苯酚类12个、香豆素类5个、苯丙素类2个、氨基酸类1个、醌类1个、醇类1个。网络药理学分析结果显示,共筛选出319个共有靶点,活性较强的成分为白藜芦醇、木犀草素、表儿茶素、刺芒柄花素、刺槐素等,止咳作用的关键靶点蛋白为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、白细胞介素6(IL-6)、ALB、Jun、胱天蛋白酶3(CASP3)、表皮生长因子受体(EGFR)等;共筛选出218个分子功能条目,包括磷酸酶结合、转录共调节因子结合、AKT活性等;共筛选出189条信号通路,包括癌症、脂质与动脉粥样硬化、前列腺癌、乙型肝炎、麻疹、糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终产物受体(AGE-RAGE)、磷脂酰肌醇-3-激酶-AKT(PI3K-AKT)信号通路等。结论 鬼点灯正丁醇提取物主要含有有机酸类、黄酮类、苯酚类、香豆素类、苯丙素类等化合物,其止咳作用可能主要与癌症、脂质与动脉粥样硬化、乙型肝炎、糖尿病并发症中的AGE-RAGE、PI3K-AKT信号通路等有关。

LC-MS/MS法测定口含烟中的4种亚硝基氨基酸

建立了液相色谱-四级杆串接质谱(LC-MS/MS)测定口含烟中N-亚硝基肌氨酸(NSAR)、3-(N-甲基亚硝基氨基)丙酸(MNPA)、4-(N-甲基亚硝基氨基)丁酸(MNBA)、亚硝基氮杂环丁烷-2-羧酸(NAzCA)的分析方法。样品经水萃取,硅藻土液液萃取柱净化后浓缩,进LC-MS-MS分析。结果表明:①NSAR、NAzCA、MNPA、MNBA的检出限分别为5.0 ng/g、2.4 ng/g、5.7 ng/g、1.4 ng/g,日内精密度小于6.5%,日间精密度小于9.4%,回收率在77.7%~111%之间。②分析了国内外14种口含烟,胶基型和含化型制品未检出4种亚硝基氨基酸;口含型样品中部分检出NSAR、NAzCA,均检出MNPA及MNBA,含量范围分别为ND~128.3 ng/g、ND~141.6 ng/g、1687.1~2424.1 ng/g、65.0~199.5 ng/g。该方法简单、准确,适用于口含烟中4种亚硝基氨基酸的分析。

人血浆中酚妥拉明浓度的LC-MS测定

建立高效液相 -质谱法测定人血浆中酚妥拉明的浓度。采用 Inertsil ODS- 3色谱柱 ,柱温 2 0°C,流动相为0 .1%三氟乙酸水溶液 - 0 .1%三氟乙酸乙腈溶液 (45∶ 5 5 ) ,流速 0 .2 m l/ min,以 N-去二甲基西布曲明为内标。电喷雾离子源 (ESI) ,电离电压 5 k V,离子源温度 4 0 0°C,碰撞能量 4 0 e V,检测通道 (内标 ) 2 5 2 .3/ 12 5 .1,通道 (酚妥拉明 ) 2 82 .2 / 12 0 .2。在 1～ 15 0 ng/ ml范围内 ,样品与内标的峰面积比与样品浓度间加权 (1/ c)回归具有良好的线性关系 (r=0 .9999)。酚妥拉明和内标的平均提取回收率均大于 89%。血样经过 3次冻融仍保持稳定 ,待测样品在全自动进样器中 12 h稳定 。

积雪草药材HPLC指纹图谱的研究

目的:研究积雪草药材的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制药材质量提供可靠的方法。方法:利用高效液相色谱法,梯度洗脱,测定了16个不同产地的积雪草药材样品。色谱柱为Alltech C18柱(250 mm×4.6 mm5,μm),流动相为乙腈-水,流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm。结果:建立了积雪草药材的HPLC指纹图谱,并检测了16批积雪草药材样品,标定了15个共有峰,通过与对照品的保留时间比对及LC-ESI-MSn进行结构解析,其中5～10号峰分别鉴定为羟基积雪草苷、积雪草苷、槲皮素、山萘酚、羟基积雪草酸、积雪草酸。经相似度计算,各产地药材之间相似性较差。结论:该方法准确可靠,重现性好,可作为控制积雪草药材内在质量的标准。

LC-MS/MS定量测定大鼠和人肝微粒体孵育液中丁苯酞浓度方法的建立

Here we report a sensitive LC-MS/MS method capable of quantifying n-Butylphthalide (NBP) down to 0.5 ng/mL in rat and human hepatic microsome incubating solutions.The method was validated over linear range of 0.5-4 000 ng/mL using diazepam as the internal standard.Compound was simply prepared by protein precipitation method and analyzed on the LC-MS/MS,which was an API-4000 system equipped with ESI interface and a Symmetry C18 column.The between-day and within-day precision and accuracy of quality control samples were ≤9.3% RSD% and ≤3.3% RE%.Sample stability (Stock solution,freeze/thaw,bench-top,short-term and long-term stability) were also investigated.This method has been applied to drug-drug interaction study of NBP in rat and human hepatic microsome incubating solutions.